植物磷含量的測定(鉬銻抗比色法)

1、植物磷含量的測定（鉬銻抗比色法）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握鉬銻抗比色法測定磷的方法。2練習(xí)實(shí)際測量以及定容的操作。3練習(xí)分光光度計(jì)的使用。二、實(shí)驗(yàn)原理植物樣品經(jīng)消煮使各種形態(tài)的磷轉(zhuǎn)變成磷酸鹽。在一定酸度下,待測液中的正磷酸與鉬酸銨和酒石酸銻鉀生成一種三元雜多酸,后者在室溫下能迅速被抗壞血酸還原為藍(lán)色絡(luò)合物 ,可用吸光光度法測定。三、實(shí)驗(yàn)試劑（1）2mol/l naoh 溶液（2）0.2%二硝基酚指示劑（3）0.5mol/l h2so4硫酸溶液 :28ml 濃 h2so4 加水稀釋至 1l。（4）鉬銻貯存溶液：量取153ml濃硫酸 (分析純，密度1.84g/ml) ，緩緩加入到400ml蒸餾水中，不斷攪

2、拌，冷卻。 另稱取經(jīng)磨細(xì)的鉬酸銨 (nh4)6mo7o24 h2o，分析純 10g溶于溫度約 60300ml水中，冷卻。然后將硫酸溶液緩緩倒入鉬酸銨溶液中。再加入0.5酒石酸銻鉀 ksboc4h4o6 1/2h2o，分析純 溶液100ml，冷卻后， 加水稀釋至 1000ml，搖勻，貯于棕色試劑瓶中，此貯備液含鉬酸銨 1，硫酸 2.75mol/l。（5）鉬銻抗顯色劑：稱取1.50g抗壞血酸溶于 100ml鉬銻貯存溶液中，此溶液有效期不長，宜隨配隨用。（6） 5mg/l 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液： 0.4394g在 50烘干的磷酸二氫鉀 (kh2po4。分析純 )，100ml水，加 5ml 濃硫酸 (防腐 )，

3、用水定容到1l，濃度為 100mg/l磷(p)，此溶液可以長期保存。吸取上述溶液10ml于 200ml容量瓶中，加水至標(biāo)度，濃度為5mg/l 磷(p)標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液不宜久存。四、實(shí)驗(yàn)步驟1、吸取定容過濾或澄清后的消煮液2.005.00ml(v2,含 p5 30ug) 于 50ml容量瓶中 , 用水稀釋至約20ml,加 12滴二硝基酚指示劑 ,滴加 2mol/l naoh 溶液中和至剛呈黃色 ,再加入 1滴 0.5mol/l h2so4 溶液 ,使溶液的黃色剛剛褪去呈淡黃色 ,然后加入鉬銻抗顯色劑5.00ml,搖勻 ,用水定容 (v3)。在室溫高于15的條件下放置 30min后,用 1cm光徑

4、比色槽在波長700nm處測定吸光度 ,以空白溶液為參比調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)。2、校準(zhǔn)曲線或直線回歸方程: 準(zhǔn)確吸取 (p)= 5mg/l標(biāo)準(zhǔn)工作溶液0, 1, 2, 4, 6, 8 ml, 分別放入 50ml 容量瓶中 ,加水至 20ml,同上步驟顯色并定容, 即得 0,0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 mg/l p標(biāo)準(zhǔn)系列溶液 , 與待測液同時(shí)測定 ,讀取吸光度 ,然后繪制校準(zhǔn)曲線或直線回歸方程。五、結(jié)果計(jì)算 wp=610m(v1/v2)v3c1000 式中 : wp植物磷的質(zhì)量分?jǐn)?shù),g/kg; c從校準(zhǔn)曲線或回歸方程求得的顯色液中磷的質(zhì)量濃度, mg/l; v1消煮液定容體積, ml; v2吸取測定的消煮液體積, ml; v3顯色液體積 , ml; m稱樣量 ,g; 六、注意事項(xiàng)1、室溫低于 15時(shí)，可