第五章-熒光分析法-scf

1、1本章學習目標：本章學習目標：1、掌握分子熒光分析法的基本原理和特點掌握分子熒光分析法的基本原理和特點 2、掌握熒光與分子結構的關系以及影響熒光強度掌握熒光與分子結構的關系以及影響熒光強度的因素的因素 3 、熟悉熒光定量分析方法及熒光分光光度計熟悉熒光定量分析方法及熒光分光光度計 4 、了解分子熒光分析法的應用 第第0505章章 熒光分析法熒光分析法2 處于處于基態(tài)基態(tài)的分子吸收能量后，躍的分子吸收能量后，躍遷到遷到激發(fā)態(tài)激發(fā)態(tài)，當激發(fā)態(tài)分子以發(fā)射，當激發(fā)態(tài)分子以發(fā)射光的形式釋放能量，返回光的形式釋放能量，返回基態(tài)的過基態(tài)的過程程，稱為，稱為分子發(fā)光分子發(fā)光。 一、什么是分子發(fā)光？一、什么是分

2、子發(fā)光？ 分子熒光分析法分子熒光分析法3 二、分子發(fā)光的分類二、分子發(fā)光的分類(按激發(fā)的模式按激發(fā)的模式 )分分子子發(fā)發(fā)光光熱致發(fā)光熱致發(fā)光光致發(fā)光光致發(fā)光場致發(fā)光場致發(fā)光化學發(fā)光化學發(fā)光熒光熒光磷光磷光 分子熒光分析法分子熒光分析法4 分子熒光分析法分子熒光分析法優(yōu)點：優(yōu)點：靈敏度高；選擇性好；試樣用量少；方法簡單。光致發(fā)光光致發(fā)光：物質(zhì)分子吸收電磁輻射能后，將從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，處于激發(fā)態(tài)的分子發(fā)射出光的現(xiàn)象，稱為光致發(fā)光。最常見形式是熒光和磷光熒光和磷光。熒光分析法：熒光分析法：根據(jù)物質(zhì)的熒光光譜的特征及強度對物質(zhì)進行定性和定量分析的方法，稱之為熒光分析法。5第一節(jié)第一節(jié) 分子熒光分析法

3、的基本原理分子熒光分析法的基本原理（重點）（重點）一、分子熒光的產(chǎn)生一、分子熒光的產(chǎn)生單重態(tài)（單重態(tài)（S）：）：s=0，M=1，分子所處的電子能態(tài)。分子所處的電子能態(tài)。三重態(tài)（三重態(tài)（T）：）：s=1，M=3，分子所處的電子能態(tài)。分子所處的電子能態(tài)。1.1.分子的電子能級和激發(fā)過程分子的電子能級和激發(fā)過程12 sM分子電子能級的多重性：分子電子能級的多重性：iss總自旋量子數(shù)：總自旋量子數(shù)：E自旋量子數(shù)：自旋量子數(shù)：s = 或或- 泡利不相容原理泡利不相容原理62.熒光的產(chǎn)生熒光的產(chǎn)生 在單重激發(fā)態(tài)中，兩個電子平行自旋平行自旋，單重態(tài)分子具有抗磁性，其激發(fā)態(tài)的平均壽命大約為1010-8-8s

4、s，而三重態(tài)分子具有順磁三重態(tài)分子具有順磁性，其激發(fā)態(tài)的平均壽命為10-4 1s以上（通常用（通常用S S和和T T分別表示分別表示單重態(tài)單重態(tài)和和三重態(tài)三重態(tài)）。）。 電子能級的電子能級的多重性：多重性：M=2s+1M=2s+1，s s（總自旋量子數(shù)）（總自旋量子數(shù)）7根據(jù)波茲曼分布，分子室溫基本處于電子能級的基態(tài)電子能級的基態(tài)，激發(fā)時，基態(tài)電子只能躍遷到激發(fā)單重態(tài)激發(fā)單重態(tài)，不能不能直接躍遷到激發(fā)三重態(tài)（激發(fā)三重態(tài)（根據(jù)自旋禁阻定律）。電子處于激發(fā)態(tài)（不穩(wěn)定狀態(tài)），可通過無輻射躍遷無輻射躍遷和輻輻射躍遷射躍遷(發(fā)光)等方式失去能量，返回基態(tài)。2.熒光的產(chǎn)生熒光的產(chǎn)生能量傳遞能量傳遞途徑途徑

5、輻射躍遷輻射躍遷熒光熒光磷光磷光系間竄躍系間竄躍無輻射躍遷無輻射躍遷振動弛豫振動弛豫內(nèi)轉(zhuǎn)換內(nèi)轉(zhuǎn)換外轉(zhuǎn)換外轉(zhuǎn)換8 在同一電子能級在同一電子能級中中，電子由電子由高高振動振動能級能級轉(zhuǎn)至低轉(zhuǎn)至低振動能振動能級級，而將多余的能，而將多余的能量量以無輻射形式以無輻射形式放放出的過程。出的過程。（1）振動弛豫）振動弛豫無輻射方式傳遞途徑9 當當兩個電子激發(fā)態(tài)之間的能級兩個電子激發(fā)態(tài)之間的能級非常非?？拷拷灾疗湔駝幽芗売幸灾疗湔駝幽芗売兄丿B重疊時，時，常發(fā)生電子由常發(fā)生電子由高高能級以能級以無輻射方式無輻射方式轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)移至低低能級的過程能級的過程。如右圖，處于高激發(fā)態(tài)（如右圖，處于高激發(fā)態(tài)（S2）的電

6、）的電子，通過內(nèi)轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)移到低激發(fā)態(tài)子，通過內(nèi)轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)移到低激發(fā)態(tài)（S1）的振動能級。）的振動能級。（2）內(nèi)轉(zhuǎn)換）內(nèi)轉(zhuǎn)換10 激發(fā)分子與溶劑分子或其他溶質(zhì)分子的激發(fā)分子與溶劑分子或其他溶質(zhì)分子的相互作用而相互作用而失去能量失去能量，并以熱能的形式釋放能量的過程。外轉(zhuǎn)換使熒光或磷光強度熒光或磷光強度減弱甚至消失減弱甚至消失。這一現(xiàn)象稱為。這一現(xiàn)象稱為“熄滅熄滅”或或“猝滅猝滅”。（3）外轉(zhuǎn)換）外轉(zhuǎn)換11 處于激發(fā)態(tài)分子的電子發(fā)生發(fā)生自自旋反轉(zhuǎn)旋反轉(zhuǎn)而使分子的多重性多重性發(fā)生變化的過程。如圖，電子電子S S1 1的振動能級同的振動能級同T T1 1的振的振動能級重疊，則可能動能級重疊，則可能發(fā)生體

7、系間跨越S1T1 ，分子由激發(fā)單重態(tài)跨越到激發(fā)三重態(tài)，熒光強度減弱甚至熄滅。（4）系間竄躍）系間竄躍12 物質(zhì)分子吸收能量被激發(fā)后，從物質(zhì)分子吸收能量被激發(fā)后，從激發(fā)激發(fā)單重態(tài)單重態(tài)的的最低振動能級最低振動能級返回返回基態(tài)時發(fā)射出的基態(tài)時發(fā)射出的光光，稱為，稱為熒光熒光。注意：注意：無論電子開始被激發(fā)至哪一個激無論電子開始被激發(fā)至哪一個激發(fā)單重態(tài)，經(jīng)過發(fā)單重態(tài)，經(jīng)過振動弛豫及內(nèi)轉(zhuǎn)換，振動弛豫及內(nèi)轉(zhuǎn)換，均均可回到可回到第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級，第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級，然后再以輻射形式發(fā)射光而返回至基態(tài)然后再以輻射形式發(fā)射光而返回至基態(tài)各振動能級上。各振動能級上。 熒光的產(chǎn)生在熒光的產(chǎn)生

8、在1010-7-7-10-10-9-9s內(nèi)完成。內(nèi)完成。 （1）發(fā)射熒光發(fā)射熒光輻射方式傳遞途徑13 電子由第一激發(fā)單重態(tài)的最低電子由第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級，以振動能級，以系間竄躍系間竄躍方式轉(zhuǎn)方式轉(zhuǎn)至第一激發(fā)至第一激發(fā)三重態(tài)三重態(tài)，再經(jīng)三重，再經(jīng)三重態(tài)最低振動能級返回至基態(tài)時態(tài)最低振動能級返回至基態(tài)時發(fā)射的光，稱為發(fā)射的光，稱為磷光磷光。由于（由于（T1S0）這個躍遷過程）這個躍遷過程也是自旋禁阻的，其發(fā)光速率也是自旋禁阻的，其發(fā)光速率較慢，約為較慢，約為10-4-10s。因此，這因此，這種躍遷所發(fā)射的光，種躍遷所發(fā)射的光，在光照停在光照停止后，仍可持續(xù)一段時間止后，仍可持續(xù)一段時間。

9、（2）發(fā)射磷光發(fā)射磷光14 熒光和磷光產(chǎn)生示意圖熒光和磷光產(chǎn)生示意圖S2S1S0T1吸吸收收發(fā)發(fā)射射熒熒光光發(fā)發(fā)射射磷磷光光系間竄躍系間竄躍內(nèi)轉(zhuǎn)換內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫振動弛豫能能量量l l 2l l 1l l 3 外轉(zhuǎn)換l l 2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫振動弛豫15二、 激發(fā)光譜與熒光光譜激發(fā)光譜（激發(fā)光譜（excitation spectrum）：使使不同不同激發(fā)激發(fā)波長波長的入射光激發(fā)熒光體，然后讓所產(chǎn)生的的入射光激發(fā)熒光體，然后讓所產(chǎn)生的熒光通過固熒光通過固定定發(fā)射發(fā)射波長波長的單色器而照到檢測器上，測定不同激的單色器而照到檢測器上，測定不同激發(fā)波長光照射下熒光強度的變化，以發(fā)波長光照射下熒光

10、強度的變化，以激發(fā)波長為橫激發(fā)波長為橫坐標坐標，熒光強度為縱坐標熒光強度為縱坐標，可得熒光物質(zhì)的激發(fā)光，可得熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜。譜。注意：激發(fā)光譜與其吸收光譜極為相似，但激發(fā)光譜曲線是熒光強度與波長的關系曲線，吸收曲線則是吸光度與波長的關系曲線，兩者性質(zhì)是不同的。16二、 激發(fā)光譜與熒光光譜17 熒光光譜（熒光光譜（fluorecence spectrum）：固定激固定激發(fā)光波長發(fā)光波長（為最大激發(fā)波長）和強度，而讓熒光物（為最大激發(fā)波長）和強度，而讓熒光物質(zhì)發(fā)射的熒光通過發(fā)射單色器分光掃描并檢測質(zhì)發(fā)射的熒光通過發(fā)射單色器分光掃描并檢測不同不同發(fā)射發(fā)射光波長下光波長下的熒光強度，以的熒光強度，

11、以發(fā)射波長為橫坐標發(fā)射波長為橫坐標，熒光強度為縱坐標作圖熒光強度為縱坐標作圖，得到物質(zhì)的熒光光譜。，得到物質(zhì)的熒光光譜。 熒光物質(zhì)的熒光物質(zhì)的最大激發(fā)波長（最大激發(fā)波長（l lex）和）和最大發(fā)射最大發(fā)射波長（波長（l lem）是鑒定物質(zhì)的根據(jù)；也是定量測定最是鑒定物質(zhì)的根據(jù)；也是定量測定最為靈敏的條件。為靈敏的條件。分子的激發(fā)光譜可能含有幾個激發(fā)帶，但發(fā)射光譜只含一個發(fā)射帶；分子的激發(fā)光譜可能含有幾個激發(fā)帶，但發(fā)射光譜只含一個發(fā)射帶；即使分子被激發(fā)到高于即使分子被激發(fā)到高于S1的電子態(tài)，由于經(jīng)過極快的內(nèi)轉(zhuǎn)換和振動弛豫降的電子態(tài)，由于經(jīng)過極快的內(nèi)轉(zhuǎn)換和振動弛豫降到到S1電子態(tài)的最低振動、轉(zhuǎn)動能

12、級，然后以輻射形式釋放能量回到基態(tài)。電子態(tài)的最低振動、轉(zhuǎn)動能級，然后以輻射形式釋放能量回到基態(tài)。200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 90004008001200160020002400280032003600400044004800 IFl l191.斯托克斯位移斯托克斯位移(Stokes shift):熒光發(fā)射波長總是大于激發(fā)光譜波長的現(xiàn)象。熒光發(fā)射波長總是大于激發(fā)光譜波長的現(xiàn)象。室溫下菲的乙醇溶液熒光光譜熒光光譜的特征熒光光譜的特征 （重點重點）202.2.熒光光譜與熒光光譜與激發(fā)波長無關激發(fā)波長無關 電子躍遷到不

13、同激發(fā)態(tài)能級，吸收不同波電子躍遷到不同激發(fā)態(tài)能級，吸收不同波長的能量，產(chǎn)生不同吸收帶，但均回到長的能量，產(chǎn)生不同吸收帶，但均回到第一電子第一電子激發(fā)單重態(tài)激發(fā)單重態(tài)的的最低最低振動能級再躍遷回到基態(tài)，從振動能級再躍遷回到基態(tài)，從而熒光發(fā)射光譜而熒光發(fā)射光譜只有一個發(fā)射帶只有一個發(fā)射帶，而且熒光光譜，而且熒光光譜的的形狀形狀與與激發(fā)波長無關激發(fā)波長無關。3.3.熒光光譜與熒光光譜與激發(fā)光譜的鏡像關系激發(fā)光譜的鏡像關系激發(fā)光譜與熒光光譜成對稱鏡像關系。激發(fā)光譜與熒光光譜成對稱鏡像關系。nm200280360440520020406080100Fab4b3b2b1b0c0c1c2c3c4蒽的激發(fā)光譜

14、（虛線）熒光光譜（實線）蒽的能級躍遷V=0V=1V=2V=3V=4V=0V=1V=2V=3V=4b4b3b2b1b0c0c1c2c3c4E4E3E2E10S 1SE4E3E2E122（一）（一）分子產(chǎn)生熒光必須分子產(chǎn)生熒光必須具備兩個條件具備兩個條件：三、熒光強度與分子結構的關系 分子必須具有與所照射的輻射頻率相分子必須具有與所照射的輻射頻率相適應的適應的 結構結構，才能，才能吸收吸收激發(fā)光；激發(fā)光； 吸收了與其本身特征頻率相同的能量之后，吸收了與其本身特征頻率相同的能量之后，必須具有一定的必須具有一定的熒光量子產(chǎn)率熒光量子產(chǎn)率。23熒光效率（熒光效率（fluorescence efficie

15、ncy):指激發(fā)態(tài)分子發(fā)射熒光的量子數(shù)與基態(tài)分子吸收激發(fā)光的量子數(shù)之比，常用表示。2425 （重點重點）262728293031三、影響熒光強度的外部因素三、影響熒光強度的外部因素1、溫度溫度2、溶劑溶劑：極性、粘度：極性、粘度3、酸度酸度：熒光物質(zhì)自身最適宜的：熒光物質(zhì)自身最適宜的pH范圍范圍4、熒光熄滅劑熒光熄滅劑：主要四種類型：主要四種類型5、散射光散射光：瑞利光、拉曼光：瑞利光、拉曼光32五、影響熒光強度的外部因素溫度降低，熒光效率和熒光強度升高。1）溫度2）溶劑*躍遷幾率增加，熒光強度將增強，熒光波長也發(fā)生紅移；溶劑粘度降低，熒光強度降低；溶劑應達到足夠的純度。333）pH值值熒熒光

16、物質(zhì)都自身最適宜的光物質(zhì)都自身最適宜的pH范圍范圍NH3+OH-H+NH2NH-OH-H+34熒光熒光淬淬滅（滅（熒光熄滅熒光熄滅）：熒光物質(zhì)分子與溶劑分）：熒光物質(zhì)分子與溶劑分子或其他溶質(zhì)分子的相互作用引起熒光強度降低子或其他溶質(zhì)分子的相互作用引起熒光強度降低的現(xiàn)象稱為熒光淬滅。的現(xiàn)象稱為熒光淬滅。熒光熒光淬滅淬滅劑：能引起熒光熄滅的物質(zhì)。劑：能引起熒光熄滅的物質(zhì)。4)熒光淬滅熒光淬滅 碰撞碰撞淬淬滅滅 M+hvM*,M*+Q M+熱熱 靜態(tài)靜態(tài)淬淬滅滅 M+Q MQ 非熒光物質(zhì)非熒光物質(zhì) 轉(zhuǎn)入三重態(tài)的轉(zhuǎn)入三重態(tài)的淬淬滅滅 三重態(tài)，氧的作用三重態(tài)，氧的作用 熒光物質(zhì)的自熒光物質(zhì)的自淬淬滅滅

17、熒光物質(zhì)濃度較高熒光物質(zhì)濃度較高導致導致熒光淬滅熒光淬滅的的四種原因四種原因：35熒光淬淬滅法: 熒光物質(zhì)加入某種淬淬滅劑后，其熒光強度的減少與熒光熄滅劑的濃度呈線性關系，可用于測定熄滅劑的含量，這種方法稱為熒光淬淬滅法。365)5)散射光散射光瑞利瑞利散射光散射光( (Rayleigh scattering light) )：光子與：光子與物質(zhì)分子發(fā)生彈性碰撞，不發(fā)生能量交換，運物質(zhì)分子發(fā)生彈性碰撞，不發(fā)生能量交換，運動方向改變；動方向改變；瑞利光瑞利光入射光入射光拉曼拉曼散射光散射光(Raman scattering light) ：光子與光子與物質(zhì)分子發(fā)生非彈性碰撞，發(fā)生能量交換，運物質(zhì)

18、分子發(fā)生非彈性碰撞，發(fā)生能量交換，運動方向改變；動方向改變；拉曼光拉曼光入射光入射光消除方法消除方法：選擇：選擇適當適當?shù)募ぐl(fā)波長的激發(fā)波長320360448激發(fā)激發(fā) 320nm硫酸奎寧硫酸奎寧350448激發(fā)激發(fā) 350nm硫酸奎寧硫酸奎寧320360激發(fā)激發(fā) 320nm0.1mol/L硫酸硫酸350400激發(fā)激發(fā) 350nm0.1mol/L硫酸硫酸a.強度強度b.強度強度硫酸奎寧在不同激發(fā)波長下的熒光（硫酸奎寧在不同激發(fā)波長下的熒光（a）與拉曼光譜（）與拉曼光譜（b）382 2、定量方法定量方法 1 1、定量依據(jù)定量依據(jù) 第二節(jié)第二節(jié) 熒光定量分析方法熒光定量分析方法39 優(yōu)點優(yōu)點 1.靈

19、敏度高靈敏度高 比紫外比紫外-可見分光光度法高可見分光光度法高24個數(shù)量級；個數(shù)量級； 檢測下限：檢測下限：0.10.001 g/mL 2.選擇性強選擇性強 既可依據(jù)發(fā)射光譜特征，又可根據(jù)激發(fā)光譜特征；既可依據(jù)發(fā)射光譜特征，又可根據(jù)激發(fā)光譜特征； 3.試樣量少和方法簡單試樣量少和方法簡單 缺點缺點應用范圍小應用范圍小401 1、定量依據(jù)定量依據(jù) 熒光強度熒光強度 If 正比于正比于吸收的光強度吸收的光強度 Ia 和熒和熒光量子產(chǎn)率光量子產(chǎn)率 ：faII 001 10bCatIIII由朗伯由朗伯- -比耳定律得：比耳定律得：2.303001 101bCbCfIIIe 熒光強度熒光強度 If ：4

20、1對于稀溶液，當對于稀溶液，當 2.303 bC 0.05時：時：02.303ffIIbC If -熒光強度熒光強度I0 -入射光強度入射光強度f -熒光量子產(chǎn)率熒光量子產(chǎn)率b - 吸收光程吸收光程 - 摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)C - 物質(zhì)濃度物質(zhì)濃度fIKC422 2、定量方法定量方法 標準曲線法：標準曲線法：FCsFxCx43直接比較法直接比較法XSFXFFSFCCIIII)0()()0()(注意：樣品與標樣溶液濃度接近，在線性范圍內(nèi)注意：樣品與標樣溶液濃度接近，在線性范圍內(nèi)步驟：步驟：1.1.配制標準溶液和試樣溶液配制標準溶液和試樣溶液2.2.測測I IF F3.3.求濃度求濃度44v對

21、于熒光法對于熒光法 F = 2.3k I0EClF I0， I0 增強，增強，F(xiàn)增大；低濃度時，增大；低濃度時，F(xiàn) C只要檢測器靈敏，可檢測微弱信號。只要檢測器靈敏，可檢測微弱信號。v對于分光光度法對于分光光度法 A = -lgT = EClC極小時，極小時，A0，無吸收；，無吸收；若若C不變，改變?nèi)肷涔獠蛔?，改變?nèi)肷涔釯0強度，強度，A無變化。無變化。所以吸收光譜受一定限制，靈敏度小于熒光光譜。所以吸收光譜受一定限制，靈敏度小于熒光光譜。為什么熒光分析法比紫外可見法更靈敏？為什么熒光分析法比紫外可見法更靈敏？45 用于測量熒光的儀器由激發(fā)光源、樣品池、用于選擇激發(fā)光波長和熒光熒光波長的單色器

22、以及檢測器四部分組成。 由光源發(fā)射的光經(jīng)第一單色器得到所需的激發(fā)光波長，通過樣品池后，一部分光能被熒光物質(zhì)所吸收，熒光物質(zhì)被激發(fā)后，發(fā)射熒光。 第三節(jié)第三節(jié) 熒光分光光度計熒光分光光度計 46問題：問題：熒光分光光度熒光分光光度計與紫外計與紫外-可見分光光可見分光光度計有何異同點？度計有何異同點？47484950紫外紫外-可見分光光度計可見分光光度計測量池測量池(吸收池吸收池)I0ItI0ItIF,p51在測量分子熒光強度時，要在與入射光成直角的方在測量分子熒光強度時，要在與入射光成直角的方向上進行測量，這是由于（向上進行測量，這是由于（ ）A. 只有在入射光線成直角的方向上才有熒光只有在入射

23、光線成直角的方向上才有熒光B. 熒光強度比透射光強度小熒光強度比透射光強度小C. 熒光強度比透射光強度大熒光強度比透射光強度大D. 熒光波長比透射光波長長熒光波長比透射光波長長E. 熒光是向各個方向發(fā)射的，為了減小透射光的影響熒光是向各個方向發(fā)射的，為了減小透射光的影響熒光分光光度計常使用的光源是（熒光分光光度計常使用的光源是（ ）A. 空心陰極燈空心陰極燈 B. 氙燈氙燈 C. 氫燈氫燈 D. 硅碳棒硅碳棒BE52儀器的校正（1）靈敏度的校正）靈敏度的校正 一定濃度的穩(wěn)定熒光物質(zhì)作對照品溶液調(diào)儀器一定濃度的穩(wěn)定熒光物質(zhì)作對照品溶液調(diào)儀器（如（如1ug/ml硫酸奎寧）硫酸奎寧）（2）波長校正）

24、波長校正 汞燈的標準譜線汞燈的標準譜線（3）激發(fā)光譜和熒光光譜的校正）激發(fā)光譜和熒光光譜的校正 光源強度、檢測器的感應度光源強度、檢測器的感應度53熒光分析法的應用（1）無機化合物的分析）無機化合物的分析v采用有機試劑進行熒光分析的元素已近采用有機試劑進行熒光分析的元素已近70多種多種v能夠與金屬離子形成熒光絡合物的能夠與金屬離子形成熒光絡合物的有機試劑絕大多數(shù)有機試劑絕大多數(shù)是芳香族化合物是芳香族化合物。（分子剛性平面結構增大）。（分子剛性平面結構增大）v另一類絡合物是三元離子締合物。另一類絡合物是三元離子締合物。例：羅丹明例：羅丹明B為陽離子熒光染料，為陽離子熒光染料，Au3+、Ga3+、

25、Tl3+等等陽離子首先與鹵素離子形成二元絡陰離子，再與羅丹陽離子首先與鹵素離子形成二元絡陰離子，再與羅丹明明B締合形成熒光化合物。締合形成熒光化合物。v熒光猝滅法熒光猝滅法也是常采用的方法。也是常采用的方法。54v脂肪族有機化合物本身能發(fā)熒光的很少，需要與某脂肪族有機化合物本身能發(fā)熒光的很少，需要與某些試劑反應后才能進行熒光分析些試劑反應后才能進行熒光分析v芳香族化合物芳香族化合物因具有共軛的不飽和體系，多數(shù)能發(fā)因具有共軛的不飽和體系，多數(shù)能發(fā)生熒光，可直接用熒光法測定。對具有致癌活性的生熒光，可直接用熒光法測定。對具有致癌活性的多環(huán)芳烴，熒光分析法已成為最主要的測定方法。多環(huán)芳烴，熒光分析法已成為最主要的測定方法。v在生物化學分析、生理醫(yī)學研究和臨床、藥物分析在生物化學分析、生理醫(yī)學研究和臨床、藥物分析領域，許多重要的分析對象，如領域，許多重要的分析對象，如維生素、氨基酸和維生素、氨基酸和蛋白質(zhì)、胺類、甾族化合物、酶和輔酶蛋白質(zhì)、胺類、甾族化合物、酶和輔酶等，均可用等，均可用熒光法分析。熒光法分析。（2）有機化合物的分析）有機化合物的分析55熒光分析新技術簡介1. 激光熒光分析激光熒光分析激光作光源；超低濃度分析激光作光源；超低濃度分析2. 時間分辯熒光分析時間分辯熒光分析利用不同物質(zhì)的熒