《熒光葉室講解》ppt課件

1、熒光葉室講解熒光葉室講解劉美玲劉美玲基因基因 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)部農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)部北京力高泰科技北京力高泰科技2007年年12月月根本原理根本原理熒光發(fā)射的根本原理熒光發(fā)射的根本原理1、光能：使基態(tài)、光能：使基態(tài)Chl變成激發(fā)變成激發(fā)態(tài)態(tài)2、一些電子從基、一些電子從基態(tài)躍遷至激態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)發(fā)態(tài)S1,S23、電子從第一激、電子從第一激發(fā)態(tài)落回基發(fā)態(tài)落回基態(tài)態(tài)熒光為什么可以反映光合表現(xiàn)？熒光為什么可以反映光合表現(xiàn)？葉綠素?zé)晒馀c光協(xié)作用葉綠素?zé)晒馀c光協(xié)作用 葉綠素?zé)晒庵饕从沉巳~綠素?zé)晒庵饕从沉薖SII的生理的生理 生化變化。生化變化。 葉綠素?zé)晒猓汗夥错戨A段的各種變化。葉綠素?zé)晒猓汗夥错戨A段的各種變化

2、。 光反響：光合電子傳送鏈，產(chǎn)生光反響：光合電子傳送鏈，產(chǎn)生ATP能量能量和和NADPH復(fù)原力，同時(shí)放出復(fù)原力，同時(shí)放出O2。 暗反響：固定暗反響：固定CO2。光合電子傳送鏈光合電子傳送鏈Z鏈鏈遠(yuǎn)紅光開(kāi)放的反響中心和封鎖的反響中心開(kāi)放的反響中心和封鎖的反響中心“封鎖封鎖 RC：當(dāng)反響中心的電子受體質(zhì)體醌：當(dāng)反響中心的電子受體質(zhì)體醌QA接受電子，全部處于復(fù)原形狀時(shí)，不能再接受電接受電子，全部處于復(fù)原形狀時(shí)，不能再接受電子，我們稱之為封鎖的子，我們稱之為封鎖的RC?！伴_(kāi)放開(kāi)放 RC：假設(shè)：假設(shè)QA的電子傳出，的電子傳出，RC的電子可以的電子可以完全傳送給完全傳送給QA，那么此時(shí)，那么此時(shí)RC稱為開(kāi)

3、放的稱為開(kāi)放的RC。 熒光參數(shù)熒光參數(shù)LI 6400光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)直接光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)直接測(cè)定熒光參數(shù)一測(cè)定熒光參數(shù)一F0：最小初始熒光，又稱基底熒光或暗熒光。指經(jīng)：最小初始熒光，又稱基底熒光或暗熒光。指經(jīng)過(guò)充分暗順應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)光系統(tǒng)過(guò)充分暗順應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)光系統(tǒng)IIPSII反響中反響中心全部開(kāi)放時(shí)的葉綠素心全部開(kāi)放時(shí)的葉綠素Chl熒光發(fā)射強(qiáng)度。熒光發(fā)射強(qiáng)度。Fm：最大熒光。指經(jīng)過(guò)充分暗順應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)：最大熒光。指經(jīng)過(guò)充分暗順應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)PSII反響中心完全封鎖時(shí)的反響中心完全封鎖時(shí)的Chl熒光發(fā)射強(qiáng)度。熒光發(fā)射強(qiáng)度。LI 6400光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)直接光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)直接測(cè)定熒

4、光參數(shù)二測(cè)定熒光參數(shù)二F0：光下最小熒光。在光順應(yīng)形狀下：光下最小熒光。在光順應(yīng)形狀下PSII反響中心反響中心完全開(kāi)放時(shí)的完全開(kāi)放時(shí)的Chl熒光發(fā)射強(qiáng)度。為了使照光后一熒光發(fā)射強(qiáng)度。為了使照光后一切的切的PSII反響中心迅速到達(dá)最大開(kāi)放程度，在測(cè)反響中心迅速到達(dá)最大開(kāi)放程度，在測(cè)定前先用遠(yuǎn)紅光進(jìn)展照射。定前先用遠(yuǎn)紅光進(jìn)展照射。Fm：光下最大熒光。在光順應(yīng)形狀下：光下最大熒光。在光順應(yīng)形狀下PSII反響中反響中心完全封鎖時(shí)的熒光發(fā)射強(qiáng)度。心完全封鎖時(shí)的熒光發(fā)射強(qiáng)度。Fs：穩(wěn)態(tài)熒光。又稱：穩(wěn)態(tài)熒光。又稱Ft。 LI 6400光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)間接光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)間接計(jì)算熒光參數(shù)一計(jì)算熒光參數(shù)

5、一Fv/Fm：光化學(xué)量子效率，指沒(méi)有蒙受任何環(huán)境脅迫：光化學(xué)量子效率，指沒(méi)有蒙受任何環(huán)境脅迫并經(jīng)過(guò)充分暗順應(yīng)葉片，其并經(jīng)過(guò)充分暗順應(yīng)葉片，其PSII最大的潛在最大的潛在光化學(xué)量子效率。普通植物恒定在光化學(xué)量子效率。普通植物恒定在0.75 0.85。 也被稱為開(kāi)放的也被稱為開(kāi)放的PSII反響中心的能量捕獲效率。反響中心的能量捕獲效率。Fv / Fm = Fm F0/FmFv/Fm：光下開(kāi)放的：光下開(kāi)放的PSII反響中心的激發(fā)能捕獲效反響中心的激發(fā)能捕獲效率。率。Fv/Fm =Fm - F0/FmFv/FmLI 6400光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)間接光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)間接計(jì)算熒光參數(shù)二計(jì)算熒光參數(shù)二P

6、SII：作用光存在時(shí)：作用光存在時(shí)PSII實(shí)踐的光化學(xué)量子效實(shí)踐的光化學(xué)量子效率，即率，即PSII反響中心電荷分別實(shí)踐量子效率，反響中心電荷分別實(shí)踐量子效率，反映了被用于光化學(xué)途徑激發(fā)能占進(jìn)入反映了被用于光化學(xué)途徑激發(fā)能占進(jìn)入PSII總總激發(fā)能的比例，植物光合才干的一個(gè)重要目的。激發(fā)能的比例，植物光合才干的一個(gè)重要目的。 PSII =Fm - Fs/FmETR：電子傳送速率。：電子傳送速率。ETR = PPFD PSII 0.85 0.5LI 6400光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)間接光合熒光儀測(cè)定的參數(shù)間接計(jì)算熒光參數(shù)三計(jì)算熒光參數(shù)三qP：光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了：光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了PSII反響中心

7、中開(kāi)放反響中心中開(kāi)放 程程 度，度，1 qP那么反映了反響中心封鎖程度，反映了那么反映了反響中心封鎖程度，反映了QA的復(fù)的復(fù)原程度。原程度。 qP =Fm - Fs/Fm - F0NPQ：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了植物熱耗散的才干的變：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了植物熱耗散的才干的變化化,數(shù)值范圍在數(shù)值范圍在 0 n (1,2,3,4,5 )。 NPQ =Fm Fm/Fm = Fm/Fm - 1 qN：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。與：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。與NPQ一樣，如今運(yùn)用較少。一樣，如今運(yùn)用較少。數(shù)值范圍為數(shù)值范圍為0 1。 qN = (Fm Fm) / (Fm F0)熒光葉室的安裝熒光葉室的安裝運(yùn)用鑷子取

8、下內(nèi)置光量子傳感器銜接線。運(yùn)用鑷子取下內(nèi)置光量子傳感器銜接線。排氣管和熱偶電極。排氣管和熱偶電極。卸下四個(gè)螺絲，六個(gè)卸下四個(gè)螺絲，六個(gè)O形密封圈。形密封圈。改換上下蓋。改換上下蓋。銜接熒光葉室與分析器之間的電源銜接線。銜接熒光葉室與分析器之間的電源銜接線。銜接輔助連線。銜接輔助連線。白色密封圈的改換。白色密封圈的改換。暗順應(yīng)夾子的運(yùn)用方法。暗順應(yīng)夾子的運(yùn)用方法。配置軟件的安裝。配置軟件的安裝。軟件引見(jiàn)軟件引見(jiàn)標(biāo)志標(biāo)志含含 義義g行行Prss_KPa ParIn_m %Blue ParOutm%Blue藍(lán)色光化學(xué)光在內(nèi)部藍(lán)色光化學(xué)光在內(nèi)部ParIn_m中所占的百分比中所占的百分比m行行F dF/

9、dt FlrCV_% FlrEvent F熒光強(qiáng)度熒光強(qiáng)度dF/dt熒光強(qiáng)度變化率熒光強(qiáng)度變化率FlrCV_%熒光強(qiáng)度變異系數(shù)熒光強(qiáng)度變異系數(shù)FlrEvent熒光事件熒光事件n行行F0 Fm Fv/FmF0充分暗順應(yīng)條件下的最小熒光充分暗順應(yīng)條件下的最小熒光Fm充分暗順應(yīng)條件下的最大熒光充分暗順應(yīng)條件下的最大熒光Fv/Fm充分暗順應(yīng)條件下光化學(xué)量子效率充分暗順應(yīng)條件下光化學(xué)量子效率o行行Fo Fm Fv/Fm FsFo光照下的最小熒光光照下的最小熒光Fm光照下的最大熒光光照下的最大熒光Fv/Fm開(kāi)放的開(kāi)放的PSIIPSII反響中心的激發(fā)能捕獲效率反響中心的激發(fā)能捕獲效率Fs穩(wěn)態(tài)熒光穩(wěn)態(tài)熒光p行

10、行PhiPS2 ETR qP qNPhiPS2PSII作用光存在時(shí)作用光存在時(shí)PSIIPSII實(shí)踐的光化學(xué)量子效率實(shí)踐的光化學(xué)量子效率ETR電子傳送速率電子傳送速率qP光化學(xué)猝滅系數(shù)光化學(xué)猝滅系數(shù)qN非光化學(xué)猝滅系數(shù)非光化學(xué)猝滅系數(shù)新新增增參參數(shù)數(shù)行行介介紹紹功能行功能行F1F2F3F4F58Flr QuikPik選擇熒光設(shè)選擇熒光設(shè)置文件置文件Flr Editor編輯熒光設(shè)編輯熒光設(shè)置置Define Actinic定義作用光定義作用光Flr Adjust設(shè)置熒光設(shè)置熒光Rcrding ON/OFF記錄熒光記錄熒光9Meas is ON/OFF丈量光開(kāi)丈量光開(kāi)/關(guān)關(guān)Flash飽和閃光飽和閃光D

11、ark Pulse暗脈沖暗脈沖Actinic光化學(xué)光光化學(xué)光開(kāi)開(kāi)/關(guān)關(guān)Far Red Is ON/OFF遠(yuǎn)紅光開(kāi)遠(yuǎn)紅光開(kāi)/關(guān)關(guān)0Do Fo丈量最小熒丈量最小熒光光Do Fm丈量最大熒丈量最大熒光光Do Fo Fm丈量最小熒丈量最小熒光和最大熒光和最大熒光光View Fsh/Drk查看強(qiáng)閃光查看強(qiáng)閃光或暗脈沖或暗脈沖0Do Fo測(cè)定測(cè)定FoDo Fs測(cè)定測(cè)定FsDo Fs Fm測(cè)定測(cè)定Fs和和FmDoFs FmFo測(cè)定測(cè)定Fs，F(xiàn)m和和FoView Fsh/Drk查看強(qiáng)閃光查看強(qiáng)閃光或暗脈沖或暗脈沖新增功能行引見(jiàn)新增功能行引見(jiàn)根本實(shí)驗(yàn)根本實(shí)驗(yàn)1、丈量、丈量F0 & Fm。2、丈量、丈量F

12、0 、Fm & Fs 。3、丈量、丈量PSII、qP & qN& NPQ。4、熒光和氣體交換參數(shù)同時(shí)丈量。、熒光和氣體交換參數(shù)同時(shí)丈量。熒光丈量的根本步驟熒光丈量的根本步驟實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)1實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)2實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)3實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1： 植物暗順應(yīng)形狀的植物暗順應(yīng)形狀的F0、Fm 、 Fv/Fm翻開(kāi)一個(gè)文件翻開(kāi)一個(gè)文件1 1，f1f1，輸入文件名，添加備注。，輸入文件名，添加備注。設(shè)置丈量光、飽和閃光設(shè)置丈量光、飽和閃光8 8，f2f2，保管設(shè)置。，保管設(shè)置。夾好葉片。夾好葉片。等待等待dF/dt dF/dt 絕對(duì)值絕對(duì)值 5 5或或FlrCV% 1FlrCV% 1。記錄數(shù)據(jù)按記錄數(shù)據(jù)按0

13、0，f1/f2/f3/f4f1/f2/f3/f4。查看數(shù)據(jù)查看數(shù)據(jù)1 1，f2f2。封鎖文件封鎖文件1 1，f3f3。傳輸文件同光合操作。傳輸文件同光合操作。實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)2： 植物光順應(yīng)形狀的植物光順應(yīng)形狀的F0、Fm 、Fs、 Fv/Fm翻開(kāi)一個(gè)文件翻開(kāi)一個(gè)文件1 1，f1f1，輸入文件名，添加備注。，輸入文件名，添加備注。設(shè)置丈量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光設(shè)置丈量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光8 8，f2f2，保管設(shè)置。，保管設(shè)置。設(shè)置活化光強(qiáng)度設(shè)置活化光強(qiáng)度8 8，f3f3。翻開(kāi)活化光翻開(kāi)活化光9 9，f4f4夾好葉片。夾好葉片。等待等待dF/dt dF/dt 絕對(duì)值絕對(duì)值 5 5或或FlrCV% 1Flr

14、CV% 1。記錄數(shù)據(jù)按記錄數(shù)據(jù)按0 0，f1/f2/f3/f4f1/f2/f3/f4。查看數(shù)據(jù)查看數(shù)據(jù)1 1，f2f2。封鎖文件封鎖文件1 1，f3f3。傳輸文件同光合操作。傳輸文件同光合操作。實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)3： 猝滅研討，丈量猝滅研討，丈量PSII、qP & qN& NPQ1、翻開(kāi)一個(gè)文件、翻開(kāi)一個(gè)文件1，f1，輸入文件名，添加備注。，輸入文件名，添加備注。2、設(shè)置丈量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光、設(shè)置丈量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光8，f2，保管設(shè)置。，保管設(shè)置。3、設(shè)置活化光強(qiáng)度、設(shè)置活化光強(qiáng)度8，f3。4、夾好暗順應(yīng)好的葉片。、夾好暗順應(yīng)好的葉片。5、等待、等待dF/dt 絕對(duì)值絕對(duì)值 5或

15、或FlrCV% 1。記錄數(shù)據(jù)按。記錄數(shù)據(jù)按0，f1/f2/f3/f4。6、翻開(kāi)活化光、翻開(kāi)活化光9，f4，等待植物順應(yīng)光環(huán)境。，等待植物順應(yīng)光環(huán)境。7、等待、等待dF/dt 絕對(duì)值絕對(duì)值 5或或FlrCV% 1。記錄數(shù)據(jù)按。記錄數(shù)據(jù)按0，f1/f2/f3/f4。8、查看數(shù)據(jù)、查看數(shù)據(jù)1，f2，封鎖文件，封鎖文件1，f3。9、傳輸文件同光合操作。、傳輸文件同光合操作。丈量光的設(shè)置丈量光的設(shè)置8，f2Intensity：1/0.8; Modulation:0.25; Filter: 1;Gain:10.飽和閃光的設(shè)置飽和閃光的設(shè)置8，f2Duration:0.8; Intensity: 7/8;

16、Blu: Nochange; Modulation: 20; Filter: 50. 遠(yuǎn)紅光的設(shè)置遠(yuǎn)紅光的設(shè)置8，f2丈量光、光化光和遠(yuǎn)紅光的設(shè)置丈量光、光化光和遠(yuǎn)紅光的設(shè)置Flr Editor 與與Flr Adjust的區(qū)別的區(qū)別 按按8,f2，進(jìn)入，進(jìn)入Flr Editor編輯熒光設(shè)置編輯熒光設(shè)置按按8,f4，進(jìn)入，進(jìn)入Flr Adjust設(shè)置熒光設(shè)置熒光區(qū)別和聯(lián)絡(luò)：區(qū)別和聯(lián)絡(luò)：第一種，修正完后，執(zhí)行；第二種，邊修正邊執(zhí)行。第一種，修正完后，執(zhí)行；第二種，邊修正邊執(zhí)行。第一種設(shè)置可以設(shè)定小數(shù)點(diǎn)后的數(shù)值，第二種只能第一種設(shè)置可以設(shè)定小數(shù)點(diǎn)后的數(shù)值，第二種只能設(shè)置設(shè)置1的倍數(shù)。的倍數(shù)。都可以設(shè)置上述三種光。都可以設(shè)置上述三種光。留意：留意： l可以先將暗順應(yīng)和光順應(yīng)的丈量程序設(shè)置好可以先將暗順應(yīng)和光順應(yīng)的丈量程序設(shè)置好8，f2，分別用獨(dú)立的名字保管；然后根據(jù)測(cè)定對(duì)