基因表達(dá)的調(diào)節(jié)PPT

1、12l基因表達(dá)（gene expression）：基因被轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生RNA，編碼著蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)信息的mRNA被翻譯成蛋白質(zhì)，總之，基因的信息被轉(zhuǎn)錄，翻譯成終產(chǎn)物的過程稱為基因表達(dá)。一一. 引論引論a. 基因的多樣性及表達(dá)的差異性 細(xì)胞在任何給定的時(shí)間內(nèi)都表達(dá)的基因只有一小部分；3l肽鏈延長因子，細(xì)菌細(xì)胞中大量存在的蛋白質(zhì)（基因產(chǎn)物）之一；lDNA損傷修復(fù)酶，每個(gè)細(xì)胞只有幾個(gè)拷貝；l代謝途徑的酶，因食物來源不同而變化數(shù)量；l一些影響細(xì)胞分化的蛋白只存在極短時(shí)間。b. 基因表達(dá)的調(diào)節(jié)是細(xì)胞代謝平衡及維持發(fā)育期間不同細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能差異的關(guān)鍵；c. 蛋白質(zhì)（或RNA）在細(xì)胞內(nèi)濃度可以在六個(gè)水平上被調(diào)節(jié)；4

2、lRNA的轉(zhuǎn)錄；lmRNA的轉(zhuǎn)錄后修飾和加工；lmRNA的降解；l蛋白質(zhì)合成（翻譯）；l翻譯后修飾；l蛋白質(zhì)降解； 所有以上過程，轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)了解的最多也是最主要的。5二二. 轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)的方式轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)的方式 基因產(chǎn)物的功能不同，調(diào)節(jié)方式也不同1. Housekeeping genes（看家基因，持家基因）或稱組成型表達(dá)基因（constitute expression gene） 這些基因的產(chǎn)物是所有細(xì)胞，所有時(shí)候都需要的，基因的表達(dá)水平相對(duì)穩(wěn)定；2. 因?yàn)槟撤N信號(hào)分子的出現(xiàn)引起表達(dá)增加的基因稱為可誘導(dǎo)（inducible）的基因，由于信號(hào)分子的出現(xiàn)導(dǎo)致基因表達(dá)增加的過程稱誘導(dǎo)作用（in

3、duction）；63. 因?yàn)槟撤N信號(hào)分子濃度的增加而表達(dá)減少的基因稱為可阻遏（repressible）基因，由于信號(hào)分子的出現(xiàn)導(dǎo)致基因表達(dá)減少的過程稱阻遏作用（repression）； 基因表達(dá)的調(diào)節(jié)是由蛋白質(zhì)和DNA之間的相互作用介導(dǎo)的。三三. 啟動(dòng)子調(diào)節(jié)（啟動(dòng)子調(diào)節(jié)（promoter） 原核啟動(dòng)子與RNA多聚酶的親和力決定轉(zhuǎn)錄起始頻率，相差可達(dá)1000倍以上。78四四. 能與能與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因子的調(diào)節(jié)結(jié)合的蛋白質(zhì)因子的調(diào)節(jié)1. 特異性因子：能促使RNA多聚酶對(duì)特定的一些啟動(dòng)子的結(jié)合的蛋白質(zhì)因子（70普通因子；32，for heat shock）；2. 阻遏子（repressors）

4、：能結(jié)合于啟動(dòng)子阻遏RNA多聚酶與起動(dòng)子結(jié)合的蛋白質(zhì)因子；3. 激活子（activators）：真核生物稱反激活子，能結(jié)合于啟動(dòng)子附近增加RNA多聚酶和啟動(dòng)子結(jié)合的蛋白質(zhì)因子。9l由一種阻遏蛋白阻斷轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)稱為負(fù)調(diào)節(jié)（negative regulation）；l由激活子增加轉(zhuǎn)錄作用的調(diào)節(jié)稱為正調(diào)節(jié)（positive regulation）；五五. 許多原核基因是以操縱子（許多原核基因是以操縱子（operon）為為單位調(diào)節(jié)的，操縱子是細(xì)菌基因表達(dá)的單位調(diào)節(jié)的，操縱子是細(xì)菌基因表達(dá)的調(diào)節(jié)單位（調(diào)節(jié)單位（unit），），包括結(jié)構(gòu)基因和由調(diào)包括結(jié)構(gòu)基因和由調(diào)節(jié)子基因產(chǎn)物識(shí)別的節(jié)子基因產(chǎn)物識(shí)別的DNA

5、控制元件（序控制元件（序列）。一個(gè)操縱子通常有列）。一個(gè)操縱子通常有2-6個(gè)基因，最個(gè)基因，最多可含多可含20多個(gè)基因，是細(xì)菌普遍的基因多個(gè)基因，是細(xì)菌普遍的基因表達(dá)調(diào)控方式；表達(dá)調(diào)控方式；1. 乳糖操縱子（乳糖操縱子（Lac operon）10112. 乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控 組成型（constitute）突變確定阻遏子的負(fù)調(diào)控作用a. Lac I 基因的突變或缺失造成LacZ，Y，A的組成型表達(dá)；l部份二倍體lac I/lac I+ 恢復(fù)正常的調(diào)控，說明lac I是反式作用因子（trans acting factor，有游離轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，因而功能可以互補(bǔ)于另一同源染色體的等位基因

6、位點(diǎn)。12b. 操縱基因（operator）為順式顯性因子（cis-acting，cis-dominant），它的突變?cè)斐伤掠位虻慕M成型表達(dá)；l順式行為因子：只調(diào)節(jié)與它共價(jià)相連的基因表達(dá)的DNA順序單位，一般無轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物；3. Lac operon的正調(diào)節(jié)的正調(diào)節(jié) 可誘導(dǎo)的分解代謝操縱子受CAP蛋白的總調(diào)節(jié)（global control）；13a. 當(dāng)E.coli生長在含葡萄糖的介質(zhì)中時(shí)，許多其它糖類分解代謝酶基因的表達(dá)受到抑制，在有葡萄糖存在時(shí)，細(xì)菌優(yōu)先利用葡萄糖；b. 葡萄糖降低細(xì)胞中c-AMP的濃度，抑制了其它糖代謝基因的表達(dá)；c. CAP蛋白（Catabolite gene Acti

7、vation Protein，CAP，分解代謝基因激活蛋白） 與c-AMP結(jié)合形成活性結(jié)構(gòu)，結(jié)合在啟動(dòng)子上游DNA順序，促進(jìn)RNA多聚酶對(duì)啟動(dòng)子的結(jié)合和Lac mRNA的轉(zhuǎn)14 錄，CAP的結(jié)合使Lac操縱子的表達(dá)增強(qiáng)50倍。lcrp基因（cAMP receptor protein，CRP）：與腺苷酸環(huán)化酶基因突變抑制Lac opreon的表達(dá)。lCAP的作用位點(diǎn)（見圖）： Lac -72 to-52，gal -50 to -23，ara -107 to -78，可能的作用方式模型I. CAP-RNA多聚酶相互作用形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物；II. CAP彎曲所結(jié)合的DNA片斷，幫助RNA多聚酶轉(zhuǎn)錄復(fù)合物

8、的形成；1516l由于CAP是除葡萄糖以外的許多糖分解代謝操縱子的正調(diào)節(jié)因子，這種受一種調(diào)節(jié)蛋白所控制的操縱子網(wǎng)絡(luò)總稱調(diào)節(jié)網(wǎng)（regulon）。III. CAP受cAMP的激活，促進(jìn)Lac mRNA的轉(zhuǎn)錄；IV. 葡萄糖存在時(shí)cAMP的水平下降，結(jié)果是葡萄糖存在時(shí)，E.coli先利用葡萄糖不用乳糖。乳糖操縱子的三種狀態(tài)表明只有阻遏蛋白不在而cAMP-CAP存在時(shí)Lac mRNA才被大量轉(zhuǎn)錄。1718六六. 調(diào)節(jié)蛋白與調(diào)節(jié)蛋白與DNA的結(jié)合的結(jié)合1. 調(diào)節(jié)蛋白有著獨(dú)特的與DNA結(jié)合的特殊結(jié)構(gòu)域（domain），結(jié)合DNA特殊順序的能力比普通順序高出105-107倍。 用于與DNA結(jié)合的是調(diào)節(jié)蛋白

9、中的幾個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)元件的固定組合，稱為模序（或模體，motif），motif是核酸或蛋白質(zhì)中的超二級(jí)結(jié)構(gòu)。a. 在雙螺旋DNA的大溝與小溝中有著可供識(shí)別的堿基上的氫鍵供體和受體及疏水基團(tuán)；1920b. 調(diào)節(jié)蛋白識(shí)別結(jié)構(gòu)模序中常含Asn，Gln，Lys或Arg，可與堿基形成氫鍵；212. 調(diào)節(jié)蛋白與DNA結(jié)合motif的結(jié)構(gòu)類型a. 螺旋轉(zhuǎn)角螺旋（Helix-Turn-Helix） 這種結(jié)構(gòu)含兩個(gè)-螺旋（79個(gè)氨基酸)由-轉(zhuǎn)角（20個(gè)氨基酸）連系，其中一個(gè)螺旋為識(shí)別螺旋，通常含有許多與DNA接觸的氨基酸殘基，位于大溝之中；b. 鋅指（Zinc Finger） 真核生物調(diào)節(jié)蛋白常含有許多由30個(gè)氨2

10、223 基酸組成的“鋅指”，其中4個(gè)AA殘基（4個(gè)Cys或2個(gè)Cys2個(gè)His），配位結(jié)合著鋅粒子，形成指狀結(jié)構(gòu)。3. 調(diào)節(jié)蛋白還和其他蛋白相互作用 調(diào)節(jié)蛋白的其它結(jié)構(gòu)域參加與RNA多聚酶結(jié)合或者與同一種蛋白結(jié)合成二聚體或多聚體。l介導(dǎo)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用的結(jié)構(gòu)模序具有特征性，如轉(zhuǎn)錄輔因子中的亮氨酸拉鏈（Leucine Zipper），-螺旋中每 24252627 7個(gè)氨基酸出現(xiàn)一個(gè)Leu。28七七. 阿拉伯糖操縱子：一種既進(jìn)行正調(diào)節(jié)也阿拉伯糖操縱子：一種既進(jìn)行正調(diào)節(jié)也能起負(fù)調(diào)節(jié)作用的調(diào)節(jié)蛋白。能起負(fù)調(diào)節(jié)作用的調(diào)節(jié)蛋白。 ara operon調(diào)節(jié)方法：幾種特殊的調(diào)節(jié)機(jī)制。1. araC蛋白既能

11、進(jìn)行正調(diào)控也能進(jìn)行負(fù)調(diào)控，信號(hào)分子的結(jié)合使它由阻遏子變構(gòu)成激活子；292. araC蛋白調(diào)節(jié)它本身基因的表達(dá)。當(dāng)它細(xì)胞內(nèi)含量多時(shí)阻遏自己基因轉(zhuǎn)錄，這種現(xiàn)象叫自我調(diào)節(jié)（autoregulation）；3. 一些調(diào)節(jié)順序能遠(yuǎn)距離起作用，通過蛋白對(duì)蛋白和蛋白對(duì)DNA的互相作用把遠(yuǎn)距離順序靠DNA的環(huán)化（DNA looping）引到啟動(dòng)子附近，這種特點(diǎn)使ara調(diào)節(jié)系統(tǒng)成為真核生物基因遠(yuǎn)距離調(diào)控的一個(gè)重要范例。a. ara operon的組成30 三個(gè)結(jié)構(gòu)基因ara A，B，D編碼著阿拉伯糖異構(gòu)酶，核酮糖激酶，5磷酸核酮糖差向異構(gòu)酶，通過三步反應(yīng)把a(bǔ)ra變Xyl5P （5磷酸木糖），一個(gè)五碳糖代謝的中間

12、體）； ara操縱子的調(diào)節(jié)蛋白araC基因在ara操縱子的上游。在ara operon有三個(gè)araC的結(jié)合順序araO1，O2，I，還有CAP結(jié)合位點(diǎn)，結(jié)構(gòu)基因ara BAD轉(zhuǎn)錄方向與araC mRNA相反； 313233b. 當(dāng)細(xì)胞中araC蛋白濃度超過40 copies/cell，它結(jié)合O1，阻止自身基因的轉(zhuǎn)錄了；c. araC既是阿拉伯糖操縱子的正調(diào)節(jié)因子，又是負(fù)調(diào)控因子。（1）當(dāng)glucose豐富而ara不存在時(shí)araC結(jié)合于araO1，O2和I ，結(jié)合在O2和I上的araC蛋白相結(jié)合使DNA形成一個(gè)環(huán)，阻止araBAD基因的轉(zhuǎn)錄；（2）當(dāng)葡萄糖不存在（或低水平）而ara糖存在時(shí)，此時(shí)

13、CAP-cAMP結(jié)合于araI附34 近，arabinose作為誘導(dǎo)物與araC結(jié)合改變的蛋白的構(gòu)象結(jié)合于araI，成為基因激活子和CAP-cAMP協(xié)調(diào)作用以誘導(dǎo)araBAD基因的轉(zhuǎn)錄；（3）ara，glu都存在或（4）都不存在時(shí)，操縱子都處阻遏狀態(tài)； 以上事實(shí)說明ara operon是個(gè)復(fù)雜的調(diào)節(jié)系統(tǒng)，對(duì)環(huán)境改變可提供迅速的可逆反應(yīng)。3536八八. 色氨酸操縱子的雙重控制色氨酸操縱子的雙重控制1. 色氨酸操縱子是可以阻遏的色氨酸操縱子是可以阻遏的 終產(chǎn)物色氨酸為輔阻遏子(co-repressor) promoter 40到+18 oprerator 10（23到3） RNA polymera

14、se與repressor對(duì)promoter的結(jié)合互相排斥； 基線水平表達(dá)（basal或repressed level）2. 色氨酸操縱子還被轉(zhuǎn)錄弱化作用控制色氨酸操縱子還被轉(zhuǎn)錄弱化作用控制373839 弱化子（或衰減子，Attenuator）：能使弱化作用發(fā)生的DNA順序（轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA兩種不同的二級(jí)結(jié)構(gòu)控制后續(xù)的轉(zhuǎn)錄）。 色氨酸操縱子mRNA的前導(dǎo)順序（leader sequence）有不同的堿基配對(duì)結(jié)構(gòu)。 轉(zhuǎn)錄衰減機(jī)制：由于轉(zhuǎn)錄和翻譯偶聯(lián)，前導(dǎo)順序中富含色氨酸密碼，可作為細(xì)胞中色氨酸濃度的傳感器，前導(dǎo)肽合成的速度影響核糖體的位置，進(jìn)而影響前導(dǎo)順序的二級(jí)結(jié)構(gòu)。4041l當(dāng)色氨酸豐富時(shí)，終止子

15、結(jié)構(gòu)形成；l當(dāng)色氨酸處于饑餓狀態(tài)時(shí)，終止子順序不形成有效的轉(zhuǎn)錄終止結(jié)構(gòu)，使mRNA的轉(zhuǎn)錄得以繼續(xù)；4243l弱化作用：用與翻譯偶聯(lián)的轉(zhuǎn)錄終止作用來調(diào)節(jié)一個(gè)細(xì)菌操縱子的表達(dá)的過程。3. 弱化子調(diào)節(jié)的普遍性弱化子調(diào)節(jié)的普遍性 多價(jià)阻遏（multivalent repression）：前導(dǎo)肽中有兩種或兩種以上用于弱化調(diào)節(jié)作用的氨基酸殘基的現(xiàn)象。4445lSOS反應(yīng)的誘導(dǎo)反應(yīng)的誘導(dǎo) SOS rugulon的調(diào)節(jié)蛋白LexA和RecA LexA阻遏子，調(diào)節(jié)所有SOS基因，能在Ala-Gly肽鍵發(fā)生自我切割而滅活，激活所有的SOS基因； RecA蛋白，多功能蛋白，被單鏈DNA激活，能使同源DNA順序交叉互

16、換，有ATPase活性，同時(shí)還是蛋白酶和輔蛋白酶（coprotease）活性。4647lSOS反應(yīng)48lSOS反應(yīng)誘導(dǎo)的部分基因 基因 功能 pol B DNA多聚酶II uvrA,B,C 核苷酸切割修復(fù)內(nèi)切酶 umuC,D 差錯(cuò)傾向修復(fù)所需 recA 49lDNA損傷觸發(fā)SOS反應(yīng)是由一種阻遏蛋白水解導(dǎo)致的； recA蛋白是一種多功能蛋白，當(dāng)它和ssDNA結(jié)合時(shí)，它有蛋白水解酶活性； LexA蛋白是recA合成的阻遏子； LexA蛋白被recA水解造成recA蛋白本身及其他蛋白的合成；5051九九. 噬菌體噬菌體的發(fā)育調(diào)控的發(fā)育調(diào)控l 的轉(zhuǎn)錄調(diào)控用級(jí)聯(lián)（cascade）調(diào)控方法，為了有序地組

17、裝噬菌體顆粒，把基因分組分階段表達(dá)；l 決定溶源化或溶菌命運(yùn)的調(diào)控，為了解真核生物的發(fā)育調(diào)控提供了一種模式。521. 溶菌（Lysis）和溶源化（Lysogeny） 進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞后的兩種命運(yùn)： 溶菌周期（lytic cycle）：新一代噬菌體顆粒產(chǎn)生并導(dǎo)致細(xì)胞溶解； 溶源化：噬菌體DNA在寄主染色體上整合，并隨寄主DNA復(fù)制傳代的過程。535455l的調(diào)節(jié)因子及功能 調(diào)節(jié)因子 功能 cI 阻遏子，在PR和PL的阻遏子， PRM的激活子，也是PRM的阻遏子 cII PRE和Pint的激活子 Cro 反阻遏子PRM的阻遏子，高濃度 時(shí)也阻遏PR,PL N 作用于tL1，tR1,tR2的反終止子 Q

18、 后期基因轉(zhuǎn)錄的反終止子56啟動(dòng)子 PR 右向轉(zhuǎn)錄主啟動(dòng)子 PL 左向轉(zhuǎn)錄主啟動(dòng)子 PRM cI基因啟動(dòng)子（用于溶原維持） PRE cI基因啟動(dòng)子（用于溶原建立） Pint 整合和切出有關(guān)基因啟動(dòng)子57環(huán)化噬菌體遺傳圖582. 溶菌和溶原的選擇是五種調(diào)節(jié)蛋白cI，cII，Cro，N，Q作用于調(diào)節(jié)順序的結(jié)果，它們調(diào)節(jié)不同啟動(dòng)子上的轉(zhuǎn)錄；59606162l溶菌 a. 寄主RNA多聚酶轉(zhuǎn)錄前早期蛋白N，Cro，cII； b. N蛋白在nutR，nutL與RNA多聚酶結(jié)合使之通讀tL1，tR1，tR2，產(chǎn)生Q蛋白； c. Q蛋白使后期基因得以轉(zhuǎn)錄表達(dá)， 完成溶菌周期，細(xì)胞溶解；l反終止蛋白（Antit

19、ermination protein）：能使RNA聚合酶通過終止點(diǎn)而繼續(xù)轉(zhuǎn)錄的蛋白。63644.溶原的建立和維持（1）的溶原化是由cII基因產(chǎn)物cII蛋白支配的，cII激活子刺激從PRE，Pint的轉(zhuǎn)錄。從PRE的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生cI蛋白（阻遏子），cI蛋白阻遏從PL和PR的轉(zhuǎn)錄但是它又是從PRM（維持啟動(dòng)子）的自動(dòng)調(diào)節(jié)因子，使整合入寄主染色體，并維持溶原狀態(tài)；（2）溶原或溶菌（烈性感染）途徑的采取部份決定于寄主的營養(yǎng)狀態(tài)，cII蛋白易65 受寄主細(xì)胞蛋白酶的破壞，當(dāng)細(xì)胞營養(yǎng)充足是，蛋白酶活性高，而使進(jìn)入溶菌周期。 溶原狀態(tài)的建立和維持（見圖）5.反阻遏子Cro和從溶菌狀態(tài)的誘導(dǎo)（1）整合狀態(tài)的噬菌體

20、稱原噬菌體（prophase）；（2）當(dāng)寄主受到DNA損傷試劑或紫外光等物理因子處理時(shí)誘發(fā)SOS反應(yīng)，recA蛋白的蛋白酶活性激活，于是cI蛋白被水解，6667 PL，PR的阻礙解除，Cro基因被轉(zhuǎn)錄，Cro反阻遏子合成；（3）Cro蛋白對(duì)O的親和力與cI相反，是OR3 OR2 OR1，因而它先結(jié)合在OR3，阻遏cI基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，PR，PL的轉(zhuǎn)錄開始，并逐步產(chǎn)生溶菌周期的蛋白，使從寄主DNA上切出，進(jìn)入溶菌狀態(tài)。686. cI蛋白與Cro蛋白的拮抗作用 阻遏子和Cro蛋白的六個(gè)結(jié)合位點(diǎn)一條鏈的堿基順序6970l操縱基因并列三個(gè)阻遏子結(jié)合位點(diǎn) 每個(gè)操縱基因結(jié)合位置有17bp，有軸對(duì)稱性，六個(gè)

21、結(jié)合位點(diǎn)都相似，但有一定的差異； cI阻遏子對(duì)操縱基因的親和力 OL1OL2OL3 Cro反阻遏子相反 OR1OR2OR371l阻遏子在操縱基因上的結(jié)合 阻遏子亞基27,000 daltons,分N末端區(qū)（92個(gè)氨基酸殘基），C末端（132-236），40個(gè)殘基的連接肽鍵。7273l原核生物核糖體蛋白合成的自我調(diào)節(jié)及與rRNA合成的協(xié)調(diào)（autogenous contol）a. 核糖體蛋白（r-protein）與其他細(xì)胞中的蛋白質(zhì)合成因子，RNA聚合酶亞基基因混合組成多個(gè)操縱子，以協(xié)調(diào)合成的速度；b. 自我調(diào)節(jié)發(fā)生在翻譯水平，每個(gè)操縱子中編碼著一種“關(guān)鍵”蛋白（key-protein），這種蛋

22、白濃度增加時(shí)會(huì)結(jié)合于mRNA的翻譯起始位置，造成“翻譯阻遏”（translation repressor）747576l協(xié)調(diào)細(xì)胞內(nèi)氨基酸濃度的“應(yīng)急反應(yīng)”（stringent response） GDPATP 酶 ppGppAMP 導(dǎo)致rRNA合成的急劇減少；c. r-protein的合成受rRNA水平的調(diào)節(jié)7778十十. 基因表達(dá)的重組調(diào)節(jié)基因表達(dá)的重組調(diào)節(jié) 生活在人小腸中的沙門氏桿菌（Salmonella）會(huì)周期性地改變鞭毛蛋白（phase variation，約1000細(xì)胞世代一次），鞭毛蛋白地周期性改變以逃避寄主免疫系統(tǒng)的攻擊。7980十一十一. 真核基因表達(dá)的調(diào)節(jié)真核基因表達(dá)的調(diào)節(jié)

23、特點(diǎn)：a. 轉(zhuǎn)錄的激活與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的多種改變相關(guān)；(chromatin remodeling)b. 主要的調(diào)控是正調(diào)節(jié)；c. 轉(zhuǎn)錄和翻譯在空間上是分離的（有核與核膜存在）；d,調(diào)節(jié)蛋白結(jié)構(gòu)更復(fù)雜。一一. 轉(zhuǎn)錄活性染色質(zhì)具有特殊性質(zhì)轉(zhuǎn)錄活性染色質(zhì)具有特殊性質(zhì)1. 轉(zhuǎn)錄活化區(qū)域?qū)怂崦甘歉叨让舾械?，通常染色質(zhì)被DNase降解,DNA片斷長約為n200bp，轉(zhuǎn)錄活性區(qū)上游被81 降解位點(diǎn)更不規(guī)則，產(chǎn)生不規(guī)則片斷；這些位點(diǎn)稱為高敏感區(qū)。2. 脫甲基化 胞嘧啶甲基化一般發(fā)生在CpG順序，有轉(zhuǎn)錄活性的染色質(zhì)DNA常被脫甲基化；3. 轉(zhuǎn)錄活躍染色質(zhì)缺少組蛋白和相關(guān)蛋白，核小體核心蛋白常被乙?；蚺c泛素（ub

24、iquitin）相結(jié)合； 以上事實(shí)證明轉(zhuǎn)錄必需解除染色質(zhì)結(jié)構(gòu)中的障礙。82二二. 大多數(shù)的真核啟動(dòng)子是正調(diào)控的大多數(shù)的真核啟動(dòng)子是正調(diào)控的1. 真核RNA多聚酶II對(duì)基因的轉(zhuǎn)錄依賴激活蛋白（activators），RNA polymerase II對(duì)啟動(dòng)子順序很少或沒有特殊親和力，負(fù)調(diào)節(jié)因子不普遍；2. 真核生物采取正調(diào)節(jié)的兩種原因 a. 真核生物基因組龐大，隨著DNA量增加，負(fù)調(diào)控因子和DNA特殊順序結(jié)合的特異性降低。轉(zhuǎn)錄起始使用多種正調(diào)節(jié)蛋白可以提高特異性。各種正調(diào)節(jié)因子83 必須結(jié)合于不同的DNA順序，然后形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物，轉(zhuǎn)錄輔因子的選擇性組合具有多樣性，轉(zhuǎn)錄的特異性就可被改善。 多細(xì)胞

25、有機(jī)體一個(gè)基因的調(diào)節(jié)位點(diǎn)平均在五個(gè)以上；b. 在大基因組中使用正調(diào)節(jié)更有效，經(jīng)濟(jì)。 人（約4萬個(gè)基因），通常大部分基因處于滅活狀態(tài)，細(xì)胞只要選擇性地合成一組激活蛋白，便可以使一組細(xì)胞所需的基因被轉(zhuǎn)錄；84c. 增強(qiáng)子（enhancer）：真核細(xì)胞中普遍存在的正調(diào)控元件，激活轉(zhuǎn)錄特點(diǎn)：I. 可以在長距離內(nèi)起作用，與被調(diào)節(jié)基因的相對(duì)位置無關(guān)，如SV40增強(qiáng)子，2個(gè)72bp的串聯(lián)重復(fù)順序，能在5.2kb長的整個(gè)基因組的任何一個(gè)位置起作用；II. 一種增強(qiáng)子只能在特定類型的細(xì)胞內(nèi)起作用，如免疫球蛋白基因增強(qiáng)子只能在B淋巴細(xì)胞中有功能，負(fù)責(zé)基因表達(dá)的組織特異性；d, 在酵母中稱UAS順序。85l增強(qiáng)子介導(dǎo)糖皮質(zhì)激素的作用 激素受體 結(jié)合于 糖皮質(zhì)激素增強(qiáng)子 基因激活子 刺激有關(guān)基因表達(dá)8687十二十二. 真核基因表達(dá)的調(diào)節(jié)蛋白真核基因表達(dá)的調(diào)節(jié)蛋白一一. TATA結(jié)合蛋白（結(jié)合蛋白（TBP） 組裝預(yù)起始復(fù)合物(preiniti