3食用菌栽培技術(shù)--第三章菌種的生產(chǎn)與保藏

1、第三章第三章 菌種的生產(chǎn)與保藏菌種的生產(chǎn)與保藏 菌種，好比農(nóng)作物的種子，是食用菌種，好比農(nóng)作物的種子，是食用菌生產(chǎn)的根本，其優(yōu)劣直接影響食用菌生產(chǎn)的根本，其優(yōu)劣直接影響食用菌的產(chǎn)量和質(zhì)量。因此，從事食用菌菌的產(chǎn)量和質(zhì)量。因此，從事食用菌菌種工作的單位都必須認(rèn)真做好菌種菌種工作的單位都必須認(rèn)真做好菌種的培育和保藏工作。的培育和保藏工作。 一、菌種培育技術(shù)一、菌種培育技術(shù) 人工培育的菌種有母種、原種和栽培種之分。人工培育的菌種有母種、原種和栽培種之分。1）母種（一級菌種）：）母種（一級菌種）：用孢子分離或組織分用孢子分離或組織分離等培育的菌絲體稱為母種。離等培育的菌絲體稱為母種。2）原種（二級菌種

2、）：）原種（二級菌種）：把母種擴(kuò)大到木屑、把母種擴(kuò)大到木屑、棉籽殼等為主的培養(yǎng)料上的菌種稱為原種。棉籽殼等為主的培養(yǎng)料上的菌種稱為原種。3）栽培種（三級菌種）栽培種（三級菌種）：由原種擴(kuò)大培養(yǎng)成：由原種擴(kuò)大培養(yǎng)成為生產(chǎn)上使用的菌種稱為栽培種。為生產(chǎn)上使用的菌種稱為栽培種。4）菌種：）菌種：實(shí)質(zhì)上就是經(jīng)過人工培養(yǎng)并進(jìn)一步實(shí)質(zhì)上就是經(jīng)過人工培養(yǎng)并進(jìn)一步繁殖的食用菌的純菌絲體。繁殖的食用菌的純菌絲體。 食用菌的制種程序食用菌的制種程序組織分離組織分離接種接種母種（一級）母種（一級） 接種接種 原種（二級）原種（二級） 接種接種栽培種（三級）栽培種（三級）種菇種菇孢子分離孢子分離 經(jīng)過這樣三級培養(yǎng)，食

3、用菌菌絲數(shù)量大大增經(jīng)過這樣三級培養(yǎng)，食用菌菌絲數(shù)量大大增加。加。 一般一般1支試管菌種可繁殖支試管菌種可繁殖46瓶原種，每瓶原瓶原種，每瓶原種又可擴(kuò)大繁殖種又可擴(kuò)大繁殖60100瓶栽培種。瓶栽培種。培養(yǎng)培養(yǎng)培養(yǎng)培養(yǎng)母母 種種原種、原種、栽培種栽培種栽培種栽培種食用菌的食用菌的制種程序制種程序 菌種生產(chǎn)必須在嚴(yán)格的無菌條件下進(jìn)行。菌種生產(chǎn)必須在嚴(yán)格的無菌條件下進(jìn)行。為了保證制種的成功，除必須掌握制種技術(shù)外，為了保證制種的成功，除必須掌握制種技術(shù)外，還需要一些基本的設(shè)備和用品。還需要一些基本的設(shè)備和用品。1、接種設(shè)備、接種設(shè)備 接種室接種室要求要求: 關(guān)閉嚴(yán)密，便于熏蒸、消毒；關(guān)閉嚴(yán)密，便于熏蒸、

4、消毒；空間不宜過大，一般長、寬、高均為空間不宜過大，一般長、寬、高均為2m即可即可;接種室外面最好有一個(gè)緩沖室；接種室外面最好有一個(gè)緩沖室；墻壁、天花板和地面都要平整、光潔；墻壁、天花板和地面都要平整、光潔；內(nèi)裝有紫外燈和日光燈。內(nèi)裝有紫外燈和日光燈。 (一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具 1 1、接種設(shè)備、接種設(shè)備 接種箱接種箱 當(dāng)菌種生產(chǎn)量不大時(shí)，可在接種箱內(nèi)進(jìn)行。當(dāng)菌種生產(chǎn)量不大時(shí)，可在接種箱內(nèi)進(jìn)行。它是用木條作成框架，以它是用木條作成框架，以3mm厚的玻璃作箱壁。厚的玻璃作箱壁。要求：要求：關(guān)閉嚴(yán)密，便于熏蒸；關(guān)閉嚴(yán)密，便于熏蒸；裝有日光燈和紫外燈。裝有日光燈和紫

5、外燈。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：搬動(dòng)方便，操作人員不會(huì)受有毒氣體搬動(dòng)方便，操作人員不會(huì)受有毒氣體危害。危害。缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：容量小。容量小。 1 1、接種設(shè)備、接種設(shè)備 超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)原理：原理：超凈工作臺(tái)是利用過濾除菌的原理，先超凈工作臺(tái)是利用過濾除菌的原理，先將空氣過濾，得到無菌空氣，然后將無菌空氣將空氣過濾，得到無菌空氣，然后將無菌空氣從風(fēng)洞打出，使工作臺(tái)范圍內(nèi)成為無菌狀態(tài)。從風(fēng)洞打出，使工作臺(tái)范圍內(nèi)成為無菌狀態(tài)。要求：要求：放置工作臺(tái)的房間要清潔，空氣流動(dòng)小，放置工作臺(tái)的房間要清潔，空氣流動(dòng)小，最好安裝滅菌燈。最好安裝滅菌燈。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：有效可靠，操作使用方便，在夏季接種有效可靠，操作使用方便，在

6、夏季接種時(shí)，使操作人員感到舒適。時(shí)，使操作人員感到舒適。 每臺(tái)每臺(tái)3000元左右，有條件的食用菌專業(yè)戶，元左右，有條件的食用菌專業(yè)戶，可選用這種先進(jìn)的接種設(shè)備?？蛇x用這種先進(jìn)的接種設(shè)備。 超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)(一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具 2、滅菌設(shè)備、滅菌設(shè)備1）手提式：）手提式：容量小，適于斜面試容量小，適于斜面試管及玻璃器皿等；管及玻璃器皿等；2）立式）立式： 容量大，投資大；容量大，投資大；3）臥式）臥式：容量大，投資大；：容量大，投資大；4）家用）家用24或或26 cm壓力鍋：壓力鍋：母種、母種、原種培養(yǎng)基原種培養(yǎng)基 。高高壓壓蒸蒸氣氣滅滅菌菌鍋鍋優(yōu)點(diǎn)：省

7、時(shí)、省燃料、優(yōu)點(diǎn)：省時(shí)、省燃料、 效果好效果好 2）、）、3）一般在菌種場或研究所應(yīng)用。）一般在菌種場或研究所應(yīng)用。滅菌設(shè)備滅菌設(shè)備高壓蒸氣滅菌鍋高壓蒸氣滅菌鍋(一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具 2、滅菌設(shè)備、滅菌設(shè)備常壓滅菌鍋常壓滅菌鍋 目前農(nóng)村生產(chǎn)栽培種的必備設(shè)備，實(shí)際上目前農(nóng)村生產(chǎn)栽培種的必備設(shè)備，實(shí)際上是一種大型蒸籠式煮灶。底部為鑄鐵大鍋，是一種大型蒸籠式煮灶。底部為鑄鐵大鍋，上部為圓形木桶，桶內(nèi)裝數(shù)層供放培養(yǎng)基的上部為圓形木桶，桶內(nèi)裝數(shù)層供放培養(yǎng)基的格架。桶蓋裝有活絡(luò)搭及密閉的橡皮圈，由格架。桶蓋裝有活絡(luò)搭及密閉的橡皮圈，由于鍋內(nèi)溫度最高是于鍋內(nèi)溫度最高是10

8、0，所以滅菌時(shí)間需維，所以滅菌時(shí)間需維持持1012h，才能達(dá)到滅菌效果。才能達(dá)到滅菌效果。(一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具 3、培養(yǎng)設(shè)備、培養(yǎng)設(shè)備 培養(yǎng)室培養(yǎng)室大小：大?。翰灰诉^大，一般以不宜過大，一般以2025，培養(yǎng)，培養(yǎng)50006000瓶菌種為宜，太大不易保溫和管理。瓶菌種為宜，太大不易保溫和管理。要求：要求：干凈、通風(fēng)、保溫，應(yīng)設(shè)有調(diào)溫設(shè)備，干凈、通風(fēng)、保溫，應(yīng)設(shè)有調(diào)溫設(shè)備，使室溫保持在使室溫保持在2025。門窗應(yīng)設(shè)鐵紗，以防。門窗應(yīng)設(shè)鐵紗，以防鼠、蟲為害。鼠、蟲為害。 生化培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱 是專業(yè)工廠生產(chǎn)的恒溫電器設(shè)備，用于培養(yǎng)是專業(yè)工廠生產(chǎn)的恒溫電器設(shè)備，用

9、于培養(yǎng)母種或少量原種，可以根據(jù)需要任意溫度調(diào)節(jié)。母種或少量原種，可以根據(jù)需要任意溫度調(diào)節(jié)。 (一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具 4、培養(yǎng)菌種的容器、培養(yǎng)菌種的容器母種母種：試管，常用規(guī)格：試管，常用規(guī)格20180200mm，18180mm等。等。 原種、栽培種原種、栽培種菌種瓶：鹽水瓶、罐頭瓶菌種瓶：鹽水瓶、罐頭瓶菌種袋菌種袋聚丙稀袋聚丙稀袋聚乙稀袋聚乙稀袋規(guī)格有：規(guī)格有：12153035 cm，173545 cm 母種母種- -試管試管原種、栽培種原種、栽培種菌種瓶或塑料袋菌種瓶或塑料袋菌種瓶菌種瓶(一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具 5、接種工

10、具、接種工具 移植菌種于培養(yǎng)基上的工具稱接種移植菌種于培養(yǎng)基上的工具稱接種工具，主要有以下幾種：工具，主要有以下幾種：接種針、環(huán)、刀、鉤、鏟、鋤、槍等；接種針、環(huán)、刀、鉤、鏟、鋤、槍等； (一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具6、常用的消毒藥品、常用的消毒藥品 70%酒精：酒精：一般用于手、種菇表面消毒；一般用于手、種菇表面消毒； 0.1%升汞：升汞：常用于玻璃器皿、非金屬常用于玻璃器皿、非金屬器械及種菇表面消毒；器械及種菇表面消毒； 0.1%KMnO4：一般用于用具、器皿消一般用于用具、器皿消毒；毒；(一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具6、常用的消毒

11、藥品、常用的消毒藥品 5%石炭酸：石炭酸：噴灑墻壁、地面及擦洗桌面等，噴灑墻壁、地面及擦洗桌面等，也可用來蘇爾代替；也可用來蘇爾代替； 2%來蘇爾、新潔爾滅：來蘇爾、新潔爾滅：用法同上；用法同上；甲醛（福爾馬林）：甲醛（福爾馬林）：用于菇房和接種箱等空用于菇房和接種箱等空氣消毒；氣消毒；方法：關(guān)閉門窗消毒，自行氣化；方法：關(guān)閉門窗消毒，自行氣化；用量：用量：10ml甲醛甲醛5g KMnO4立方米。立方米。 (一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)1、母種培養(yǎng)基、母種培養(yǎng)基 食用菌母種培養(yǎng)基的種類繁多，由于不同食用菌母種培養(yǎng)基的種類繁多，由于不

12、同營養(yǎng)類型的食用菌對營養(yǎng)物質(zhì)的要求不同，所營養(yǎng)類型的食用菌對營養(yǎng)物質(zhì)的要求不同，所以，在培養(yǎng)不同食用菌母種時(shí)，應(yīng)選擇適宜該以，在培養(yǎng)不同食用菌母種時(shí)，應(yīng)選擇適宜該菌種的培養(yǎng)基。菌種的培養(yǎng)基。 母種培養(yǎng)基要求營養(yǎng)豐富、完全、氮源、母種培養(yǎng)基要求營養(yǎng)豐富、完全、氮源、維生素的比例應(yīng)高。維生素的比例應(yīng)高。 現(xiàn)將食用菌常用的母種培養(yǎng)基列舉如下現(xiàn)將食用菌常用的母種培養(yǎng)基列舉如下 ：(一一) 菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù) 配方配方馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA） 馬鈴薯馬鈴薯200g、葡萄糖（或蔗糖）葡萄糖（或蔗糖）20g、瓊脂

13、瓊脂20g、H2O 1000mL、pH 6.5。 適用于一般食用菌母種分離與培養(yǎng)，適用于一般食用菌母種分離與培養(yǎng)，但草菇、猴頭菌等在此培養(yǎng)基上生長不但草菇、猴頭菌等在此培養(yǎng)基上生長不良。良。 (二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)綜合馬鈴薯培養(yǎng)基綜合馬鈴薯培養(yǎng)基 馬鈴薯馬鈴薯200g、葡萄糖（或蔗糖）葡萄糖（或蔗糖）20g、KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、維生素維生素B1 10mg、瓊脂瓊脂20g、H2O 1000mL、pH自然。自然。 適合培養(yǎng)草菇、猴頭菌、靈芝及各種食用菌適合培養(yǎng)草菇、猴頭菌、靈芝及各種食用菌菌種分離、保藏。菌種分離、保藏。(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)胡蘿卜葡萄

14、糖瓊脂培養(yǎng)基胡蘿卜葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 胡蘿卜胡蘿卜200g、葡萄糖（或蔗糖）葡萄糖（或蔗糖）1820g、瓊脂瓊脂20g、H2O 1000mL、pH自然。自然。(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)玉米粉培養(yǎng)基玉米粉培養(yǎng)基 玉米粉玉米粉40g、葡萄糖（或蔗糖）葡萄糖（或蔗糖）10g、瓊脂瓊脂20g、H2O 1000ml、pH自然；自然；適用于大多數(shù)食用菌菌絲的生長。適用于大多數(shù)食用菌菌絲的生長。馬鈴薯、葡萄糖、蛋白胨、瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯、葡萄糖、蛋白胨、瓊脂培養(yǎng)基 馬鈴薯馬鈴薯200g、葡萄糖（或蔗糖）葡萄糖（或蔗糖）20g、蛋白蛋白胨胨10g、瓊脂瓊脂20g、H2O 1000ml、pH自然；自然；適用

15、于培養(yǎng)和保藏多種食用菌。適用于培養(yǎng)和保藏多種食用菌。(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)黃豆芽、松針培養(yǎng)基黃豆芽、松針培養(yǎng)基 黃豆芽黃豆芽250g、松針?biāo)舍?0g、葡萄糖（或蔗葡萄糖（或蔗糖）糖）20g、瓊脂瓊脂20g、H2O 1000ml、pH 55.5。 將松針、黃豆芽按量稱好，加水煮將松針、黃豆芽按量稱好，加水煮30min，取濾液，加入葡萄糖、瓊脂，充取濾液，加入葡萄糖、瓊脂，充分?jǐn)嚢?，使瓊脂熔化，補(bǔ)水至分?jǐn)嚢?，使瓊脂熔化，補(bǔ)水至1000ml，即分裝試管。即分裝試管。主要用于培養(yǎng)竹蓀母種。主要用于培養(yǎng)竹蓀母種。(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)蘋果汁培養(yǎng)基蘋果汁培養(yǎng)基 蘋果蘋果100g、蛋

16、白胨蛋白胨2g、蔗糖蔗糖20g、瓊脂瓊脂20g、H2O 1000ml；主要用于草菇培養(yǎng)主要用于草菇培養(yǎng)（配制方法同（配制方法同PDA） 配方配方 配制方法（以配制方法（以PDA為例）為例） 馬鈴薯（去皮、去芽眼）馬鈴薯（去皮、去芽眼）切成片切成片稱取稱取200g1000mL H2O煮沸煮沸雙層紗布過濾雙層紗布過濾取濾液并補(bǔ)足取濾液并補(bǔ)足1000mL瓊脂瓊脂熔化其它營熔化其它營養(yǎng)物質(zhì)養(yǎng)物質(zhì)調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pH（用（用HCl或或NaOH）分裝試分裝試管管滅菌（高壓蒸氣滅菌滅菌（高壓蒸氣滅菌15-30min）制成斜制成斜面面檢查滅菌效果（即檢查滅菌效果（即2830培養(yǎng)培養(yǎng)23d） 其它天然培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基

17、，如：玉米粉、其它天然培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基，如：玉米粉、黃豆粉、胡蘿卜、麩皮等原料，加適量水煮汁黃豆粉、胡蘿卜、麩皮等原料，加適量水煮汁過濾，取濾液與其它成分混合。過濾，取濾液與其它成分混合。 (二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)2、母種分離、母種分離母種分母種分離方法離方法孢子分離孢子分離 組織分離組織分離基質(zhì)分離基質(zhì)分離有性有性無性無性 孢子分離法孢子分離法 利用孢子在適宜培養(yǎng)基上形成菌絲來獲得利用孢子在適宜培養(yǎng)基上形成菌絲來獲得純菌種的方法。純菌種的方法。 孢子孢子分離分離法法1）單孢子分離法：）單孢子分離法：培養(yǎng)基上只接種培養(yǎng)基上只接種1個(gè)擔(dān)個(gè)擔(dān)孢子，使它萌發(fā)成菌絲體而獲得純菌種的孢子，使

18、它萌發(fā)成菌絲體而獲得純菌種的方法。方法。 如：雙孢蘑菇、草菇單個(gè)孢子分如：雙孢蘑菇、草菇單個(gè)孢子分離得到菌絲便能結(jié)實(shí)。離得到菌絲便能結(jié)實(shí)。（一個(gè)孢子（一個(gè)孢子萌發(fā)萌發(fā)菌絲體菌絲體純種）純種） 2）多孢子分離法：）多孢子分離法：許多孢子接種于同一培許多孢子接種于同一培養(yǎng)基上，使它們萌發(fā)自由交配來獲得純菌種養(yǎng)基上，使它們萌發(fā)自由交配來獲得純菌種的方法。如：香菇、平菇、金針菇、毛木耳的方法。如：香菇、平菇、金針菇、毛木耳等。等。 （多個(gè)孢子（多個(gè)孢子萌發(fā)萌發(fā)菌絲體菌絲體純種）純種） (二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)下面先解釋二個(gè)基本概念下面先解釋二個(gè)基本概念 1 1）同宗配合：）同宗配合：同一擔(dān)子

19、孢子萌發(fā)產(chǎn)生的兩條同一擔(dān)子孢子萌發(fā)產(chǎn)生的兩條菌絲之間進(jìn)行結(jié)合便能生育（自交親合、可孕，菌絲之間進(jìn)行結(jié)合便能生育（自交親合、可孕，類似于高等植物自花授粉），可用單孢子分離。類似于高等植物自花授粉），可用單孢子分離。如：雙孢蘑菇、草菇如：雙孢蘑菇、草菇 2 2）異宗配合：）異宗配合：同一性別菌絲之間不親合，只同一性別菌絲之間不親合，只有兩條性別不同的菌絲交配才能產(chǎn)生子實(shí)體。有兩條性別不同的菌絲交配才能產(chǎn)生子實(shí)體。大多數(shù)食用菌屬此類型，需用多孢子分離法。大多數(shù)食用菌屬此類型，需用多孢子分離法。 (二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù) 擔(dān)子菌亞門中，約擔(dān)子菌亞門中，約10%菌類屬同宗結(jié)菌類屬同宗結(jié)合，合，

20、90%以上是異宗配合，所以單孢子以上是異宗配合，所以單孢子分離對大多數(shù)食用菌不適用，只有育種分離對大多數(shù)食用菌不適用，只有育種時(shí)才采用。時(shí)才采用。 此法技術(shù)復(fù)雜，生產(chǎn)上很少采用，在此此法技術(shù)復(fù)雜，生產(chǎn)上很少采用，在此不作詳述。不作詳述。(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù) 多孢子分離簡單易行，生產(chǎn)上經(jīng)常采用，多多孢子分離簡單易行，生產(chǎn)上經(jīng)常采用，多孢子分離的具體操作方法有以下幾種：孢子分離的具體操作方法有以下幾種：整菇插種法整菇插種法：傘菌常用此法采得孢子。：傘菌常用此法采得孢子。 即選擇成熟度適當(dāng)?shù)膬?yōu)良種菇，在無菌操作即選擇成熟度適當(dāng)?shù)膬?yōu)良種菇，在無菌操作下，插入無菌孢子采集器內(nèi)，置適溫下讓其

21、自下，插入無菌孢子采集器內(nèi)，置適溫下讓其自然彈散孢子。用接種環(huán)取少量孢子，放入試管然彈散孢子。用接種環(huán)取少量孢子，放入試管斜面上培養(yǎng)。斜面上培養(yǎng)。種菇選擇：種菇選擇：菌絲生長健壯，無病蟲雜菌，出菇菌絲生長健壯，無病蟲雜菌，出菇均勻，轉(zhuǎn)潮較快，菇形圓整，菌蓋肥厚，達(dá)八均勻，轉(zhuǎn)潮較快，菇形圓整，菌蓋肥厚，達(dá)八九成熟。九成熟。 參見參見P48(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù) 孢子采集器是用來采集食用菌孢子的一種裝置。孢子采集器是用來采集食用菌孢子的一種裝置。 孢子孢子采集采集器器搪瓷盤（大號(hào)培養(yǎng)皿）搪瓷盤（大號(hào)培養(yǎng)皿）培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿種菇支架種菇支架玻璃鐘罩（大漏斗）玻璃鐘罩（大漏斗）參見參見P48懸

22、釣法懸釣法 此法主要用于耳類（黑木耳、毛木耳、此法主要用于耳類（黑木耳、毛木耳、銀耳等）孢子的采集。銀耳等）孢子的采集。 耳片（表面消毒）耳片（表面消毒） 懸掛于培養(yǎng)基上懸掛于培養(yǎng)基上方方培養(yǎng)培養(yǎng) 取出掛鉤與耳片取出掛鉤與耳片培養(yǎng)培養(yǎng)挑取先端菌絲挑取先端菌絲轉(zhuǎn)管純化轉(zhuǎn)管純化母種母種 1224h培養(yǎng)基培養(yǎng)基耳片耳片參見參見P48組織分離：組織分離：指通過菇體組織分離純種。指通過菇體組織分離純種。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：操作簡便、取材廣泛、不易變異，操作簡便、取材廣泛、不易變異，保持原菌種優(yōu)良種性。保持原菌種優(yōu)良種性。方法：方法：選擇種菇（出菇早、無病蟲害、柄短、選擇種菇（出菇早、無病蟲害、柄短、肉厚、大小適

23、中、肉厚、大小適中、56分成熟）分成熟）組織分離組織分離 組織分離法組織分離法參見參見P45 選擇種菇選擇種菇表面消毒（表面消毒（75%酒精或酒精或0.1%升汞）升汞）撕成兩半撕成兩半取菌柄菌蓋交取菌柄菌蓋交界處界處小塊菌肉小塊菌肉移入移入PDA培養(yǎng)培養(yǎng)觀觀察察轉(zhuǎn)管轉(zhuǎn)管純種純種 上述分離物在上述分離物在25下，經(jīng)下，經(jīng)3d5d可看到分離可看到分離物表面長出白色絨毛狀絲，每隔物表面長出白色絨毛狀絲，每隔1d2d檢查檢查1次，隨時(shí)淘汰霉菌、細(xì)菌污染的培養(yǎng)物，培次，隨時(shí)淘汰霉菌、細(xì)菌污染的培養(yǎng)物，培養(yǎng)養(yǎng)10d15d，再作再作1次轉(zhuǎn)管即得到純種。次轉(zhuǎn)管即得到純種。 組織分離法組織分離法參見參見P45-

24、46注：注： 取組織塊不要貪大，因組織塊小易定植取組織塊不要貪大，因組織塊小易定植; 有些食用菌不易用組織分離法獲純種；有些食用菌不易用組織分離法獲純種； 不同的食用菌切取部位和消毒方法不同。不同的食用菌切取部位和消毒方法不同。如：如：1）紅菇、乳菇等，因它們菇體細(xì)胞已泡）紅菇、乳菇等，因它們菇體細(xì)胞已泡囊化，再生能力極弱；囊化，再生能力極弱；又如：又如：2）銀耳和木耳等膠質(zhì)菌，它們子實(shí)體）銀耳和木耳等膠質(zhì)菌，它們子實(shí)體中菌絲含量極少，組織分離法不易成功。而只中菌絲含量極少，組織分離法不易成功。而只能取其生長的基質(zhì)即菇木、耳木分離。能取其生長的基質(zhì)即菇木、耳木分離。 組織分離法組織分離法 概念

25、：概念： 由菇木、耳木、培養(yǎng)料等食用菌生長基由菇木、耳木、培養(yǎng)料等食用菌生長基質(zhì)中的菌絲分離培養(yǎng)而成。這是利用潛在質(zhì)中的菌絲分離培養(yǎng)而成。這是利用潛在于寄主組織內(nèi)的菌絲體獲得純種的方法。于寄主組織內(nèi)的菌絲體獲得純種的方法。（常用于銀耳及木耳菌種分離（常用于銀耳及木耳菌種分離）基內(nèi)菌絲分離法（基質(zhì)分離法）基內(nèi)菌絲分離法（基質(zhì)分離法）參見參見P46-47段木內(nèi)菌絲分離法：段木內(nèi)菌絲分離法： 取取12cm菇木、耳木（子實(shí)體著生部位）菇木、耳木（子實(shí)體著生部位）去皮去皮消毒（消毒（75%酒精或酒精或0.1%升汞浸泡升汞浸泡1min）切去四周木塊切去四周木塊切成火柴桿粗細(xì)，切成火柴桿粗細(xì)，0.5 cm長

26、長的小木梗的小木梗取取1根放入試管斜面上根放入試管斜面上培養(yǎng)培養(yǎng)取取菌絲菌絲轉(zhuǎn)管純化轉(zhuǎn)管純化基內(nèi)菌絲分離法（基質(zhì)分離法）基內(nèi)菌絲分離法（基質(zhì)分離法）參見參見P46-47(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)3、菌種提純與擴(kuò)大繁殖、菌種提純與擴(kuò)大繁殖 用孢子、組織或基質(zhì)分離法得到的菌種，一般用孢子、組織或基質(zhì)分離法得到的菌種，一般不宜直接用于生產(chǎn)，必須經(jīng)過提純方可應(yīng)用。不宜直接用于生產(chǎn)，必須經(jīng)過提純方可應(yīng)用。提純：提純：選稀疏單菌落選稀疏單菌落邊緣取菌邊緣取菌接種試管斜接種試管斜面（面（35支）支）培養(yǎng)培養(yǎng)純菌種。純菌種。擴(kuò)大繁殖擴(kuò)大繁殖：提純的母種或從有關(guān)單位引進(jìn)的母：提純的母種或從有關(guān)單位引進(jìn)的

27、母種，數(shù)量均很少，應(yīng)擴(kuò)大繁殖后再用。種，數(shù)量均很少，應(yīng)擴(kuò)大繁殖后再用。 在母種繁殖時(shí)，最好一次多移些，不易多次在母種繁殖時(shí)，最好一次多移些，不易多次轉(zhuǎn)管，以免影響出菇率，降低產(chǎn)量和質(zhì)量。轉(zhuǎn)管，以免影響出菇率，降低產(chǎn)量和質(zhì)量。 一支斜面母種可移接一支斜面母種可移接40支左右斜面試管。支左右斜面試管。4、質(zhì)量檢驗(yàn)、質(zhì)量檢驗(yàn) 對分離、引進(jìn)或轉(zhuǎn)管擴(kuò)大的菌種，應(yīng)經(jīng)過質(zhì)量對分離、引進(jìn)或轉(zhuǎn)管擴(kuò)大的菌種，應(yīng)經(jīng)過質(zhì)量鑒定，選優(yōu)去劣，方可使用。鑒定，選優(yōu)去劣，方可使用。1）檢驗(yàn)方法）檢驗(yàn)方法外觀鑒定外觀鑒定優(yōu)良菌種：優(yōu)良菌種：菌絲濃白、粗壯、富有彈性，則生命菌絲濃白、粗壯、富有彈性，則生命力強(qiáng)。如有子實(shí)體或茶褐色

28、被膜，只要除去仍可力強(qiáng)。如有子實(shí)體或茶褐色被膜，只要除去仍可使用。使用。老化菌種：老化菌種：菌種已收縮、干燥或菌絲體自溶產(chǎn)生菌種已收縮、干燥或菌絲體自溶產(chǎn)生了大量紅褐色液體，說明生活力弱，不可使用。了大量紅褐色液體，說明生活力弱，不可使用。 (二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)顯微鏡檢驗(yàn)顯微鏡檢驗(yàn) 挑取少許菌絲于載玻片上，加蒸餾水挑取少許菌絲于載玻片上，加蒸餾水1滴，滴，蓋上蓋玻片，觀察菌絲形態(tài)是否為培育的菌種。蓋上蓋玻片，觀察菌絲形態(tài)是否為培育的菌種。菌絲生長速度菌絲生長速度 將其接種到適宜斜面培養(yǎng)基上，在適溫下培將其接種到適宜斜面培養(yǎng)基上，在適溫下培養(yǎng)。凡菌絲生長較快、整齊、濃密而健壯的就養(yǎng)

29、。凡菌絲生長較快、整齊、濃密而健壯的就是優(yōu)良母種。是優(yōu)良母種。參見參見52(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)顯微鏡檢驗(yàn)顯微鏡檢驗(yàn)菌絲生長速度菌絲生長速度出菇試驗(yàn)出菇試驗(yàn) 進(jìn)行子實(shí)體產(chǎn)量和品質(zhì)評比。進(jìn)行子實(shí)體產(chǎn)量和品質(zhì)評比。 經(jīng)以上檢驗(yàn)，通過綜合評比，選出菌絲生經(jīng)以上檢驗(yàn)，通過綜合評比，選出菌絲生長速度較快，子實(shí)體生長健壯、品質(zhì)好、產(chǎn)長速度較快，子實(shí)體生長健壯、品質(zhì)好、產(chǎn)量高的母種，即可供生產(chǎn)上使用。量高的母種，即可供生產(chǎn)上使用。參見參見52(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)(二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)2）檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)）檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)首先要辨認(rèn)分離或引進(jìn)的是不首先要辨認(rèn)分離或引進(jìn)的是不是所需要的菌種

30、；是所需要的菌種；有無雜菌污染，是否老化。有無雜菌污染，是否老化。 (二二) 母種生產(chǎn)技術(shù)母種生產(chǎn)技術(shù)(三三) 原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù) 原種和栽培種的生產(chǎn)，無論是培養(yǎng)基成分，原種和栽培種的生產(chǎn)，無論是培養(yǎng)基成分，配制方法和滅菌方法基本上是相同的。配制方法和滅菌方法基本上是相同的。1）原種：是由試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的母種作種）原種：是由試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的母種作種源接種而成，主要用于繁殖栽培種，也可直接源接種而成，主要用于繁殖栽培種，也可直接用于生產(chǎn)。用于生產(chǎn)。（母種（母種原種）原種）2）栽培種：由原種作種源擴(kuò)大而成，只能用于）栽培種：由原種作種源擴(kuò)大而成，只能用于生產(chǎn)。生產(chǎn)

31、。（原種（原種栽培種栽培種)(三三) 原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法 培培養(yǎng)養(yǎng)料料 木屑木屑米糠培養(yǎng)料：米糠培養(yǎng)料：木生菇類，如：木生菇類，如：木耳、銀耳、香菇；木耳、銀耳、香菇；草莖或草糞草莖或草糞廄肥培養(yǎng)料：廄肥培養(yǎng)料：草生菇類，草生菇類，如：蘑菇、草菇；如：蘑菇、草菇；棉籽殼棉籽殼米糠培養(yǎng)料米糠培養(yǎng)料：多種菇類。：多種菇類。 糞草培養(yǎng)基（適用于蘑菇）糞草培養(yǎng)基（適用于蘑菇） 稻草或麥秸稻草或麥秸20kg、糞肥（干）糞肥（干）30kg、石膏石膏500g、水適量。水適量。方法：稻草切成方法：稻草切成2cm長糞肥長糞肥混合

32、發(fā)酵石混合發(fā)酵石膏膏調(diào)水調(diào)水裝瓶裝瓶滅菌滅菌稻草麩皮培養(yǎng)基（草菇）稻草麩皮培養(yǎng)基（草菇） 干稻草干稻草78%、麩皮或米糠、麩皮或米糠20%、蔗糖、蔗糖1%、過磷酸鈣過磷酸鈣1%、水適量、水適量方法：稻草切成方法：稻草切成2cm長長發(fā)酵發(fā)酵蔗糖麩皮蔗糖麩皮過磷酸鈣過磷酸鈣 1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法 木屑米糠培養(yǎng)基木屑米糠培養(yǎng)基（香菇、木耳、猴頭、平菇等）（香菇、木耳、猴頭、平菇等） 木屑木屑78%、麩皮或米糠、麩皮或米糠20%、石膏、石膏1%、蔗糖、蔗糖1%、水適量。、水適量。 木屑、麩皮、黃豆粉培養(yǎng)基（銀耳）木屑、麩皮、黃豆粉培養(yǎng)基（銀耳） 木屑木屑50kg、

33、麩皮麩皮15kg、黃豆粉黃豆粉1kg、蔗糖蔗糖0.75kg、MgSO4 0.25kg、水水7075kg。棉籽殼培養(yǎng)基（平菇、猴頭、金針菇）棉籽殼培養(yǎng)基（平菇、猴頭、金針菇） 棉籽殼棉籽殼99.7%、蔗糖、蔗糖0.1%、石膏、石膏0.2%、水適量。、水適量。1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法 (三三) 原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)2、培養(yǎng)基（料）配制原則、培養(yǎng)基（料）配制原則掌握碳氮比例掌握碳氮比例 食用菌對碳和氮的需要有一個(gè)比例，簡稱碳食用菌對碳和氮的需要有一個(gè)比例，簡稱碳氮比（氮比（C）。）。菌絲體生長階段：菌絲體生長階段：C=20 1；子實(shí)體形成階段

34、：子實(shí)體形成階段：C=3040 1；C 過高，菌絲體生長過旺，而子實(shí)體小、過高，菌絲體生長過旺，而子實(shí)體小、產(chǎn)量低。產(chǎn)量低。2、培養(yǎng)基（料）配制原則、培養(yǎng)基（料）配制原則 選好培養(yǎng)材料選好培養(yǎng)材料首先選不含殺菌物質(zhì)的木屑首先選不含殺菌物質(zhì)的木屑 杉、松、樟等樹種，含酚、酯、精油等殺杉、松、樟等樹種，含酚、酯、精油等殺菌物質(zhì)，會(huì)抑制食用菌生長。要用必須經(jīng)過菌物質(zhì)，會(huì)抑制食用菌生長。要用必須經(jīng)過處理，如：蒸煮、曬等。處理，如：蒸煮、曬等。 根據(jù)食用菌的喜好選木屑根據(jù)食用菌的喜好選木屑 如：培養(yǎng)香菇用樺木屑就比椴木屑好；如：培養(yǎng)香菇用樺木屑就比椴木屑好； 培養(yǎng)金針菇用構(gòu)，楮等木屑就比用榆、槐等培養(yǎng)金

35、針菇用構(gòu)，楮等木屑就比用榆、槐等木屑好。木屑好。 注意物理性狀注意物理性狀 培養(yǎng)原料要注意顆粒粗細(xì)、質(zhì)地軟硬程度，培養(yǎng)原料要注意顆粒粗細(xì)、質(zhì)地軟硬程度，以及持水性能等物理性狀。以及持水性能等物理性狀。調(diào)節(jié)酸堿度調(diào)節(jié)酸堿度 各種食用菌需要的各種食用菌需要的pH值不同，配制培養(yǎng)料值不同，配制培養(yǎng)料時(shí)，應(yīng)選用時(shí)，應(yīng)選用NaOH、石灰、鹽酸或過磷酸鈣等石灰、鹽酸或過磷酸鈣等物質(zhì)調(diào)節(jié)物質(zhì)調(diào)節(jié)pH值。霉菌比食用菌喜歡更低的值。霉菌比食用菌喜歡更低的pH值，生產(chǎn)上有時(shí)為了控制這類雜菌的發(fā)生，往值，生產(chǎn)上有時(shí)為了控制這類雜菌的發(fā)生，往往將往將pH值適當(dāng)調(diào)高值適當(dāng)調(diào)高0.51。2、培養(yǎng)基（料）配制原則、培養(yǎng)基（

36、料）配制原則3、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）木屑：木屑： 樹種：樹種：除松樹、杉樹、柏樹、樟樹、除松樹、杉樹、柏樹、樟樹、蕓香屬、按屬等樹種之外，絕大多數(shù)闊蕓香屬、按屬等樹種之外，絕大多數(shù)闊葉樹和木屑都可以利用。（因其中含有葉樹和木屑都可以利用。（因其中含有酚、酯、精油等殺菌物質(zhì)）酚、酯、精油等殺菌物質(zhì)） 粗細(xì)：粗細(xì)：不宜過細(xì)，以免培養(yǎng)基過濕或不宜過細(xì)，以免培養(yǎng)基過濕或通氣不良。通氣不良。 3、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）木屑：木屑： 選擇：選擇：根據(jù)食用菌分解能力選擇，分解能根據(jù)食用菌分解能力選擇，分解能力較強(qiáng)的食用菌采用硬

37、質(zhì)闊葉樹木屑，反之力較強(qiáng)的食用菌采用硬質(zhì)闊葉樹木屑，反之采用軟質(zhì)樹種木屑。采用軟質(zhì)樹種木屑。如：金針菇分解能力較弱，以含單寧較少木如：金針菇分解能力較弱，以含單寧較少木屑為宜，木屑越陳越好；屑為宜，木屑越陳越好；茯苓菌分解能力較強(qiáng)，可采用顆粒粗的松木茯苓菌分解能力較強(qiáng)，可采用顆粒粗的松木屑或松木釘。屑或松木釘。 米糠、麩皮作用米糠、麩皮作用作用：補(bǔ)充氮源和維生素。作用：補(bǔ)充氮源和維生素。 稻草、麥秸、木屑、棉籽殼等纖維素原料，稻草、麥秸、木屑、棉籽殼等纖維素原料，含氮量低。如：木屑含氮量含氮量低。如：木屑含氮量0.03%以下。以下。麩皮：麩皮：含氮量比米糠多，但維生素不如米糠。含氮量比米糠多，

38、但維生素不如米糠。米糠：米糠：含氮量比麩皮少。含氮量比麩皮少。用量：一般用量：一般10%20%，過多易引起污染。，過多易引起污染。 3、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）加糖的作用加糖的作用初期補(bǔ)充碳源，用量初期補(bǔ)充碳源，用量1%5%。誘導(dǎo)胞外酶的產(chǎn)生。誘導(dǎo)胞外酶的產(chǎn)生。 纖維素原料，食用菌利用緩慢。加入纖維素原料，食用菌利用緩慢。加入少量白糖作為食用菌初期補(bǔ)充碳源，促少量白糖作為食用菌初期補(bǔ)充碳源，促進(jìn)菌絲快速生長，同時(shí)誘導(dǎo)纖維素酶的進(jìn)菌絲快速生長，同時(shí)誘導(dǎo)纖維素酶的產(chǎn)生，更好地利用纖維素。產(chǎn)生，更好地利用纖維素。 3、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）、原料選擇的注

39、意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）Ca2作用作用 提供食用菌鈣離子：原料中加石膏、提供食用菌鈣離子：原料中加石膏、CaCO3或過磷酸鈣、骨粉提供食用菌鈣或過磷酸鈣、骨粉提供食用菌鈣離子；離子； 鈣不斷中和食用菌產(chǎn)生的有機(jī)酸；鈣不斷中和食用菌產(chǎn)生的有機(jī)酸； 鈣還能中和單寧；鈣還能中和單寧； 減少過量減少過量K、Mg對菌絲中毒，促進(jìn)對菌絲中毒，促進(jìn)菌絲生長。菌絲生長。 3、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）、原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說明）(三三) 原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)4、原種、栽培種的制作方法、原種、栽培種的制作方法 按配方稱取原料按配方稱取原料拌料拌料裝瓶（袋）裝瓶（袋）打洞（孔徑打洞（孔徑

40、1cm深至瓶底）深至瓶底）滅菌（滅菌（1.5 kgcm2，1.52 h）冷卻冷卻接種（接入接種（接入黃豆大小一塊）黃豆大小一塊）培養(yǎng)（培養(yǎng)（25 27 ）菌絲長滿瓶（袋）菌絲長滿瓶（袋）培養(yǎng)培養(yǎng)7 d8 d擴(kuò)擴(kuò)大成栽培種。大成栽培種。 (三三) 原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)5、雜菌檢查（菌種檢查）、雜菌檢查（菌種檢查） 接種后的原種，一般在接種后的原種，一般在3 d5 d左右菌絲左右菌絲恢復(fù)生長，應(yīng)每天全面檢查雜菌情況，如恢復(fù)生長，應(yīng)每天全面檢查雜菌情況，如有污染及時(shí)剔除。有污染及時(shí)剔除。（正常為白色，若混有其它色澤，應(yīng)及時(shí)（正常為白色，若混有其它色澤，應(yīng)及時(shí)處理）；如發(fā)現(xiàn)接種

41、塊無新菌絲萌發(fā)，則處理）；如發(fā)現(xiàn)接種塊無新菌絲萌發(fā)，則認(rèn)為是死菌，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)種。認(rèn)為是死菌，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)種。 正常：菌絲白色正常：菌絲白色 雜菌：黃、紅、綠、黑雜菌：黃、紅、綠、黑 死菌：補(bǔ)種死菌：補(bǔ)種二、菌種保藏二、菌種保藏 菌種是食用菌栽培成敗的關(guān)鍵。分菌種是食用菌栽培成敗的關(guān)鍵。分離篩選一株優(yōu)良的菌種是一項(xiàng)艱苦的離篩選一株優(yōu)良的菌種是一項(xiàng)艱苦的任務(wù)，而長期保持優(yōu)良菌種的性能，任務(wù)，而長期保持優(yōu)良菌種的性能，也是一項(xiàng)極為重要的工作。食用菌與也是一項(xiàng)極為重要的工作。食用菌與其他其他微生物微生物一樣，都是有遺傳性和變一樣，都是有遺傳性和變異性。異性。遺傳性遺傳性：保證了優(yōu)良菌種的性能相對穩(wěn)定，能：保

42、證了優(yōu)良菌種的性能相對穩(wěn)定，能傳給下一代，為菌種保藏提供了良好的條件。傳給下一代，為菌種保藏提供了良好的條件。變異性變異性：使高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的菌種，逐漸衰退，給菌：使高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的菌種，逐漸衰退，給菌種保藏帶來了困難。種保藏帶來了困難。菌種保藏的目的：菌種保藏的目的：保持菌種的優(yōu)良性狀；保持菌種的優(yōu)良性狀；降低衰退速度。降低衰退速度。確保菌種純潔，長期在生產(chǎn)上應(yīng)用。確保菌種純潔，長期在生產(chǎn)上應(yīng)用。（不衰退、不死亡、不污染雜菌）（不衰退、不死亡、不污染雜菌）二、菌種保藏二、菌種保藏 原理：原理：降低菌種代謝活動(dòng)。降低菌種代謝活動(dòng)。降低代謝活動(dòng)方法：降低代謝活動(dòng)方法：（創(chuàng)造各種條件）（創(chuàng)造各種條件） 低溫低

43、溫 干燥干燥 缺氧等缺氧等 在這些條件下，食用菌可處于在這些條件下，食用菌可處于“休眠休眠”狀態(tài)或處于微弱的代謝活動(dòng)。狀態(tài)或處于微弱的代謝活動(dòng)。 常用的保存方法有以下幾種。常用的保存方法有以下幾種。 二、菌種保藏二、菌種保藏 （一）斜面低溫保藏法（一）斜面低溫保藏法 這是一種較好的簡易保藏法，目前應(yīng)用最多。這是一種較好的簡易保藏法，目前應(yīng)用最多。方法：方法：將培養(yǎng)好的斜面菌種，放入將培養(yǎng)好的斜面菌種，放入4冰箱內(nèi)保冰箱內(nèi)保藏。藏。保存期：保存期：36月月適用范圍：適用范圍：多數(shù)食用菌多數(shù)食用菌注：不適于草菇。由于草菇對低溫的耐受力較注：不適于草菇。由于草菇對低溫的耐受力較差，其菌絲在差，其菌絲

44、在5下易死亡，所以保藏草菇菌種下易死亡，所以保藏草菇菌種的溫度需提高至的溫度需提高至1012或在草菇斜面菌種上加或在草菇斜面菌種上加34ml 10%甘油防凍。甘油防凍。二、菌種保藏二、菌種保藏 （二）石蠟封藏法（隔絕空氣法）（二）石蠟封藏法（隔絕空氣法）方法：方法：用注射器注入滅菌的石蠟。注入量以高用注射器注入滅菌的石蠟。注入量以高出斜面尖端出斜面尖端1cm為宜，然后塞上棉塞或無菌橡為宜，然后塞上棉塞或無菌橡皮塞，用蠟封好，保藏在冰箱或低溫干燥處。皮塞，用蠟封好，保藏在冰箱或低溫干燥處。（菌絲體與空氣隔絕，降低其代謝活動(dòng)，防止（菌絲體與空氣隔絕，降低其代謝活動(dòng)，防止培養(yǎng)基干燥）培養(yǎng)基干燥）保存

45、期：保存期：6年年適用范圍：適用范圍： 可用于保藏所有不宜用冷凍或干燥保藏的真菌?？捎糜诒２厮胁灰擞美鋬龌蚋稍锉２氐恼婢?石蠟石蠟培養(yǎng)基培養(yǎng)基菌絲體菌絲體二、菌種保藏二、菌種保藏 （三）擔(dān)子孢子保藏法（干燥）（三）擔(dān)子孢子保藏法（干燥） 食用菌的孢子，可用濾紙條、河砂、氯食用菌的孢子，可用濾紙條、河砂、氯化硅膠作吸附劑，干燥后進(jìn)行保存?；枘z作吸附劑，干燥后進(jìn)行保存。1、濾紙片保藏法、濾紙片保藏法 將食用菌的孢子吸附在無菌的濾紙條上，將食用菌的孢子吸附在無菌的濾紙條上，干燥后進(jìn)行保存，一般可保存干燥后進(jìn)行保存，一般可保存35年。年。方法：方法：濾紙片（剪成濾紙片（剪成40.8cm小條小條滅

46、菌）滅菌）收集孢子（讓孢子彈射到濾紙條上）收集孢子（讓孢子彈射到濾紙條上）將有孢子的濾紙條放入試管中（含硅膠）將有孢子的濾紙條放入試管中（含硅膠）封口封口冰箱中保存冰箱中保存（三）擔(dān)子孢子保藏法（干燥）（三）擔(dān)子孢子保藏法（干燥）1、濾紙片保藏法、濾紙片保藏法2、砂土管保藏法、砂土管保藏法砂土（砂土（2 1）裝管裝管滅菌滅菌接入孢子接入孢子干燥干燥保存。保存。 （四）冷凍、真空、干燥保藏法（四）冷凍、真空、干燥保藏法 這種方法是利用低溫、干燥、缺這種方法是利用低溫、干燥、缺氧等條件保存菌種，一般可保存氧等條件保存菌種，一般可保存10年左右。年左右。 二、菌種保藏二、菌種保藏三、制種、保藏中易碰

47、到的問題及處理方法三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法1、母種污染處理、母種污染處理細(xì)菌污染細(xì)菌污染底部取菌：底部取菌：可根據(jù)細(xì)菌只發(fā)生在可根據(jù)細(xì)菌只發(fā)生在培養(yǎng)基表面培養(yǎng)基表面，而真菌菌絲能穿透到培養(yǎng)基內(nèi)部的特點(diǎn)，用無而真菌菌絲能穿透到培養(yǎng)基內(nèi)部的特點(diǎn)，用無菌操作法敲破試管取出培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基的底菌操作法敲破試管取出培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基的底部挑取一小塊帶有菌絲的培養(yǎng)基，移植到另一部挑取一小塊帶有菌絲的培養(yǎng)基，移植到另一試管中培養(yǎng)，可得到純正的母種。試管中培養(yǎng)，可得到純正的母種。二、菌種保藏二、菌種保藏三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法1、母種污染處理、母

48、種污染處理細(xì)菌污染細(xì)菌污染底部取菌底部取菌覆蓋培養(yǎng)：覆蓋培養(yǎng)：將熔化培養(yǎng)基冷卻到將熔化培養(yǎng)基冷卻到40，倒在已，倒在已污染細(xì)菌的斜面上，使之形成厚約污染細(xì)菌的斜面上，使之形成厚約20 cm的覆的覆蓋層，當(dāng)食用菌菌絲透過培養(yǎng)基形成新的菌落蓋層，當(dāng)食用菌菌絲透過培養(yǎng)基形成新的菌落時(shí)，即可挑取轉(zhuǎn)管純化。時(shí)，即可挑取轉(zhuǎn)管純化。三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法1、母種污染處理、母種污染處理細(xì)菌污染細(xì)菌污染真菌污染真菌污染 若污染的是青霉、黃霉、木霉等真菌，只要若污染的是青霉、黃霉、木霉等真菌，只要母種菌絲與這些雜菌沒有相聯(lián)或尚有一部分菌母種菌絲與這些雜菌沒有相

49、聯(lián)或尚有一部分菌絲沒有相聯(lián)，并且這些雜菌的菌絲還沒有產(chǎn)生絲沒有相聯(lián)，并且這些雜菌的菌絲還沒有產(chǎn)生孢子時(shí)，可以用無菌方法仔細(xì)挑取沒有相聯(lián)的孢子時(shí)，可以用無菌方法仔細(xì)挑取沒有相聯(lián)的一部分菌絲，移植到另外的試管中繼續(xù)培育，一部分菌絲，移植到另外的試管中繼續(xù)培育，就能得到純正的母種。就能得到純正的母種。 三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法1、母種污染處理、母種污染處理2、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪些？、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪些？怎樣鑒別？怎樣鑒別？ 根據(jù)雜菌開始發(fā)生的部位，大致有以下幾根據(jù)雜菌開始發(fā)生的部位，大致有以下幾種污染原因：種污染原因：

50、若雜菌同時(shí)在培養(yǎng)基的若雜菌同時(shí)在培養(yǎng)基的上、中、下上、中、下部位發(fā)部位發(fā)生，主要是由于生，主要是由于培養(yǎng)基滅菌不徹底培養(yǎng)基滅菌不徹底造成的。造成的。若雜菌開始發(fā)生在若雜菌開始發(fā)生在接種塊接種塊上，這很可能是上，這很可能是母種或原種已經(jīng)感染了雜菌；或者是由于母種或原種已經(jīng)感染了雜菌；或者是由于接接種工具不嚴(yán)格種工具不嚴(yán)格（消毒），把雜菌帶入。（消毒），把雜菌帶入。2、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪些？怎樣鑒別？些？怎樣鑒別？若雜菌先在若雜菌先在培養(yǎng)基表面培養(yǎng)基表面發(fā)生，這是由發(fā)生，這是由于接種過程中于接種過程中無菌操作不嚴(yán)無菌操作不嚴(yán)而引起的。而引起的。若雜菌

51、是在若雜菌是在接種后若干天才接種后若干天才發(fā)生的，發(fā)生的，而且是發(fā)生在瓶口往下掛的，這說明雜而且是發(fā)生在瓶口往下掛的，這說明雜菌是從棉花塞侵入培養(yǎng)基的。引起的原菌是從棉花塞侵入培養(yǎng)基的。引起的原因是因是培養(yǎng)室濕度過大、棉塞受潮，造成培養(yǎng)室濕度過大、棉塞受潮，造成霉菌滋生所致霉菌滋生所致。三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法三、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法3、為什么母種不能多次轉(zhuǎn)管移植？、為什么母種不能多次轉(zhuǎn)管移植？ 母種轉(zhuǎn)管次數(shù)多了會(huì)削弱菌絲的生活力，母種轉(zhuǎn)管次數(shù)多了會(huì)削弱菌絲的生活力，降低出菇率，甚至造成菌絲不孕而不能降低出菇率，甚至造成菌絲不孕而不能形成子實(shí)體。因此母種培育可以一次

52、多形成子實(shí)體。因此母種培育可以一次多培育幾支試管，不要反復(fù)多次分離轉(zhuǎn)管，培育幾支試管，不要反復(fù)多次分離轉(zhuǎn)管，以確保菌絲旺盛的生活力。以確保菌絲旺盛的生活力。（發(fā)生變異）（發(fā)生變異）4、優(yōu)良菌種的標(biāo)準(zhǔn)是什么？、優(yōu)良菌種的標(biāo)準(zhǔn)是什么？ 各種食用菌菌種，既有特定的質(zhì)量標(biāo)各種食用菌菌種，既有特定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，也有共同的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。這些共同的準(zhǔn)，也有共同的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。這些共同的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要是質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要是純、壯純、壯兩條。兩條。純：純：除銀耳菌種，其余各種栽培食用除銀耳菌種，其余各種栽培食用菌均是一種菌絲體的純培養(yǎng)物，不得混菌均是一種菌絲體的純培養(yǎng)物，不得混入雜菌或純培養(yǎng)物以外的其它菌種。入雜菌或純培養(yǎng)物以外

53、的其它菌種。例如：香菇例如：香菇7925菌種，只能是菌種，只能是7925菌株菌株菌絲體的純培養(yǎng)。菌絲體的純培養(yǎng)。4、優(yōu)良菌種的標(biāo)準(zhǔn)是什么？、優(yōu)良菌種的標(biāo)準(zhǔn)是什么？ 第一、不得混入毛霉、根霉、曲霉、木第一、不得混入毛霉、根霉、曲霉、木霉等任何霉菌或細(xì)菌、病毒；霉等任何霉菌或細(xì)菌、病毒；（雜菌）（雜菌）第二、也不得混入平菇、金針菇等其它第二、也不得混入平菇、金針菇等其它食用菌的菌絲體；食用菌的菌絲體；（其它食用菌）（其它食用菌）第三、也不得混入香菇第三、也不得混入香菇7925菌株以外的菌株以外的任何一種香菇菌株。任何一種香菇菌株。（其它菌株）（其它菌株）壯：壯：菌種長相正常、長勢旺、再生能菌種長相

54、正常、長勢旺、再生能力強(qiáng)。力強(qiáng)。 1、食用菌生產(chǎn)中常用的設(shè)備和用具有哪些？、食用菌生產(chǎn)中常用的設(shè)備和用具有哪些？（1）接種設(shè)備：如接種箱、超凈工作臺(tái)、接種）接種設(shè)備：如接種箱、超凈工作臺(tái)、接種室等；室等；（2）滅菌設(shè)備：如高壓蒸汽滅菌鍋、常壓滅菌）滅菌設(shè)備：如高壓蒸汽滅菌鍋、常壓滅菌鍋等；鍋等；（3）培養(yǎng)設(shè)備：如培養(yǎng)室、生化培養(yǎng)箱；）培養(yǎng)設(shè)備：如培養(yǎng)室、生化培養(yǎng)箱；（4）培養(yǎng)菌種容器：如試管、菌種瓶、菌種袋；）培養(yǎng)菌種容器：如試管、菌種瓶、菌種袋；（5）接種工具：如接種針、環(huán)、刀、鉤、鏟、）接種工具：如接種針、環(huán)、刀、鉤、鏟、鋤、槍等；鋤、槍等；（6）消毒藥品：如）消毒藥品：如70%酒精、酒精、0.1%升汞、升汞、0.1%KMnO4、5%石炭酸、石炭酸、 2%來蘇爾、新潔來蘇爾、新潔爾滅、甲醛（福爾馬林）等。爾滅、甲醛（福爾馬林）等。一、簡答題一、簡答題2、寫出、寫出PDA培養(yǎng)基的配方和配制方法培養(yǎng)基的配方和配制方法。PDA培養(yǎng)基的配方：培養(yǎng)基的配方：馬鈴薯馬鈴薯200g，葡萄糖，葡萄糖20g，瓊脂，瓊脂20g，水，水1000mL，pH6.5配制方法：配制方法：馬鈴薯去皮馬鈴薯去皮切成片切成片稱取稱取200g加水加水1000mL煮沸煮沸2030mim雙層紗