如何制作檢驗科質(zhì)控圖

1、 主講人：主要內(nèi)容：如何制作檢驗科質(zhì)控圖 質(zhì)控血清 1 1內(nèi)部對照質(zhì)控血清內(nèi)部對照質(zhì)控血清 2 2外部對照質(zhì)控血清外部對照質(zhì)控血清 外部對照質(zhì)控血清是各級實驗室為了監(jiān)控每次檢測的重復性和穩(wěn)定性以及檢驗試劑盒批間差異而設置的一套陰性和陽性對照血清。設立外部對照還可以提示標本處于臨界值狀態(tài)時的檢驗操作情況。 如何制作檢驗科質(zhì)控圖 一、外部對照質(zhì)控血清的組成 理想的外部對照應該包括陽性對照、弱陽性對照、臨界值對照和陰性對照。 在每次實驗時應設置一個單一濃度水平的質(zhì)控品即弱陽性對照。這個弱陽性對照的值以設定在該試劑盒Cut-off值的23倍為宜。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 二、外部對照質(zhì)控血清的來源和選擇1

2、 1）通過向有關機構購買獲得）通過向有關機構購買獲得2 2）通過實驗室制備獲得）通過實驗室制備獲得 ( ( 比較經(jīng)濟的方法比較經(jīng)濟的方法 ) ) 混合試劑盒內(nèi)部對照血清，等量分裝。 混合HIV抗體陽性或陰性人血清，3000轉/分鐘離心15分鐘，用0.2m 生物濾膜過濾除菌后再進行56 30分鐘加熱滅活處理。弱陽性對照可以通過使用HIV抗體陰性的正常人血清梯度稀釋HIV抗體強陽性血清并經(jīng)標定后得到。弱陽性對照的OD值以23倍于Cut-off為宜。如何制作檢驗科質(zhì)控圖三、外部對照質(zhì)控血清的保存1）外部對照血清或血漿的一次制備量應該足夠本實驗室一年使用2）外部對照血清應該均一、無菌3）外部對照血清標

3、定后應該等量分裝，每個分裝的量應足夠一周使用4）外部對照應該分類作好標記，使用不同顏色的標簽5）外部對照血清應該存放在70 ，如無條件則存放在非自動除霜的20 冰箱6）外部對照血清一旦融解以后應該存放在 28 ，一周后必須棄去，不能重新凍存。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 四、外部對照質(zhì)控血清的使用 原則上每一次實驗必須使用外部對照質(zhì)控血清，建立質(zhì)控圖，以便監(jiān)控實驗操作的一致性和結果的準確性。同時可以了解各批試劑盒之間的誤差(批間差異)。如何制作檢驗科質(zhì)控圖質(zhì)控圖(1)X-2SXX+SX-SX+2S如何制作檢驗科質(zhì)控圖 建立質(zhì)控圖參數(shù) 對對HIVHIV抗體檢測抗體檢測(ELISA)(ELISA)外部對照

4、質(zhì)控血清的評價采外部對照質(zhì)控血清的評價采用多次測定的用多次測定的ODOD值的均值上下各兩個標準差的范圍，即值的均值上下各兩個標準差的范圍，即外部對照外部對照ODOD值的值的9595可信限為可信限為 x x 2 2s s。各個外部對照的。各個外部對照的標定即確定外部對照的均值和可信限，標定即確定外部對照的均值和可信限， 可用下列幾個統(tǒng)計學參數(shù)來確定可信限可用下列幾個統(tǒng)計學參數(shù)來確定可信限: : 算術平均值算術平均值( ( x x ) )代表一組代表一組ODOD值數(shù)的平均值。值數(shù)的平均值。 標準差標準差( (s s) ) 變異系數(shù)變異系數(shù)( (cvcv) )，如何制作檢驗科質(zhì)控圖次數(shù)次數(shù)質(zhì)控血清質(zhì)

5、控血清ODODCut-offCut-off值值ODODS/COS/CO值值1 10.1800.1800.1050.1051.711.712 20.1900.1900.1050.1051.811.813 30.2000.2000.1050.1051.901.904 40.2280.2280.1050.1051.811.815 50.1370.1370.1050.1051.091.096 60.2210.2210.1050.1052.102.107 70.1500.1500.1050.1051.431.438 80.1700.1700.1050.1051.621.629 90.1800.1800.

6、1050.1052.142.1410100.1500.1500.1050.1051.431.4311110.2000.2000.1050.1051.901.9012120.1420.1420.1050.1051.351.3513130.2100.2100.1050.1052.002.0014140.2210.2210.1050.1051.521.5215150.1800.1800.1050.1051.711.7116160.1900.1900.1050.1051.811.8117170.1600.1600.1050.1051.521.5218180.2210.2210.1050.1052.10

7、2.1019190.2100.2100.1050.1052.002.0020200.1500.1500.1050.1051.431.43次數(shù)次數(shù)日期日期質(zhì)控血清質(zhì)控血清ODODCut-offCut-off值值 S/CO S/CO值值21217.47.40.1600.1600.1050.1051.521.5222227.77.70.1900.1900.1050.1051.811.8123237.87.80.2000.2000.1050.1051.901.9024247.117.110.2280.2280.1050.1051.811.8125257.127.120.1390.1390.1050.1

8、051.101.1026267.157.150.2210.2210.1050.1052.102.1027277.167.160.1500.1500.1050.1051.431.4328287.187.180.1700.1700.1050.1051.621.6229297.197.190.2250.2250.1050.1052.142.14 質(zhì)控圖(Levey-Jennings控制圖)0.81.11.41.722.32.62021222324252627282930次數(shù)如何制作檢驗科質(zhì)控圖 質(zhì)控圖的判定和分析質(zhì)控圖的判定和分析 如果檢驗進入質(zhì)控狀態(tài)時，質(zhì)控對照值超出 2s，則本次實驗結果不能被接

9、受( 失控 )。 位移：位移：如果幾個連續(xù)質(zhì)控對照值 (3-5次) 都落在均值(中心線)的一邊則稱之為位移，通常表示存在大的變化 ( 失控 )。 引起位移的原因有使用新批號的試劑盒、使用新試劑、實驗員的更換、孵育溫度的改變、儀器 ( 移液器 ) 故障等。 如何制作檢驗科質(zhì)控圖 質(zhì)控圖的判定和分析質(zhì)控圖的判定和分析 趨勢：趨勢：當幾個連續(xù)質(zhì)控對照值(5-7個)幾乎按一個方向分布時稱之為趨勢(失控)，通常由參數(shù)的緩慢改變引起，如試劑失效和移液器逐漸不準確等。 發(fā)生漂移和趨勢的最常見的原因是試劑(如酶標記物)或?qū)φ盏氖АＨ绾沃谱鳈z驗科質(zhì)控圖 質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點質(zhì)量控制圖建立和分析的注意

10、要點 a a可以先進行最佳條件下的變異測定，即在最佳條件可以先進行最佳條件下的變異測定，即在最佳條件下下( (人、儀器、試劑、實驗室等因素人、儀器、試劑、實驗室等因素) )對同一批質(zhì)控血清對同一批質(zhì)控血清連續(xù)進行測定連續(xù)進行測定2020次以上，獲得一組數(shù)據(jù)，求次以上，獲得一組數(shù)據(jù)，求 x x 和和s s值。值。然后求出常規(guī)條件下的然后求出常規(guī)條件下的 x x 和和 s s。如果常規(guī)條件下的。如果常規(guī)條件下的 x x 和和s s 值與最佳條件下的值與最佳條件下的 x x 和和s s值比較接近，則可以接受。值比較接近，則可以接受。若不作最佳條件下的測定，可以用本室以往處于控制狀若不作最佳條件下的測

11、定，可以用本室以往處于控制狀態(tài)下的數(shù)值替代。態(tài)下的數(shù)值替代。b b采用采用S/COS/CO比值制圖要比單用比值制圖要比單用ODOD或或A A值制圖的方法給出值制圖的方法給出更為精確的評估，因為它將每次更為精確的評估，因為它將每次/ /每天每天ODOD值的浮動考慮值的浮動考慮在內(nèi)。從在內(nèi)。從S/COS/CO質(zhì)控圖中可以直觀地發(fā)現(xiàn)外部對照值的漂質(zhì)控圖中可以直觀地發(fā)現(xiàn)外部對照值的漂移和趨勢。移和趨勢。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點c c 由專人負責建立質(zhì)控圖，每月由專人負責建立質(zhì)控圖，每月( (月末月末) )定定期召開質(zhì)量控制會，討論本月檢測的質(zhì)量

12、控期召開質(zhì)量控制會，討論本月檢測的質(zhì)量控制情況。檢驗人員在每次檢驗之前，了解一制情況。檢驗人員在每次檢驗之前，了解一下質(zhì)控圖的結果，做到心中有數(shù)。下質(zhì)控圖的結果，做到心中有數(shù)。d d 建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒。劑盒。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點e e使用新批號或使用不同廠家的試劑盒都必須在質(zhì)控使用新批號或使用不同廠家的試劑盒都必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。原則上，如果改用新批號試劑盒，圖上注明使用日期。原則上，如果改用新批號試劑盒，應重新制作室內(nèi)質(zhì)控框架圖，并建議對新舊兩批試劑應重新制作室內(nèi)質(zhì)控

13、框架圖，并建議對新舊兩批試劑盒進行平行性試驗。盒進行平行性試驗。f f 發(fā)現(xiàn)全部對照值劇烈位移，立即報告室主管，分發(fā)現(xiàn)全部對照值劇烈位移，立即報告室主管，分析原因，若是試劑盒質(zhì)量問題，立刻通知廠家。析原因，若是試劑盒質(zhì)量問題，立刻通知廠家。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點h h 外部和內(nèi)部陰性對照質(zhì)控血清出現(xiàn)高值傾向，應該外部和內(nèi)部陰性對照質(zhì)控血清出現(xiàn)高值傾向，應該注意試劑、技術或設備出現(xiàn)問題注意試劑、技術或設備出現(xiàn)問題( (如洗板機等如洗板機等) )。i i 實驗室配制新批次的外部對照質(zhì)控血清或變動外部實驗室配制新批次的外部對照質(zhì)控血清或變動

14、外部對照質(zhì)控血清的值時，必須重新計算均值和標準差，建對照質(zhì)控血清的值時，必須重新計算均值和標準差，建立新的質(zhì)控圖。立新的質(zhì)控圖。j j 操作者在測定質(zhì)控血清時，發(fā)現(xiàn)質(zhì)控血清數(shù)據(jù)違背操作者在測定質(zhì)控血清時，發(fā)現(xiàn)質(zhì)控血清數(shù)據(jù)違背了控制規(guī)則，應填寫失控報告單，上交室負責人，由室了控制規(guī)則，應填寫失控報告單，上交室負責人，由室負責人決定是否要發(fā)出檢驗報告。負責人決定是否要發(fā)出檢驗報告。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 “即刻法即刻法”質(zhì)控質(zhì)控采用“即刻法”質(zhì)控統(tǒng)計方法，只需在常規(guī)條件下對外部質(zhì)控血清連續(xù)測定3次，按以下統(tǒng)計方法計算，如連續(xù)測定3次的結果都在控制范圍之內(nèi)，即可對第3次結果進行質(zhì)控，以保證檢驗結果的質(zhì)

15、量。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 “即刻法即刻法”的建立參見鄭懷競主編的建立參見鄭懷競主編免免 疫學檢驗室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控疫學檢驗室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控具體計算方法如下：先將測定值從小到大排列：x1，x2，x3xn(x1為最小值，xn為最大值)計算 X 和 s計算SI上限值和SI下限值如何制作檢驗科質(zhì)控圖SI上限= X 最大值 X S SI下限=X - X最小值 S S 將SI上限、SI下限與SI值表中的數(shù)字比較。如何制作檢驗科質(zhì)控圖當當SI上限上限和和SI下限下限 n3s值時，說明該值已在值時，說明該值已在3s范圍之外，屬范圍之外，屬“失控失控”。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 處于處于“告警告警”和和“失控失控

16、”狀態(tài)的數(shù)值應舍去，需重狀態(tài)的數(shù)值應舍去，需重新測定該外部質(zhì)控血清和病人樣本。新測定該外部質(zhì)控血清和病人樣本。 舍去的只是本次失控的數(shù)值及同時測定的樣本，舍去的只是本次失控的數(shù)值及同時測定的樣本，其他次測定值仍可繼續(xù)使用。其他次測定值仍可繼續(xù)使用。 當檢測的數(shù)值超過當檢測的數(shù)值超過20次后次后,不必再使用不必再使用“即刻即刻法法”質(zhì)控統(tǒng)計計算質(zhì)控統(tǒng)計計算,可以轉入常規(guī)的質(zhì)控圖的質(zhì)控?？梢赞D入常規(guī)的質(zhì)控圖的質(zhì)控。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 21次質(zhì)控血清檢測次質(zhì)控血清檢測S/CO值值 次數(shù) S/CO值值 次數(shù) S/CO值值 1 1.71 12 1.35 2 1.81 13 2.00 3 1.90 14

17、 1.52 4 1.81 15 1.71 5 1.09 16 1.81 6 2.10 17 1.52 7 1.43 18 2.10 8 1.62 19 2.00 9 2.14 20 1.43 10 1.43 21 1.52 11 1.90如何制作檢驗科質(zhì)控圖在第3次測定后按“即刻法”計算：n=3三次S/CO值從小到大排列為： 1.711.811.90 求出X= 1.81, S = 0.10 計算: SI下限 =1.81-1.71=1.0 0.10 SI上限=1.90-1.81=0.9 0.10查SI值表: n=3時, n2s=1.15, n3s=1.15， SI上限和SI下限均小于n2s，表示

18、該三次檢測數(shù)據(jù)在控制范圍內(nèi)。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 在第5次測定后,按上法計算:n=5 1.09 1.71 1.81 1.811.90 X=1.66, S = 0.33 SI下限=1.66-1.09=1.73 0.33 SI上限=1.90-1.66=0.73 0.33查SI值表： n=5時, n2s=1.67, n3s=1.75 n2s(1.67) SI下限(1.73) n3s (1.75), SI下限值在n2s和n3s之間,說明該值在2s3s范圍，處于“告警”狀態(tài)，故本次數(shù)據(jù)及同時測定的樣本結果應棄去后重新測定。如何制作檢驗科質(zhì)控圖 第6次檢測，n仍為5進行計算:n=5 1.71 1.81 1.81 1.90 2.10 X =1.87, S = 0.15 SI下限=1.87-1.71=1.07 0.15 SI上限=2.10-1.87=1.53 0.15 查SI值表: n=5時, n2s=1.67, n3s=1.75. SI上限和SI下限均小于n2s，數(shù)據(jù)在控制范圍內(nèi)，說明本次測定樣本結果可靠?？衫^續(xù)檢測并計算。如何制作檢驗科質(zhì)控圖當測定達到21次時,應舍去一個數(shù)據(jù)(第5個),n=20,排序如下: 1.351.431.431.431.521.521.621.711.711.811.811.811.901.90