液相色譜儀日常維護(hù)及常見故障解決實(shí)用教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1液相色譜儀日常液相色譜儀日常(rchng)維護(hù)及常見故障解維護(hù)及常見故障解決決第一頁(yè)，共66頁(yè)。第1頁(yè)/共66頁(yè)第二頁(yè)，共66頁(yè)。溶劑溶劑(rngj)信息信息避免使用下列對(duì)不銹鋼有腐蝕性的溶劑：避免使用下列對(duì)不銹鋼有腐蝕性的溶劑：鹵化物堿金屬溶液和相應(yīng)的酸溶液。鹵化物堿金屬溶液和相應(yīng)的酸溶液。高濃度的無機(jī)酸例如：硝酸和硫酸。高濃度的無機(jī)酸例如：硝酸和硫酸。能夠形成鹵素自由基或酸的氯化試劑及其混合物。能夠形成鹵素自由基或酸的氯化試劑及其混合物。含有過氧化物的色譜級(jí)醚必須用氧化鋁干燥劑。含有過氧化物的色譜級(jí)醚必須用氧化鋁干燥劑。在有機(jī)溶劑中的有機(jī)酸溶液。在有機(jī)溶劑中的有機(jī)酸溶液。含有強(qiáng)絡(luò)合

2、劑含有強(qiáng)絡(luò)合劑(h j)的溶液。的溶液。四氯化碳和異丙醇或四氯化碳和異丙醇或THF混合液?；旌弦?。第2頁(yè)/共66頁(yè)第三頁(yè)，共66頁(yè)。溶 劑UV截止波長(zhǎng)（nm）乙 睛190水190環(huán) 己 烷195己 烷200甲 醇210乙 醇210乙 醚220二氯甲烷220氯 仿240四氯化碳265四氫呋喃280（220）甲 苯285所以在使用紫外檢測(cè)器時(shí)，所用波長(zhǎng)(bchng)應(yīng)至少比所用溶劑的截止波長(zhǎng)(bchng)大20nm以上。在使用紫外檢測(cè)器時(shí)，所用波長(zhǎng)與所用溶劑的截止波長(zhǎng)接近（或低于截止波長(zhǎng)）時(shí)，容易產(chǎn)生噪音(zoyn)干擾，從而影響檢測(cè)結(jié)果。第3頁(yè)/共66頁(yè)第四頁(yè)，共66頁(yè)。生色團(tuán)分子式實(shí) 例最大吸

3、收波長(zhǎng)（nm）羰基（酮）RRC=O丙酮271羰基醛RHC=O乙醛293羧基RCOOH醋酸271酰胺RCONH2乙酰胺208次乙基RCH=CHR乙烯193亞次乙基RC=CR乙炔173睛RC=N乙睛160硝基RNO2硝基甲烷271溶劑、PH、溫度等都會(huì)影響生色團(tuán)的最大吸收(xshu)峰的強(qiáng)度和位置。第4頁(yè)/共66頁(yè)第五頁(yè)，共66頁(yè)。溶劑溶劑(rngj)過過濾濾不干凈的溶劑或在溶劑瓶中長(zhǎng)菌的溶劑會(huì)阻塞溶劑過濾器，降低泵的操作性能。遵從下列建議可以提高性能，延長(zhǎng)溶劑過濾器的壽命：l使用無菌溶劑瓶避免溶劑長(zhǎng)菌。l用濾膜過濾溶劑去除微生物。l每?jī)商旄鼡Q或過濾溶劑。l避免溶劑瓶直接日照。l向溶劑中加入0.0

4、001-0.001M的疊氮化鈉。第5頁(yè)/共66頁(yè)第六頁(yè)，共66頁(yè)。第6頁(yè)/共66頁(yè)第七頁(yè)，共66頁(yè)。第7頁(yè)/共66頁(yè)第八頁(yè)，共66頁(yè)。目的(md)脫氣(tu q)方法：氦氣脫氣(tu q)回流加熱脫氣(tu q)真空脫氣(tu q)超聲脫氣(tu q)排除(pich)溶解在流動(dòng)相中的氧氣和氮?dú)?2 脫氣機(jī)第8頁(yè)/共66頁(yè)第九頁(yè)，共66頁(yè)。12 mlSolenoid valve第9頁(yè)/共66頁(yè)第十頁(yè)，共66頁(yè)。阻尼器/壓力(yl)傳感器泵驅(qū)動(dòng)(q dn)溶劑(rngj)瓶梯度比例閥主動(dòng)輸入閥AV出口球閥BOV清洗閥Purge Valve柱塞桿Piston第10頁(yè)/共66頁(yè)第十一頁(yè)，共66頁(yè)。二元

5、泵工作二元泵工作(gngzu)原理原理DamperPurge valveMixerABInlet valveOutlet valveWasteInlet valveOutlet valve第11頁(yè)/共66頁(yè)第十二頁(yè)，共66頁(yè)。第12頁(yè)/共66頁(yè)第十三頁(yè)，共66頁(yè)。樣品完全溶解在流動(dòng)相中樣品沒有完全溶解過濾樣品，確保樣品中不含固體顆粒用流動(dòng)相或比流動(dòng)相弱的溶劑溶解樣品進(jìn)樣量盡量小4 進(jìn)樣器第13頁(yè)/共66頁(yè)第十四頁(yè)，共66頁(yè)。六通閥手動(dòng)進(jìn)樣閥 - 六通閥ToWasteSample Loop(Fixed Volume)FromToColumnSampleSyringeLoadInjectToCol

6、umnPumpFrom PumpTo Waste手動(dòng)進(jìn)樣器第14頁(yè)/共66頁(yè)第十五頁(yè)，共66頁(yè)。第15頁(yè)/共66頁(yè)第十六頁(yè)，共66頁(yè)。自動(dòng)進(jìn)樣器Metering device6-port valveSampling unitFrom pumpTo columnTo waste準(zhǔn)備準(zhǔn)備(zhnbi)位置位置調(diào)用調(diào)用(dioyng)樣品樣品瓶瓶吸樣品吸樣品進(jìn)樣和運(yùn)行進(jìn)樣和運(yùn)行(ynxng)位置位置標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣過程標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣過程 .第16頁(yè)/共66頁(yè)第十七頁(yè)，共66頁(yè)。第17頁(yè)/共66頁(yè)第十八頁(yè)，共66頁(yè)。色譜色譜(s p)柱柱保護(hù)保護(hù) 過濾所有的溶劑和樣品過濾所有的溶劑和樣品 使用保護(hù)使用保護(hù)(boh)

7、(boh)柱柱 儀器在使用完畢，要沖洗整個(gè)系統(tǒng)，移走系統(tǒng)中的緩沖液。儀器在使用完畢，要沖洗整個(gè)系統(tǒng)，移走系統(tǒng)中的緩沖液。 柱子在不使用時(shí)，兩端密封保存柱子在不使用時(shí)，兩端密封保存 在適當(dāng)?shù)娜軇┲斜４嬷釉谶m當(dāng)?shù)娜軇┲斜４嬷?注意色譜柱的注意色譜柱的pHpH值使用范圍值使用范圍 不要高壓沖洗柱子不要高壓沖洗柱子 不要高溫下過長(zhǎng)時(shí)間使用硅膠鍵合相不要高溫下過長(zhǎng)時(shí)間使用硅膠鍵合相第18頁(yè)/共66頁(yè)第十九頁(yè)，共66頁(yè)。第19頁(yè)/共66頁(yè)第二十頁(yè)，共66頁(yè)。第20頁(yè)/共66頁(yè)第二十一頁(yè)，共66頁(yè)。第21頁(yè)/共66頁(yè)第二十二頁(yè)，共66頁(yè)。邏輯判斷及處理問題 化學(xué)品 環(huán)境 機(jī)器*色譜柱/保護(hù)柱*電源 *泵

8、*溶液*地線 *進(jìn)樣器*樣品(yngpn)*溫度 *檢測(cè)器*濕度 *數(shù)據(jù)處理單元*清潔程度第22頁(yè)/共66頁(yè)第二十三頁(yè)，共66頁(yè)。第23頁(yè)/共66頁(yè)第二十四頁(yè)，共66頁(yè)。第24頁(yè)/共66頁(yè)第二十五頁(yè)，共66頁(yè)。第25頁(yè)/共66頁(yè)第二十六頁(yè)，共66頁(yè)。第26頁(yè)/共66頁(yè)第二十七頁(yè)，共66頁(yè)。第27頁(yè)/共66頁(yè)第二十八頁(yè)，共66頁(yè)。第28頁(yè)/共66頁(yè)第二十九頁(yè)，共66頁(yè)。第29頁(yè)/共66頁(yè)第三十頁(yè)，共66頁(yè)。無樣品峰無樣品峰未進(jìn)樣未進(jìn)樣 泵未工作泵未工作漏液漏液流動(dòng)相或樣品的問題流動(dòng)相或樣品的問題柱子或保護(hù)柱的問題柱子或保護(hù)柱的問題數(shù)據(jù)采集裝置的問題或其與檢測(cè)器連線的問題數(shù)據(jù)采集裝置的問題或其與檢

9、測(cè)器連線的問題最簡(jiǎn)單快捷的檢查最簡(jiǎn)單快捷的檢查 - 泵是否工作泵是否工作, 系統(tǒng)是否漏液系統(tǒng)是否漏液, 進(jìn)一針丙酮溶液檢查檢測(cè)器讀數(shù)進(jìn)一針丙酮溶液檢查檢測(cè)器讀數(shù)(dsh)及及數(shù)據(jù)單元是否有響應(yīng)數(shù)據(jù)單元是否有響應(yīng) 第30頁(yè)/共66頁(yè)第三十一頁(yè)，共66頁(yè)。第31頁(yè)/共66頁(yè)第三十二頁(yè)，共66頁(yè)。第32頁(yè)/共66頁(yè)第三十三頁(yè)，共66頁(yè)。第33頁(yè)/共66頁(yè)第三十四頁(yè)，共66頁(yè)。1.壓力(yl)無現(xiàn)象判斷故障排除面版燈不亮電源不通檢查電源接頭松脫擰緊接頭泵頭漏液接口太松擰緊泵頭螺絲泵密封墊磨損更換密封墊第34頁(yè)/共66頁(yè)第三十五頁(yè)，共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除泵不送溶劑泵頭有氣泡排氣泡，溶劑需脫氣使用的溶

10、劑黏性太高換低黏性溶劑溶劑貯液器中過濾器臟清洗貯液瓶、過濾器，排空閥打開關(guān)閉排空閥控制器設(shè)定不正確設(shè)置正確流動(dòng)相不夠補(bǔ)足流動(dòng)相第35頁(yè)/共66頁(yè)第三十六頁(yè)，共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除壓力值高泵流速設(shè)定太高設(shè)定正確的流速流動(dòng)相使用不恰當(dāng)使用恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相緩沖結(jié)晶鹽沉淀沖洗樣品與流動(dòng)相不互溶稀釋或改變流動(dòng)相柱溫太低升高溫度色譜柱性能下降換柱2.壓力(yl)高第36頁(yè)/共66頁(yè)第三十七頁(yè)，共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除壓力值高溶劑貯液器中過濾器臟清洗鏈接管路阻塞沖洗，必要時(shí)更換進(jìn)樣閥阻塞沖洗進(jìn)樣器第37頁(yè)/共66頁(yè)第三十八頁(yè)，共66頁(yè)。現(xiàn)象判斷故障排除壓力值低泵流速設(shè)定太低設(shè)定正確的流速色譜柱選擇不恰當(dāng)更

11、換恰當(dāng)?shù)纳V柱柱溫過高降低柱溫系統(tǒng)漏液檢查漏液位置并維修流動(dòng)相使用不當(dāng)改變流動(dòng)相3.壓力(yl)低第38頁(yè)/共66頁(yè)第三十九頁(yè)，共66頁(yè)。4.壓力(yl)不穩(wěn)現(xiàn)象判斷故障排除壓力變化重現(xiàn)性好采用梯度所引起的壓力是正常泵內(nèi)有氣泡溶劑脫氣不適當(dāng)排氣泡，溶劑需脫氣壓力波動(dòng)泵密封墊損壞更換密封墊溶劑混合器故障清洗或更換混合器漏液連接口太松擰緊接口管路損壞更換第39頁(yè)/共66頁(yè)第四十頁(yè)，共66頁(yè)。1.峰前沿(qinyn)現(xiàn)象判斷故障排除峰前沿柱性能下降更換色譜柱保護(hù)柱失效換柱芯進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高降低進(jìn)樣體積或降低樣品濃度第40頁(yè)/共66頁(yè)第四十一頁(yè)，共66頁(yè)。2.峰拖尾現(xiàn)象判斷故障排除峰拖尾柱性

12、能下降更換色譜柱保護(hù)柱失效換柱芯色譜柱或保護(hù)柱被污染清洗柱或保護(hù)柱，必要時(shí)更換色譜柱選擇不當(dāng)選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱流動(dòng)相選擇不當(dāng)選擇恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相第41頁(yè)/共66頁(yè)第四十二頁(yè)，共66頁(yè)。3.峰變寬現(xiàn)象判斷故障排除峰變寬柱性能下降更換色譜柱保護(hù)柱失效換柱芯色譜柱或保護(hù)柱被污染清洗柱或保護(hù)柱，必要時(shí)更換色譜柱選擇不當(dāng)選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱流動(dòng)相選擇不當(dāng)選擇恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相流動(dòng)相流速太低調(diào)節(jié)流速第42頁(yè)/共66頁(yè)第四十三頁(yè)，共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除峰變寬緩沖液濃度太低增加濃度系統(tǒng)沒到達(dá)平衡使系統(tǒng)到達(dá)平衡進(jìn)樣器問題檢查進(jìn)樣器環(huán)境溫度變化使用柱溫箱漏夜檢查漏夜的位置并維修出現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)未被完全分離的物質(zhì)的峰選擇其它色譜

13、條件以改善分離效果檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大使用較小的時(shí)間常數(shù)第43頁(yè)/共66頁(yè)第四十四頁(yè)，共66頁(yè)。4.峰分叉(fn ch)現(xiàn)象判斷故障排除峰分叉柱性能下降更換色普柱保護(hù)柱失效換柱芯色譜柱或保護(hù)柱被污染清洗柱或保護(hù)柱，必要時(shí)更換進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高降低進(jìn)樣體積或降低樣品濃度樣品溶劑不溶流動(dòng)相改變?nèi)軇┗虿捎昧鲃?dòng)相溶解樣品第44頁(yè)/共66頁(yè)第四十五頁(yè)，共66頁(yè)。5.無峰現(xiàn)象判斷故障排除無峰檢測(cè)器參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤設(shè)置正確的檢測(cè)器參數(shù)樣品降解檢查樣品配制過程，更換樣品自動(dòng)進(jìn)樣器故障檢查進(jìn)樣器無樣品加樣品檢測(cè)器與數(shù)據(jù)處理裝置鏈接故障檢查并正確鏈接第45頁(yè)/共66頁(yè)第四十六頁(yè)，共66頁(yè)。6.負(fù)峰現(xiàn)象判斷故障排

14、除出現(xiàn)所有負(fù)峰連接數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)信號(hào)線接反正確連接記錄儀或檢測(cè)器信號(hào)極性相反改變極性設(shè)置出現(xiàn)一個(gè)或幾個(gè)負(fù)峰離子對(duì)分離體系對(duì)峰的影響在流動(dòng)相中溶解樣品使用的流動(dòng)相吸收高使用流動(dòng)相稀釋樣品自動(dòng)進(jìn)樣器注射進(jìn)空氣清洗自動(dòng)進(jìn)樣器第46頁(yè)/共66頁(yè)第四十七頁(yè)，共66頁(yè)。7.鬼峰現(xiàn)象判斷故障排除色譜圖出現(xiàn)鬼峰樣品前處理時(shí)產(chǎn)生降解或混入雜質(zhì)用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、檢查樣品處理過程，換新樣品前一次進(jìn)樣的洗脫物增加分析時(shí)間或梯度洗脫、提高流速、如問題仍存在，兩次進(jìn)樣間用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱注射器臟清洗注射器、沖洗進(jìn)樣口第47頁(yè)/共66頁(yè)第四十八頁(yè)，共66頁(yè)。現(xiàn)象判斷故障排除色譜圖出現(xiàn)鬼峰流動(dòng)相被污染清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過

15、濾器、使用HPLC級(jí)試劑柱被污染清洗柱或更換柱六通閥污染清洗六通閥檢測(cè)器污染清晰檢測(cè)器管路污染沖洗流動(dòng)相中含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑變化使用無防腐溶劑第48頁(yè)/共66頁(yè)第四十九頁(yè)，共66頁(yè)。8.保留(boli)時(shí)間變化現(xiàn)象判斷故障排除保留時(shí)間不重復(fù)系統(tǒng)不問或未達(dá)到平衡分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡室溫波動(dòng)大使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境柱被污染沖洗柱或更換柱溶劑配比不合適調(diào)節(jié)溶劑配比進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高減小進(jìn)樣體積第49頁(yè)/共66頁(yè)第五十頁(yè)，共66頁(yè)。9.保留(boli)時(shí)間不斷變化現(xiàn)象判斷故障排除保留時(shí)間不斷變化流速變化重新設(shè)定流速,檢查泵 是否正常工作系統(tǒng)沒有達(dá)到平衡分析之前

16、應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡柱被污染沖洗柱或更換柱流動(dòng)相被污染清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使用HPLC級(jí)試劑系統(tǒng)泄漏檢查并進(jìn)行維修第50頁(yè)/共66頁(yè)第五十一頁(yè)，共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除保留時(shí)間不斷變化流動(dòng)相脫氣不夠充分清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使用HPLC級(jí)試劑 室溫變化使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境柱恒溫箱設(shè)置有誤設(shè)置正確的溫度第51頁(yè)/共66頁(yè)第五十二頁(yè)，共66頁(yè)。10.基線漂移現(xiàn)象判斷故障排除基線漂移系統(tǒng)不穩(wěn)或沒有達(dá)到平衡分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡室溫不穩(wěn)使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境流動(dòng)相污染或分解清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使

17、用HPLC級(jí)試劑流動(dòng)相脫氣不充分脫氣重新平衡系統(tǒng)第52頁(yè)/共66頁(yè)第五十三頁(yè)，共66頁(yè)。現(xiàn)象判斷故障排除基線漂移流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化更改配比或流速柱被污染沖洗柱或更換柱固定相流失為說明問題存在，用一段連接管路代替色譜柱，通流動(dòng)相檢測(cè)基線檢測(cè)池被污染或有氣體用甲醇或其他強(qiáng)極性的溶劑沖洗流通池第53頁(yè)/共66頁(yè)第五十四頁(yè)，共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除基線漂移測(cè)定的波長(zhǎng)選擇有誤使用分光光度計(jì)說明背景吸收，如背景值高，說明流動(dòng)相含有紫外吸收化合物導(dǎo)致基線漂移。使用的流動(dòng)相應(yīng)在紫外截止波長(zhǎng)以外，或更換溶劑系統(tǒng)泄漏檢查并進(jìn)行維修樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)用強(qiáng)度合適的溶劑清洗色譜柱第54頁(yè)/共66頁(yè)第五十五頁(yè)，

18、共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除無規(guī)則基線噪音系統(tǒng)不穩(wěn)或沒有達(dá)到平衡分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡系統(tǒng)泄漏檢查并進(jìn)行維修流動(dòng)相污染或分解清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使用HPLC級(jí)試劑柱被污染沖洗柱或更換柱色譜柱填料流失或阻塞更換色譜柱11.無規(guī)則基線(jxin)噪音第55頁(yè)/共66頁(yè)第五十六頁(yè)，共66頁(yè)。現(xiàn)象判斷故障排除無規(guī)則基線噪音流動(dòng)相混合不均或混合器工作不正常維修或更換混合器檢測(cè)池被污染或用甲醇或其他強(qiáng)極性的溶劑沖洗流通池系統(tǒng)內(nèi)有氣泡用強(qiáng)極性的溶劑清洗系統(tǒng)檢測(cè)器內(nèi)有氣泡清洗檢測(cè)器，在檢測(cè)器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器檢測(cè)器燈能量不足更換燈第56頁(yè)/共66頁(yè)第五十七頁(yè)，共66頁(yè)。12.規(guī)則(

19、guz)基線噪音現(xiàn)象判斷故障排除規(guī)則基線噪音流動(dòng)相、檢測(cè)器或泵內(nèi)有氣泡流動(dòng)相脫氣，沖洗系統(tǒng)除去檢測(cè)器或泵內(nèi)的空氣室溫不穩(wěn)穩(wěn)定環(huán)境溫度。使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境流動(dòng)相回收使用除非特殊需要不使用回收溶劑流動(dòng)相混合不完全使流動(dòng)相混合均勻或使用低黏度的溶劑第57頁(yè)/共66頁(yè)第五十八頁(yè)，共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除規(guī)則基線噪音泵振動(dòng)在系統(tǒng)中假如脈沖阻尼器泵入口管路松或阻塞檢查泵入口管路在同一水平上有其他設(shè)備關(guān)掉儀器，檢查干擾是否來自于外部第58頁(yè)/共66頁(yè)第五十九頁(yè)，共66頁(yè)。1.定量(dngling)結(jié)果現(xiàn)象判斷故障排除精密度降低樣品預(yù)處理時(shí)樣品降解或混入雜質(zhì)用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、檢查樣品處理過程，換新樣品保留時(shí)間改變，峰形不正常見“峰形不正?！钡墓收吓懦椒z測(cè)器響應(yīng)故障檢查檢測(cè)器第59頁(yè)/共66頁(yè)第六十頁(yè)，共66頁(yè)?，F(xiàn)象判斷故障排除精密度降低峰積分不