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1、第六章1生長(zhǎng):生物原生質(zhì)體總量(重量、體積、大?。┯幸?guī)律、不可逆增加的生物過(guò)程(同化作用速度超過(guò)異化作用)2繁殖:微生物生長(zhǎng)到一定階段,由于細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)的重建產(chǎn)生新的生命個(gè)體,引起生物個(gè)體數(shù)目增加的生物學(xué)過(guò)程。3群體生長(zhǎng)=個(gè)體生長(zhǎng)+個(gè)體繁殖4生長(zhǎng)測(cè)量方法(1)直接法:稱干重法:精確測(cè)體積法:粗放,測(cè)沉降量 (2)間接法:比濁法:450650nm的OD值生理指標(biāo)法:測(cè)含N量法等5繁殖數(shù)測(cè)量方法(1)直接法:計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù):總菌數(shù) / (活菌染色) (2)間接法:平板菌落計(jì)數(shù)板:菌落形成單位(CFU)×稀釋度6同步培養(yǎng):即設(shè)法使某一群體中的所有個(gè)體細(xì)胞盡可能都處于同樣細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂周期
2、中,然后通過(guò)分析此群體在各階段的生物化學(xué)特性變化,來(lái)間接了解單個(gè)細(xì)胞的相應(yīng)變化規(guī)律。7同步生長(zhǎng):通過(guò)同步培養(yǎng)的手段而使細(xì)胞群體中各個(gè)體處于分裂步調(diào)一致的生長(zhǎng)狀態(tài)。8生長(zhǎng)曲線:在封閉的培養(yǎng)系統(tǒng)里,以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo),定量描述液體培養(yǎng)基中微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線。9生長(zhǎng)曲線分為:1)延滯期特點(diǎn):v 生長(zhǎng)速率常數(shù)R0 ;v 細(xì)胞體積增大或拉長(zhǎng);v 細(xì)胞內(nèi)RNA,尤其是rRNA的含量很高,原生質(zhì)呈堿性; v 合成代謝十分活躍v 抗性降低,對(duì)不良環(huán)境因素敏感。2)對(duì)數(shù)期特點(diǎn)v 生長(zhǎng)速度最快,代時(shí)(G)最短; v 細(xì)胞穩(wěn)定, 平衡生長(zhǎng),菌體成分均勻; v 酶活性高,代謝穩(wěn)定
3、。3)穩(wěn)定期特點(diǎn):v 生長(zhǎng)速率常數(shù)R=0,達(dá)到正生長(zhǎng)與負(fù)生長(zhǎng)相等的動(dòng)態(tài)平衡;v 菌體產(chǎn)量達(dá)到最高點(diǎn);v 菌體產(chǎn)量與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗間呈現(xiàn)出有規(guī)律的比例關(guān)系。v 胞內(nèi)儲(chǔ)藏物開(kāi)始形成(肝糖粒、脂肪粒等); v 芽孢桿菌一般在這時(shí)開(kāi)始形成芽孢;v 積累次級(jí)代謝產(chǎn)物(又稱穩(wěn)定期產(chǎn)物),如抗生素、維生素等。 4)衰亡期特點(diǎn):v 生長(zhǎng)速率負(fù)增長(zhǎng);v 細(xì)胞形態(tài)多樣,出現(xiàn)畸形,形成衰退型;v 蛋白水解酶活躍,出現(xiàn)細(xì)胞自溶現(xiàn)象; v 芽孢細(xì)菌芽孢大量釋放。 10連續(xù)培養(yǎng):在培養(yǎng)微生物時(shí),不斷流進(jìn)新鮮培養(yǎng)基,并以溢流方式不斷流出培養(yǎng)物,使生長(zhǎng)達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,其中的微生物可長(zhǎng)期維持在指數(shù)生長(zhǎng)期,這種培養(yǎng)方式也稱為開(kāi)放培
4、養(yǎng)。11單批培養(yǎng):指將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中經(jīng)過(guò)培養(yǎng)生長(zhǎng),最后一次收獲的培養(yǎng)方式,也稱分批培養(yǎng)、密閉培養(yǎng)。12連續(xù)培養(yǎng)按控制方式分:恒化器法:控制恒定的流速,使由于細(xì)菌生長(zhǎng)而耗去的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及時(shí)得到補(bǔ)充,培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物濃度基本恒定,并使微生物始終在低于其最高生長(zhǎng)速率的條件下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的連續(xù)培養(yǎng)。(流速不變)恒濁器法:通過(guò)光電控制系統(tǒng)調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的流速,控制細(xì)菌培養(yǎng)液菌體密度的恒定,以取得菌體密度高、濃度恒定的連續(xù)培養(yǎng)方法。(密度不變)13稀釋率(D)=f(流速)/V(容積)14影響微生物生長(zhǎng)的主要因素:(1) 溫度:1)最低生長(zhǎng)溫度 2)最適生長(zhǎng)溫度:嗜冷菌、中溫菌、嗜熱菌 3)最高生長(zhǎng)溫
5、度(2)氧氣:1)好氧菌:專性好氧菌、兼性好氧菌、微好氧菌 2)厭氧菌:耐氧菌、嚴(yán)格厭氧菌(3)pH:配置培養(yǎng)基時(shí)調(diào)整pH的措施:緩沖能力15所有細(xì)菌生長(zhǎng)都需要氧嗎?為什么?厭氧菌缺乏SOD(超氧化物歧化酶)、過(guò)氧化氫酶,不能解除氧代謝產(chǎn)物(過(guò)氧化氫、超氧陰離子自由基O2-)的毒性而死亡(并非被氧氣殺死)。16控制有害微生物的方法:1)物理:pH、干燥、溫度、輻射 2)化學(xué):表面消毒機(jī)、防腐劑、抗生素17厭氧三大技術(shù):亨蓋特滾管技術(shù)、厭氧罐、厭氧手套箱18滅菌:采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施。19消毒:采用溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分有
6、害的病原菌。20防腐:通過(guò)制菌作用防治食品、生物制品等對(duì)象發(fā)生霉腐的措施。21化療:對(duì)病原菌具高度毒力而對(duì)其宿主基本無(wú)毒的化學(xué)物質(zhì)來(lái)抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長(zhǎng)繁殖。22高溫滅菌:(1)干熱滅菌法:火焰灼燒法 烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法(150-170,2h) (2)濕熱滅菌法:1)常壓下:巴氏消毒法(163,30min) 煮沸消毒法(100,15min以上) 間歇滅菌法(80-100,15-30min) 2)加壓下:常規(guī)加壓滅菌法(121,15-30min) 連續(xù)加壓滅菌法(135-140,5-15s)23在評(píng)價(jià)表面消毒劑、化學(xué)殺菌劑、防霉劑、農(nóng)藥或化學(xué)治療等的藥效或毒性時(shí),采用最低抑制濃度、半致死
7、劑量、最低致死劑量。24石炭酸系數(shù):指在一定時(shí)間內(nèi)被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度和達(dá)到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。供試菌傷寒沙門氏菌。 25磺胺藥抑制原理:是葉酸類似物。26抗生素:是一類由微生物或其他生物生命活動(dòng)過(guò)程中合成的次生代謝產(chǎn)物或其人工衍生物。27抗生素作用機(jī)制:P18028微生物產(chǎn)生抗藥性的原因(判斷):產(chǎn)生一種能使藥物失去活性的酶、把藥物作用的靶位加以修飾和改變、形成救護(hù)途徑、使藥物不能透過(guò)細(xì)胞膜、通過(guò)主動(dòng)外排系統(tǒng)把進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外。第七章1遺傳:親代與子代相似。2變異:親代與子代、子代間不同個(gè)體不完全相同。3飾變:指外表的修飾性改變。4三個(gè)經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn):1)
8、肺炎球菌的轉(zhuǎn)化試驗(yàn):F. Griffith實(shí)驗(yàn)結(jié)論:S型菌體內(nèi)一定存在一種能使R型轉(zhuǎn)化為S型菌的物質(zhì)(轉(zhuǎn)化因子)。O. T. Avery(活的R型菌)結(jié)論:完整的DNA是遺傳物質(zhì)。2)噬菌體感染試驗(yàn)結(jié)論:DNA是遺傳物質(zhì)。3)植物病毒的重建試驗(yàn)結(jié)論:RNA也是遺傳物質(zhì)。DNA是主要遺傳物質(zhì),核酸是一切生物的遺傳物質(zhì)。5遺傳物質(zhì)在7個(gè)水平上的形式:1、細(xì)胞水平2、細(xì)胞核水平3、染色體水平4、核酸水平5、基因水平6、密碼子水平7、核苷酸水平6典型質(zhì)粒簡(jiǎn)介:1)F質(zhì)粒2)R質(zhì)粒3)Col質(zhì)粒4)Ti質(zhì)粒5)Ri質(zhì)粒6)mega質(zhì)粒7)降解性質(zhì)粒8)生理功能性質(zhì)粒7基因突變:遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)或數(shù)量突
9、然發(fā)生的可遺傳的變化。8突變類型(判斷、選擇):突變株的表型:1)選擇性突變株:營(yíng)養(yǎng)缺陷型、抗性突變型、條件致死突變型 2)非選擇性突變株:形態(tài)突變型、抗原突變型、產(chǎn)量突變型 9突變率:某一細(xì)胞(或病毒體)在每一世代中發(fā)生某一性狀突變的幾率。10基因突變的特點(diǎn)(簡(jiǎn)答):1)自發(fā)性2)不對(duì)應(yīng)性3)稀有性4)獨(dú)立性5)可誘變性6)穩(wěn)定性7)可逆性11基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的實(shí)驗(yàn)證明:1)變量試驗(yàn)(菌株:大腸桿菌,噬菌體:T1)2)涂布試驗(yàn)3)影印平板實(shí)驗(yàn)12基因突變:1)誘變:點(diǎn)突變:堿基置換、移碼突變 畸變:缺失、添加、易位、倒位 2)自發(fā)突變13紫外線對(duì)DNA的損傷及其修復(fù)(簡(jiǎn)答):嘧啶光化
10、學(xué)反應(yīng)產(chǎn)物主要是嘧啶二聚體和水合物1光復(fù)活作用:把經(jīng)UV照射后的微生物立即暴露于可見(jiàn)光下時(shí),就可出現(xiàn)明顯降低其死亡率的現(xiàn)象。2切除修復(fù):又稱暗修復(fù),不依賴可見(jiàn)光,只通過(guò)酶切作用去除嘧啶二聚體,隨后重新合成一段正常DNA鏈的核酸修復(fù)方式。14如何利用誘變育種的基本環(huán)節(jié)?(考)P20915誘變育種中的幾個(gè)原則(論述) 1)選擇簡(jiǎn)便有效的誘變劑2)挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株 3)選用最適的誘變劑量5)充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)6)利用和創(chuàng)造形態(tài)、生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)7)設(shè)計(jì)高效篩選方案16類突變株的篩選方法1)產(chǎn)量突變株:瓊脂塊培養(yǎng)法 2)抗藥性突變株:梯度平板 3)營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的篩選:基本培養(yǎng)基、完
11、全培養(yǎng)基、補(bǔ)充培養(yǎng)基、野生型、營(yíng)養(yǎng)缺陷型(不能再基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng))、原養(yǎng)型17 原核生物的基因重組:轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、原生質(zhì)體融合真核生物的基因重組:有性雜交、準(zhǔn)性雜交18 轉(zhuǎn)化:受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。19轉(zhuǎn)導(dǎo):由缺陷噬菌體介導(dǎo)的細(xì)菌細(xì)胞間進(jìn)行遺傳交換的一種方式。轉(zhuǎn)導(dǎo):1)普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)(以溫和噬菌體為媒介,錯(cuò)誤包裝引起):完全普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)、流產(chǎn)普遍轉(zhuǎn)導(dǎo) 2)局限轉(zhuǎn)導(dǎo)(以部分缺陷的溫和噬菌體為媒介,錯(cuò)誤剪切引起):低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)、高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)20接合:通過(guò)細(xì)胞與細(xì)胞的直接接觸而產(chǎn)生的遺傳信息的轉(zhuǎn)移和重組過(guò)程。大腸桿菌的4種接合型菌株:a)F-菌株:無(wú)F質(zhì)粒,無(wú)菌毛b)F+菌
12、株, F質(zhì)粒游離,細(xì)胞表面有性菌毛。c)Hfr菌株,F(xiàn)質(zhì)粒整合,細(xì)胞表面有性菌毛。d)F菌株21原生質(zhì)體融合:通過(guò)人為的方法,使遺傳性狀不同的兩細(xì)胞的原生質(zhì)體進(jìn)行融合,借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定的重組子的過(guò)程,稱為原生質(zhì)體融合。22基因工程:利用人為因素,改造遺傳物質(zhì),從而使物種發(fā)生變異,創(chuàng)建出具有某種穩(wěn)定新性狀的生物新品系。23基因工程的基本操作:獲得目的基因選擇基因載體體外重組外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞篩選和鑒定應(yīng)用24菌種的衰退:菌種在培養(yǎng)或保藏過(guò)程中,由于自發(fā)突變,而使原有性狀發(fā)生改變的現(xiàn)象。造成菌種退化的主要原因是基因突變25菌種的復(fù)壯:使衰退的菌種恢復(fù)原來(lái)優(yōu)良性狀。26菌種保藏:人為
13、地創(chuàng)造合適的環(huán)境條件,使微生物的代謝處于不活潑、生長(zhǎng)繁殖受抑制的休眠狀態(tài)。7種常見(jiàn)菌種保藏方法比較:P235第八章1微生物含量之比大體有十倍遞減規(guī)律:細(xì)菌108>放線菌107>霉菌106>酵母菌105>藻類104>原生動(dòng)物1032微生物與生物環(huán)境間的關(guān)系:互生:兩種可單獨(dú)生活的生物,當(dāng)它們?cè)谝黄饡r(shí),通過(guò)各自的代謝活動(dòng)而有利于對(duì)方,或偏利于一方的生活方式,稱為互生;“可分可合,合比分好”共生:是指兩種生物共居在一起,相互分工合作,相依為命,甚至達(dá)到難分難解、合二為一的極其緊密的一種相互關(guān)系,稱為共生?!肮簿右黄穑止f(xié)作、難分難解、合二為一”寄生:一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)或體表,從中取得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖,同時(shí)使后者蒙受損害甚至被殺死的現(xiàn)象。拮抗:由于一種微生物類群生長(zhǎng)時(shí)所產(chǎn)生的某些代謝產(chǎn)物,抑制甚至毒害了另外微生物類群的生存,其本身卻不受影響或危害 捕食:指一種大型的生物直接捕捉、吞食另一種小型生物以滿足其營(yíng)養(yǎng)需要的相互關(guān)系。 微生物的共生:地衣,真菌和綠藻或真菌和藍(lán)藻3微生物的地球化學(xué)作用:氮素循環(huán)、硫素循環(huán)、碳素循環(huán)、磷素循環(huán)4污水處理中應(yīng)熟悉的幾個(gè)常用名詞(選擇、判斷):BOD生物需氧量,COD化學(xué)需氧量,TOD 總需氧量,評(píng)價(jià)某水質(zhì)的綜合指標(biāo)之一第十章七
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