SOP標(biāo)準(zhǔn)操作程序-CREA

1、sop 標(biāo)準(zhǔn)操作程序crea 肌酐 （貨號(hào) ：osr6178）實(shí)驗(yàn)原理：肌酐測量用于診斷和治療腎臟疾病。血清肌酐測定被證明在評價(jià)腎小球功能和監(jiān)測腎透析方面是有用的。但是，血清水平對于早期腎損壞并不敏感，在治療腎衰竭的過程中，它對血液透析的反應(yīng)比尿素氮（bun ）慢得多。血清肌酐和bun 都用來區(qū)分腎前性氮質(zhì)血癥和腎后性（梗阻性的）氮質(zhì)血癥。血清bun 的增加并不伴隨血清肌酐的增加對于識(shí)別腎前性氮質(zhì)血癥是非常重要的。對于腎后性氮質(zhì)血癥，血清bun 和肌酐都增加，但是增加并不是成比例地大于bun 。血清肌酐水平隨人的年齡，體重和性別而變化。有時(shí)它在肌肉塊少，惡病質(zhì)的病人，截肢者和老年人中的水平較低

2、。血清肌酐水平正常并不排除腎功能受損。方法奧林巴斯 au640 肌酐的測定是jaffe 方法的改良動(dòng)力學(xué)法2，在這種方法中，肌酐在堿性條件下和苦味酸發(fā)生反應(yīng)，形成一種紅-橙色化合物。但是，這個(gè)反應(yīng)并不是肌酐所特有的，因?yàn)槠渌奈镔|(zhì)，如葡萄糖， 丙酮酸鹽， 抗壞血酸和乙酰乙酸鹽與苦味酸也會(huì)發(fā)生反應(yīng)，生成相似的顏色3。fabiny 和 ertingshausen4發(fā)現(xiàn)，堿性肌酐苦味酸達(dá)到最大顏色變化與假性肌酐有不同的速率。cook5利用堿性苦味酸陽性物質(zhì)不同的反應(yīng)速率得到比jaffe 反應(yīng)更有針對性的結(jié)果。在 520/800nm 吸光度變化率與標(biāo)本中肌酐濃度成正比。肌酐+苦味酸- 紅-橙色化合物標(biāo)

3、本：病人準(zhǔn)備 ：無特殊要求。類型： 標(biāo)本最好是無溶血的血清或肝素化的血漿。血清應(yīng)從紅血球中盡快分離出來。標(biāo)本穩(wěn)定性：血清肌酐在28下穩(wěn)定 7 天，在冰凍條件下（-20）可長時(shí)間保存。儀器與材料 : 儀器 ：奧林巴斯au640 生化分析儀材料 ：奧林巴斯au640 肌酐參與反應(yīng)成份的最終濃度：氫氧化鈉120 mmol/l 苦味酸2.9 mmol/l 其中含有保護(hù)劑。注意 ：1. 此試劑為體外診斷用，不要吞服。2. r1 有腐蝕性，可燃燒。不要入口。避免和眼睛，皮膚或衣服接觸。如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15 分鐘，并尋找醫(yī)療保護(hù)。3. r2 有毒，不要入口。 如果外部接觸到， 立即

4、用大量的水沖洗受損害的部位15 分鐘。接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護(hù)。4. r2 含有苦味酸，快速加熱或撞擊會(huì)導(dǎo)致干燥苦味酸的爆炸。用水稀釋濺出來的液體并擦拭干凈。試驗(yàn)用試管的直徑在1216mm。定標(biāo)液： 奧林巴斯定標(biāo)液 （cat. no. dr0040 ）用于血清， nerl 水性 100mg/dl 標(biāo)準(zhǔn)（#5045）用于尿。試劑準(zhǔn)備 ：奧林巴斯au640 的肌酐是即開即用的。無需特殊準(zhǔn)備。執(zhí)行參數(shù) （性能參數(shù)）：以下數(shù)據(jù)是根據(jù)奧林巴斯au640 肌酐試劑已經(jīng)建立的程序。精密度 ：精密度的評估是根據(jù)nccls 推薦的典型方法10，au640 批內(nèi)精密度小于3%，總精密度小于5%。用于分析

5、的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的nccls 的規(guī)則。血清：n=100 批內(nèi)精密度總精密度平均值（ mg/dl ）sd cv% sd cv% 0.80 0.0 0.0 0.0 0.0 5.6 0.05 0.8 0.09 1.5 6.04 0.04 0.7 0.07 1.1 尿：n=100 批內(nèi)精密度總精密度平均值（ mg/dl ）sd cv% sd cv% 96.5 0.6 0.6 1.0 1.0 195.9 1.1 0.5 2.5 1.3 方法學(xué)比較 ：血清： 奧林巴斯au640 肌酐（方法1）與其它奧林巴斯分析儀器（方法2） ，共同做176 個(gè)病人標(biāo)本。相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.9998，回歸方程如下：

6、肌酐方法1=（肌酐方法21. 027）-0.01 病人結(jié)果數(shù)值分布：0.225.4 mg/dl 尿： 奧林巴斯 au640 肌酐（方法1）與其它奧林巴斯分析儀器（方法2） ，共同做 176 個(gè)病人標(biāo)本。相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.9998，回歸方程如下：肌酐方法1=（肌酐方法21. 000）+0.9 病人結(jié)果數(shù)值分布：11281 mg/dl敏感度 ：在奧林巴斯au640 生化分析儀上每分鐘變化8 毫吸光度為1 mg/dl。試劑的貯存 ：1.當(dāng)保存于28，不開蓋情況下至標(biāo)簽的失效期。2.開蓋后放于儀器的冰箱中可以穩(wěn)定14 天。變質(zhì)指示 ：任何試劑有濁度或r1 有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。校準(zhǔn)：標(biāo)

7、準(zhǔn)液的準(zhǔn)備：奧林巴斯定標(biāo)液（cat. no. dr0040 ） 。奧林巴斯定標(biāo)液是即開即用的，無需特殊準(zhǔn)備。校準(zhǔn)程序 ：每 7 天需要定標(biāo)一次。肌酐定標(biāo)程序用奧林巴斯定標(biāo)物，可追蹤到全國科學(xué)技術(shù)學(xué)會(huì)（ nist）標(biāo)準(zhǔn)參考材料（srm）914a。當(dāng)有以下情況時(shí)需要重新定標(biāo)：1 換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)。2 當(dāng)打開使用一瓶新的試劑時(shí)。3 當(dāng)儀器做完保養(yǎng)后。4 重要零件更換時(shí)。質(zhì)控：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把奧林巴斯水平i 與 ii 質(zhì)控血清（ dr0061&62 ）作為未知標(biāo)本進(jìn)行分析。在所有的尿測定中，尿質(zhì)控應(yīng)用于所有的尿測定中，如bio-rad 尿化學(xué)質(zhì)控。操作程序（逐步地）：au640

8、開機(jī)1.確認(rèn)兩瓶清洗劑有足夠的量。2.打開蒸餾水供應(yīng)系統(tǒng)的閥門。3.如果沒有設(shè)定自動(dòng)開機(jī)，請按分析儀器上的power on 鍵。4.確認(rèn)打印機(jī)為開機(jī)并處于聯(lián)機(jī)狀態(tài)。5.在start condition 屏幕，輸入所需信息，并按f2 退出。6.如果要求輸入密碼，請輸入密碼。7.確認(rèn)儀器上的在線試劑的位置是否正確、數(shù)量（體積）是否充足，不足請?zhí)砑硬⒃谙到y(tǒng)狀態(tài)中的試劑狀態(tài)檢查試劑。8.在急診臺(tái)wash1 的位置的試管中加滿一支1n hcl 的樣品針清洗液。9. ise（電極）需要以下步驟定標(biāo)：a.在急診臺(tái)相應(yīng)位置放血清/尿高和低值標(biāo)準(zhǔn)液。b.在系統(tǒng)狀態(tài)菜單選擇ise 狀態(tài)菜單。c.選擇 f5，選定合

9、適的定標(biāo)條目。d.定標(biāo)完成后，確認(rèn)斜率和因數(shù)是否在范圍內(nèi)。開始分析 : 1.把定標(biāo)、質(zhì)控、和標(biāo)本架放在架子傳送帶上。2.用鼠標(biāo)點(diǎn)擊屏幕最上方的start anal yzer 圖標(biāo)。3.點(diǎn)擊 f2 退出鍵，退回到主屏幕。分析參數(shù)血清：樣品體積20 微升稀釋水0 微升試劑 1 體積120微升稀釋水90 微升試劑 2 體積120微升稀釋水0 微升波長520/800 方法fixed 讀點(diǎn)13/24 溫度37尿樣品體積5微升稀釋水0 微升試劑 1 體積120微升稀釋水0 微升試劑 2 體積60 微升稀釋水0 微升波長520/800 方法fixed 讀點(diǎn)13/27 溫度37完整的實(shí)驗(yàn)參數(shù)與操作程序可以在a

10、u640 用戶手冊中查到。計(jì)算：無需手工計(jì)算，在37每個(gè)標(biāo)本的結(jié)果自動(dòng)以mg/dl 打印。報(bào)告結(jié)果 : 參考范圍 ：參考值：血清：男性：0.7-1.3mg/dl 女性：0.6-1.2mg/dl 尿：男性：14-26mg/kg/24hr 女性：11-20mg/ kg/24hr 參考值因性別、 年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。血清結(jié)果來自德克薩斯州北部300 個(gè)獻(xiàn)血者。不正常結(jié)果的處理程序：根據(jù)儀器參數(shù)的正常值會(huì)打印異常標(biāo)志。報(bào)告格式：自動(dòng)地打印37 mg/dl 的報(bào)告，如果以si 單位（ mmol/dl ）報(bào)告結(jié)果，要乘以88.4。操作過程注意

11、事項(xiàng)：操作過程的限制性：olympusau640 血清測定的肌酐的線性范圍是0.225.0 mg/dl ，尿測定的線性范圍是1300 mg/dl ，樣品濃度超過線性上限應(yīng)稀釋重做。在au640 中應(yīng)用自動(dòng)重做功能，標(biāo)本稀釋重做后會(huì)自動(dòng)乘以稀釋倍數(shù)。超范圍的標(biāo)本也可以在四份生理鹽水中加一份血清進(jìn)行手工稀釋，輕輕地混勻，在au640上當(dāng)常規(guī)標(biāo)本，結(jié)果乘以5。干擾物質(zhì) ：研究結(jié)果表明肌酐受以下物質(zhì)干擾7：乳糜乳糜達(dá)到1000mg/dl 時(shí)影響小于3% 溶血血紅蛋白達(dá)到500mg/dl 時(shí)影響小于3% 膽紅素膽紅素達(dá)到40mg/dl 時(shí)影響小于3% 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)達(dá)到1.2 到 12g/dl 時(shí)影響小于

12、3% olympus 的研究結(jié)果是根據(jù)現(xiàn)時(shí)發(fā)表的文獻(xiàn)，olympus 美國公司正在進(jìn)行準(zhǔn)確性的研究，對于其它物質(zhì)的干擾，請參看young8和 friedman11等人發(fā)表的文獻(xiàn)。參考文獻(xiàn)：1.tietz,n.w.(ed),textbook of clinical chemistry,w.b. saunders,1986. 2.jaffe,m.z.physiol chem,10:391,1886. 3.soldin,s.j. et al.,clin biochem,11:82,1987. 4.fabiny,d.l. and ertingshausen,g.,clin chem,17:696,1971. 5.cook,j.g.h.,clin chem acta,32:485,1971. 6.tietz,n.w.(ed),fundamentals of clinical chemistry,3rd edition,w.b.saunders,1987. 7.nccls,interference testing in clincial chemistry,ep7-p,1986. 8.young,d.s.,effects of drugs on