含量測定方法與驗(yàn)證.PPT

1、第四章 藥物的含量測定方法與驗(yàn)證 定量分析方法的分類與特點(diǎn) 樣品的前處理方法 藥品分析方法的驗(yàn)證第一節(jié)第一節(jié) 定量分析方法的分類與特點(diǎn)定量分析方法的分類與特點(diǎn) 定量分析方法的計(jì)算定量分析方法的計(jì)算藥典對藥物的藥典對藥物的含量限度的表示方法含量限度的表示方法原料藥：多以原料藥：多以%表示，有二種情況表示，有二種情況按原料藥本身形式計(jì)算其含量按原料藥本身形式計(jì)算其含量例例 ：阿司匹林（：阿司匹林（P.P.1111）按干燥品計(jì)不得）按干燥品計(jì)不得少于少于9 99 9.5%.5%對氨基水楊酸鈉按干燥品計(jì)不得少于對氨基水楊酸鈉按干燥品計(jì)不得少于99.0%99.0%凡未規(guī)定上限的，藥典凡例中規(guī)定，其含凡未

2、規(guī)定上限的，藥典凡例中規(guī)定，其含量上限不得超過量上限不得超過101.0%101.0%。由于藥物組成不定，需以另一種穩(wěn)定形由于藥物組成不定，需以另一種穩(wěn)定形式計(jì)算含量式計(jì)算含量例例 ：氫氧化鋁：氫氧化鋁 Al(OH) Al(OH)3 3 以含三氧化二鋁以含三氧化二鋁（AlAl2 2OO3 3）計(jì)，不得少于）計(jì)，不得少于48 .0%48 .0%制劑：制劑的含量限度表示方法有三種情況制劑：制劑的含量限度表示方法有三種情況按標(biāo)示量計(jì)算按標(biāo)示量計(jì)算標(biāo)示量即規(guī)格量，生產(chǎn)廠家的處方量。它標(biāo)示量即規(guī)格量，生產(chǎn)廠家的處方量。它是以標(biāo)示量為是以標(biāo)示量為100%100%，將測得含量與之相，將測得含量與之相比較，求出

3、相對于標(biāo)示量的百分含量。比較，求出相對于標(biāo)示量的百分含量。例：維生素例：維生素B B1 1注射液含維生素注射液含維生素B B1 1應(yīng)為標(biāo)示應(yīng)為標(biāo)示量的量的95.0%95.0%105.0%105.0%干酵母片含蛋白質(zhì)不得少于標(biāo)示量的干酵母片含蛋白質(zhì)不得少于標(biāo)示量的40.0%40.0%直接用直接用%含量規(guī)定范圍（主藥含量微）含量規(guī)定范圍（主藥含量微）例：復(fù)方碘溶液例：復(fù)方碘溶液 含含 I 應(yīng)為應(yīng)為4 .5% 5 .5% 含含 KI 應(yīng)為應(yīng)為9 .5% 10 .5% 復(fù)方氯化鈉注射液復(fù)方氯化鈉注射液 含總含總Cl-量量 0.52%0.58% 含含KCl量量 0.028%0.032% 含含CaCl22

4、H2O 0.031%0.035%以重量規(guī)定含量范圍（多為復(fù)方制劑）以重量規(guī)定含量范圍（多為復(fù)方制劑）例：復(fù)方炔諾酮片例：復(fù)方炔諾酮片 炔諾酮炔諾酮 0.540.66mg /片片 炔雌醇炔雌醇 31.538.5g /片片 復(fù)方磺胺甲噁唑片復(fù)方磺胺甲噁唑片 SMZ 0.3600.440 g /片片 TMP 72.088.0mg /片片2021-12-56一、容量分析法一、容量分析法滴定法滴定法aA+bB cC+dDaA+bB cC+dD（ A A被測藥物；被測藥物； B B滴定液）滴定液）（一）、滴定度的概念（一）、滴定度的概念T-T-與與1ml1ml規(guī)定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液所相規(guī)定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液所相當(dāng)

5、的被測物的當(dāng)?shù)谋粶y物的mgmg數(shù)。數(shù)。（二）、滴定度的計(jì)算（二）、滴定度的計(jì)算T=MT=MA A mmB B a/b a/b （mg/ml mg/ml ）（三）含量計(jì)算（三）含量計(jì)算 1 1、直接滴定法、直接滴定法 原料藥以原料藥以%表示的制劑表示的制劑樣品樣品% = V% = VF FT/WT/W100% 100% F = NF = N實(shí)實(shí) / N/ N理理2 2、間接滴定法、間接滴定法（1）、剩余滴定法中須做空白）、剩余滴定法中須做空白樣品樣品% =（V空白空白 V測測 )樣樣 FT/W100% （2）、生成物滴定法）、生成物滴定法aA+bB=cC（生成物）（生成物）+dD ，cC+eE=

6、fF+gG 找到找到A與與E的關(guān)系，計(jì)算滴定度（的關(guān)系，計(jì)算滴定度（p.146）（自學(xué)）（自學(xué)） 相當(dāng)于標(biāo)示量相當(dāng)于標(biāo)示量%的計(jì)算公式的計(jì)算公式片劑：片劑：VFT/W平均片重平均片重/標(biāo)示量標(biāo)示量100%針劑：針劑： VFT/W/標(biāo)示量（標(biāo)示量（g/ml） 100% 以重量以重量/片計(jì)的計(jì)算公式片計(jì)的計(jì)算公式VFT/W平均片重平均片重=重量重量/片片 司可巴比妥鈉膠囊含量測定：精密稱取內(nèi)容物司可巴比妥鈉膠囊含量測定：精密稱取內(nèi)容物0.1385g0.1385g，置碘量瓶中，加水，置碘量瓶中，加水10mL10mL，振搖使溶解，振搖使溶解，精密加溴滴定液（精密加溴滴定液（0.05mol/L0.05m

7、ol/L）25 mL25 mL，再加鹽，再加鹽酸酸5 mL5 mL，立即密塞并振搖，立即密塞并振搖1 1分鐘，暗處靜置分鐘，暗處靜置1515分分鐘后，加碘化鉀試液鐘后，加碘化鉀試液10 mL10 mL，立即密塞，搖勻，立即密塞，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液（用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L0.1mol/L，F(xiàn)=0.992F=0.992）滴）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色定，至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。已知：樣消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。已知：樣品消耗硫代硫酸鈉滴定液（品消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）17.

8、05 17.05 mLmL，空白試驗(yàn)消耗，空白試驗(yàn)消耗25.22mL25.22mL，每，每1mL1mL溴滴定液溴滴定液（0.05mol/L0.05mol/L）相當(dāng)于）相當(dāng)于13.01mg13.01mg的司可巴比妥鈉。的司可巴比妥鈉。計(jì)算本品相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量（規(guī)格計(jì)算本品相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量（規(guī)格0.1g0.1g，2020粒膠囊內(nèi)容物重粒膠囊內(nèi)容物重2.7506 g2.7506 g）？）？ (p.90 (p.90生成物生成物滴定法滴定法) )2021-12-510司可巴比妥鈉的滴定度計(jì)算司可巴比妥鈉的滴定度計(jì)算 1摩爾摩爾司可巴比妥鈉與司可巴比妥鈉與1 1摩爾溴相當(dāng)摩爾溴相當(dāng)T=MAmB

9、a/b260.20.051/113.01mg/mlNNHNaOCH3OOCH2CH3Br2NNHNaOCH3OOCH3CH2Br BrBr2KIKBrI2I2Na2S2O3NaINa2s4o6+(過量 定量 )+2(剩 余 )2+22+(25.22 17.05) 13.010.992 2.7506 0.1385 0.1 1000 20100% 精密量取維生素精密量取維生素C C注射液注射液4mL4mL（相當(dāng)于維生素（相當(dāng)于維生素C C 0.2g0.2g），加水），加水15mL15mL與丙酮與丙酮2mL2mL，搖勻，放置，搖勻，放置5 5分分鐘，加稀醋酸鐘，加稀醋酸4mL4mL與淀粉指示液與淀粉

10、指示液1mL1mL，用碘滴定，用碘滴定液液(0.05mol/L)(0.05mol/L)滴定至溶液顯藍(lán)色，并持續(xù)滴定至溶液顯藍(lán)色，并持續(xù)3030秒秒鐘不退。已知：注射液規(guī)格鐘不退。已知：注射液規(guī)格2mL:0.1g2mL:0.1g，消耗，消耗0.05mol/L0.05mol/L碘滴定液（碘滴定液（F=1.005F=1.005）22.45mL22.45mL，維，維生素生素C C的分子量為的分子量為176.12176.12，問：，問：（1 1）丙酮和稀醋酸分別起什么作用？）丙酮和稀醋酸分別起什么作用？（2 2）每）每1mL1mL碘滴定液碘滴定液(0.05mol/L)(0.05mol/L)相當(dāng)于多少相當(dāng)

11、于多少mgmg的維生素的維生素C C？（3 3）求本品相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量？）求本品相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量？2021-12-513維生素維生素C C1摩爾維生素摩爾維生素C與與1摩爾碘相當(dāng)摩爾碘相當(dāng)T0.05176.121/18.806mg/ml T V F維生素維生素C標(biāo)示量標(biāo)示量 4 0.05 100 8.806 22.45 1.005 4 0.05 1000 10099.34OOOHO HO HHC H2O HOOOOO HHC H2O HI2H+CC+2 H I二、光譜分析二、光譜分析（一）、（一）、UV法法1、標(biāo)準(zhǔn)對照法（一點(diǎn)法）、標(biāo)準(zhǔn)對照法（一點(diǎn)法）A樣樣/A標(biāo)標(biāo) = C樣樣/C

12、標(biāo)標(biāo)，樣品樣品%= A樣樣/A標(biāo)標(biāo) C標(biāo)標(biāo)F/W100%F=稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù) W=取樣量取樣量2、百分吸收系數(shù)法（、百分吸收系數(shù)法（A= E1%cmCL） C% = A / E1%cm 樣品樣品% = A / E1%cm F/WF = 稀釋倍數(shù)和濃度換算因子稀釋倍數(shù)和濃度換算因子W = 取樣量取樣量 3、標(biāo)準(zhǔn)曲線法（、標(biāo)準(zhǔn)曲線法（y=bxa）由標(biāo)準(zhǔn)曲線或回歸方程求出由標(biāo)準(zhǔn)曲線或回歸方程求出C樣樣，再根據(jù)，再根據(jù)F，W求出樣品求出樣品%。4、計(jì)算分光光度法、計(jì)算分光光度法雙波長法，差示法均可應(yīng)用比爾定律的雙波長法，差示法均可應(yīng)用比爾定律的公式，以公式，以A代替吸收度代替吸收度A。差示分光光度法差

13、示分光光度法原理：利用被測物在兩種不同溶液中吸收光譜發(fā)生原理：利用被測物在兩種不同溶液中吸收光譜發(fā)生了特征性變化，而共存干擾物在該兩種溶液中未引了特征性變化，而共存干擾物在該兩種溶液中未引起光譜變化，測定兩種溶液的吸收度差值（起光譜變化，測定兩種溶液的吸收度差值（A值），值），根據(jù)根據(jù)A與被測物濃度與被測物濃度C的線性關(guān)系進(jìn)行定量測定。的線性關(guān)系進(jìn)行定量測定。方法：方法： 一定量一定量+酸酸 一定體積一定體積 （測定）（測定） A測測 同樣量同樣量+堿堿 同樣體積同樣體積 （參比）（參比） A參參 A測測A參參=A樣樣干擾物在兩種溶液中吸收光譜無變化，即干擾物在兩種溶液中吸收光譜無變化，即A雜

14、雜=0， A樣樣只與樣品濃度只與樣品濃度C呈線性關(guān)系。呈線性關(guān)系。供試品220 240 260 280nm ApH10pH10溶液，溶液， 240nm240nm pH13pH13溶液，溶液， 255nm255nm酸性溶液，無酸性溶液，無 maxmaxA樣樣=A pH13pH13- - A pH10pH10A標(biāo)標(biāo)=A pH13pH13- - A pH10pH10C樣樣=A樣樣/A標(biāo)標(biāo)C C標(biāo)標(biāo)特點(diǎn)：具備一般分光光度法簡易、快速、特點(diǎn)：具備一般分光光度法簡易、快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點(diǎn)直接讀數(shù)的優(yōu)點(diǎn);無需事先分離，又能消除無需事先分離，又能消除干擾干擾;提供一個(gè)近似理想的參比溶液。提供一個(gè)近似理想的參比

15、溶液。A2021-12-518（二）、（二）、FLU法法以熒光強(qiáng)度以熒光強(qiáng)度R代替吸收度代替吸收度A1、對照品溶液與空白溶液的、對照品溶液與空白溶液的熒光強(qiáng)度之差（熒光強(qiáng)度之差（R R對對）2、供試品溶液與空白溶液的、供試品溶液與空白溶液的熒光強(qiáng)度之差（熒光強(qiáng)度之差（R R樣樣） R R樣樣C樣樣 C對對 R R對對稱取己酸孕酮稱取己酸孕酮0.0105g,0.0105g,加無水乙醇溶解后加無水乙醇溶解后, ,置置10ml10ml容量瓶中容量瓶中, ,稀釋至刻度稀釋至刻度, ,搖勻。吸取搖勻。吸取1.00ml,1.00ml,置置100ml100ml容量瓶中容量瓶中, ,加無水乙醇稀釋至加無水乙醇

16、稀釋至刻度刻度, ,置置1cm1cm吸收池內(nèi)進(jìn)行測定吸收池內(nèi)進(jìn)行測定, , 根據(jù)下列數(shù)據(jù)根據(jù)下列數(shù)據(jù), ,求出按干燥品計(jì)算的己酸孕酮百分含量。求出按干燥品計(jì)算的己酸孕酮百分含量。A=0.390, EA=0.390, E1%1%1cm1cm=393=3930.390 0.390 1010393 393 0.0105 0.0105 100% = 含量含量% 復(fù)方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑（復(fù)方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑（SMZSMZ）的含）的含量測定：量測定： 精密稱取本品（每片含精密稱取本品（每片含SMZSMZ為為0.4g0.4g）1010片，片，總重量為總重量為5.5028g5.5028g。精密稱

17、取。精密稱取SMZSMZ對照品對照品0.0501g0.0501g、片粉、片粉0.0756g0.0756g，按雙波長分光光度法，按雙波長分光光度法測定測定SMZSMZ含量。在含量。在257nm257nm波長處測得：對照品波長處測得：對照品溶液的吸收度溶液的吸收度A A對對為為0.3300.330，供試溶液的吸收度，供試溶液的吸收度A A樣樣為為0.3720.372。在。在304nm304nm波長處測得：對照品溶液波長處測得：對照品溶液的吸收度的吸收度A A對對為為0.0090.009，供試溶液的吸收度，供試溶液的吸收度A A樣樣為為0.0210.021。計(jì)算。計(jì)算SMZSMZ的含量相當(dāng)于標(biāo)示量的

18、百分含的含量相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量。量。257nm257nm304nm304nm對照品對照品供試品供試品0.3300.3300.3720.3720.0090.0090.0210.021 0.372- 0.021 0.0501 5.50280.0501 5.5028 0.330- 0.009 0.0756 100.0756 10 0.4 0.4100%100%=99.69%對乙酰氨基酚片劑對乙酰氨基酚片劑溶出度溶出度測定：測定：取標(biāo)示量為取標(biāo)示量為0.3g0.3g的本品的本品6 6片，依法在片，依法在1000mL1000mL溶劑中測定溶出度。經(jīng)溶劑中測定溶出度。經(jīng)3030分鐘時(shí)，取溶液分鐘時(shí)，取

19、溶液5mL5mL濾過，精密吸取續(xù)濾液濾過，精密吸取續(xù)濾液1mL1mL，加，加0.04%0.04%氫氧化氫氧化鈉溶液稀釋至鈉溶液稀釋至50mL50mL，搖勻，在，搖勻，在257nm257nm波長處波長處測得每片的吸收度分別為測得每片的吸收度分別為0.3450.345，0.3480.348，0.3510.351，0.3590.359，0.3560.356和和0.3330.333，按其百分吸，按其百分吸收系數(shù)為收系數(shù)為715715計(jì)算出各片的溶出量。限度為標(biāo)計(jì)算出各片的溶出量。限度為標(biāo)示量的示量的80%80%。并判斷其溶出度是否符合規(guī)定。并判斷其溶出度是否符合規(guī)定。0.345 50 1000715

20、0.3= 80.4%片片1：片片2復(fù)方苯巴比妥散中苯巴比妥的測定復(fù)方苯巴比妥散中苯巴比妥的測定主要成分：苯巴比妥，阿司匹林主要成分：苯巴比妥，阿司匹林原理：在原理：在pH 5.91和和pH 8.04條件下，阿司匹林及水條件下，阿司匹林及水解產(chǎn)物水楊酸等的紫外吸收光譜重合解產(chǎn)物水楊酸等的紫外吸收光譜重合 ， A=0，而，而苯巴比妥在此兩苯巴比妥在此兩pH條件下的差示光譜在條件下的差示光譜在240nm 處處A值最大，因此可測定此波長處的值最大，因此可測定此波長處的A值，采用標(biāo)值，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。準(zhǔn)曲線法定量。方法：取樣品方法：取樣品0.12g，加無水乙醇，加無水乙醇20ml，振搖，加，振搖，加

21、水至水至200ml，取，取5ml兩份，分別用兩份，分別用pH 5.91和和pH 8.04的緩沖液稀釋至的緩沖液稀釋至50ml，以試劑為空白，在，以試劑為空白，在240nm處處測定吸收度，代入回歸方程計(jì)算含量。測定吸收度，代入回歸方程計(jì)算含量。三、色譜分析（三、色譜分析（HPLC和和GC） 內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)法：F = A 內(nèi)內(nèi)/ A 標(biāo)標(biāo)C標(biāo)標(biāo)/C內(nèi)內(nèi) 樣品樣品% = A樣樣/A內(nèi)內(nèi)FC內(nèi)內(nèi)稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)/W100%或或C樣樣= R樣樣/內(nèi)內(nèi)/ R標(biāo)標(biāo)/內(nèi)內(nèi) C標(biāo)標(biāo)（R代表峰面積比值）代表峰面積比值） 外標(biāo)法（同光譜法）外標(biāo)法（同光譜法）:標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)對照法標(biāo)準(zhǔn)對照法(一點(diǎn)法一點(diǎn)法)系

22、統(tǒng)適用性試驗(yàn)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)柱效（理論板數(shù)）柱效（理論板數(shù)） n=5.54(tn=5.54(tR R/W/Wh/2h/2) )2 2分離度分離度 R=R= 拖尾因子拖尾因子 T=T= 重復(fù)性重復(fù)性 取對照品或樣品溶液，連續(xù)進(jìn)樣取對照品或樣品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5 5次，測得峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)差次，測得峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)差RSDRSD應(yīng)小于應(yīng)小于2.0%2.0%2(t2(tR2R2-t -tR1R1) )WW1 1+W+W2 2WW0.05h0.05h2d2d1 1(R 1.5)(R 1.5)(T=0.95(T=0.951.05)1.05) T=WW0.05h0.05h/2d/2d1 1d1hWW0.05h0.

23、05h0.05h HPLCHPLC測定復(fù)方測定復(fù)方SMZSMZ片中片中SMZSMZ含量，以含量，以SGSG為內(nèi)標(biāo)，為內(nèi)標(biāo)，測得測得標(biāo)準(zhǔn)液中：標(biāo)準(zhǔn)液中：SMZSMZ峰高峰高14.90cm14.90cm，濃度，濃度8.0mg/mL8.0mg/mL，SGSG峰高峰高13.80cm13.80cm，濃度，濃度4.0mg/mL4.0mg/mL。樣品液中：樣品液中：SMZSMZ峰高峰高11.92cm11.92cm，SGSG峰高峰高16.20cm16.20cm，濃度濃度4.0mg/mL4.0mg/mL。求樣品液中求樣品液中SMZSMZ的濃度為多少？（進(jìn)樣量均為的濃度為多少？（進(jìn)樣量均為5 5 l l）13.8

24、 8.014.9 4.0F=樣品（樣品（mg/mLmg/mL） =11.92 4.016.2=1.852 F =5.45用用HPLC法測得某藥保留時(shí)間為法測得某藥保留時(shí)間為12.54min，半高峰寬半高峰寬3.0mm（紙速（紙速5mm/min），計(jì)算），計(jì)算柱效？柱效？N=5.54（12.54/3.0）2 ？N=5.5412.54/（3.0/5）2 ？N=2420丙酸睪酮含量測定采用高效液相法：取本品對照品適丙酸睪酮含量測定采用高效液相法：取本品對照品適量，精密稱定，加甲醇定量稀釋成每量，精密稱定，加甲醇定量稀釋成每1mL中約含中約含1mg的溶液。精密量取該溶液和內(nèi)標(biāo)溶液（的溶液。精密量取該溶

25、液和內(nèi)標(biāo)溶液（1.6mg/mL苯丙苯丙酸諾龍甲醇溶液）各酸諾龍甲醇溶液）各5mL，置，置25mL量瓶中，加甲醇量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，取稀釋至刻度，搖勻，取10 L注入液相色譜儀，記錄色注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取本品適量，同法測定，內(nèi)標(biāo)法計(jì)算含量。譜圖。另取本品適量，同法測定，內(nèi)標(biāo)法計(jì)算含量。已知對照品溶液為已知對照品溶液為1.052mg/mL，樣品溶液為，樣品溶液為1.032mg/mL，測得對照液中丙酸睪酮和內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的峰面，測得對照液中丙酸睪酮和內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的峰面積分別為積分別為54678和和61258，樣品液中丙酸睪酮和內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)，樣品液中丙酸睪酮和內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的峰面積分別為的峰面積分別為52

26、213和和61228，計(jì)算丙酸睪酮的含量？，計(jì)算丙酸睪酮的含量？52213 / 6122854678 / 612581.052/1.032=？97.4% 第二節(jié) 樣品分析的前處理方法v一、概述l含金屬藥物有：富馬酸亞鐵、葡萄糖酸銻鈉、枸櫞酸鉍鉀、葡萄糖酸鋅、酒石酸銻鉀等。l含鹵素藥物有：泛影酸、三氯叔丁醇、碘番酸、磺溴酞鈉等。l根據(jù)所含金屬或鹵素在分子中結(jié)合的牢固程度，分析前采用不同方法進(jìn)行預(yù)處理。v不經(jīng)有機(jī)破壞處理的分析方法l直接測定法l金屬原子不與碳直接相連的或C-M鍵結(jié)合不牢固的有機(jī)金屬藥物，在水溶液中電離，可選用適當(dāng)方法直接測定。例：l富馬酸亞鐵在熱的稀礦酸中溶解，釋放出亞鐵離子，用硫

27、酸鈰滴定液直接滴定。 CHCOOCHCOOFeHClFe2+l葡萄糖酸銻鈉為組成不定的五價(jià)銻化合物，采用間接碘量法測定銻的含量，在酸性條件下，葡萄糖酸銻鈉與碘化鉀試液作用，Sb5+可氧化KI，析出I2，用Na2S2O3滴定液滴定。l枸櫞酸鉍鉀、葡萄糖酸鋅EDTA滴定法測定含量。l經(jīng)水解后測定法l本法適合于鹵素與脂肪碳鏈相連者，經(jīng)加熱回流使其水解，有機(jī)結(jié)合的鹵素轉(zhuǎn)變成無機(jī)的鹵素離子，然后用適當(dāng)方法進(jìn)行測定。例：l三氯叔丁醇的含量測定CCl3C(CH3)2OH + 4NaOH3NaCl然后用銀量法測定氯化鈉含量。回流注意l沉淀轉(zhuǎn)化（加有機(jī)溶劑）lFe3+的水解（酸性中滴定）NaCl + AgNO3

28、AgCl剩余AgNO3+ SCN-AgSCNSCN- + Fe3+Fe（SCN）2+終點(diǎn)時(shí)AgClAg+ + Cl-+SCN-AgSCNl硬脂酸鎂與定量硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液共沸，水解生成硬脂酸和硫酸鎂，剩余的硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液回滴。l經(jīng)氧化還原后測定法l堿性還原后測定當(dāng)鹵素結(jié)合于芳環(huán)上時(shí)，因結(jié)合較牢固，需在堿性條件下加還原劑回流，使X-C鍵斷裂，形成無機(jī)鹵化物后測定。例泛影酸的含量測定COONaIIINHCOCH3CH3COHN+3Zn +11NaOHCOONaNH2NH2+ 3NaI回流NaI AgNO3 AgI 曙紅鈉指示劑 l酸性還原后測定l例碘番酸，JP采用冰醋酸酸性條件下用鋅粉還

29、原，硝酸銀滴定液滴定，以四溴酚酞乙酯為指示劑，終點(diǎn)時(shí)沉淀由黃色變?yōu)榫G色。lUSP，BP，ChP均采用氫氧化鈉堿性條件下用鋅粉還原，然后用硝酸銀滴定液滴定，但指示終點(diǎn)方法不同， ChP采用吸附指示劑曙紅鈉， USP采用吸附指示劑四溴酚酞乙酯，BP采用電位法指示終點(diǎn)。 v經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法l濕法破壞lHNO3-HClO4破壞力強(qiáng)，反應(yīng)激烈，注意勿將內(nèi)容物蒸干，以免爆炸。適用于生物樣品的破壞，所得無機(jī)金屬離子為高價(jià)態(tài)。對含氮雜環(huán)藥物不適宜。lHNO3- H2SO4 適用于大多數(shù)有機(jī)藥物的破壞，所得無機(jī)金屬離子為高價(jià)態(tài)。對堿土金屬藥物不適用，可改用HNO3-HClO4 法。lH2SO4-SO42-本

30、法所得金屬離子為低價(jià)態(tài)，常用于含砷或銻有機(jī)藥物的破壞。若用本法破壞低碳藥物時(shí)，宜添加適量淀粉等多碳化合物，以保證破壞過程中將金屬離子轉(zhuǎn)變?yōu)榈蛢r(jià)態(tài)。l其他濕法破壞lHNO3- H2SO4 -HClO4lH2SO4 H2O2lH2SO4 KMnO4l濕法破壞的儀器一般為凱氏燒瓶。 l干法破壞l將有機(jī)物置坩堝中，加Ca(OH)2或無水 Na2CO3或輕質(zhì)氧化鎂，灼燒灰化，先小火加熱，然后高溫灰化。l注意：溫度應(yīng)控制在420 以下。本法所得灰分往往不易溶解，但不能丟棄。l本法適用于濕法不易破壞完全的有機(jī)物（如含氮雜環(huán)），以及不能用硫酸破壞的有機(jī)藥物，不適用含揮發(fā)性金屬的有機(jī)藥物。l氧瓶燃燒法（Oxyg

31、en flask combustion method）l儀器裝置鉑金絲硬質(zhì)玻璃燃燒瓶樣品l稱樣l燃燒分解操作（通O2 1-2 min，燃燒）l吸收液l水-NaOH（含碘、氯藥物）l例鹽酸胺碘酮、碘苯酯、甲狀腺粉l水- NaOH -H2O2（含溴、含硫藥物）l例磺溴酞鈉l水（含氟藥物）l硝酸溶液（含硒藥物）l注意注意：l防爆，燃燒瓶應(yīng)洗滌干凈；l氧氣要充足，燃燒應(yīng)完全；l測定含氟藥物應(yīng)用石英燃燒瓶。l燃燒分解后的測定方法l滴定法l銀量法含氯、溴藥物（例磺溴酞鈉）BrBrBrBrCCHOOHOOSO3NaSO3Na4燃燒分解NaBr Br-+ Ag+AgBr剩余的 Ag+ SCN-AgSCNl碘量

32、法含碘藥物（例鹽酸胺碘酮）OOIH3CNCH3CH3OIHCl燃燒分解 I2 NaI + NaIO I2 + NaOH NaIO NaIO3+ NaI NaI + Br2NaIO3（Br2 + HCOOHHBr + CO2）NaIO3 + 5KI3I2H+I2 + Na2S2O3NaI + Na2S4O6l分光光度法含氟藥物l例氟尿嘧啶含氟量測定：取15mg樣品，經(jīng)氧瓶燃燒破壞后加水稀釋至100ml。要求含氟量應(yīng)為13.1% -14.6%。NHNOOFH燃燒破壞F-OOOHOHFCH NCH CH COOHCOOHCe3+pH4.3OOOHOCH NCH CH COOCOOCeFOH（藍(lán)紫色）

33、（茜素氟藍(lán)）l氟尿嘧啶M=130.08l氟的原子量為18.9984l理論含氟量為：l18.9984/ 130.08*100%=14.61%l測定含量時(shí)以標(biāo)準(zhǔn)氟化鈉（20ugF/ml）為對照，置2cm比色皿中，以試劑為空白，于610nm波長處測定對照和樣品的吸收度。計(jì)算含氟量。AuAsX Cs X100WX 100%=F%2021-12-549第三節(jié)第三節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證分析方法驗(yàn)證l準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度l表示測定結(jié)果與真值的符合程度，用回收率表表示測定結(jié)果與真值的符合程度，用回收率表示示。l絕對回收率（提取回收率、萃取回收率）絕對回收率（提取回收率、萃取回收率）l方法回收率方法回

34、收率 測量值測量值回收率回收率 加入量加入量 1002021-12-550l回收率測定要求：回收率測定要求：l 添加的藥物量必須與實(shí)際測定量相近。添加的藥物量必須與實(shí)際測定量相近。l 添加物質(zhì)必須與實(shí)際存在的狀態(tài)相似。添加物質(zhì)必須與實(shí)際存在的狀態(tài)相似。l 同時(shí)做空白試驗(yàn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。l 考察高、中、低三個(gè)濃度?？疾旄摺⒅?、低三個(gè)濃度。l 絕對回收率絕對回收率95%95%，每次測得值應(yīng)保持恒，每次測得值應(yīng)保持恒定。定。2021-12-551l精密度精密度一組數(shù)據(jù)之間彼此接近的程度一組數(shù)據(jù)之間彼此接近的程度l 考察高、中、低三個(gè)濃度的精密度考察高、中、低三個(gè)濃度的精密度l 一般要求一般要求n5n5l 日內(nèi)（