瘧原蟲顯微鏡鏡檢技術(shù)PPT課件

1、瘧疾簡(jiǎn)介 瘧疾是一種古老的傳染病, ,俗稱“冷熱病”、“打擺子”、“發(fā)瘧子”、“脾寒”、“瘴氣”等，是由瘧原蟲寄生于人體引起的傳染性寄生蟲病。第1頁(yè)/共75頁(yè)寄生人體的四種瘧原蟲寄生人體的四種瘧原蟲間日瘧原蟲間日瘧原蟲 Plasmodium vivaxPlasmodium vivax，P.vP.v 三日瘧原蟲三日瘧原蟲 P PMalariae,P.mMalariae,P.m 惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲 P PFalciparum,P.fFalciparum,P.f 卵形瘧原蟲卵形瘧原蟲 P POvale,P.oOvale,P.o 我國(guó)主要是間日瘧常見(jiàn)，惡性瘧次之，三日瘧偶爾發(fā)我國(guó)主要是間日瘧常見(jiàn)，惡

2、性瘧次之，三日瘧偶爾發(fā)現(xiàn)，卵形瘧已無(wú)病例報(bào)告?，F(xiàn)，卵形瘧已無(wú)病例報(bào)告。第2頁(yè)/共75頁(yè)鏡檢瘧原蟲方法簡(jiǎn)述 19世紀(jì)后期，顯微鏡的出現(xiàn)使人們不斷發(fā)現(xiàn)了傳染病的病因。1880年法國(guó)軍醫(yī)拉韋朗第一次見(jiàn)到并描述了人紅細(xì)胞內(nèi)的瘧原蟲，至此才解開(kāi)了困擾人們數(shù)千年的瘧疾的病因之謎。第3頁(yè)/共75頁(yè)鏡檢瘧原蟲方法簡(jiǎn)述 目前用于瘧疾診斷的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)包括病原學(xué)檢查、免疫學(xué)檢測(cè)和分子生物學(xué)檢測(cè)三類。鏡檢瘧原蟲由于具有操作簡(jiǎn)便、敏感、價(jià)廉和可鑒別蟲種等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用于瘧疾的病原學(xué)診斷已愈近一個(gè)世紀(jì)，仍是目前最常用的方法，也是我國(guó)瘧疾診斷標(biāo)準(zhǔn)確定的實(shí)驗(yàn)室檢查方法（WS259-2006）。第4頁(yè)/共75頁(yè)鏡檢目的與意義 瘧

3、疾診斷標(biāo)準(zhǔn)中把瘧疾病例分為疑似病例、臨床病例、確診病例和帶蟲者，前兩者依據(jù)流行病學(xué)史和臨床表現(xiàn)即可做出診斷，而后兩者需通過(guò)發(fā)現(xiàn)病原體方能做出診斷。 通過(guò)對(duì)發(fā)熱病人血檢達(dá)到確診瘧疾病例。及時(shí)發(fā)現(xiàn)傳染源和明確感染的瘧原蟲種類，以能針對(duì)蟲種選擇正確的治療方案。第5頁(yè)/共75頁(yè)血片鏡檢 血片制作用于檢查瘧原蟲的血涂片有兩種：一種是將血液涂呈薄膜狀，稱薄血膜。一種是血液涂成圓盤，稱厚血膜。薄血膜上的血細(xì)胞要求平輔在玻片上面。第6頁(yè)/共75頁(yè)血膜的制作（取血時(shí)間）血膜的制作（取血時(shí)間） 取血時(shí)機(jī)取血時(shí)機(jī) 現(xiàn)癥病人一般可隨時(shí)取血，瘧疾普現(xiàn)癥病人一般可隨時(shí)取血，瘧疾普查查 時(shí)可不考慮取血時(shí)機(jī)。時(shí)可不考慮取血時(shí)

4、機(jī)。 在診斷或需要某期瘧原蟲作標(biāo)本時(shí)，則應(yīng)掌在診斷或需要某期瘧原蟲作標(biāo)本時(shí)，則應(yīng)掌握適宜的取血時(shí)機(jī)。間日瘧在寒熱發(fā)作時(shí)，外握適宜的取血時(shí)機(jī)。間日瘧在寒熱發(fā)作時(shí)，外周血液中主要可見(jiàn)環(huán)狀體期；發(fā)作后數(shù)小時(shí)，周血液中主要可見(jiàn)環(huán)狀體期；發(fā)作后數(shù)小時(shí)，環(huán)狀體發(fā)育到滋養(yǎng)體期，瘧色素形成，形態(tài)較環(huán)狀體發(fā)育到滋養(yǎng)體期，瘧色素形成，形態(tài)較易辯認(rèn)，為診斷的有利時(shí)機(jī)；易辯認(rèn)，為診斷的有利時(shí)機(jī)；3648小時(shí)，小時(shí)，可檢出裂殖體；發(fā)作一、二次后，配子體出現(xiàn)可檢出裂殖體；發(fā)作一、二次后，配子體出現(xiàn)較多。惡性瘧較理想的取血時(shí)間是在發(fā)作后至較多。惡性瘧較理想的取血時(shí)間是在發(fā)作后至20小時(shí)內(nèi)取血，初發(fā)患者退熱后常查不到原小時(shí)內(nèi)

5、取血，初發(fā)患者退熱后常查不到原蟲。蟲。第7頁(yè)/共75頁(yè)血膜的制作（取血操作） 取血方法取血方法 采血部位一般人為耳垂，指頭，通常在耳垂取血（現(xiàn)場(chǎng)取血建議用大頭針采血，一人一針，避采血部位一般人為耳垂，指頭，通常在耳垂取血（現(xiàn)場(chǎng)取血建議用大頭針采血，一人一針，避免血傳疾?。Ｏ扔妹庋獋骷膊。Ｏ扔?5%酒精棉球消毒取血部位（冬季用手捻動(dòng)耳垂使其充血后再行消毒），待酒精干后，酒精棉球消毒取血部位（冬季用手捻動(dòng)耳垂使其充血后再行消毒），待酒精干后，用左手拇指和食指緊捏耳垂上方，右手持消毒針迅速刺入耳垂下端用左手拇指和食指緊捏耳垂上方，右手持消毒針迅速刺入耳垂下端12毫米，不宜過(guò)深或過(guò)淺。然后用右毫米

6、，不宜過(guò)深或過(guò)淺。然后用右手中指輕輕向擠壓出血。手中指輕輕向擠壓出血。第8頁(yè)/共75頁(yè)血膜的制作（取血操作）第9頁(yè)/共75頁(yè)取血量及涂片法（涂片操作）取血量及涂片法（涂片操作） 薄血膜薄血膜 取潔凈的載玻片取潔凈的載玻片2張，張，1張平置在桌上，以左手拇指，食張平置在桌上，以左手拇指，食指夾持載玻片兩端（手指切勿接指夾持載玻片兩端（手指切勿接觸玻片表面），用另一張邊緣平觸玻片表面），用另一張邊緣平滑（最好為磨口邊緣）的載玻片滑（最好為磨口邊緣）的載玻片做推片，用推片一端邊緣的中點(diǎn)做推片，用推片一端邊緣的中點(diǎn)從取血部分取約從取血部分取約1微升的血量（相微升的血量（相當(dāng)于當(dāng)于1/4火柴頭大小），使

7、血滴火柴頭大小），使血滴與 平 置 的 載 玻 片 接 觸 ， 并 形 成與 平 置 的 載 玻 片 接 觸 ， 并 形 成2530度夾角，待血液向兩側(cè)擴(kuò)度夾角，待血液向兩側(cè)擴(kuò)展約展約2厘米長(zhǎng)度時(shí)，均勻而迅速地厘米長(zhǎng)度時(shí)，均勻而迅速地輕輕向左推出（約輕輕向左推出（約2.5厘米長(zhǎng)），厘米長(zhǎng)），整個(gè)血膜成舌形。整個(gè)血膜成舌形。第10頁(yè)/共75頁(yè)正確的推片姿勢(shì)第11頁(yè)/共75頁(yè)取血量及涂片法（涂片操作）取血量及涂片法（涂片操作） 厚血膜 用推 片的一角，從取血部位刮取約4微升血量（相當(dāng)于火柴頭?。?，使血滴與平置的載玻片接觸，再由里向外一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)24圈，涂成直徑0.81厘米大小圓形厚血膜，血膜厚

8、薄均勻，過(guò)厚易于脫落，過(guò)薄達(dá)不到檢出率的要求。第12頁(yè)/共75頁(yè) 涂制厚、薄血膜的位置涂制厚、薄血膜的位置 通常是將厚、薄血膜涂通常是將厚、薄血膜涂在一張載片上。方法是將在一張載片上。方法是將載片分為載片分為6等分，第等分，第1、2格備貼標(biāo)簽及編號(hào)用；厚格備貼標(biāo)簽及編號(hào)用；厚血膜涂在第血膜涂在第3格中央，薄格中央，薄血膜涂在第血膜涂在第4格前緣至第格前緣至第6格中部。作為標(biāo)本的血格中部。作為標(biāo)本的血片每張玻片涂厚、薄血膜片每張玻片涂厚、薄血膜各各1個(gè)；門診和發(fā)熱病人個(gè)；門診和發(fā)熱病人血片每片血片每片1人，涂人，涂2個(gè)厚個(gè)厚血膜血膜1個(gè)薄血膜，以防血個(gè)薄血膜，以防血膜脫落而影響檢查。膜脫落而影響

9、檢查。第13頁(yè)/共75頁(yè)標(biāo)準(zhǔn)的瘧疾厚薄血膜片位置第14頁(yè)/共75頁(yè)血片的染色血片的染色 一、吉氏染液母液一、吉氏染液母液配制配制 取吉氏粉取吉氏粉0.5克置于研缽中，加少量甘油充分研磨，邊加邊磨，克置于研缽中，加少量甘油充分研磨，邊加邊磨，至至25毫升加完為止，倒入毫升加完為止，倒入60或或100毫升帶有玻塞的有色玻瓶中。毫升帶有玻塞的有色玻瓶中。在研缽中加少量無(wú)水甲醇，洗去甘油濃液混入瓶?jī)?nèi)，至在研缽中加少量無(wú)水甲醇，洗去甘油濃液混入瓶?jī)?nèi)，至25毫升毫升甲醇洗凈缽中甘油染液為止，塞緊瓶塞，充分搖勻，置于甲醇洗凈缽中甘油染液為止，塞緊瓶塞，充分搖勻，置于5560水浴中水浴中2小時(shí)，或室溫內(nèi)小時(shí)，

10、或室溫內(nèi)35天，每天用力搖動(dòng)天，每天用力搖動(dòng)5分鐘，分鐘，即成原液。吉氏染液是目前較優(yōu)良的血膜染劑，即使在炎熱天即成原液。吉氏染液是目前較優(yōu)良的血膜染劑，即使在炎熱天氣中，亦可經(jīng)久不變。氣中，亦可經(jīng)久不變。第15頁(yè)/共75頁(yè)血片的染色血片的染色二、瑞式染液的配制瑞式染液的配制 將瑞氏染劑粉1g置于研缽內(nèi)，加入15ml甘油充分研磨后，倒入有塞玻璃瓶中，再用500ml甲醇洗出研缽中的甘油溶液，倒入瓶中，搖勻后，置室溫下，每天搖動(dòng)5分鐘，3天后即可使用。 此方法染色的時(shí)間短，但染色效果不如吉氏染液效果穩(wěn)定，又不能大量血片染色，可用于門診應(yīng)急血片用。第16頁(yè)/共75頁(yè)血片的染色血片的染色 吉氏染液血片

11、染色方法吉氏染液血片染色方法 （推薦使用此方法）（推薦使用此方法）先用甲醇或無(wú)水酒精固定薄血膜，待干后進(jìn)行染色。在固定薄血膜后用先用甲醇或無(wú)水酒精固定薄血膜，待干后進(jìn)行染色。在固定薄血膜后用清水對(duì)厚血膜溶脫血紅蛋白可用滴管滴水于厚血膜上，待血膜呈灰白色清水對(duì)厚血膜溶脫血紅蛋白可用滴管滴水于厚血膜上，待血膜呈灰白色時(shí)，將水傾去，晾干后進(jìn)行染色。時(shí)，將水傾去，晾干后進(jìn)行染色。 成批血片染色：將已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入成批血片染色：將已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入2%吉氏染液吉氏染液稀釋液（稀釋液（2毫升原液加中性蒸餾水毫升原液加中性蒸餾水98毫升稀釋均勻即成），同時(shí)對(duì)厚薄毫升稀釋均勻

12、即成），同時(shí)對(duì)厚薄血膜染色血膜染色30分鐘（如染液不合標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，得酌情增減染色時(shí)間），然后分鐘（如染液不合標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，得酌情增減染色時(shí)間），然后用清水輕輕將染液沖去，再用清水輕輕沖洗一次，干凈后將血片標(biāo)本用清水輕輕將染液沖去，再用清水輕輕沖洗一次，干凈后將血片標(biāo)本（血膜面朝下）插于晾干板上，待干鏡檢。（血膜面朝下）插于晾干板上，待干鏡檢。 第17頁(yè)/共75頁(yè)血片的染色血片的染色 單張血片染色：薄血膜經(jīng)固定干燥后，用2%2%吉氏染液稀釋液1212毫升，滴入血片標(biāo)本上染色3030分鐘左右；或用中性蒸餾水1 1毫升，加吉氏母液1212滴，混合均勻后滴入血片標(biāo)本上，染色10201020分鐘，然后用清水輕輕將

13、片上的染液沖洗干凈，（切勿先倒掉染液再用水沖洗）晾干鏡檢。 第18頁(yè)/共75頁(yè)瑞氏染液的染色方法： 先用蠟筆在厚、薄血膜間劃一界限，滴幾滴蒸餾水在厚血膜上溶血。溶血后傾去水滴。在薄血膜上加瑞氏染液5 58 8滴，染色1 12 2分鐘。然后再加5 58 8滴蒸餾水于薄血膜上，用吸管將染液與蒸餾水混合均勻后，把染液引到厚血膜上，使厚血膜再染色1010分鐘。用清水輕輕沖去染液，晾干。第19頁(yè)/共75頁(yè) 血片的鏡檢在學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲之前，必須先對(duì)正常厚薄血在學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲之前，必須先對(duì)正常厚薄血膜中各種血細(xì)胞的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和染色性質(zhì)膜中各種血細(xì)胞的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和染色性質(zhì)加以識(shí)別。加以識(shí)別。學(xué)習(xí)鏡檢瘧

14、原蟲，首先要學(xué)看薄血膜，在基本學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲，首先要學(xué)看薄血膜，在基本上掌握薄血膜中瘧原蟲形態(tài)后，才學(xué)習(xí)鏡檢厚上掌握薄血膜中瘧原蟲形態(tài)后，才學(xué)習(xí)鏡檢厚血膜。血膜。鏡檢瘧原蟲一般只查厚血膜，薄血膜僅作為原鏡檢瘧原蟲一般只查厚血膜，薄血膜僅作為原蟲分類時(shí)參考和血片編號(hào)之用。蟲分類時(shí)參考和血片編號(hào)之用。鏡檢瘧原蟲必須用油鏡頭配合鏡檢瘧原蟲必須用油鏡頭配合5X低倍目鏡鏡低倍目鏡鏡檢，當(dāng)發(fā)現(xiàn)疑難問(wèn)題時(shí)可調(diào)換檢，當(dāng)發(fā)現(xiàn)疑難問(wèn)題時(shí)可調(diào)換10X目鏡進(jìn)行觀目鏡進(jìn)行觀察。察。檢查時(shí)應(yīng)從厚血膜的上緣開(kāi)始，使血膜從上而檢查時(shí)應(yīng)從厚血膜的上緣開(kāi)始，使血膜從上而下，自左至右，由右至左，一行接一行，一個(gè)下，自左至右，由右至

15、左，一行接一行，一個(gè)視野稍疊一個(gè)視野順序地查完整個(gè)血膜。視野稍疊一個(gè)視野順序地查完整個(gè)血膜。 第20頁(yè)/共75頁(yè)瘧原蟲血片檢查結(jié)果確定檢查全部厚血膜未查見(jiàn)瘧原蟲者判為陰性。顯微鏡下查見(jiàn)瘧原蟲，根據(jù)瘧原蟲形態(tài)確定惡性瘧、間日瘧、三日瘧、卵形瘧或混合感染。 第21頁(yè)/共75頁(yè)制作血膜的注意事項(xiàng)1. 玻片清洗時(shí)，避免玻片碰撞、磨損。制作血膜的載玻片必須完全清潔而毫無(wú)油漬或污垢。制片時(shí)，手指只能持載片的邊緣，不能接觸玻片表面，以免油污使薄血膜產(chǎn)生空白區(qū)以及厚血膜脫落。作為推片的玻片邊緣一定要平滑，才能使推出的血膜均勻一致。第22頁(yè)/共75頁(yè)制作血膜的注意事項(xiàng) 2. 剛涂制的血膜要平放在標(biāo)本盒內(nèi)，厚血膜

16、未干前勿使標(biāo)本盒傾斜，以免血膜剛涂制的血膜要平放在標(biāo)本盒內(nèi)，厚血膜未干前勿使標(biāo)本盒傾斜，以免血膜傾向一側(cè)，造成血膜厚薄不均，厚處不溶血和著色而影響檢查結(jié)果；晾干血膜時(shí)傾向一側(cè)，造成血膜厚薄不均，厚處不溶血和著色而影響檢查結(jié)果；晾干血膜時(shí)應(yīng)注意防塵、防止蒼蠅、蟑螂等昆蟲吮吸血膜，干后應(yīng)及時(shí)裝入標(biāo)本盒并蓋嚴(yán)，應(yīng)注意防塵、防止蒼蠅、蟑螂等昆蟲吮吸血膜，干后應(yīng)及時(shí)裝入標(biāo)本盒并蓋嚴(yán)，新的木制標(biāo)本盒需敞開(kāi)放置一段時(shí)間，讓木醇揮發(fā)后才能使用，以免厚血膜紅蛋新的木制標(biāo)本盒需敞開(kāi)放置一段時(shí)間，讓木醇揮發(fā)后才能使用，以免厚血膜紅蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。第23頁(yè)/共

17、75頁(yè)制作血膜的注意事項(xiàng) 324487213第24頁(yè)/共75頁(yè)影響染色效果的因素影響染色效果的因素 血片染色好壞除了與玻片是否清潔，血片制作質(zhì)量好壞等有關(guān)外，還受到以下幾個(gè)因素的影響： （1）染料溶劑的質(zhì)量 染料、甲醇和甘油如果不純，常使配制的染液偏酸或偏堿而影響染色效果。因此必須用分析純的甲醇和中性甘油，而且在配制時(shí)所用的器具必須干凈而無(wú)水份。第25頁(yè)/共75頁(yè)影響染色效果的因素影響染色效果的因素 （2）染液的新舊 新配制的染液因色素尚未充分溶解，染色力較弱且常呈現(xiàn)偏堿性。染液存放時(shí)間越久，染色力越強(qiáng)。通常在染液配制12周后才使用，盛裝染液的瓶子應(yīng)加塞蓋密。以防吸潮而影響染液質(zhì)量。第26頁(yè)/

18、共75頁(yè)影響染色效果的因素影響染色效果的因素 （3）染液稀釋后使用時(shí)間）染液稀釋后使用時(shí)間 吉氏和瑞氏染液的主要成份是美藍(lán)、伊紅和由美藍(lán)氧化產(chǎn)生的天青，三者能在吉氏和瑞氏染液的主要成份是美藍(lán)、伊紅和由美藍(lán)氧化產(chǎn)生的天青，三者能在酒精溶液中溶解，但在水溶液中伊紅遇到美藍(lán)和天青即產(chǎn)生沉淀。因此，必須在稀釋染液當(dāng)時(shí)使用，酒精溶液中溶解，但在水溶液中伊紅遇到美藍(lán)和天青即產(chǎn)生沉淀。因此，必須在稀釋染液當(dāng)時(shí)使用，一般一般在半小時(shí)內(nèi)在半小時(shí)內(nèi)染色力最強(qiáng)。染色力最強(qiáng)。第27頁(yè)/共75頁(yè)影響染色效果的因素影響染色效果的因素 （4）染液的稀釋濃度 染液的濃度高其著色就快而深，從而瘧原蟲寄生紅細(xì)胞的薛氏點(diǎn)粗大顯著，

19、但顏色常偏堿；染液濃度過(guò)低則染色時(shí)間久，顏色偏酸，薛氏點(diǎn)不明顯或消失。 （5）染色時(shí)間）染色時(shí)間 染色時(shí)間長(zhǎng)染色效果好，反之較差。室溫高則著色快，染色時(shí)染色時(shí)間長(zhǎng)染色效果好，反之較差。室溫高則著色快，染色時(shí)間可略縮短，氣溫低可適當(dāng)延長(zhǎng)。因此染色時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液的質(zhì)量、新舊、稀釋間可略縮短，氣溫低可適當(dāng)延長(zhǎng)。因此染色時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液的質(zhì)量、新舊、稀釋濃度和氣溫而適當(dāng)增減。濃度和氣溫而適當(dāng)增減。第28頁(yè)/共75頁(yè)影響染色效果的因素影響染色效果的因素 （6）染色用水）染色用水 染液的稀釋用水和染色后沖洗用水應(yīng)選擇染液的稀釋用水和染色后沖洗用水應(yīng)選擇Ph7.07.2清潔水，通常使用的新鮮的蒸餾水清潔水，通

20、常使用的新鮮的蒸餾水或過(guò)濾的冷開(kāi)水，以及自來(lái)水、井水、河水、泉水和雨水等。如果偏酸或偏堿，可用緩沖蒸餾水調(diào)整。染或過(guò)濾的冷開(kāi)水，以及自來(lái)水、井水、河水、泉水和雨水等。如果偏酸或偏堿，可用緩沖蒸餾水調(diào)整。染色后發(fā)現(xiàn)血膜顏色偏藍(lán)（偏堿）或偏紅（偏酸）時(shí)，可用與之相反的酸、堿度水沖洗血片予以糾正。色后發(fā)現(xiàn)血膜顏色偏藍(lán)（偏堿）或偏紅（偏酸）時(shí)，可用與之相反的酸、堿度水沖洗血片予以糾正。第29頁(yè)/共75頁(yè)影響染色效果的因素影響染色效果的因素 （7）染色后不要直接將染液倒掉，應(yīng)沿玻片或染色缸邊緣加水使染液表面一層溢出，并輕輕沖洗，以免染液色素顆粒沾污血膜。第30頁(yè)/共75頁(yè)瘧原蟲形態(tài)特征和鑒別要點(diǎn)瘧原蟲形

21、態(tài)特征和鑒別要點(diǎn) 在RBCRBC內(nèi)發(fā)現(xiàn)瘧原蟲是確診瘧疾和鑒別蟲種的重要依據(jù) 瘧原蟲基本構(gòu)造相同-細(xì)胞膜、質(zhì)、核 瑞氏或姬氏染色：核染成紫紅色，胞質(zhì)呈蘭色，瘧原蟲消化血紅蛋白產(chǎn)物- -瘧色素呈棕黃色 瘧原蟲在RBCRBC內(nèi)各期形態(tài)各不相同第31頁(yè)/共75頁(yè)瘧原蟲在瘧原蟲在RBCRBC內(nèi)的形態(tài)內(nèi)的形態(tài)（三期六種形態(tài)）（三期六種形態(tài)）滋養(yǎng)體期：大、小滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體期：大、小滋養(yǎng)體裂殖體期：成熟、未成熟裂殖體裂殖體期：成熟、未成熟裂殖體配子體期：雌、雄配子體配子體期：雌、雄配子體第32頁(yè)/共75頁(yè) 人體瘧原蟲的基本結(jié)構(gòu)人體瘧原蟲的基本結(jié)構(gòu) 瘧原蟲基本構(gòu)造為 細(xì)胞質(zhì)（胞漿）、核和瘧色素。 1.1.細(xì)胞漿

22、被染成蔚藍(lán)色或深藍(lán)色，隨著蟲體發(fā)育長(zhǎng)大，細(xì)胞漿逐漸增多。間日瘧原蟲發(fā)育到大滋養(yǎng)體階段，胞漿呈阿米巴樣活動(dòng)，胞漿內(nèi)有空泡。第33頁(yè)/共75頁(yè) 第34頁(yè)/共75頁(yè)第35頁(yè)/共75頁(yè)第36頁(yè)/共75頁(yè)第37頁(yè)/共75頁(yè)第38頁(yè)/共75頁(yè)第39頁(yè)/共75頁(yè)瘧原蟲薄血膜形態(tài)鑒別（吉氏染色）第40頁(yè)/共75頁(yè)間日瘧小滋養(yǎng)體-環(huán)狀體 較大，較大，約占寄生紅細(xì)胞的約占寄生紅細(xì)胞的1/31/3，胞漿較薄，一個(gè)核，胞漿較薄，一個(gè)核，很少見(jiàn)到一個(gè)紅細(xì)胞寄生很少見(jiàn)到一個(gè)紅細(xì)胞寄生2 2個(gè)環(huán)狀體和一個(gè)環(huán)狀體有個(gè)環(huán)狀體和一個(gè)環(huán)狀體有2 2個(gè)核。個(gè)核。 第41頁(yè)/共75頁(yè) 間日瘧滋養(yǎng)體- -大滋養(yǎng)體 經(jīng)8 81010小時(shí)，

23、蟲體增大，胞質(zhì)增多，伸出偽足，阿米巴樣，常含空泡。 出現(xiàn)黃褐色的瘧色素，細(xì)小、桿狀，散在分布。 紅細(xì)胞脹大，變形，顏色變淡，并出現(xiàn)數(shù)量較多，淡紅色的小點(diǎn)，稱薛氏小點(diǎn)第42頁(yè)/共75頁(yè)間日瘧- -裂殖體未成熟裂殖體經(jīng)4040小時(shí)晚期滋養(yǎng)體發(fā)育成熟，蟲體變圓，空泡消失，核分成2 2個(gè)以上。核開(kāi)始分裂又稱裂殖體前期色素聚集成團(tuán)塊第43頁(yè)/共75頁(yè) 間日瘧成熟裂殖體成熟裂殖體 成熟裂殖子約有成熟裂殖子約有12122424個(gè)，通常個(gè)，通常1616個(gè)，排個(gè)，排列不規(guī)則。列不規(guī)則。 受染受染RBC RBC 脹大、顏色脹大、顏色蒼白、蟲體幾乎充滿蒼白、蟲體幾乎充滿紅細(xì)胞紅細(xì)胞 瘧色素集中成堆，常瘧色素集中成堆

24、，常聚集一側(cè)。聚集一側(cè)。第44頁(yè)/共75頁(yè)第45頁(yè)/共75頁(yè)配子體 瘧原蟲經(jīng)過(guò)幾次紅細(xì)胞內(nèi)裂體增殖，部分裂殖子在紅細(xì)胞內(nèi)不再進(jìn)行裂體增殖，而發(fā)育為雌性配子體或雄性配子體，間日瘧原蟲配子體呈圓形或橢圓形，瘧色素均勻分布于蟲體內(nèi)，核1 1個(gè)。 第46頁(yè)/共75頁(yè) 間日瘧原蟲雌配子體 蟲體較大，占滿脹大的紅細(xì)胞 胞質(zhì)致密，色深藍(lán) 核小致密，深紅色，多位于蟲體一側(cè) 瘧色素黃褐色，均勻散在第47頁(yè)/共75頁(yè)惡性瘧原蟲-環(huán)狀體 環(huán)纖細(xì), ,約為RBCRBC直徑的1/61/6，RBCRBC不脹大，顏色稍紫或正常 核1 1個(gè)或2 2個(gè)，紅細(xì)胞常含2 2個(gè)以上原蟲 蟲體常位于紅細(xì)胞的邊緣 ，呈“鳥(niǎo)飛狀” 不帶色

25、素第48頁(yè)/共75頁(yè)惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體 一般不出現(xiàn)在外周血一般不出現(xiàn)在外周血 蟲體小結(jié)實(shí)，圓形，蟲體小結(jié)實(shí)，圓形，空泡不顯著，不活動(dòng)空泡不顯著，不活動(dòng) 瘧色素集中一團(tuán)，黑瘧色素集中一團(tuán)，黑褐色褐色 原蟲此時(shí)開(kāi)始集中在原蟲此時(shí)開(kāi)始集中在內(nèi)臟毛細(xì)血管內(nèi)臟毛細(xì)血管第49頁(yè)/共75頁(yè)惡性瘧成熟裂殖體惡性瘧成熟裂殖體 裂殖子裂殖子8 82626個(gè)，通常個(gè)，通常8 81818個(gè)，排列不規(guī)則個(gè)，排列不規(guī)則 瘧色素集中成一團(tuán)，黑瘧色素集中成一團(tuán)，黑褐色褐色 蟲體占紅細(xì)胞體積的蟲體占紅細(xì)胞體積的2/32/3至至3/4 3/4 第50頁(yè)/共75頁(yè)惡性瘧原蟲雌配子體惡性瘧原蟲雌配子體 新月形，兩端

26、較尖 核1個(gè)，較小，致密，深紅色，常位于中央 胞漿深藍(lán)色 瘧色素黑褐色，緊密分布于核周圍第51頁(yè)/共75頁(yè)惡性瘧原蟲雄配子體惡性瘧原蟲雄配子體 臘腸形，兩端鈍圓臘腸形，兩端鈍圓 胞漿淺藍(lán)或談紅色胞漿淺藍(lán)或談紅色 核核1 1個(gè)，較大，疏松，淡紅色，位于中央個(gè)，較大，疏松，淡紅色，位于中央 瘧色素黑褐色，小桿狀，在核周圍松散分布瘧色素黑褐色，小桿狀，在核周圍松散分布 第52頁(yè)/共75頁(yè)第53頁(yè)/共75頁(yè)三日瘧原蟲主要形態(tài)特征1. 寄生的紅細(xì)胞正?；蚩s小，有淡紅色細(xì)小的齊氏點(diǎn)2.環(huán)狀體中等大小，核較大，胞漿粗厚；3.滋養(yǎng)體胞漿常呈帶狀，核呈條狀，瘧色素深褐色，粗大常沿邊緣分布；4.裂殖體小于正常紅細(xì)胞，核612個(gè)，常排列成菊花狀，瘧色素常聚集于中央；5.雌雄配子體小于正常紅細(xì)胞，色素呈深褐色；6.常可查見(jiàn)各階段的瘧原蟲。第54頁(yè)/共75頁(yè)第55頁(yè)/共75頁(yè)蟲種周圍血中發(fā)育階段紅細(xì)胞形態(tài) 瘧原蟲形態(tài)大小點(diǎn)彩胞漿瘧色素裂 殖 子數(shù)惡 性 瘧原蟲環(huán)狀體配子體正常常 見(jiàn)茂 氏點(diǎn)環(huán)狀體纖細(xì)，常見(jiàn)個(gè)核粗黑，配子體中明顯16-32間 日 瘧原蟲各 期 滋養(yǎng)體裂 殖 體和 配 子體漲大,可達(dá)正常的 1.5-2 倍薛 氏點(diǎn) 可出現(xiàn)阿米巴樣滋養(yǎng)體，淺藍(lán)色，活潑金棕色不明顯12-24卵 形 瘧原蟲各期滋養(yǎng)體裂殖體和配子體漲大,可達(dá) 正 常的