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1、單細(xì)胞 RNA-seq 分析Jie Li 下機(jī)數(shù)據(jù)的處理(10X為例) 單細(xì)胞分析(實(shí)操)Cellranger 簡(jiǎn)介 cell ranger是10X genomics公司提供的,專(zhuān)門(mén)用于分析10X 單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的pipeline,包含了原始數(shù)據(jù)拆分,構(gòu)建索引,表達(dá)定量,合并數(shù)據(jù),聚類(lèi)分析等多個(gè)功能。 直接從官網(wǎng)下載最新版的軟件即可,網(wǎng)址如下:https:/ 安裝Step1. 下載安裝包wget -O cellranger-4.0.0.tar.gz https:/ 安裝Step2. 解壓文件tar -xzvf cellranger-4.0.0.tar.gzCellranger 構(gòu)建索引 1.

2、官網(wǎng)下載(人,小鼠的索引)下載網(wǎng)址:https:/ 構(gòu)建索引 2.自行構(gòu)建需要準(zhǔn)備的文件:基因組序列,注釋文件(gtf)運(yùn)行命令:cellranger mkref -genome=AT -nthreads=10 -fasta=Arabidopsis.fa -genes=Arabidopsis.gtf-genome :創(chuàng)建索引的名稱(chēng)-nthreads:使用的線(xiàn)程數(shù)(默認(rèn)1)-fasta:參考的基因組序列的路徑-genes:基因注釋文件的路徑Cellranger 定量運(yùn)行命令:cellranger count -id=sample -transcriptome=/xx/ AT -fastqs=/xxx/fastq_path -localcores=8 -localmem=64參數(shù)解釋?zhuān)篿d:樣本名(唯一性)transcriptome:上一步創(chuàng)建的索引的目錄名fastqs:下機(jī)數(shù)據(jù)的目錄localcores:內(nèi)核localmem:內(nèi)存其它參數(shù)可以參考:

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