傳染病病例標(biāo)本采集和運輸_第1頁
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文檔簡介

1、整理課件病原微生物標(biāo)本的采集、保存及運輸方法整理課件病原微生物標(biāo)本的采集 標(biāo)本采集種類血液標(biāo)本(抗凝血與非抗凝血)呼吸道標(biāo)本上呼吸道標(biāo)本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、痰液等)下呼吸道標(biāo)本(呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、胸腔積液、肺組織活檢標(biāo)本等)。消化道標(biāo)本 (糞便和肛拭子)尿液標(biāo)本其他人體標(biāo)本 (腦脊液、皰疹液、淋巴結(jié)穿刺液等)尸體解剖標(biāo)本采集媒介和動物標(biāo)本采集環(huán)境標(biāo)本采集整理課件病原微生物標(biāo)本的采集 標(biāo)本采集中的注意事項采樣時生物安全的考慮采樣時生物安全的考慮采樣時間及部位采樣時間及部位采樣容器采樣容器采樣標(biāo)本的標(biāo)識采樣標(biāo)本的標(biāo)識各種標(biāo)本的采樣方法各種標(biāo)本的采樣方法整理課件病原微生物

2、標(biāo)本的采集 采樣時生物安全的考慮采樣時生物安全的考慮 1)具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員;具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員; 住院病例的標(biāo)本由所在醫(yī)院醫(yī)護(hù)人員在當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)專業(yè)人員指導(dǎo)下采集。 密切接觸者標(biāo)本由當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)采集。 2具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護(hù)水具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護(hù)水 平相適應(yīng)的設(shè)備,包括個人防護(hù)用品(隔離衣、帽、平相適應(yīng)的設(shè)備,包括個人防護(hù)用品(隔離衣、帽、 口罩、鞋套、手套、防護(hù)眼鏡等)、防護(hù)材料、器材口罩、鞋套、手套、防護(hù)眼鏡等)、防護(hù)材料、器材 和防護(hù)設(shè)施等;和防護(hù)設(shè)施等; 3)具有有效的防止病原微生物擴(kuò)散和

3、感染的措施;具有有效的防止病原微生物擴(kuò)散和感染的措施; 4)具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。整理課件病原微生物標(biāo)本的采集采樣時間及部位采樣時間及部位時間時間:一般在懷疑細(xì)菌感染時應(yīng)盡量在急性發(fā)病期和使用抗生素之前一般在懷疑細(xì)菌感染時應(yīng)盡量在急性發(fā)病期和使用抗生素之前采集標(biāo)本,進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng),否則這種標(biāo)本在分離培養(yǎng)時要加采集標(biāo)本,進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng),否則這種標(biāo)本在分離培養(yǎng)時要加藥物拮抗劑。藥物拮抗劑。 作病毒分離和病毒抗原檢測的標(biāo)本,應(yīng)在發(fā)病初期和急作病毒分離和病毒抗原檢測的標(biāo)本,應(yīng)在發(fā)病初期和急性期采樣,因為此時病毒在體內(nèi)大量繁殖,檢

4、出率高,性期采樣,因為此時病毒在體內(nèi)大量繁殖,檢出率高,病毒分類標(biāo)本最好在發(fā)病病毒分類標(biāo)本最好在發(fā)病12天內(nèi)采取。天內(nèi)采取。 部位:根據(jù)致病菌在患者不同病期的體內(nèi)分布和排出部部位:根據(jù)致病菌在患者不同病期的體內(nèi)分布和排出部位,采集不同的標(biāo)本。位,采集不同的標(biāo)本。 例如傷寒病人應(yīng)在發(fā)病早期未使用抗生素之前采血培養(yǎng),例如傷寒病人應(yīng)在發(fā)病早期未使用抗生素之前采血培養(yǎng),在在23周時停用抗生素周時停用抗生素2天后采糞便培養(yǎng)。全病程可做骨天后采糞便培養(yǎng)。全病程可做骨髓培養(yǎng)。髓培養(yǎng)。整理課件病原微生物標(biāo)本的采集 采樣容器采樣容器采集標(biāo)本應(yīng)使用無菌容器,一個標(biāo)本一個采集標(biāo)本應(yīng)使用無菌容器,一個標(biāo)本一個容器。容

5、器。對容器基本要求是選耐用材料制成,容器對容器基本要求是選耐用材料制成,容器包裝好后可防滲漏。包裝好后可防滲漏。能承受空中地面運送過程中可能發(fā)生的溫能承受空中地面運送過程中可能發(fā)生的溫度和壓力變化。度和壓力變化。整理課件病原微生物標(biāo)本的采集 采樣標(biāo)本的標(biāo)識采樣標(biāo)本的標(biāo)識 包括種類、原始采樣容器、標(biāo)本性質(zhì)、數(shù)量、運送人和包括種類、原始采樣容器、標(biāo)本性質(zhì)、數(shù)量、運送人和接受人及其包裝日期、運輸日期、統(tǒng)一的識別編號及病接受人及其包裝日期、運輸日期、統(tǒng)一的識別編號及病人聯(lián)系方式、姓名、檢驗?zāi)康?、臨床診斷等信息。人聯(lián)系方式、姓名、檢驗?zāi)康?、臨床診斷等信息。 其他信息如病人信息(年齡、性別、完整地址),臨

6、床其他信息如病人信息(年齡、性別、完整地址),臨床資料(發(fā)病日期、臨床癥狀、治療史、可疑的發(fā)病原因、資料(發(fā)病日期、臨床癥狀、治療史、可疑的發(fā)病原因、采樣前是否用抗生素),急性或恢復(fù)期標(biāo)本,癥狀類似采樣前是否用抗生素),急性或恢復(fù)期標(biāo)本,癥狀類似病人的其他標(biāo)本。病人的其他標(biāo)本。接收標(biāo)本的實驗室也應(yīng)記錄接收日期和時間、接受標(biāo)本者的姓名、接收標(biāo)本的實驗室也應(yīng)記錄接收日期和時間、接受標(biāo)本者的姓名、標(biāo)本性質(zhì)和狀態(tài)等。標(biāo)本性質(zhì)和狀態(tài)等。 這些信息都是解釋檢驗結(jié)果所必需的。這些信息都是解釋檢驗結(jié)果所必需的。整理課件病原微生物標(biāo)本的采集各種標(biāo)本的采樣方法各種標(biāo)本的采樣方法(1)血液采集血液采集全血:作血液病

7、原培養(yǎng)時,嚴(yán)格用無菌穿刺法采靜脈血,移入無菌的有螺口的抗凝的全血:作血液病原培養(yǎng)時,嚴(yán)格用無菌穿刺法采靜脈血,移入無菌的有螺口的抗凝的容器或培養(yǎng)瓶中送檢。采集量為容器或培養(yǎng)瓶中送檢。采集量為3-5毫升。毫升。做核酸檢測時,抗凝劑一般使用做核酸檢測時,抗凝劑一般使用EDTA-K3或枸櫞酸鈉,不可用肝素。或枸櫞酸鈉,不可用肝素。血清:用于檢測用于檢測IgM的血清一般采于發(fā)病的血清一般采于發(fā)病1個月內(nèi);用于檢測個月內(nèi);用于檢測IgG的血液應(yīng)收集兩次,的血液應(yīng)收集兩次,第一次于發(fā)病初期(第一次于發(fā)病初期(13天),越早越好,第二次血樣一般在恢復(fù)期(第一次采血后天),越早越好,第二次血樣一般在恢復(fù)期(第

8、一次采血后34周)。雙份血清同時檢測,如抗體滴度有周)。雙份血清同時檢測,如抗體滴度有4倍以上升高才有意義。倍以上升高才有意義。 (2)糞便采集:)糞便采集:應(yīng)在急性腹瀉期及用藥前采集自然排出的糞便。采集時應(yīng)用滅菌棉拭子應(yīng)在急性腹瀉期及用藥前采集自然排出的糞便。采集時應(yīng)用滅菌棉拭子多點蘸取患者新鮮排出糞便的膿血、粘液、水樣便或稀便部分,采樣量一般多點蘸取患者新鮮排出糞便的膿血、粘液、水樣便或稀便部分,采樣量一般3-5克??恕#?)咽拭子:)咽拭子:令患者仰頭張口,用壓舌板壓舌,將無菌棉拭子伸入口腔,適度用力拭涂令患者仰頭張口,用壓舌板壓舌,將無菌棉拭子伸入口腔,適度用力拭涂抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體

9、部位,放入盛有抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位,放入盛有3-5mlHanks液的采樣管中,在靠近頂端處折液的采樣管中,在靠近頂端處折斷棉簽桿,旋緊管蓋并密封。斷棉簽桿,旋緊管蓋并密封。整理課件病原微生物標(biāo)本的采集 各種標(biāo)本的采樣方法各種標(biāo)本的采樣方法(4)肛拭子:用棉花拭子在)肛拭子:用棉花拭子在3-5mlHanks液中浸濕,插入液中浸濕,插入肛門肛門2-3cm處,自肛門周圍皺襞處拭取,或在肛門口內(nèi)輕處,自肛門周圍皺襞處拭取,或在肛門口內(nèi)輕輕旋轉(zhuǎn)涂擦,然后插入盛有輕旋轉(zhuǎn)涂擦,然后插入盛有3-5mlHanks液采樣管內(nèi)。液采樣管內(nèi)。 (6)皰疹液:可同時采集多個皰疹作為一份標(biāo)本。先用)皰疹液:可同時采集

10、多個皰疹作為一份標(biāo)本。先用75%酒精對皰疹周圍的皮膚進(jìn)行消毒,然后用消毒針將酒精對皰疹周圍的皮膚進(jìn)行消毒,然后用消毒針將皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液,迅速將棉簽放入盛有皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液,迅速將棉簽放入盛有3-5mlHanks液中、在靠近頂端處折斷棉簽桿,旋緊管蓋液中、在靠近頂端處折斷棉簽桿,旋緊管蓋并密封。并密封。 如如用于核酸檢測的標(biāo)本采集用于核酸檢測的標(biāo)本采集采集咽拭子或肛拭子等用于采集咽拭子或肛拭子等用于檢測核酸時不能使用棉拭子和木質(zhì)拭子棒,因為這類材檢測核酸時不能使用棉拭子和木質(zhì)拭子棒,因為這類材料中含有核酸擴(kuò)增抑制劑,而要使用滅菌人造纖維拭子料中含有核酸擴(kuò)增抑制劑,而要使用滅菌人

11、造纖維拭子和塑料棒。和塑料棒。整理課件病原微生物標(biāo)本的采集 各種標(biāo)本的采樣方法各種標(biāo)本的采樣方法 (5)腦脊液:)腦脊液:在無菌條件下由腰椎穿刺,用無在無菌條件下由腰椎穿刺,用無菌試管收集菌試管收集35ml,(作厭氧培養(yǎng)時標(biāo)本應(yīng)注入,(作厭氧培養(yǎng)時標(biāo)本應(yīng)注入?yún)捬跗績?nèi)),操作最好在醫(yī)院內(nèi)由有經(jīng)驗的醫(yī)生厭氧瓶內(nèi)),操作最好在醫(yī)院內(nèi)由有經(jīng)驗的醫(yī)生按腰椎穿刺術(shù)進(jìn)行。按腰椎穿刺術(shù)進(jìn)行。 (6)皰疹液:可同時采集多個皰疹作為一份標(biāo))皰疹液:可同時采集多個皰疹作為一份標(biāo)本。先用本。先用75%酒精對皰疹周圍的皮膚進(jìn)行消毒,酒精對皰疹周圍的皮膚進(jìn)行消毒,然后用消毒針將皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液,迅然后用消毒針將皰

12、疹挑破用棉簽蘸取皰疹液,迅速將棉簽放入盛有速將棉簽放入盛有3-5mlHanks液中、在靠近頂液中、在靠近頂端處折斷棉簽桿,旋緊管蓋并密封。端處折斷棉簽桿,旋緊管蓋并密封。整理課件病原微生物標(biāo)本的采集禽流感環(huán)境禽流感環(huán)境標(biāo)本采集標(biāo)本采集采樣液:采樣液:可使用可使用 Hanks或或Eagles等培養(yǎng)液加入以下抗菌素和等培養(yǎng)液加入以下抗菌素和0.5%BSA(也可以使用也可以使用MEM、EMEM、DMEM,價格相對較高,價格相對較高 ):采采樣液最好現(xiàn)配現(xiàn)用樣液最好現(xiàn)配現(xiàn)用氨芐青霉素氨芐青霉素 (2 x 106 IU/L):主要對:主要對G+菌作用強(qiáng)菌作用強(qiáng)鏈霉素鏈霉素 (200 mg/L) :主要對

13、:主要對G-菌,結(jié)核桿菌有抑制作用菌,結(jié)核桿菌有抑制作用兩性菌素兩性菌素 B (2 x 106 IU/L) :主要為抗真菌主要為抗真菌作用作用慶大霉素慶大霉素 (250 mg/L):廣譜抗生素廣譜抗生素 制霉菌素制霉菌素 (0.5 x 106 IU/L) 鹽酸氧氟沙星鹽酸氧氟沙星 (60 mg/L):廣譜菌,對多數(shù)腸桿菌科細(xì)菌等:廣譜菌,對多數(shù)腸桿菌科細(xì)菌等G-菌較菌較強(qiáng)的抗菌活性強(qiáng)的抗菌活性磺胺甲基異惡唑磺胺甲基異惡唑 (0.2 g/L)整理課件病原微生物標(biāo)本的采集 禽流感環(huán)境禽流感環(huán)境標(biāo)本采集標(biāo)本采集1、水標(biāo)本、水標(biāo)本在每個籠具旁的飲水槽采集一份飲用水標(biāo)本,將水槽中的水樣用無菌的、一次性的

14、玻璃棒或棉簽充分混勻后采集5-10ml置于15ml外螺旋蓋的管內(nèi)。水溝或水池水溝或水池:清洗禽類的污水清洗禽類的污水:整理課件病原微生物標(biāo)本的采集 2、擦拭標(biāo)本擦拭標(biāo)本 籠具表面籠具表面擦拭擦拭標(biāo)本標(biāo)本:用蘸有采樣液的帶有聚丙烯纖維頭的拭子擦拭籠具表面禽類最常接觸的3-5個不同部位(包括籠具底部),然后將擦拭過的拭子放入含5ml采樣液的采樣管中,尾部棄去。也可以用多個拭子充分擦拭籠具表面后放到一個采樣管中 宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭標(biāo)本宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭標(biāo)本:如果宰殺或擺放禽肉使用不同的案板,可采集擦拭標(biāo)本放到不同的采樣管中。方法與采集籠具表面擦拭標(biāo)本的方法相同,拭子要擦拭禽肉接觸

15、最多的部位整理課件病原微生物標(biāo)本的采集3、糞便標(biāo)本糞便標(biāo)本 從禽舍或環(huán)境中采集從禽舍或環(huán)境中采集樣品樣品5g左右,放入含左右,放入含5ml采樣液的采樣管中,充分采樣液的采樣管中,充分混勻。同一地點多份糞便標(biāo)本可置于同一采樣管中。混勻。同一地點多份糞便標(biāo)本可置于同一采樣管中。 4、其它、其它標(biāo)本標(biāo)本籠具周圍標(biāo)本(籠具下地面,籠具墊草等)籠具周圍標(biāo)本(籠具下地面,籠具墊草等)內(nèi)臟拭子內(nèi)臟拭子皮毛拭子等皮毛拭子等。整理課件病原微生物標(biāo)本的保存總原則:根據(jù)標(biāo)本種類及檢測內(nèi)容確定標(biāo)本的保存方式。用于細(xì)菌檢測的標(biāo)本:常需無菌、無抗生素保存,從而能確保目標(biāo)細(xì)菌的存活并抑制其他微生物的能確保目標(biāo)細(xì)菌的存活并抑

16、制其他微生物的過度生長。過度生長。一般在4 C C或室溫保存?;蚴覝乇4妗S糜诓《緳z測的標(biāo)本:一般應(yīng)放在保溫容器一般應(yīng)放在保溫容器(0C4C)里,不可放置超過)里,不可放置超過2天,如不能立天,如不能立即分離病毒時,應(yīng)將標(biāo)本凍存保存。即分離病毒時,應(yīng)將標(biāo)本凍存保存。若長期儲存,若長期儲存,最好在最好在7070C C凍存凍存。整理課件病原微生物標(biāo)本的保存 如懷疑是寄生蟲,所取糞便中加入如懷疑是寄生蟲,所取糞便中加入10%福福爾馬林和爾馬林和PVA防腐劑(充分混合)。防腐劑(充分混合)。 用于檢測抗原或抗體的標(biāo)本可在用于檢測抗原或抗體的標(biāo)本可在4 4C C8 8C C保保存存242428h28h,

17、在,在2020C C保存時間更長。保存時間更長。檢測抗體的血清可在檢測抗體的血清可在4 4C C保存約一個星期,保存約一個星期,最長最長1010天;超過一周必須在天;超過一周必須在-20-20C C下冷凍。下冷凍。整理課件病原微生物標(biāo)本的保存 實驗室必須對所有標(biāo)本建立追蹤系統(tǒng),此系統(tǒng)中必須嚴(yán)格注明標(biāo)本基本信息,如標(biāo)號,標(biāo)本唯一識別碼,采樣日期,地點,采樣人等;患者的基本信息、臨床診斷檢測結(jié)果,以及實驗室檢測信息,如檢測項目、時間和結(jié)果。從而可隨時了解標(biāo)本淶源信息,追蹤原始出處。整理課件病原微生物標(biāo)本的包裝任何感染性材料的包裝和運輸都必須遵循任何感染性材料的包裝和運輸都必須遵循WHOWHO對對傳

18、染性物質(zhì)和診斷性標(biāo)本的安全運送指南(傳染性物質(zhì)和診斷性標(biāo)本的安全運送指南(WHOWHO,19971997)。標(biāo)準(zhǔn)的包裝方法和材料應(yīng)能確保即使在運送中包標(biāo)準(zhǔn)的包裝方法和材料應(yīng)能確保即使在運送中包裝意外受損時也能保護(hù)人員的安全及標(biāo)本的完整。裝意外受損時也能保護(hù)人員的安全及標(biāo)本的完整。因此運送標(biāo)本時要進(jìn)行三層包裝。因此運送標(biāo)本時要進(jìn)行三層包裝。整理課件病原微生物標(biāo)本的包裝原始的原始的容器容器應(yīng)該是防漏的應(yīng)該是防漏的,可盛容量不大,可盛容量不大于于500ml。在原始容器與第二層包裝之間在原始容器與第二層包裝之間應(yīng)放置有吸應(yīng)放置有吸附作用的材料附作用的材料。并輔以第二層防漏包裝。并輔以第二層防漏包裝。運

19、輸標(biāo)本的外包裝必須有明確的標(biāo)簽,標(biāo)運輸標(biāo)本的外包裝必須有明確的標(biāo)簽,標(biāo)明寄送人和接收人的詳細(xì)聯(lián)系方式、包裝明寄送人和接收人的詳細(xì)聯(lián)系方式、包裝日期和運輸日期等。日期和運輸日期等。 整理課件病原微生物標(biāo)本的包裝 國際民航組織危險品航空安全運輸技術(shù)細(xì)則中將感染性物質(zhì)分為A和B兩類。 A A類指人感染后發(fā)病的可能性大,傳染性強(qiáng),對人群危害類指人感染后發(fā)病的可能性大,傳染性強(qiáng),對人群危害性大的烈性感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)。高度懷疑具有嚴(yán)重性大的烈性感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)。高度懷疑具有嚴(yán)重危害性的感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)也屬于危害性的感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)也屬于A A類。類。A A類感染性類感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)物質(zhì)

20、感染性物質(zhì) 聯(lián)合國編號聯(lián)合國編號UN2814UN2814和和UN2900UN2900(只導(dǎo)致動(只導(dǎo)致動物致?。┪镏虏。?采用采用P620P620包裝要求。包裝要求。 A A類之外,僅具有一般危險性,引起感染的機(jī)會較少的類之外,僅具有一般危險性,引起感染的機(jī)會較少的感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)為感染性物質(zhì)感染性物質(zhì)為B B類(聯(lián)合國編號類(聯(lián)合國編號UN3373UN3373),采),采用用P650P650包裝要求。包裝要求。整理課件A類包裝和B類包裝區(qū)別1A類包裝B類包裝定義對人或動物致死或永久性致殘不符合列入A類標(biāo)準(zhǔn)的感染性物質(zhì)運輸專用名稱感染性物質(zhì),可感染人的診斷標(biāo)本或臨床標(biāo)本或生命物質(zhì)B類英文運

21、輸專用名Infectious substance affecing humansBiological substane,category BUN編號UN2814UN3373運輸對象名錄中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物及其樣本;第三類中包裝分類為A類的病原微生物名錄中規(guī)定的第三類、第四類病原微生物及其樣本UN專用標(biāo)記需要不需要整理課件A類包裝和B類包裝區(qū)別2 A類包裝B類包裝主容器防水、防穿刺、防泄漏防破損、防泄漏次級容器防水、防穿刺、防泄漏防破損、防泄漏外包裝最小邊長100mm至少有一個表面100mm 100mm危險申報單需要不需要標(biāo)識客機(jī)單包裝主容器最大運輸量液體50mL,固體50g液體1L

22、,固體4KgUN3373整理課件A類感染性物質(zhì)的包裝材料類感染性物質(zhì)的包裝材料B類感染性物質(zhì)的包裝材料類感染性物質(zhì)的包裝材料整理課件A類感染物質(zhì)的標(biāo)識整理課件B類感染物質(zhì)的標(biāo)識 UN3373Biological substance,Biological substance, Category BCategory B(生物物質(zhì),(生物物質(zhì),B B類)類)整理課件病原微生物標(biāo)本的實驗室間傳遞 應(yīng)制定對危險材料運輸?shù)恼?yīng)制定對危險材料運輸?shù)恼吆统绦?,包括危險材料在策和程序,包括危險材料在實驗室內(nèi)、實驗室所在機(jī)構(gòu)實驗室內(nèi)、實驗室所在機(jī)構(gòu)內(nèi)及機(jī)構(gòu)外部的運輸,應(yīng)符內(nèi)及機(jī)構(gòu)外部的運輸,應(yīng)符合國家和國際規(guī)定

23、的要求。合國家和國際規(guī)定的要求。 應(yīng)以防止污染人員或環(huán)境的應(yīng)以防止污染人員或環(huán)境的方式運輸危險材料,并有可方式運輸危險材料,并有可靠的安保措施。靠的安保措施。 危險材料應(yīng)置于被批準(zhǔn)的本危險材料應(yīng)置于被批準(zhǔn)的本質(zhì)安全的防漏容器中運輸。質(zhì)安全的防漏容器中運輸。整理課件病原微生物標(biāo)本的運輸?shù)孛孢\送標(biāo)本時注意將裝有標(biāo)本的箱子緊地面運送標(biāo)本時注意將裝有標(biāo)本的箱子緊緊固定在交通工具上緊固定在交通工具上,車上還應(yīng)備有吸水材料、消毒劑、手套、口罩、車上還應(yīng)備有吸水材料、消毒劑、手套、口罩、護(hù)目鏡、密封防水的廢棄物容器等防護(hù)用品。護(hù)目鏡、密封防水的廢棄物容器等防護(hù)用品。為避免路途顛簸引起標(biāo)本溶血,可在運送前分為

24、避免路途顛簸引起標(biāo)本溶血,可在運送前分離血清。離血清。 在國際、國家、商業(yè)的有關(guān)規(guī)定允許下,在國際、國家、商業(yè)的有關(guān)規(guī)定允許下,診斷標(biāo)本也可空運,應(yīng)注意規(guī)范包裝。診斷標(biāo)本也可空運,應(yīng)注意規(guī)范包裝。 整理課件病原微生物標(biāo)本的運輸 分離培養(yǎng)細(xì)菌、病毒的標(biāo)本大多數(shù)要求冷藏運送。分離培養(yǎng)細(xì)菌、病毒的標(biāo)本大多數(shù)要求冷藏運送。腦膜炎球菌等應(yīng)在腦膜炎球菌等應(yīng)在35C37C保溫運送。保溫運送。 血液標(biāo)本用于細(xì)菌、病毒或寄生蟲分離時,需低血液標(biāo)本用于細(xì)菌、病毒或寄生蟲分離時,需低溫保存,不能冷凍。溫保存,不能冷凍。用冰塊而不是干冰運送。做立克次體類微生物的全血用冰塊而不是干冰運送。做立克次體類微生物的全血標(biāo)本要

25、求干冰保存和冷凍運送。標(biāo)本要求干冰保存和冷凍運送。 檢測核酸樣品的運送要求低溫快速。檢測核酸樣品的運送要求低溫快速。從標(biāo)本采集到檢測的間隔時間要盡可能短,并盡可能從標(biāo)本采集到檢測的間隔時間要盡可能短,并盡可能將標(biāo)本處于冷藏狀態(tài)。檢測前保存時間較長時則需冷將標(biāo)本處于冷藏狀態(tài)。檢測前保存時間較長時則需冷凍標(biāo)本防止核酸降解。凍標(biāo)本防止核酸降解。整理課件整理課件可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定種或樣本運輸管理規(guī)定可感染人類的高致病性病原微生物(毒)可感染人類的高致病性病原微生物(毒) 種或樣本運輸管理規(guī)定種或樣本運輸管理規(guī)定已于已于200

26、5年年11月月24 日經(jīng)衛(wèi)生部部務(wù)會議討論通過,現(xiàn)予以發(fā)布,日經(jīng)衛(wèi)生部部務(wù)會議討論通過,現(xiàn)予以發(fā)布, 自自2006年年2月月1日起施行。日起施行。整理課件可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定種或樣本運輸管理規(guī)定目的:為加強(qiáng)可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸?shù)墓芾?,保障人體健康和公共衛(wèi)生,依據(jù)中華人民共和國傳染病防治法、病原微生物實驗室生物安全管理條例等法律、行政法規(guī)的規(guī)定,制定本規(guī)定。定義:本規(guī)定所稱可感染人類的高致病性病原微生物(毒)種或樣本規(guī)定所稱可感染人類的高致病性病原微生物(毒)種或樣本是指在本是指在人間傳染的

27、病原微生物名錄人間傳染的病原微生物名錄中規(guī)定的第一類、第二類中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物菌(毒)種或樣本。病原微生物菌(毒)種或樣本。 適用范圍:本規(guī)定適用于可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種本規(guī)定適用于可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的或樣本的運輸管理運輸管理工作。工作。人間傳染的病原微生物名錄人間傳染的病原微生物名錄中第三類中第三類病原微生物運輸包裝分類為病原微生物運輸包裝分類為A類類的病原微生物菌(毒)種或樣本,以的病原微生物菌(毒)種或樣本,以及疑似高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本,按照本規(guī)定進(jìn)行運及疑似高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本,按照本規(guī)定進(jìn)行運輸管

28、理。輸管理。 整理課件可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定種或樣本運輸管理規(guī)定 運輸以上范圍內(nèi)規(guī)定的菌(毒)種或樣本(以下通稱高運輸以上范圍內(nèi)規(guī)定的菌(毒)種或樣本(以下通稱高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本),應(yīng)當(dāng)經(jīng)致病性病原微生物菌(毒)種或樣本),應(yīng)當(dāng)經(jīng)省級以省級以上上衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)。未經(jīng)批準(zhǔn),不得運輸。衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)。未經(jīng)批準(zhǔn),不得運輸。 申請單位:從事疾病預(yù)防控制、醫(yī)療、教學(xué)、科研、菌申請單位:從事疾病預(yù)防控制、醫(yī)療、教學(xué)、科研、菌(毒)種保藏以及生物制品生產(chǎn)的單位,因工作需要,(毒)種保藏以及生物制品生產(chǎn)的單位,因工作

29、需要,可以申請運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本。可以申請運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本。 運輸申請:申請運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或運輸申請:申請運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的單位(以下簡稱申請單位),在運輸前應(yīng)當(dāng)向省樣本的單位(以下簡稱申請單位),在運輸前應(yīng)當(dāng)向省級衛(wèi)生行政部門提出申請,并提交以下申請材料(原件級衛(wèi)生行政部門提出申請,并提交以下申請材料(原件一份,復(fù)印件三份):一份,復(fù)印件三份):整理課件1.可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸申請表整理課件整理課件整理課件 (接收單位)具備從事高致病性病原(接收單位)具備從事高致病性病原微生物實驗

30、活動資格的實驗室;微生物實驗活動資格的實驗室; (接收單位)取得有關(guān)政府主管部門(接收單位)取得有關(guān)政府主管部門核發(fā)的從事高致病性病原微生物實驗核發(fā)的從事高致病性病原微生物實驗活動、菌(毒)種或樣本保藏、生物活動、菌(毒)種或樣本保藏、生物制品生產(chǎn)等的批準(zhǔn)文件。制品生產(chǎn)等的批準(zhǔn)文件。 整理課件整理課件整理課件 在固定的申請單位和接收單位之間多次運輸在固定的申請單位和接收單位之間多次運輸相同品種高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本相同品種高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的,可以申請的,可以申請多次運輸多次運輸。多次運輸?shù)挠行跒?。多次運輸?shù)挠行跒? 6個月個月;期滿后需要繼續(xù)運輸?shù)模瑧?yīng)當(dāng)重新提

31、出申;期滿后需要繼續(xù)運輸?shù)?,?yīng)當(dāng)重新提出申請。請。整理課件省內(nèi)運輸審批:省內(nèi)運輸審批: 申請在省、自治區(qū)、直轄市申請在省、自治區(qū)、直轄市行行政區(qū)域內(nèi)政區(qū)域內(nèi)運輸高致病性病原微生物菌(毒)種運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的,由省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部或樣本的,由省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部門審批。門審批。整理課件 省級衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)對申請單位提交的申省級衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)對申請單位提交的申請材料及時審查,對申請材料不齊全或者不符合請材料及時審查,對申請材料不齊全或者不符合法定形式的,應(yīng)當(dāng)即時出具申請材料補(bǔ)正通知書;法定形式的,應(yīng)當(dāng)即時出具申請材料補(bǔ)正通知書;對申請材料齊全或者符合法定

32、形式的,應(yīng)當(dāng)即時對申請材料齊全或者符合法定形式的,應(yīng)當(dāng)即時受理,并在受理,并在5個工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定;符個工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定;符合法定條件的,頒發(fā)合法定條件的,頒發(fā)可感染人類的高致病性病可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本準(zhǔn)運證書原微生物菌(毒)種或樣本準(zhǔn)運證書;不符合;不符合法定條件的,應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說明理法定條件的,應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說明理由。由。整理課件跨省運輸審批:跨省運輸審批: 申請申請跨省跨省、自治區(qū)、直轄市運輸高致、自治區(qū)、直轄市運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的,應(yīng)當(dāng)將申請材病性病原微生物菌(毒)種或樣本的,應(yīng)當(dāng)將申請材料提交運輸

33、料提交運輸出發(fā)地出發(fā)地省級衛(wèi)生行政部門進(jìn)行初審;對符省級衛(wèi)生行政部門進(jìn)行初審;對符合要求的,省級衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)在合要求的,省級衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)在3個工作日內(nèi)出個工作日內(nèi)出具初審意見,并將初審意見和申報材料上報具初審意見,并將初審意見和申報材料上報衛(wèi)生部審衛(wèi)生部審批。批。 整理課件衛(wèi)生部應(yīng)當(dāng)自收到申報材料后衛(wèi)生部應(yīng)當(dāng)自收到申報材料后3個工作日內(nèi)做出是否批個工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定。符合法定條件的,準(zhǔn)的決定。符合法定條件的,頒發(fā)頒發(fā)可感染人類的高可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本準(zhǔn)運證書致病性病原微生物菌(毒)種或樣本準(zhǔn)運證書;不不符合法定條件的,應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說明理符合

34、法定條件的,應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說明理由。由。整理課件突發(fā)疫情突發(fā)疫情 對于為控制傳染病暴發(fā)、流行或者突發(fā)公對于為控制傳染病暴發(fā)、流行或者突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處理的高致病性病原微生物菌(毒)共衛(wèi)生事件應(yīng)急處理的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的運輸申請,省級衛(wèi)生行政部門與衛(wèi)生部之種或樣本的運輸申請,省級衛(wèi)生行政部門與衛(wèi)生部之間可以通過傳真的方式進(jìn)行上報和審批;需要提交有間可以通過傳真的方式進(jìn)行上報和審批;需要提交有關(guān)材料原件的,應(yīng)當(dāng)于事后盡快補(bǔ)齊。關(guān)材料原件的,應(yīng)當(dāng)于事后盡快補(bǔ)齊。整理課件 根據(jù)疾病控制工作的需要,應(yīng)當(dāng)向中國疾病預(yù)根據(jù)疾病控制工作的需要,應(yīng)當(dāng)向中國疾病預(yù)防控制中心運送高致

35、病性病原微生物菌(毒)種或樣防控制中心運送高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的,向中國疾病預(yù)防控制中心直接提出申請,由本的,向中國疾病預(yù)防控制中心直接提出申請,由中中國疾病預(yù)防控制中心審批國疾病預(yù)防控制中心審批;符合法定條件的,頒發(fā);符合法定條件的,頒發(fā)可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本準(zhǔn)運證書本準(zhǔn)運證書;不符合法定條件的,應(yīng)當(dāng)出具不予批;不符合法定條件的,應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說明理由。中國疾病預(yù)防控制中心應(yīng)當(dāng)將準(zhǔn)的決定并說明理由。中國疾病預(yù)防控制中心應(yīng)當(dāng)將審批情況于審批情況于3日內(nèi)日內(nèi)報衛(wèi)生部備案報衛(wèi)生部備案。 整理課件運輸申請運輸

36、申請單位單位衛(wèi)生部科教司衛(wèi)生部科教司中國中國CDC(實驗室管理處實驗室管理處)出發(fā)地省出發(fā)地省級衛(wèi)生行級衛(wèi)生行政部門政部門初審(初審(3 3個工作日)個工作日)核發(fā)核發(fā)準(zhǔn)運證準(zhǔn)運證或出具不予批準(zhǔn)的或出具不予批準(zhǔn)的決定及理由決定及理由核準(zhǔn)申請的單位,在運輸任務(wù)核準(zhǔn)申請的單位,在運輸任務(wù)結(jié)束后,書面報告運輸情況結(jié)束后,書面報告運輸情況3 3日內(nèi)報衛(wèi)生部日內(nèi)報衛(wèi)生部備案備案審批審批整理課件陸路運輸陸路運輸水路運輸水路運輸民用航空運輸民用航空運輸整理課件實驗室檢測技術(shù)鏡檢形態(tài)學(xué)觀察鏡檢形態(tài)學(xué)觀察細(xì)菌的分離培養(yǎng)細(xì)菌的分離培養(yǎng)細(xì)菌的鑒定細(xì)菌的鑒定病毒的分離培養(yǎng)病毒的分離培養(yǎng)整理課件直接涂片鏡檢形態(tài)學(xué)觀察直

37、接涂片鏡檢形態(tài)學(xué)觀察直接涂片染色后鏡檢適用于形態(tài)和染色直接涂片染色后鏡檢適用于形態(tài)和染色上具有特征性的病原菌。上具有特征性的病原菌。例如痰中查見抗酸性細(xì)長桿菌,膿液中發(fā)現(xiàn)例如痰中查見抗酸性細(xì)長桿菌,膿液中發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性葡萄串狀球菌,咽喉假膜中有異革蘭氏陽性葡萄串狀球菌,咽喉假膜中有異染顆粒的棒狀桿菌及霍亂弧菌、艱難梭菌等。染顆粒的棒狀桿菌及霍亂弧菌、艱難梭菌等。優(yōu)點是方便快捷,缺點是適用范圍小。優(yōu)點是方便快捷,缺點是適用范圍小。電鏡技術(shù):可快速診斷病毒,適用于形態(tài)特殊且并病毒量較多的標(biāo)本。缺點是設(shè)備昂貴,對技術(shù)人員要求高,并需要一定的病毒量。整理課件細(xì)菌的分離培養(yǎng)細(xì)菌的分離培養(yǎng) 無菌部位采集的

38、腦脊液、血液等標(biāo)本,可直接接種至營養(yǎng)豐富的液無菌部位采集的腦脊液、血液等標(biāo)本,可直接接種至營養(yǎng)豐富的液體或固體培養(yǎng)基。體或固體培養(yǎng)基。有正常菌群存在部位所取標(biāo)本(如糞便),應(yīng)接種至選擇或鑒有正常菌群存在部位所取標(biāo)本(如糞便),應(yīng)接種至選擇或鑒別性培養(yǎng)基。別性培養(yǎng)基。缺點:耗時較長(需缺點:耗時較長(需4872h),過程繁瑣,),過程繁瑣,優(yōu)點:能獲得病原菌,特異性為優(yōu)點:能獲得病原菌,特異性為100%,是許多細(xì)菌性傳染病實,是許多細(xì)菌性傳染病實驗室確診的最重要證據(jù),驗室確診的最重要證據(jù),v 因此,在暴發(fā)疫情中要求盡可能進(jìn)行病原菌分離來獲得實驗室確診因此,在暴發(fā)疫情中要求盡可能進(jìn)行病原菌分離來獲

39、得實驗室確診證據(jù)。證據(jù)。 整理課件細(xì)菌的鑒定細(xì)菌的鑒定生化鑒定生化鑒定生化代謝特征是鑒定病原菌的重要方法之一。如糖發(fā)酵生化代謝特征是鑒定病原菌的重要方法之一。如糖發(fā)酵試驗等。試驗等?,F(xiàn)有多種微量、快速、半自動或全自動細(xì)菌生化反應(yīng)試現(xiàn)有多種微量、快速、半自動或全自動細(xì)菌生化反應(yīng)試劑盒和檢測儀器,極大地方便了菌株鑒定工作。劑盒和檢測儀器,極大地方便了菌株鑒定工作。血清鑒定與分型血清鑒定與分型利用已知的特異抗體的診斷血清可以確定細(xì)菌的種和型。利用已知的特異抗體的診斷血清可以確定細(xì)菌的種和型。常用方法是玻片凝集實驗,在數(shù)分鐘內(nèi)能可得出結(jié)果。常用方法是玻片凝集實驗,在數(shù)分鐘內(nèi)能可得出結(jié)果。整理課件4.、

40、免疫學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)主要有單免疫擴(kuò)散、雙免疫擴(kuò)散和對流免疫主要有單免疫擴(kuò)散、雙免疫擴(kuò)散和對流免疫電泳。電泳。免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù)包括免疫熒光技術(shù)、放射免疫測定和免疫酶包括免疫熒光技術(shù)、放射免疫測定和免疫酶技術(shù),其中免疫酶技術(shù)還包括酶聯(lián)免疫吸附技術(shù),其中免疫酶技術(shù)還包括酶聯(lián)免疫吸附實驗(實驗(ELISA)、夾心法,以及生物素加親)、夾心法,以及生物素加親和素的和素的ELISA方法。方法?,F(xiàn)場應(yīng)用最多的是現(xiàn)場應(yīng)用最多的是ELISA方法。方法。整理課件6、核酸檢測、核酸檢測 核酸診斷主要用于檢測難以培養(yǎng)的微生物、或目核酸診斷主要用于檢測難以培養(yǎng)的微生物、或目前培養(yǎng)方法不敏感、花

41、費高或耗時太久的情況。前培養(yǎng)方法不敏感、花費高或耗時太久的情況。優(yōu)點:省時,靈敏性高。在嚴(yán)格控制實驗過程的條件優(yōu)點:省時,靈敏性高。在嚴(yán)格控制實驗過程的條件下,對于病因診斷有很好的作用。下,對于病因診斷有很好的作用。缺點:實驗過程控制不嚴(yán)格時可能產(chǎn)生假陽性結(jié)果。缺點:實驗過程控制不嚴(yán)格時可能產(chǎn)生假陽性結(jié)果。實驗條件、經(jīng)驗和試劑成本要求高。實驗條件、經(jīng)驗和試劑成本要求高。 因此在應(yīng)用時要考慮對疫情控制的需要,考慮必因此在應(yīng)用時要考慮對疫情控制的需要,考慮必要性和可行性。要性和可行性。整理課件整理課件 具有特異、敏感、快速、簡便和容易自動化等特點。具有特異、敏感、快速、簡便和容易自動化等特點。為增

42、加靈敏度和特異度,普通為增加靈敏度和特異度,普通PCR又演化有多種方法,如又演化有多種方法,如RT- PCR、PCR-RFLP、套式、套式PCR、多重、多重PCR、實時、實時PCR技術(shù)。技術(shù)。近來實時近來實時PCR技術(shù)用于臨床檢測得到迅速發(fā)展和普及,可實時檢技術(shù)用于臨床檢測得到迅速發(fā)展和普及,可實時檢測到信號的變化,并且整個反應(yīng)過程為密閉,不需電泳檢測結(jié)果,測到信號的變化,并且整個反應(yīng)過程為密閉,不需電泳檢測結(jié)果,避免了產(chǎn)物的擴(kuò)散和交叉污染,具有較好應(yīng)用前景。避免了產(chǎn)物的擴(kuò)散和交叉污染,具有較好應(yīng)用前景。聚合酶鏈反應(yīng)(聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)整

43、理課件 通常在支持膜上進(jìn)行,又稱為核酸印跡雜交。根據(jù)檢測通常在支持膜上進(jìn)行,又稱為核酸印跡雜交。根據(jù)檢測樣品的不同又被分為樣品的不同又被分為DNA印跡雜交和印跡雜交和RNA印跡雜交。印跡雜交。DNA探針雜交在檢測沒有成熟可靠的培養(yǎng)方法的臨床標(biāo)本時具有探針雜交在檢測沒有成熟可靠的培養(yǎng)方法的臨床標(biāo)本時具有突出的優(yōu)點,如突出的優(yōu)點,如HPV、乙肝病毒(、乙肝病毒(HBV)、和)、和EB病毒的檢測。病毒的檢測。 與傳統(tǒng)鑒定方法相比,針對莢膜組織胞漿菌、皮炎芽生與傳統(tǒng)鑒定方法相比,針對莢膜組織胞漿菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌和新生隱球菌的檢測探針具有獨特的優(yōu)菌、粗球孢子菌和新生隱球菌的檢測探針具有獨特的優(yōu)點。點。分子雜交技術(shù)(分子雜交技術(shù)(molecular hybridization)整理課件基因芯片技術(shù)核酸檢測基因芯片技術(shù)核酸檢測芯片是一塊方形的玻璃,上面鋪了一層肉眼看不芯片是一塊方形的玻璃,上面鋪了一層肉眼看不見的見的DNA探針。探針。待測的樣品基因被切成長短不一的片斷,用熒光化學(xué)待測的樣品基因被切成長短不一的片斷,用熒光化學(xué)物質(zhì)標(biāo)記,然后作為一種溶液注射到嵌有芯片的膠片物質(zhì)標(biāo)記,然后作為一種溶液注射到嵌有芯片的膠片上。用裝有激光設(shè)備的儀器來檢測,通過激光光束激上。用裝有激光設(shè)備的儀器來檢測,通過激光光束激發(fā)

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