




版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、基礎(chǔ)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題及參考答案填空題1.核酸分子中糖環(huán)與堿基之間為b 型的 糖昔 鍵,核昔與核昔之2.間通過磷酸二酯dna變性后,紫外吸收_鍵連接成多聚體。增加,粘度_下降_ ,浮力密度3.宜 ,生物活性_dna雙螺旋直徑為_丸 。2nm,每隔3.4_nm上升,圈,相當(dāng)于10個堿基對。4 . z-dna 為 左手螺旃。5 . hn-rna是真核生物mrna 的前體。6 .用sanger的鏈末端終止法測定 dna 一級結(jié)構(gòu)時,鏈終止劑是雙脫氧核昔三磷酸。7 . 維系dna雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的力主要有氫鍵 和堿基堆積力。8 .在堿性條件下,核糖 核酸比脫氧核糖核酸更容易降解,其原因是因?yàn)楹颂?核酸的每
2、個核甘酸上 -oh的緣故。9 . dna復(fù)制時,連續(xù)合成的鏈稱為前導(dǎo) 鏈;不連續(xù)合成的鏈稱為10 . dna合成的原料是四種脫氧核糖核甘三磷酸;復(fù)制中所需要的引物是 rna 。11 . dna合成時,先由引物酶合成rna 引物 ,再由 dna 聚合酶出在其3'端合成dna鏈,然后由 dna 聚合酶i切除引物并填補(bǔ)空隙,最后由dna連接酶連接成完整的鏈。12 .細(xì)菌的dna連接酶以nad 為能量來源,動物細(xì)胞和t4噬菌體的dna連接酶以atp為能源。13 .大腸桿菌rna聚合酶的全酶由“26 6' b 組成,其核心酶的組成為 “233'。14 . rna轉(zhuǎn)錄過程中識別轉(zhuǎn)錄
3、啟動子的是b 因子,協(xié)助識別轉(zhuǎn)錄終止部位的是 p 因子。15 .真核細(xì)胞mrn給成后的成熟過程包括戴帽、 加尾 、剪接、甲基化修飾。16 .遺傳信息由 rna傳涕到 dna的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄,由逆轉(zhuǎn)錄酶17 .反密碼子第1位堿基和密碼子第3 堿基的配對允許有一定的擺動,稱為變偶性。18 .在原核細(xì)胞翻譯起始時,小亞基16srrna的3'端與mrna5端的 sd序列之間互補(bǔ)配對,確定讀碼框架,fmet-trna f占據(jù)核糖體的 p位點(diǎn) 位置。19 .細(xì)胞內(nèi)多肽鏈合成的方向是從n端到 0 端,而閱讀 mrna勺方向是從 5 '端到3 ' 端。20 .在形成氨酰-trna時,由
4、氨基酸的竣 基與trna3'末端的 羥基形成酯鍵。為保證蛋白質(zhì)合成的正確性,氨酰trna合成酶除了對特定氨 基酸有很強(qiáng)的專一性 之外,還能將“錯誤”氨基酸從氨酰化-trna復(fù)合物上水解 下來。21.轉(zhuǎn)肽酶催化生成的化學(xué)鍵是肽鍵,該酶還具有酯酶活性。22.肽鏈延伸包括:進(jìn)位、成肽、和移位。23.翻譯延長階段的進(jìn)位,是指氨酰-trna進(jìn)入 a位。翻譯延長階段的轉(zhuǎn)位是指 mrna與 核糖體做相對運(yùn)動。24 .體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)形成正確的構(gòu)象需要分子伴侶的幫助,某些蛋白質(zhì)的折疊還需要二硫鍵互換酶和脯氨酰肽酰異構(gòu)酶的催化。25 .正調(diào)控和負(fù)調(diào)控是基因表達(dá)的兩種最基本的調(diào)節(jié)形式,其中原核細(xì)胞常用 負(fù)
5、調(diào)控模式,而真核細(xì)胞常用正調(diào)控 模式。26 .在原核細(xì)胞中,由同一調(diào)控區(qū)控制的一群功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成一個基因表達(dá)調(diào)控單位,稱為啟動子 ,其調(diào)控區(qū)包括啟動 基因和操縱 基因。27 .有些基因的表達(dá)較少受環(huán)境的影響,在一個生物體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù) 表達(dá),因此被稱為管家基因;另有一些基因表達(dá)極易受環(huán)境的影響,在特定環(huán)境信號刺激下,相應(yīng)的基因被激活,基因表達(dá)產(chǎn)物增加,這種基 因是可 誘導(dǎo)的基因,相反,如果基因?qū)Νh(huán)境信號應(yīng)答時被抑制,這種基因是可阻遏的基因。28 .在基因重組技術(shù)中,切割dna用 限制性核酸內(nèi)切酶,連接dna用dna1接酶 。29 .除噬菌體外,質(zhì)粒 和 病毒也是分子克隆的常用載體
6、。30 .用動物病毒dnaa造的基因載體有腺病毒載體和反轉(zhuǎn)錄病載體。用于植物基因工程的常用載體是ti質(zhì)粒 。31 .將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌稱轉(zhuǎn)化,將噬菌體dna專入細(xì)菌稱轉(zhuǎn)導(dǎo) 。32 . southern印跡法、northern印跡法和 western印跡法是分別用于研究 dna 、 rna 和 甯白質(zhì)轉(zhuǎn)移和鑒定的幾種常視技術(shù)。二、 選擇題1 .有關(guān)核酸的雜交(a,c,d )a.dna變性的方法常用加熱和堿變性b. 相同來源的核酸才能通過變性而雜交c. 不同來源的核酸復(fù)性時,若全部或部分堿基互補(bǔ)就可以雜交d.雜交可以發(fā)生在 dna與dna之間,rna與dna rna與rna之間e.把待測dn雨記成
7、探針進(jìn)行雜交2 .dna 的復(fù)性速度與以下哪些有關(guān)(e)a.溫度 b.分子內(nèi)的重復(fù)序列c.ph d. 變性dna的起始濃度e.以上全部3 .某dna分子中腺喋吟的含量為 15%則胞喀咤白含量應(yīng)為(d)a 15% b 30% c 40% d 35% e 70%4 .dna 變性是指 (d)a.分子中磷酸二酯鍵斷裂b .多核甘酸鏈解聚c. dna分子由超螺旋-雙螺旋d .互補(bǔ)堿基之間氫鍵斷裂e . dn冊子中堿基丟失5 .寡聚dt-纖維素柱層析用于(d)a.從總dna中分離純化質(zhì)粒dna b.從總核蛋白中分離 dnpc.除去雜蛋白 d. 從總rna中純化mrna6 . 關(guān)于雙螺旋結(jié)構(gòu)學(xué)說的敘述哪一
8、項(xiàng)是錯誤的 (c)a. 由兩條反向平行的脫氧多核苷酸鏈組成b. 堿基在螺旋兩側(cè),磷酸與脫氧核糖在外圍c.兩條鏈間的堿基配對非常嚴(yán)格,a與t間形成三個氫鍵,g與c間形成兩個氫鍵d. 堿基對平面垂直于中心軸,堿基對之間的作用力為范德華力e. 螺旋每轉(zhuǎn)一圈包含10 個堿基對7 .下列關(guān)于雙鏈dnag基含量關(guān)系,哪一個是錯誤的(b)a a=t, g=c b a+t=g+c c a+g=c+t d a+c=g+t8 .下列是幾種 dna分子的堿基組成比例。哪一種的tm值最高(a)a a+t=15% b g+c=25% c g+c=40% d a+t=80%9 . dna復(fù)制時,下列哪一種酶是不需要的(e
9、)a. dna旨導(dǎo)的dna聚合酶b . dnadl接酶c .拓樸異構(gòu)酶d .解鏈酶e.限制性內(nèi)切酶10 .dna 復(fù)制中的引物是(c)a.由dnw模板合成的dna段b .由rna為模板合成的rn*段c.由dnw模板合成的rna段d .由rna為模板合成的rna段e.引物仍存在于復(fù)制完成的dna鏈中11 .dna 復(fù)制時,子鏈的合成是(c)a.一條鏈5' f 3',另一條鏈3' f5' b .兩條鏈均為3' f5'c.兩條鏈均為 5' -3' d ,兩條鏈均為連續(xù)合成e .兩條鏈均為不連續(xù)合成12 .在e.coli細(xì)胞中dna聚合酶
10、i的作用主要是 (c)a. dnam制b. e.colidna 合成的起始 c. 切除rnmi物d. 岡崎片段的連接13 .需要 dna 連接酶參與的過程有(a)a dna 復(fù)制 b dna 體外重組c dna 損傷的切除修復(fù)d rna逆轉(zhuǎn)錄14 .dna 損傷的光修復(fù)作用是一種高度專一的修復(fù)方式, 它只作用于紫外線引起的 (a)a.喀咤二聚體b.喋吟二聚體c.喀咤-喋吟二聚體d.為兩個單獨(dú)的嘧啶堿基15 .真核細(xì)胞rna聚合酶ii催化合成的是(b)a 18srna b mrna c trna d 5srna e rrna16 . 轉(zhuǎn)錄指下列哪一過程(b)a.以rnw模板合成dna b.以dn
11、a為模板合成rnac.以rnw模板合成蛋白質(zhì)d. 以dnw模板合成dna17 .hnrna 是(b)a.存在于細(xì)胞核內(nèi)的trna前體 b. 存在于細(xì)胞核內(nèi)的 mrn順體c.存在于細(xì)胞核內(nèi)的rrna前體 d. 存在于細(xì)胞核內(nèi)的snrna前體18 .基因有兩條鏈,與mrna5列相同(t代替u)的鏈叫做(a)a. 有義鏈 b. 反義鏈c. 重鏈 d. cdna 鏈19 . 下列關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄酶的敘述哪一個是錯誤的 (d)a.它以rnw模板指導(dǎo)dna勺合成b. 它也可以dnw模板指導(dǎo)dna勺合成c. 它具有 rnase h 活性 d. 逆轉(zhuǎn)錄酶的作用不需要引物20 . 多肽鏈的氨基酸序列取決于 (d)a
12、trna b. 18s rrna c. 28s rrna d mrna e. 氨基酰 -mrna合成酶21 .密碼ggc勺對應(yīng)反密碼子是(a)a gcc b. ccg c. ccc d. cgc e. ggc22 . 關(guān)于密碼子,錯誤的敘述是(c)a.每一密碼子代表一種氨基酸b.某些密碼子不代表氨基酸c. 一種氨基酸只有一種密碼子d.甲硫氨酸只有一種密碼子e. 密碼子有種族特異性23. 一個n端為丙氨酸的20肽,其開放的閱讀框架至少應(yīng)該由多少個核甘酸殘基組成? (c)a 60 個 b. 63 個 c. 66 個 d. 57 個 e. 69 個24. 氨基酰-trna中,trna與氨基酸的結(jié)合鍵
13、是(e)a.鹽鍵 b.磷酸二酯鍵c. 肽鍵 d. 糖昔鍵 e. 酯鍵25. 原核生物和真核生物翻譯起始不同之處(b)a.真核生物的 shine-dalgarno 序列使mrna核糖體結(jié)合b.真核生物帽子結(jié)合蛋白是翻譯起始因子之一c if 比 eif 種類多d.原核生物和真核生物使用不同起始密碼e.原核生物有tataat乍為翻譯起始序列,真核生物則是tata26. 關(guān)于核蛋白體轉(zhuǎn)肽酶,錯誤的敘述是(c)a.轉(zhuǎn)肽不需要 gtp b. 轉(zhuǎn)肽不需要 atp c .活性中心在小亞基d.活性中心在大亞基e .活性中心與rrna有關(guān)27. 一個氨基酸參入多肽鏈,需要(b)a.兩個 atp分子 b , 一個a
14、tp分子,兩個 gtp分子c. 一個 atp分子,一個 gtp分子 d .兩個atp分子,一個 gtp分子e.兩個gtp分子28. 信號肽段的作用是(c)a.指導(dǎo)dn蛤成的啟動b.指導(dǎo)多肽鏈糖基化c .引導(dǎo)多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng) d .指導(dǎo)rna合成的啟動e.指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的啟動29. 多肽鏈合成后,其ser 可 (b)a.乙?;?b .糖基化 c .磷酸化 d .甲基化 e .硫酸化30. 蛋白質(zhì)合成后加工不包括 (d)a.蛋白質(zhì)的磷酸化 b.信號肽的切除c .蛋白質(zhì)的糖基化d.酶的構(gòu)像變化e .蛋白質(zhì)的乙?;?1. 以下哪一種抑制劑只能抑制真核生物的蛋白質(zhì)合成(c)a.氯霉素 b. 紅霉素 c .
15、放線菌酮d .喋吟霉素 e .四環(huán)素32. 一個操縱子通常含有(b)a. 一個啟動序列和一個編碼基因b.一個啟動序列和數(shù)個編碼基因c. 數(shù)個啟動序列和一個編碼基因d.數(shù)個啟動序列和數(shù)個編碼基因e 兩個啟動序列和數(shù)個編碼基因33 有關(guān)操縱子學(xué)說的論述,正確的是(b)a. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)是真核生物基因調(diào)控的主要方式b. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)是原核生物基因調(diào)控的主要方式c. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)由調(diào)節(jié)基因、操縱基因、啟動子和結(jié)構(gòu)基因組成d. 誘導(dǎo)物與阻遏蛋白結(jié)合啟動轉(zhuǎn)錄e. 誘導(dǎo)物與啟動子結(jié)合而啟動轉(zhuǎn)錄34 轉(zhuǎn)錄因子是(c)a. 調(diào)節(jié) dna 結(jié)合活性的小分子代謝效應(yīng)物 b. 調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄延伸速度的蛋白 質(zhì)c. 調(diào)
16、節(jié)轉(zhuǎn)錄起始速度的蛋白質(zhì)d. 調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物分解速度的蛋白質(zhì)e. 促進(jìn)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工的蛋白質(zhì)35. 阻遏蛋白(阻抑蛋白)識別操縱子中的(c)a. 啟動基因 b. 結(jié)構(gòu)基因 c. 操縱基因 d. 內(nèi)含子 e. 調(diào)節(jié)基因36. 在下列哪種情況下,乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄活性最高(a)a. 高乳糖,低葡萄糖b.高乳糖,高葡萄糖c. 低乳糖,低葡萄糖d. 低乳糖,高葡萄糖e. 不一定37. 順式作用元件是指(e)a.基因的5/側(cè)翼序列b.基因的3/側(cè)翼序列 c.基因的5/和3/側(cè)翼序列d.基因的5/和3 /側(cè)翼序列以外的序列e.具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能的特異dna序列38. 反式作用因子是指(e)a. 具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋
17、白 b. 具有抑制功能的調(diào)節(jié)蛋白c. 對自身基因具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白 d. 對另一基因具有激活功能的調(diào) 節(jié)蛋白e. 對另一基因有調(diào)節(jié)功能的蛋白質(zhì)因子39. 下列關(guān)于限制性內(nèi)切酶的敘述哪一項(xiàng)是錯誤的(c)a.它能識別dna特定的堿基順序,并在特定的位點(diǎn)切斷dnab. 切割點(diǎn)附近的堿基順序一般呈回文結(jié)構(gòu)c. 它能專一性降解經(jīng)甲基化修飾的 dnad.是重組dna勺重要工具酶e. 主要從細(xì)菌中獲得40. 基因工程中,不常用到的酶是(c)a. 限制性核酸內(nèi)切酶b.dna 聚合酶 c.dna 解鏈酶 d.dna 連接酶e. 反轉(zhuǎn)錄酶41 下列哪項(xiàng)不能作為表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的方法?(d)a. 磷酸鈣轉(zhuǎn)染
18、b. 電穿孔 c. 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染d. 氯化鈣轉(zhuǎn)染e. 顯微注射42 . 重組體的篩選方法有(a)a. 抗藥標(biāo)志篩選 b. 標(biāo)記補(bǔ)救c. 分子雜交d. 免疫化學(xué) e. 酶聯(lián)免疫檢測43 .cdna 是指(d)a.在體內(nèi)合成的與病毒 dna rna互補(bǔ)的dnab.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與 dna5補(bǔ)的dnac.在體外經(jīng)轉(zhuǎn)錄合成的與 dna5補(bǔ)的rnad.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與 rna5補(bǔ)的dnae.在體內(nèi)經(jīng)轉(zhuǎn)錄合成的與 dna5補(bǔ)的rna44 .建cdna文庫時,首先需分離細(xì)胞的(c)a. 染色體 dna b. 線粒體 dna c. 總 mrna d.trna e.rrna三、判斷題(,)1.生物體內(nèi)
19、,天然存在的 dna分子多為負(fù)超螺旋。(,)2.rna分子可以發(fā)生熱變性,并有增色效應(yīng)。(x )3.水分子可以插入天然 dn后子雙螺旋空隙中。(x )4.從結(jié)構(gòu)基因中的dna列可以推出相應(yīng)的蛋白質(zhì)序列。(,)5.提高鹽濃度可使 dna分子的熔點(diǎn)(tm)升高。(,)6.rna的局部螺旋區(qū)中,兩條鏈之間的方向也是反向平行的。(x ) 7.在e.coli細(xì)胞和真核細(xì)胞中都是由dna聚合酶i切除 rna引物。(x )8.逆轉(zhuǎn)錄酶催化 rna指導(dǎo)的dna合成不需要 rna引物。(x)9.rna病毒不含dna基因組,根據(jù)中心法則它必須先進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,才能復(fù) 制和增殖。(x)10.原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的 rna
20、聚合酶都能夠直接識別啟動子。(x )11.大腸桿菌染色體 dna由兩條鏈組成,其中一條鏈充當(dāng)模板鏈,另外一條鏈充當(dāng)編碼鏈。(x)12.由于遺傳密碼的通用性,用原核生物表達(dá)真核基因不存在技術(shù)障礙。表達(dá)出的蛋白質(zhì)通常是有功能的。(x)13.氨酰-trna合成酶可以通過合成反應(yīng)的逆反應(yīng)切除誤載的氨基酸。(x)14.所有氨酰-trna合成酶的作用都是把氨基酸連接在trna末端核糖的3- 羥基上。(x)15.在核糖體上形成肽鏈所需的能量,由水解gtp來提供。(x )16.生物合成蛋白質(zhì)時,a位的氨基酸轉(zhuǎn)移到 p位,使p位的肽鏈延長,a位 空載的 -trna 隨后便脫落。(x)17.蛋白質(zhì)能夠折疊成何種三
21、維結(jié)構(gòu),主要是由分子伴侶決定的。(,)18.高等真核生物的大部分 dna是不為蛋白質(zhì)編碼的。(v) 19.大多數(shù)管家基因編碼低豐度的mrna.(x )20.乳糖可以誘導(dǎo)乳糖操縱子的表達(dá),所以乳糖對乳糖操縱子的調(diào)控屬于正 調(diào)控系統(tǒng)。(,)2 1.某些蛋白質(zhì)既可以作為阻遏蛋白又可以作為激活蛋白參與基因表達(dá)的 調(diào)控。(,)22.準(zhǔn)備用原核生物表達(dá)真核基因時,最好通過cdna獲取目的基因。(v)2 3.用原核生物表達(dá)真核生物的糖蛋白,其表達(dá)產(chǎn)物不會有正常的生物學(xué)功能。(x )24.ti質(zhì)??梢噪S土壤農(nóng)桿菌進(jìn)入植物細(xì)胞。(x )25.用入噬菌體作克隆載體時,外源dna片斷越小,克隆的成功率越高。(v)2
22、 6.基因克隆選擇的宿主細(xì)胞必須無限制性核酸內(nèi)切酶。(x )27.采用藍(lán)白斑選擇法時,藍(lán)色菌落或噬菌斑是含有重組載體的克隆。(v)2 8.若1個氨基酸有3個遺傳密碼,則這 3個遺傳密碼的前兩個核甘酸通 常是相同的。四、名詞解釋(每題 2 分,共 20 分)1. 增色效應(yīng)(hyperchromic effect);核酸從雙鏈變?yōu)閱捂湹臒o規(guī)則卷曲狀態(tài)時,在260nm處的吸光度增加,稱 “增色效應(yīng)”。2. 分子雜交( molecular hybridization ) ;不同的dna片段之間,dna片段與rna片段之間,如果彼此間的核甘酸排列順序互補(bǔ)也可以復(fù)性,形成新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種按照互補(bǔ)堿基配
23、對而使不完全互補(bǔ) 的兩條多核苷酸相互結(jié)合的過程稱為分子雜交。3. 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(pcr);聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(pcr是擴(kuò)增樣品中的 dna量和富集眾多 dna分子中的一個特 定的dna序列的一種技術(shù)。在該反應(yīng)中,使用與目的dna序列互補(bǔ)的寡核甘酸作為引物,進(jìn)行多輪的 dna合成。其中包括 dna變性,引物退火和在tap dna聚合酶催化下的dna合成。4. dna 的變性與復(fù)性(denaturation and renaturation of dna );dna的變性是指dna雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂,變成單鏈并不涉及共價鍵的斷裂。 dna的復(fù)性是指變性 dna在適當(dāng)條件下,又可使兩條彼此分開的鏈重新
24、締合成為雙 螺旋結(jié)構(gòu)。5. tm ;通常把加熱變性 dna使增色效應(yīng)達(dá)到最大增量一半時的的溫度稱為該dna的熔點(diǎn)或熔解溫度,用 tm表示。6. 內(nèi)含子與外顯子內(nèi)含子是指結(jié)構(gòu)基因中存在于外顯子之間的非編碼序列,也是基因中不表達(dá)的序列,屬插入序列。外顯子是指基因中編碼蛋白質(zhì)的序列。7. 半保留復(fù)制;dna 復(fù)制的一種方式。每條鏈都可用作合成互補(bǔ)鏈的模板,合成出兩分子的雙鏈dna每個分子都是由一條親代鏈和一條新合成的鏈組成。8. 岡崎片段;相對比較短的 dna鏈(大約1000核甘酸殘基),是在 dna的滯后鏈的不連續(xù)合成期間生成的片段,這是reiji okazaki在dna合成實(shí)驗(yàn)中添加放射性的脫氧
25、核昔酸前體觀察到的。9. 復(fù)制體;一種多蛋白復(fù)合體,包含dna聚合酶,引發(fā)酶,解旋酶,單鏈結(jié)合蛋白和其它輔助因子。復(fù)制體位于每個復(fù)制叉處,進(jìn)行染色體dnam制的聚合反應(yīng)。10. 編碼鏈;雙鏈dna中,不能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄的那一條dna鏈,其核甘酸序列與轉(zhuǎn)錄生成的rna的序列一致(在 rna中是以u取代了 dna中的t)。11. 內(nèi)含子;在轉(zhuǎn)錄后的加工中,從最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物除去的內(nèi)部的核苷酸序列。術(shù)語內(nèi)含子也指dna中編碼相應(yīng)rna的區(qū)域。12. 外顯子( exon )既存在于最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中,也存在于成熟的rna分子中的核甘酸序列。術(shù)語外顯子也指dna中編碼相應(yīng)rna的區(qū)域。13. 遺傳密碼;dna編碼
26、鏈或mrnah的核甘酸,以3個為一組(三聯(lián)體)決定 1個氨基酸的種 類,稱為三聯(lián)體密碼。mrna勺三聯(lián)體密碼是連續(xù)排列的,因此, mrna勺核甘酸序列 可以決定蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。14. 擺動假說;mrnak的密碼子與trna上的反密碼子相互辯認(rèn),大多數(shù)情況是遵從堿基配對 規(guī)律的。但也可出現(xiàn)不嚴(yán)格的配對,這種現(xiàn)象就是遺傳密碼的擺動性,trna分子上有相當(dāng)多的稀有堿基,例如次黃喋吟( inosine,i )常出現(xiàn)于三聯(lián)體反密碼子的5'端第一位,它和 mrn福碼子第3位的a、c、u都可以配對。15. sd 序列;位于mrna子aug起始密碼子上游約 813個核甘酸處,由46個核甘酸組 成的富
27、含喋吟的序列,以 -ag-ga-為核心。sd序列同16s rrna近3'-末端的序歹u互 補(bǔ),在核糖體與mrna勺結(jié)合過程中起重要作用。16. 信號肽;是未成熟的分泌性蛋白質(zhì)中可被細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)識別的特征性氨基酸序列。有堿性n-末端區(qū)、疏水核心區(qū)及加工區(qū)三個區(qū)段。蛋白質(zhì)被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞的一定部位后, 信號肽即被切除。17. 多聚核糖體是由1個mrn吩子與一定數(shù)目的單個核糖體結(jié)合而成的串珠狀排列。每個核糖體可以獨(dú)立完成一條肽鏈的合成, 所以多個核糖體上可以同時進(jìn)行多條肽鏈的合成, 可以加速蛋白質(zhì)的合成速度,提高模板mrna勺利用率。18. 操縱子;原核生物的幾個功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因往往排列在一起
28、,轉(zhuǎn)錄生成一個mrna然后分別翻譯成幾種不同的蛋白質(zhì)。這些蛋白可能是催化某一代謝過程的酶,或共同完成某種功能。這些結(jié)構(gòu)基因與其上游的啟動子,操縱基因共同構(gòu)成轉(zhuǎn)錄單位,稱操縱子。19. 啟動子;是rna聚合酶結(jié)合位點(diǎn)周圍的一組轉(zhuǎn)錄控制組件,包括至少一個轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。在真核基因中增強(qiáng)子和啟動子常交錯覆蓋或連續(xù)。有時,將結(jié)構(gòu)密切聯(lián)系而無法區(qū)分的啟動子、增強(qiáng)子樣結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱啟動子。20. 增強(qiáng)子;是一種能夠提高轉(zhuǎn)錄效率的順式調(diào)控元件,最早是在sv40 病毒中發(fā)現(xiàn)的長約200bp的一段dna可使旁側(cè)的基因轉(zhuǎn)錄提高100倍,其后在多種真核生物,甚至在原核生物中都發(fā)現(xiàn)了增強(qiáng)子。增強(qiáng)子通常占100200bp長度,也
29、和啟動子一樣由若干組件構(gòu)成,基本核心組件常為812bp,可以單拷貝或多拷貝串連形式存在。21. 衰減子;在原核生物的 trp 操縱子結(jié)構(gòu)中,第一個結(jié)構(gòu)基因與啟動子p 之間有一個區(qū)域含 trp 密碼子,稱衰減子。當(dāng)環(huán)境中 trp 濃度很高時,它可通過編碼并翻譯,使正在轉(zhuǎn)錄的mrn即成終止信號,從而終止trp操縱子的表達(dá)。這種轉(zhuǎn)錄衰減實(shí)質(zhì)上是 轉(zhuǎn)錄與一個前導(dǎo)肽翻譯過程的偶聯(lián),它是原核生物特有的一種基因調(diào)控機(jī)制。22. 反式作用因子;大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子由某一基因表達(dá)后,通過與特異的順式作用元件相互作用(dna毒白質(zhì)相互作用),或通過與基它調(diào)節(jié)因子的相互作用(蛋白質(zhì) -蛋白質(zhì) 相互作用) ,反式激
30、活另一基因的轉(zhuǎn)錄,故稱反式作用蛋白或反式作用因子。23. 順式調(diào)控元件:指可影響自身基因表達(dá)活性的真核dna序列。根據(jù)順式作用元件在基因中的位置、轉(zhuǎn)錄激活作用的性質(zhì)及發(fā)揮作用的方式,分為啟動子、增強(qiáng)子及沉默子等。24. 降解物基因活化蛋白;也就是camp受體蛋白(camp receptor protein,crp ),它與camp的復(fù)合物可 以促進(jìn)某些原核操縱子(如乳糖操縱子)的轉(zhuǎn)錄。25. 克隆技術(shù);“克隆”作為名詞指相同的分子或細(xì)胞構(gòu)成的群體,或一個共同的祖先通過無性繁殖所得到的群體,作為動詞指獲取“克隆”的過程。克隆技術(shù)特指獲取“克隆”的過程,包括分子克隆,細(xì)胞克隆等技術(shù)。26. 限制性
31、核酸內(nèi)切酶;就是識別dna的特異序列,并在識別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈dna的一類核酸內(nèi)切酶。限制性核酸內(nèi)切酶存在于細(xì)菌體內(nèi),與相伴存在的甲基化酶共同構(gòu)成細(xì)菌的限制、修飾體系,限制外源 dna保護(hù)自身dna對保持細(xì)菌遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定具有重要意義。限制性核酸內(nèi)切酶分為三類,其中的h類酶能特異性在一定的核甘酸序列處切割雙鏈dna因而在基因工程中得到廣泛的應(yīng)用。27. 基因組dnac庫;利用限制性核酸內(nèi)切酶將染色體dna切割成一定大小的片段,將這些片段分子與適當(dāng)?shù)目寺≥d體拼接成重組dna分子,繼而轉(zhuǎn)入受體菌,使每個細(xì)菌內(nèi)都攜帶一種重組dna分子。不同細(xì)菌中的重組 dna子可能包含不同的染色體dna片段,這
32、樣,只要得到的轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的重組dna分子種類足夠多,則全部轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的各種染色體片段就代表了染色體的整個基因組。存在于轉(zhuǎn)化細(xì)菌內(nèi),由克隆載 體所攜帶的所有基因組dna片段的集合稱基因組 dna文庫。基因組dna文庫涵蓋了基因組的全部基因信息。 28. cdna 文庫以mrna模板,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化,在體外反轉(zhuǎn)錄成cdna與適當(dāng)?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體)連接后轉(zhuǎn)化受體菌,則每個細(xì)菌含有一段cdna并能繁殖擴(kuò)增,這樣包含著細(xì)胞全部 mrna言息的cdna克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cdna文庫?;蚪M含有的基因在特定的組織細(xì)胞中只有一部分表達(dá),而且處在不同環(huán)境條件、 不同分化時期的細(xì)胞其基因
33、表達(dá)的種類和強(qiáng)度也不盡相同,所以cdna文庫具有組織細(xì)胞特異性。cdna文庫顯然比基因組 dna文庫小得多,能夠比較容易從中篩選克隆 得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。另外,對真核細(xì)胞來說,從基因組dna文庫獲得的基因與從cdnac庫獲得的不同,基因組dnat庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組 基因,而從cdna文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接,去除了內(nèi)含子的cdna 一般來說,從cdna文庫獲得的基因,因不含內(nèi)含子而片段較小,更適合于用作基因工程的目的基因。由于原核生物不存在將 hnrn劭口工成mrna勺酶系統(tǒng),若用原核生物表達(dá)真核 基因,則目的基因一定要通過cdna獲取。五、分析計(jì)算題1 .簡述b-dna
34、的結(jié)構(gòu)特征。( 1)兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸相互纏繞形成右手螺旋;(2)喋吟和喀咤堿位于雙螺旋的內(nèi)側(cè),磷酸和核糖在外側(cè), 彼此通過3' , 5'磷酸二酯鍵相連接,形成 dna分子的骨架。堿基平面和縱軸垂直,糖環(huán)的平面則和 縱軸平行;(3)雙螺旋的平均直徑為 2nm,兩個相鄰的堿基對之間相距的高度,堿基堆積 距離為0.34nm,兩個核甘酸之間的夾角為36度;( 4)兩條核苷酸鏈依靠彼此堿基之間形成的氫鍵相聯(lián)系而結(jié)合在一起; ( 5)堿基在一條鏈上的排列順序不受任何限制。2 .何i胃tn?影響tm大小的因素有哪些?在實(shí)驗(yàn)中如何計(jì)算tm值?dna的變性從開始解鏈到完全解
35、鏈,是在一個相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成的,在 這一范圍內(nèi),紫外線吸收值的增加量達(dá)到最大增加量的50%寸的溫度為dna勺解鏈溫度(溶解溫度,melting temperature,tm )。tm值大小主要與gc含量有關(guān),gc 含量越高,tm值越大;另外核酸分子越大,tm值也越大,溶液ph值大于11.3 ,核酸完全變性,小于 5.0則核酸容易脫喋吟。降低溶液的離子強(qiáng)度會使tm值下降,尿 素等變性劑也會使 tm值下降。在實(shí)驗(yàn)中,tm值計(jì)算公式:tm=69.3+0.41(g+c%),小 于 20bp 的寡核甘酸:tm=4 (g+c +2 (a+t)。3 .如果人體有1014個細(xì)胞,每個體細(xì)胞的 dna含量
36、為6.4 x09個堿基對。試計(jì) 算人體dna的總長度是多少?是太陽-地球之間距離(2.2 m09公里)的多少倍?已 知雙鏈dna每1000個核甘酸重lxl0-18g,求人體的dna的總質(zhì)量。每個體細(xì)胞的 dna 的總長度為:6.4 x09x0.34nm = 2.176 109 nm= 2.176m, 14113 .人體內(nèi)所有體細(xì)胞的 dna的總長度為:2.176m m0 = 2.176 10 km這個長度與太陽-地球之間距離(2.2 m09公里)相比為:2.176x1011/2.2 109 = 99倍, 每個核甘酸重 1x10-18g/1000=10-21g,所以,總 dna 6.4 1023
37、 m0-21=6.4 102=640g4 .什么是dna變性? dna變性后理化性有何變化?dna雙鏈轉(zhuǎn)化成單鏈的過程成變性。引起dna變性的因素很多,如高溫、超聲波、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑和某些化學(xué)試劑(如尿素,酰胺)等都能引起變性。dna變性后的理化性質(zhì)變化主要有:(1)天然dna子的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈變成單鏈的無規(guī)則線團(tuán),生物學(xué)活性喪失;(2)天然的線型 dnm子直徑與長度之比可達(dá) 1: 10,其水溶液具有很大的黏度。變性后,發(fā)生了螺旋-線團(tuán)轉(zhuǎn)變,黏度顯著降低;(3)在氯化葩溶液中進(jìn)行密度才度離心,變性后的dna孚力密大大增加;(4)沉降系數(shù)s增加;(5) dn儂性后,堿基的有序堆積被破壞,堿
38、基被暴露出來,因此,紫外 吸收值明顯增加,產(chǎn)生所謂增色效應(yīng)。(6) dna分子具旋光性,旋光方向?yàn)橛倚S捎赿n冊子的高度不對稱性,因此旋光性很強(qiáng),其 a=150 。當(dāng)dna分子變性時, 比旋光值就大大下降。5 .什么是核酸雜交?有何應(yīng)用價值?熱變性后的dna片段在進(jìn)行復(fù)性時,不同來源的變性核酸(dna rna只要有一定數(shù)量的堿基互補(bǔ)(不必全部堿基互補(bǔ)),就可形成雜化的雙鏈結(jié)構(gòu)。此種使不 完全互補(bǔ)的單鏈在復(fù)性的條件下結(jié)合成雙鏈的技術(shù)稱為核酸雜交。用被標(biāo)記的已知 堿基序列的單鏈核酸小分子作為探針,可確定待檢測的 dna rna分子中是否有與探針同源的堿基序列。用此原理,制作探針,再通過雜交,可用
39、于細(xì)菌,病毒,腫瘤 和分子病的診斷(基因診斷)。也可用于基因定位,目的基因篩選,基因表達(dá)狀況 的分析等研究工作。6 .若使15n標(biāo)記的大腸桿菌在14n培養(yǎng)基中生長三代,提取 dna ,并用平衡沉 降法測定dna密度,其14n-dna分子與14n 15n雜合dna分子之比應(yīng)為多少?15n標(biāo)記的大腸桿菌利用培養(yǎng)基中的14n合成dna第一代dna雙鏈都是14n15n雜合dna分子。第二代分別是以第一代中的14n和15n鏈作為母鏈合成新的dna所以14n- dna分子與14n15n雜合dna分子之比為1:1。第三代中的14n和15n母鏈的 分子之比是3: 1,所以14n- dna分子與14n15n雜合
40、dna分子之比應(yīng)為3: 1。7 .真核生物dna聚合酶有哪幾種?它們的主要功能是什么?真核生物的dnam合酶有a、3、丫、8、e五種,均具有5'- 3聚合酶活性, dna聚合酶丫、8和e有3。5'外切酶活性,dna聚合酶a和3無外切酶活性。dna 聚合酶&用于合成引物,dna聚合酶8用于合成細(xì)胞核 dna dna聚合酶3和&主 要起修復(fù)作用,dnam合酶丫用于線粒體dna勺合成。8 .真核細(xì)胞中有幾種 rna聚合酶?它們的主要功能是什么?真核生物的rna聚合酶,按照對a -鵝膏蕈堿的敏感性不同進(jìn)行分類:rna聚合酶i基本不受”-鵝膏蕈堿的抑制,在大于 10-3m
41、ol/l時才有輕微的抑制。 rna聚 合酶h對a-鵝膏蕈堿最為敏感,在 10-8mol/l以下就會被抑制。rna聚合酶出對a -鵝膏蕈堿的敏感性介于聚合酶i和聚合酶n之間,在10 5mol/l到104mol/l才會有抑制現(xiàn)象。rna聚合酶i存在于核仁中,其功能是合成5.8s rrna、18 s rrna和28 s rrna。rna聚合酶h存在于核質(zhì)中,其功能是合成 mrna、snrna。rna聚 合酶出也存在于核質(zhì)中,其功能是合成 trna和5 s rrna及轉(zhuǎn)錄alu序列。9 . 真核生物三類啟動子各有何結(jié)構(gòu)特點(diǎn)?真核生物三類啟動子分別由 rna 聚合酶 i 、 ii、 iii 進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。類
42、別 i 啟動子包 括核心啟動子和上游控制元件兩部分,需要ubf1 和 sl1 因子參與作用。類別ii 啟動子包括四類控制元件:基本啟動子、起始子、上游元件和應(yīng)答元件。識別這些元 件的反式作用因子由通用轉(zhuǎn)錄因子、 上游轉(zhuǎn)錄因子和可誘導(dǎo)的因子。 類別 iii 啟動子 有兩類:上游啟動子和基因內(nèi)啟動子,分別由裝配因子和起始因子促進(jìn)轉(zhuǎn)錄起始復(fù) 合物的形成和轉(zhuǎn)錄。10 論述遺傳密碼的特點(diǎn)。(1)遺傳密碼為三聯(lián)體:模板從mrna5端的起始密碼子開始,到 3'端的終止密碼稱為開放讀碼框架。 在框架內(nèi)每3 個堿基組成1 個密碼子, 決定 1 個氨基酸。( 2 )遺傳密碼的種類:遺傳密碼共64 個,其中
43、 61 個密碼子分別代表各種氨基酸。3個為肽鏈合成的終止信號。位于 5'端的aug除了代表甲硫蛋氨酸外,還是肽鏈 合成的起始信號。(3)遺傳密碼的連續(xù)性:對mrn吩子上密碼子的閱讀方法叫讀碼。 正確讀碼是每3 個相鄰堿基一組,不間斷地連續(xù)讀下去,直到出現(xiàn)終止密碼為止。mrnah堿基的插入和缺失,可導(dǎo)致框移突變。(4)遺傳密碼的簡并性:有 61個密碼子代表20種氨基酸,每個密碼子只代表一種氨基酸,而多數(shù)氨基酸都有24個密碼子,這種由幾個密碼子編碼同一氨基酸的現(xiàn)象稱為簡并性。從密碼表上可看出 密碼子的第3 位堿基通常是簡并的。 ( 5 )遺傳密碼的擺動性:指密碼子與反密碼子配對不遵從堿基配
44、對規(guī)律,此不嚴(yán)格的配對關(guān)系稱為擺動性。如丙氨酰- trna 反密碼子的第1位堿基i可以與密碼子第 3位的a、c或u配對。遺傳密碼的擺動性使一 種trna可以識別幾種代表同一種氨基酸的密碼子。(6)遺傳密碼的通用性:從細(xì)菌到人的遺傳密碼都市通用的,但近年發(fā)現(xiàn)哺乳類動物線粒體的蛋白質(zhì)合成體系中有 個別例外。如 ua6代表終止密碼子,而代表色氨酸;cua代表亮氨酸,而代表蘇氨酸。( 7)遺傳密碼的防錯系統(tǒng):由于遺傳密碼的簡并性,有4 個密碼的氨基酸,其第三位的堿基被替換,仍編碼同一種氨基酸,從遺傳密碼表可以看出,只要遺傳 密碼的第二位是 u,則第一位和第三位不論怎么變化,其編碼的氨基酸總是疏水性 的
45、,如第二位是c,則其編碼的氨基酸是非極性的或極性不帶電荷的,若第二位為a或g,則編碼的氨基酸 r基是親水性的,第一位是a或c,第二位是a或g,則編碼 的氨基酸r基是堿性的,若前兩位是ag則編碼的氨基酸 r基是酸性的。這些規(guī)律使 某些核苷酸的替換可以不引起肽鏈中氨基酸的變化,或被替換的氨基酸理化性質(zhì)相似。這便是密碼的防錯系統(tǒng)。11 .如果mrnat的閱讀框已被確定,它將只編碼一種多肽的氨基酸順序。從一 蛋白質(zhì)的已知氨基酸順序,是否能確定唯一的一種mrna勺核甘酸序列?為什么?由于1個密碼子只能編碼一種氨基酸, 在mrna勺開放閱讀框確定后,用遺傳密碼可以推出其相應(yīng)蛋白質(zhì)的氨基酸序列。由于mrna
46、1由dna轉(zhuǎn)錄而來的,如果基因(dna編碼區(qū)的序列已知,也可由此推出相應(yīng)表達(dá)產(chǎn)物的氨基酸序列。但是,由于 除甲硫氨酸和色氨酸外的 18 種氨基酸均有一種以上的密碼子, 由蛋白質(zhì)的氨基酸序 列推斷相應(yīng)mrna勺核甘酸序列時,我們會面臨多種選擇。比如,由7個氨基酸的序列推測其可能的 mrn編碼區(qū)序列,若其中有5個氨基酸有2個密碼,則能夠與其相 對應(yīng)的核苷酸序列會有25種,即有32 種。12 .如果e.coli染色體dna勺75%可用來編碼蛋白質(zhì),假定蛋白質(zhì)的平均相對 分子質(zhì)量為60000,以三個堿基編碼一個氨基酸計(jì)算,(1)若該染色體 dna約能編碼2000種蛋白質(zhì),求該染色體 dna的長度? (
47、 2)該染色體dna的相對分子質(zhì)量 大約是多少?(氨基酸殘基的平均相對分子質(zhì)量是120,核苷酸對的平均相對分子質(zhì)量是640 ) 。( 1)因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的平均相對分子質(zhì)量為 60000,氨基酸殘基的平均相對分子質(zhì)量為120,則蛋白質(zhì)的平均氨基酸殘基的個數(shù)為60000/120=500 個,編碼 2000 種蛋白至少需要2000 x 500x 3個密碼子,而 dnag基的75%ffl來編碼這2000個蛋白, 則該染色體 dna勺長度為:2000 x 500 x 3/75%=4000000bp。若該 dna為b-dna 每 個bp使螺旋軸延伸 0.34nm,則其長度應(yīng)為: 0.34 x 4000000=
48、1360000nm; (2)該染 色體 dna勺相對分子質(zhì)量大約是640x 4000000= 2560000000=2.56 x 109 da。13 . 原核生物與真核生物翻譯起始階段有何異同?相同之處: ( 1)都需生成翻譯起始復(fù)合物; ( 2)都需多種起始因子參加; ( 3) 翻譯起始的第一步都需核糖體的大、小亞基先分開;(4)都需要mrnafl氨酰-trna結(jié)合到核糖體的小亞基上;(5) mrn庭小亞基上就位都需一定的結(jié)構(gòu)成分協(xié)助。(6)小亞基結(jié)合 mrn府口起始者trna后,才能與大亞基結(jié)合。(7)都需要消耗能量。不同之處: (1)真核生物核糖體是80s(40s+60s); eif 種
49、類多( 10 多種) ;起始氨酰-trna是met- trna (不需甲?;?,mrn股有sd序列;mrn肝小亞基上就 位需5'端帽子結(jié)構(gòu)和帽結(jié)合蛋白以及 eif2; mrnat于met-trna結(jié)合到小亞基上。(2)原核生物核糖體是 70s (30s+50s); if種類少(3種);起始氨酰-trna是fmet- trna (需甲酰化);需sd序列與16s-trna配對結(jié)合,rps-1辯認(rèn)識別序列;小亞基 與起始氨酰-trna結(jié)合后,才與 mrna吉合。14 . 簡述信號肽假說的基本內(nèi)容。蛋白質(zhì)合成后的靶向輸送原理,有幾種不同的學(xué)說,信號肽假說是目前被普遍接受的學(xué)說之一。分泌性蛋白質(zhì)
50、的初級產(chǎn)物n-端多有信號肽結(jié)構(gòu),信號肽一旦合成(蛋白質(zhì)合成未終止),即被胞漿的信號肽識別蛋白(srb結(jié)合,srp與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜 的內(nèi)側(cè)面的受體即對接蛋白(dp)結(jié)合,組成一個輸送系統(tǒng),促使膜通道開放,信 號肽帶動合成中的蛋白質(zhì)沿通道穿過膜,信號肽在沿通道折回時被膜上的信號肽酶 切除,蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體經(jīng)進(jìn)一步修飾(如糖基化)后,即可被分選到細(xì) 胞的不同部位。15 .肽鏈合成后的加工修飾有哪些途徑?蛋白質(zhì)合成后的加工修飾內(nèi)容有:(1)肽鏈的剪切:如切除 n端的met,切除信號肽,切除蛋白質(zhì)前體中的特定肽段。(2)氨基酸側(cè)鏈的修飾,如:磷酸化、糖基化、甲基化等。(3)二硫鍵的形成。(4)與輔基的
51、結(jié)合。16 .簡述操縱子的基本結(jié)構(gòu)。操縱子的調(diào)控區(qū)有一個操縱序列,一個啟動序列及一個 cap位點(diǎn),調(diào)控區(qū)下游有幾個結(jié)構(gòu)基因,還有一個調(diào)節(jié)基因編碼阻遏蛋白,阻遏蛋白與操縱序列結(jié)合,使 操縱子受阻遏而處于關(guān)閉狀態(tài)。若camp與cap結(jié)合,形成的復(fù)合物與 cap位點(diǎn)結(jié)合,可增大操縱子的轉(zhuǎn)錄活性。阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)和 cap的正性調(diào)節(jié)共同調(diào)節(jié) 結(jié)構(gòu)基因的表達(dá),操縱子機(jī)制在原核基因表達(dá)調(diào)控中具有較善遍的意義,因其多是 幾個功能相關(guān)基因串聯(lián)于同一操縱子上,故在同一啟動序列控制下,可轉(zhuǎn)錄出能為 多種蛋白質(zhì)編碼的 mrna ,即多順反子 mrna。17 .舉例說明基因表達(dá)的誘導(dǎo)與阻遏,正調(diào)控與負(fù)調(diào)控。在特定的
52、環(huán)境信號刺激下,相應(yīng)的基因被激活,基因表達(dá)產(chǎn)物增加,則這種基 因是可誘導(dǎo)的。可誘導(dǎo)基因在特定的環(huán)境中表達(dá)增強(qiáng)的過程稱為誘導(dǎo)。例如有dna損傷時,修復(fù)酶基因就會在細(xì)菌內(nèi)被誘導(dǎo)激活,使修復(fù)酶的活性增加。相反,如果 基因?qū)Νh(huán)境信號應(yīng)答時被抑制則這種基因是可阻遏的,可阻遏基因表達(dá)產(chǎn)物水平降 低的過程稱為阻遏,例如,當(dāng)培養(yǎng)液中色氨酸供應(yīng)充分時,在細(xì)菌內(nèi)編碼色氨酸合 成相關(guān)酶的基因表達(dá)會被抑制。如果某種基因在沒有調(diào)節(jié)蛋白存在時是表達(dá)的,加 入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因表達(dá)活性便被關(guān)閉,這樣的控制為負(fù)調(diào)控。例如,乳糖操縱 子。相反,若某種基因在沒有調(diào)節(jié)蛋白存在時是關(guān)閉的,加入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因 活性就被開啟,這種控
53、制稱為正調(diào)控。例如代謝物阻遏。18 .概述原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)。原核基因表達(dá)調(diào)控與真核存在很多共同之處,但因原核生物沒有細(xì)胞核和亞細(xì) 胞結(jié)構(gòu),其基因組結(jié)構(gòu)要比真核生物簡單,基因表達(dá)的調(diào)控因此而比較簡單。雖然 原核基因的表達(dá)也受轉(zhuǎn)錄起始、轉(zhuǎn)錄終止、翻譯調(diào)控及rna、蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性等多級調(diào)控,但其表達(dá)開、關(guān)的關(guān)鍵機(jī)制主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄起始。其特點(diǎn)包括以下3方面:(1) b因子決定rna聚合酶的識別特異性:原核生物只有一種rna聚合酶,核心酶催化轉(zhuǎn)錄的延長,仃亞基識別特異啟動序列,即不同的仃因子協(xié)助啟動不同基因的轉(zhuǎn)錄。(2)操縱子模型的普遍性:除個別基因外,原核生物絕大數(shù)基因按功能 相關(guān)性成簇地連
54、續(xù)排列在染色體上,共同組成一個轉(zhuǎn)錄單位即操縱子,如乳糖操縱 子等。一個操縱子含一個啟動序列及數(shù)個編碼基因。在同一個啟動序列控制下,轉(zhuǎn) 錄出多順反子 mrna。(3)阻遏蛋白與阻遏機(jī)制的普遍性:在很多原核操縱子系統(tǒng), 特異的阻遏蛋白是控制啟動序列活性的重要因素。當(dāng)阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合或解 離時,結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄被阻遏或去阻遏。19 .概述真核生物基因組的特點(diǎn)。(1)基因組結(jié)構(gòu)龐大:哺乳動物基因組dna由約3 m109 bp的核甘酸組成。大約有3萬個左右的基因,90%以上的dna不為蛋白質(zhì)編碼。真核細(xì)胞 dna與組蛋 白結(jié)合形成復(fù)雜的染色質(zhì)結(jié)構(gòu),基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制更加復(fù)雜。(2)單順反子:真核基因轉(zhuǎn)
55、錄產(chǎn)物為單順反子,即一個編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個mrna分子,經(jīng)翻譯生成一條多肽鏈。許多蛋白質(zhì)由幾條不同的多肽鏈組成,因此存在多個基因的協(xié)調(diào)表達(dá)。(3)重復(fù)序列:重復(fù)序列在真核 dna中普遍存在,重復(fù)序列長短不一,短的在 10 個核甘酸以下,長的達(dá)數(shù)百,乃至上千個核甘酸。據(jù)重復(fù)頻率不同分為高度重復(fù)序 列、中度重復(fù)序列及單拷貝序列。(4)基因的不連續(xù)性:結(jié)構(gòu)基因的兩側(cè)有不被轉(zhuǎn)錄的非編碼序列,往往是基因表達(dá)的調(diào)控區(qū)。在編碼基因內(nèi)部有一些不為蛋白質(zhì)編 碼的間隔序列,稱內(nèi)含子,而編碼序列稱外顯子,因此真核基因是不連續(xù)的。20 .概述真核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)。同原核生物一樣,真核基因表達(dá)調(diào)控的最基本環(huán)節(jié)也
56、是轉(zhuǎn)錄起始,而且某些機(jī) 制是相同的,但也存在明顯差別:(1) rna聚合酶:真核有 3種rna聚合酶,分別負(fù)責(zé)3種rna轉(zhuǎn)錄。(2)活性染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變化:當(dāng)基因被激活時, 可觀察到染色體相應(yīng)區(qū)域發(fā)生結(jié)構(gòu)和性質(zhì)變化。包括對核酸酶敏感,dna拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)變化,dna堿基修飾變化和組蛋白變化。(3)正調(diào)節(jié)占主導(dǎo)地位: 真核rna聚合酶對啟動子的親和力極小或根本沒有實(shí)質(zhì)性的親和力,二者的結(jié)合必須依賴一種或多種激活蛋白。盡管發(fā)現(xiàn)少量基因存在負(fù)性順式作用元件,但普遍存在的是正性調(diào)節(jié)機(jī)制。(4)轉(zhuǎn)錄與翻譯分隔進(jìn)行:真核細(xì)胞有胞核及胞質(zhì)等區(qū)間分布,轉(zhuǎn)錄與翻譯在不同亞細(xì)胞 結(jié)構(gòu)中進(jìn)行。(5)轉(zhuǎn)錄后加工:真核基因的內(nèi)含子和外顯子均被轉(zhuǎn)錄,內(nèi)含子在轉(zhuǎn) 錄后要被剪接去
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 安全教育試題及答案B
- 樂山市中考測試題及答案
- 多維大數(shù)據(jù)分析與可視化研究-洞察闡釋
- 工貿(mào)企業(yè)綜合應(yīng)急處置預(yù)案
- 2025合同范本借款合同模板
- 廠房租賃保證金合同規(guī)范
- 高端餐廳裝修設(shè)計(jì)施工及后期維護(hù)合同
- 車輛贈與及新能源汽車推廣應(yīng)用合同
- 餐飲企業(yè)股權(quán)激勵計(jì)劃股東協(xié)議合同
- 卡通里的新年愿望
- 河南省南陽市鄧州市2023-2024學(xué)年七年級下學(xué)期期末生物試題(解析版)
- 電影敘事與美學(xué)智慧樹知到期末考試答案章節(jié)答案2024年南開大學(xué)
- 《陸上風(fēng)力發(fā)電建設(shè)工程質(zhì)量監(jiān)督檢查大綱》
- emc能源管理合同
- 【專業(yè)版】短視頻直播電商部門崗位職責(zé)及績效考核指標(biāo)管理實(shí)施辦法
- 湖北省襄陽樊城區(qū)七校聯(lián)考2025屆化學(xué)九上期中統(tǒng)考模擬試題含解析
- 幼兒園語言故事《一頂大草帽》課件
- +期末測試卷(試題)-2023-2024學(xué)年四年級下冊數(shù)學(xué)人教版
- 2024春期國開電大本科《經(jīng)濟(jì)學(xué)(本)》在線形考(形考任務(wù)1至6)試題及答案
- 四年級下冊數(shù)學(xué)教案-8.1確定位置丨蘇教版
- 【特殊場景條款】物流運(yùn)輸車輛租賃合同(標(biāo)準(zhǔn)版)
評論
0/150
提交評論