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文檔簡(jiǎn)介
1、分子生物學(xué)復(fù)習(xí)資料(一)第一章 蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)1、蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)稱(chēng)為構(gòu)象,指的是蛋白質(zhì)分子中所有原子在三維空間中的排布,并不涉及共價(jià)鍵的斷裂和生成所發(fā)生的變化。2、維持和穩(wěn)定蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)的因素有共價(jià)鍵(二硫鍵)和次級(jí)鍵,次級(jí)鍵有4種類(lèi)型,即離子鍵、氫鍵、疏水性相互作用和范德瓦力。3、蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指肽鏈中局部肽段的構(gòu)象,它們是完整肽鏈構(gòu)象(三級(jí)結(jié)構(gòu))的結(jié)構(gòu)單元,是蛋白質(zhì)復(fù)雜的立體結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ),因此二級(jí)結(jié)構(gòu)也可以稱(chēng)為構(gòu)象單元。螺旋、折疊是常見(jiàn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)。4、一些肽段有形成螺旋和折疊兩種構(gòu)象的可能性(或形成勢(shì)),這類(lèi)肽段被稱(chēng)為兩可肽。5、兩個(gè)或幾個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元被連接肽段連接起來(lái)
2、,進(jìn)一步組合成有特殊幾何排列的局域立體結(jié)構(gòu),稱(chēng)為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。超二級(jí)結(jié)構(gòu)的基本組織形式有,和等3類(lèi)。6、蛋白質(zhì)家族:一類(lèi)蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)有30以上同源性,或一級(jí)結(jié)構(gòu)同源性很低,但它們的結(jié)構(gòu)和功能相似,它們也屬于同一家族。例如球蛋白的氨基酸序列相差很大,但屬于同一家族。超家族:有些蛋白質(zhì)家族之間,一級(jí)結(jié)構(gòu)序列的同源性較低,但在許多情況下,它們的結(jié)構(gòu)和功能存在一定的相似性。這表明它們可能存在共同的進(jìn)化起源。這些蛋白質(zhì)家族屬于同一超家族。7、結(jié)構(gòu)域是一個(gè)連貫的三維結(jié)構(gòu),是可互換并且半獨(dú)立的功能單位,在真核細(xì)胞中由一個(gè)外顯子編碼,由至少40個(gè)以上多至200個(gè)殘基構(gòu)成最小、最緊密也最穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),作為結(jié)構(gòu)和
3、功能單位,會(huì)重復(fù)出現(xiàn)在同一蛋白質(zhì)或不同蛋白質(zhì)中。8、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)所提供的信息有哪些?同源蛋白質(zhì)的物種差異與生物進(jìn)化。不同物種之間可變殘基差異的數(shù)目可提供物種之間親源關(guān)系遠(yuǎn)近的信息??梢詮囊患?jí)結(jié)構(gòu)推測(cè)出蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)。在蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)中,可根據(jù)某種蛋白質(zhì)或其肽段的一級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行同源性搜索,與已知蛋白質(zhì)進(jìn)行序列比較。在搜索功能上可能無(wú)關(guān)的蛋白質(zhì)中發(fā)現(xiàn)有相關(guān)的同源性序列,揭示了一些蛋白質(zhì)還可能具有未被認(rèn)識(shí)的新功能。9、-螺旋、-折疊各自的特點(diǎn)?-螺旋的特點(diǎn):蛋白質(zhì)多肽鏈像螺旋狀盤(pán)曲,每隔3.6個(gè)氨基酸殘基沿中心軸螺旋上升一圈,每上升一圈沿螺旋軸方向上升0.54nm,即每個(gè)氨基酸殘基向上升高0
4、.15nm,每個(gè)氨基酸殘基沿中心軸旋轉(zhuǎn)100°。-螺旋的穩(wěn)定性是靠鏈內(nèi)氫鍵維持的,相鄰的螺圈之間形成鏈內(nèi)氫鍵,氫鍵的取向幾乎與中心軸平行。氫鍵是由每個(gè)氨基酸殘基的N-H與前面隔3個(gè)氨基酸的C=O形成的,肽鏈上所有的肽鍵都參與了氫鍵的形成,因此-螺旋相當(dāng)穩(wěn)定。-螺旋中氨基酸殘基的側(cè)鏈伸向外側(cè)。-螺旋有左手螺旋和右手螺旋兩種,但天然蛋白質(zhì)的-螺旋,絕大多數(shù)為右手螺旋。-折疊的特點(diǎn):由兩條或多條幾乎完全伸展的肽鏈平行排列,通過(guò)鏈間氫鍵交聯(lián)而形成。肽鏈的主鏈呈鋸齒狀折疊現(xiàn)象,-碳原子總是處于折疊的角上,氨基酸的R基團(tuán)交替分布在片層的兩側(cè)。-折疊結(jié)構(gòu)的氫鍵主要是由兩條肽鏈之間形成;也可以在同一
5、肽鏈的不同部分之間形成。幾乎所有肽鍵都參與鏈內(nèi)氫鍵的交聯(lián),氫鍵與鏈的長(zhǎng)軸接近垂直。-折疊有兩種類(lèi)型:一為平行式,即所有肽鏈的N-端都在同一邊,另一為反平行式。第二章 核酸的結(jié)構(gòu)1、DNA是由脫氧核糖核苷酸組成的長(zhǎng)鏈多聚物,是遺傳物質(zhì)。具有下列基本特性:具有穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),能進(jìn)行復(fù)制,特定的結(jié)構(gòu)能傳遞給子代;攜帶生命的遺傳信息,以決定生命的產(chǎn)生、生長(zhǎng)和發(fā)育;能產(chǎn)生遺傳的變異,使進(jìn)化永不枯竭。2、DNA鏈的方向總是理解為從5P端到3OH端。DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)實(shí)際上就是DNA分子內(nèi)堿基的排列順序。3、DNA是雙螺旋結(jié)構(gòu):主鏈由脫氧核糖和磷酸基團(tuán)以3,5磷酸二酯鍵交互連接構(gòu)成的,在雙螺
6、旋的外側(cè),堿基在內(nèi)側(cè),堿基必須配對(duì)。一條鏈繞著另一條鏈旋轉(zhuǎn)、盤(pán)繞,一條鏈上的嘌呤與另一條鏈上的嘧啶相互配對(duì),嘌呤與嘧啶以氫鍵保持在一起。4、雙螺旋DNA熔解成單鏈的現(xiàn)象稱(chēng)為DNA變性。已經(jīng)變性的DNA在一定條件下重新恢復(fù)雙鏈的過(guò)程稱(chēng)為復(fù)性。5、染色質(zhì)是以雙鏈DNA為骨架,與組蛋白、非組蛋白以及少量的各種RNA等共同組成絲狀結(jié)構(gòu)。在染色質(zhì)中,DNA和組蛋白的組成非常穩(wěn)定,非組蛋白和RNA隨細(xì)胞生理狀態(tài)不同而有變化。6、常染色質(zhì)是在細(xì)胞間期核內(nèi)染色體折疊壓縮程度較低,處于伸展?fàn)顟B(tài),堿性染性著色較淺而均勻的那些染色質(zhì)。主要是單一拷貝和中度重復(fù)序列。異染色質(zhì)是在細(xì)胞間期核內(nèi)染色質(zhì)壓縮程度較高,處于凝集
7、狀態(tài),堿性染料著色較深的部分。7、核小體是構(gòu)成真核生物染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位,是DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的緊密結(jié)構(gòu)形式。8、RNA的種類(lèi)及其各自的特點(diǎn)?RNA分為rRNA,tRNA,mRNA。rRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)為莖狀;tRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)呈三葉草形,三級(jí)結(jié)構(gòu)形狀像一個(gè)倒寫(xiě)L字母;真核細(xì)胞mRNA3端有一段長(zhǎng)約200核苷酸的PloyA,5端有一個(gè)帽子結(jié)構(gòu)。在蛋白質(zhì)合成中的作用:mRNA作為蛋白質(zhì)多肽鏈合成的直接模板,其5端帽子結(jié)構(gòu)可能與蛋白質(zhì)合成的正確起始有關(guān),可協(xié)助核糖體與mRNA相結(jié)合,使翻譯作用在AUG處開(kāi)始。rRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合形成核糖體,是蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所。tRNA的主要作用是轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸,在蛋白質(zhì)合成
8、起接頭作用。 第三章 基因和基因組1、基因被定義為轉(zhuǎn)錄功能單位,是編碼一種可擴(kuò)散產(chǎn)物的一段DNA序列,其產(chǎn)物可以是蛋白質(zhì)或RNA。一個(gè)完整的基因應(yīng)該由兩部分組成,即編碼區(qū)和調(diào)控區(qū)。2、基因組是一種生物染色體內(nèi)全部遺傳物質(zhì)的總和,包括構(gòu)成基因和基因之間區(qū)域的所有DNA。所謂總和,還應(yīng)該指該物種的不同DNA功能區(qū)域在DNA分子上結(jié)構(gòu)分布和排列的情況?;蚪M以及基因一般以DNA的長(zhǎng)度和序列表示。3、病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):與細(xì)菌相比較,病毒的基因組很小,所含遺傳信息量較小,只能編碼少數(shù)的蛋白質(zhì)。病毒基因組由DNA或RNA組成。核酸的結(jié)構(gòu)可以是單鏈或雙鏈、閉合環(huán)狀或線(xiàn)狀分子。常有基
9、因重疊現(xiàn)象,即同一DNA分子序列可以編碼2種或3種蛋白質(zhì)分子。4、細(xì)菌基因組的一般特點(diǎn):基因組通常僅由一條環(huán)狀雙鏈DNA分子組成。但現(xiàn)發(fā)現(xiàn)有越來(lái)越多的線(xiàn)形基因組。只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)。有操縱子的結(jié)構(gòu)。數(shù)個(gè)相關(guān)(參與一個(gè)生化過(guò)程)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起,受同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié),合成多順?lè)醋觤RNA。編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因是單拷貝的,但rRNA基因往往是多拷貝的。非編碼的DNA所占比例少,類(lèi)似病毒基因組?;蚪MDNA具有多種調(diào)控區(qū),如復(fù)制起始區(qū)、復(fù)制終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄終止區(qū)等特殊序列。與真核生物類(lèi)似,具有可移動(dòng)的DNA序列。5、真核生物基因組特點(diǎn):基因組的分子量大。低等真核生物大約107-108 bp,
10、而高等真核生物為5×108-1010 bp真核生物細(xì)胞往往有很多染色體,一般呈線(xiàn)狀。每個(gè)染色體DNA有很多復(fù)制起始點(diǎn)。細(xì)胞核DNA與蛋白質(zhì)穩(wěn)定地結(jié)合成染色質(zhì)的復(fù)雜結(jié)構(gòu)。染色質(zhì)內(nèi)除了含有DNA和組蛋白外,還有大量非組蛋白。由于存在核膜,細(xì)胞被分隔成細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),因此,在基因表達(dá)中,轉(zhuǎn)錄和翻譯在時(shí)間和空間上是分隔的,不偶聯(lián)的?;蚪M的大量序列是非編碼序列,有大量重復(fù)序列。真核生物的蛋白質(zhì)基因往往是單拷貝存在,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是單順?lè)醋觤RNA。存在一些可移動(dòng)的DNA序列。絕大多數(shù)真核生物基因含有內(nèi)含子,因而基因編碼區(qū)是不連續(xù)的。真核生物基因內(nèi)部也可能含有大量的重復(fù)序列。6、基因家族:一組功能類(lèi)
11、似、結(jié)構(gòu)具有同源性的基因稱(chēng)為基因家族?;蚣易宓姆诸?lèi)有多種方式?;蚣易甯鞒蓡T在結(jié)構(gòu)上非常類(lèi)似,具有保守性,如rRNA基因家族,但基因之間的間隔區(qū)可以有很大的長(zhǎng)度差異和序列差異。重要的基因家族:rRNA基因家族、5S rRNA基因、組蛋白基因家族、珠蛋白基因家族、生長(zhǎng)激素基因家族、超基因。7、超基因:是指一組由多基因和單基因組成的更大的基因家族。在高等真核細(xì)胞中,一個(gè)基因簇內(nèi)含有數(shù)百個(gè)功能相關(guān)的基因,它們可能是由基因擴(kuò)增后結(jié)構(gòu)上輕微變化而產(chǎn)生的,這些基因的結(jié)構(gòu)有程度不等的同源性,功能上仍保持原始基因的基本功能,或者進(jìn)化成具有相關(guān)而不同的新功能,這樣的一簇基因稱(chēng)為超基因家族。有免疫球蛋白超基因家
12、族、核受體超基因家族、細(xì)胞因子超基因家族等。8、在初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物hnRNA加工產(chǎn)生成熟的mRNA時(shí),被切除的非編碼序列稱(chēng)為內(nèi)含子。在成熟的mRNA或蛋白質(zhì)中存在的序列稱(chēng)為外顯子?;虻牟贿B續(xù)性是真核生物基因所特有的,但不是所有真核生物基因都一定具有這種不連續(xù)性。9、內(nèi)含子的功能:含有可閱讀框架(ORF),內(nèi)含子的ORF可能編碼酶或蛋白質(zhì),其中包括逆轉(zhuǎn)錄酶、成熟酶。含有各種剪接信號(hào)碼,內(nèi)含子編碼的成熟酶直接參與內(nèi)含子本身的剪接功能。對(duì)基因表達(dá)有影響,內(nèi)含子對(duì)基因表達(dá)在多個(gè)水平上施加影響。內(nèi)含子中的增強(qiáng)子序列增加了基因轉(zhuǎn)錄的起始反應(yīng)。 10、人類(lèi)基因組計(jì)劃(HGP)的總體目標(biāo)是要完成人類(lèi)全
13、部24條染色體3×109bp序列的分析。具體包括:人類(lèi)基因組作圖(遺傳學(xué)圖譜、物理圖譜) 。對(duì)基因組DNA進(jìn)行切割和克隆。測(cè)定基因組的全部DNA序列?;虻蔫b定。信息系統(tǒng)的建立、信息的儲(chǔ)存和處理以及相應(yīng)軟件的開(kāi)發(fā)。11、結(jié)構(gòu)基因組學(xué):以全基因組測(cè)序?yàn)槟繕?biāo)的基因結(jié)構(gòu)研究,闡述基因組中基因的位置和結(jié)構(gòu),為基因功能的研究奠定基礎(chǔ)。12、功能基因組學(xué):是利用結(jié)構(gòu)基因組學(xué)提供的信息,以大規(guī)模實(shí)驗(yàn)方法及統(tǒng)計(jì)與計(jì)算機(jī)分析,全面系統(tǒng)地分析全部基因的功能。13、蛋白質(zhì)組:是一個(gè)基因組在特定細(xì)胞內(nèi)所表達(dá)的蛋白質(zhì)。對(duì)于一種生物來(lái)說(shuō),它的基組DNA基本上是恒定的,但蛋白質(zhì)組是動(dòng)態(tài)的。也就是不同組織的細(xì)胞中蛋
14、白質(zhì)組是不同的,在同一細(xì)胞的不同生長(zhǎng)狀態(tài)、病理狀態(tài)下也是不一樣的。蛋白質(zhì)組只指某一特定時(shí)間內(nèi)的蛋白質(zhì)集合體。14、生物信息學(xué):是用數(shù)理和信息科學(xué)的觀點(diǎn)、理論和方法去研究生命現(xiàn)象,組織和分析呈指數(shù)增長(zhǎng)的生物學(xué)數(shù)據(jù)的一門(mén)學(xué)科。生物信息學(xué)位于生物、計(jì)算機(jī)、數(shù)學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域的交叉點(diǎn)上,其研究目標(biāo)是揭示“基因組信息結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性及遺傳語(yǔ)言的根本規(guī)律”。生物信息學(xué)包含了基因組信息學(xué)、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)模擬和藥物設(shè)計(jì)等3個(gè)組成部分。目前的研究包括下面幾個(gè)方面:相關(guān)信息的收集、儲(chǔ)存、管理與提供。新基因的發(fā)現(xiàn)和鑒定。非編碼區(qū)的信息結(jié)構(gòu)分析。大規(guī)?;蚬δ鼙磉_(dá)譜的分析。蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)、模擬和分子設(shè)計(jì)。藥物開(kāi)發(fā)。
15、60; 第五章基因工程原理一、基本概念1.基因工程:是對(duì)攜帶遺傳信息的分子進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的分子工程,包括基因重組、克隆和表達(dá)。核心是構(gòu)建重組體DNA的技術(shù)。2.基因組DNA文庫(kù):是某一生物體的染色體全部DNA序列被隨機(jī)切割成適當(dāng)大小的片段后,插入到載體內(nèi)構(gòu)成的DNA文庫(kù)。理論上,全部重組克隆含有該生物全部遺傳信息的總和。3.cDNA基因文庫(kù):是從某類(lèi)真核細(xì)胞分離總的polyA+-mRNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)的 DNA,從單鏈的cDNA用DNA聚合酶合成雙鏈cDNA。全部雙鏈cDNA插入到載體那,構(gòu)成重組DNA。重組載體轉(zhuǎn)化 E.coli后得到的克隆總和。4.扣除文庫(kù):將兩種不
16、同組織來(lái)源的mRNA進(jìn)行比較,用扣除雜交排除相同部分,即共同表達(dá)的那部分mRNA,選出剩余有差異的,特異表達(dá)的mRNA構(gòu)建成cDNA文庫(kù)。5.分子雜交:是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下可按堿基配對(duì)的原則退火成雙鏈的過(guò)程。是分子生物學(xué)最常用的方法之一。6.PCR:即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增樣品中的DNA量和富集眾多DNA分子中的一個(gè)特定的DNA序列的一種技術(shù)。在該反應(yīng)中,使用與目的DNA序列互補(bǔ)的寡核苷酸作為引物,進(jìn)行多輪DNA合成。其中包括DNA變性、引物退火和在TaqDNA聚合酶催化下的DNA合成。7.物理圖譜:是DNA片段上限制性?xún)?nèi)切酶酶切位點(diǎn)的圖譜,表示各種限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)在
17、DNA序列上的線(xiàn)性排列。指的是DNA序列上兩點(diǎn)間的實(shí)際距離。8.Southern雜交:用于檢測(cè)DNA片段混合物中存在特定序列的技術(shù)。又稱(chēng)Southern印跡。檢驗(yàn)的目的DNA通常用一種或一種以上的限制性?xún)?nèi)切酶酶切,得到各種特定長(zhǎng)度的片段,在凝膠電泳中依長(zhǎng)度分成條帶,DNA片段原位地轉(zhuǎn)移到NC膜或尼龍膜上。然后,膜上的DNA片段與標(biāo)記的探針DNA進(jìn)行雜交,已雜交的DNA片段可通過(guò)標(biāo)記的探針進(jìn)行放射性或顯色反應(yīng)定位。9.Northern雜交:從真核生物的特定組織或發(fā)育階段的細(xì)胞分離出全部RNA或mRNA,用變性凝膠電泳分離后轉(zhuǎn)移到NC膜上。用變性的探針DNA對(duì)NC膜上的RNA進(jìn)行雜交。從顯影或顯色
18、反應(yīng)判斷陽(yáng)性雜交的存在。10.亞克?。寒?dāng)載體中插入的外源DNA片段太大,難以作摹寫(xiě)分析或操作時(shí),需要對(duì)該克隆片段作些再切割,將大的DNA片段切稱(chēng)較小的片段,然后再與另外的新載體重組,并進(jìn)行轉(zhuǎn)化程序,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為亞克隆。 二、思考題1.PCR技術(shù)原理的是什么?PCR技術(shù)是利用兩種寡核苷酸引物,分別與雙鏈DNA片段的兩端互補(bǔ),形成DNA聚合酶反應(yīng)中的模板和引物的關(guān)系,這是PCR技術(shù)的核心。PCR聚合酶反應(yīng)體系的一些重要條件包括:模板、一對(duì)寡核苷酸引物、4種底物dNTP和Tap DNA聚合酶。反應(yīng)分為3步:雙鏈模板DNA變性、退火和鏈的延伸。 2.基因工程中工具酶的種類(lèi)?限制性?xún)?nèi)
19、切酶,DNA連接酶,DNA聚合酶,逆轉(zhuǎn)錄酶,RNA聚合酶。 3.DNA聚合酶的特點(diǎn)?需要提供合成模板;不能起始新的DNA鏈,必須要有引物提供3'OH;合成的方向都是5'3'除聚合DNA外還有其它功能;以脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)為前體催化合成DNA。 4.熟悉基因工程載體的種類(lèi)和特點(diǎn)?種類(lèi):質(zhì)粒載體,噬菌體載體,M13噬菌體載體,柯斯質(zhì)粒載體,細(xì)菌人工染色體,酵母人工染色體,動(dòng)物病毒載體特點(diǎn):載體DNA是單個(gè)復(fù)制單元,在宿主細(xì)胞內(nèi)應(yīng)具有獨(dú)立復(fù)制能力;分子量盡可能的小,便于細(xì)胞中分離純化,離體條件下操作;含有多種限制行內(nèi)切酶的單一切點(diǎn);載體內(nèi)有不影響
20、其復(fù)制,生長(zhǎng)的非必要區(qū)域;具有多種選擇行標(biāo)記。 5.基因工程載體的基本要求,基因工程的基本步驟?基本要求:載體能夠獨(dú)立復(fù)制,具有復(fù)制起點(diǎn)。應(yīng)具有靈活的克隆位點(diǎn)和方便的篩選標(biāo)記。應(yīng)具有很強(qiáng)的啟動(dòng)子,能為大腸桿菌RNA聚合酶所識(shí)別。應(yīng)具有阻遏子,使啟動(dòng)子受到控制,只有當(dāng)誘導(dǎo)時(shí)才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。應(yīng)具有很強(qiáng)的終止子,只轉(zhuǎn)錄克隆的基因,所產(chǎn)生的mRNA較為穩(wěn)定。所產(chǎn)生的mRNA必須具有翻譯的起始信號(hào)AUG和SD序列,以便轉(zhuǎn)錄后順利翻譯?;静襟E:目的DNA的獲得;載體的選擇與構(gòu)建;目的DNA與載體的重組;重組DNA的轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染;篩選含有重組DNA分子的宿主細(xì)胞,獲得克隆。 6.DNA文庫(kù)
21、構(gòu)建的基本步驟?細(xì)胞核DNA的分離;適當(dāng)?shù)南拗菩詢(xún)?nèi)切酶酶切DNA;DNA片段與載體的連接,導(dǎo)入E.coli等工程菌株;基因文庫(kù)特性的檢測(cè),篩選。 第六章 DNA的復(fù)制一、名詞解釋1.DNA半保留復(fù)制:DNA復(fù)制時(shí),親代DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi),分別以解開(kāi)的兩股單鏈為模板,以dNTP為原料,按照堿基互補(bǔ)的原則,合成與模板鏈互補(bǔ)的新鏈,從而形成兩個(gè)子代DNA雙鏈,其結(jié)構(gòu)與親代DNA雙鏈完全一致。因子代DNA雙鏈中的一股單鏈源自親代,另一股單鏈為合成的新鏈,形成的雙鏈與親代雙鏈的堿基序列完全一致,故稱(chēng)為半保留復(fù)制。2.復(fù)制叉:原核生物DNA的復(fù)制從單一起點(diǎn)開(kāi)始
22、,雙螺旋結(jié)構(gòu)被打開(kāi),分開(kāi)的兩股單鏈分別作為新DNA合成的模板,DNA合成從起點(diǎn)開(kāi)始向兩個(gè)方向進(jìn)行,與單一起點(diǎn)相連的局部結(jié)構(gòu)形狀呈“Y”型,稱(chēng)復(fù)制叉結(jié)構(gòu)。3.復(fù)制子:基因組中能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的DNA單位稱(chēng)為復(fù)制子或復(fù)制單位。它含有控制復(fù)制起始或終止的特定位點(diǎn),從復(fù)制起始點(diǎn)到終止點(diǎn)的區(qū)域?yàn)橐粋€(gè)復(fù)制子。4.半不連續(xù)復(fù)制:復(fù)制過(guò)程中,催化DNA 合成的DNA聚合酶只能催化核苷酸從53方向合成,以3 5鏈為模板時(shí),新生的DNA以53方向連續(xù)合成;而以53為模板只能合成若干反向互補(bǔ)的岡崎片段,這些片段再相連成完整的新鏈,故稱(chēng)半不連續(xù)復(fù)制。5.前導(dǎo)鏈:與復(fù)制叉移動(dòng)的方向一致,通過(guò)連續(xù)的5-3聚合合成的新的DN
23、A鏈。6.滯后鏈:與復(fù)制叉移動(dòng)的方向相反,通過(guò)不連續(xù)的5-3聚合合成的新的DNA鏈。7.岡崎片段:DNA雙鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,?fù)制時(shí),親代雙鏈DNA在復(fù)制叉處打開(kāi),由于新鏈的合成具有方向性,即從53,以53DNA鏈為模板合成反向互補(bǔ)的新鏈時(shí),只能合成小片段DNA,這些片段根據(jù)發(fā)現(xiàn)者命名為岡崎片斷。 二、思考題1.DNA復(fù)制的特征?絕大多數(shù)DNA和RNA的生物合成,均按照堿基配對(duì)原則,以預(yù)先存在的DNA鏈為模板,逐個(gè)復(fù)制,生成新的拷貝。DNA或RNA鏈的生物合成只能以5´3´方向進(jìn)行。特異的聚合酶類(lèi)催化核酸的生物合成。在核酸生物合成中,聚合酶的底物核苷酸要求總是5
24、80;核糖核苷酸,即5´-NTP或5´-dNTP。RNA聚合酶進(jìn)行聚合反應(yīng)時(shí),能夠直接以NTP為底物,逐個(gè)聚合,即從頭合成RNA。 2.復(fù)制過(guò)程的幾個(gè)階段?以E.coli為例,DNA復(fù)制過(guò)程分為三個(gè)階段:起始:從DNA上控制復(fù)制起始的序列即起始點(diǎn)開(kāi)始復(fù)制,形成復(fù)制叉。復(fù)制方向多為雙向,也可以是單向,若以雙向進(jìn)行復(fù)制,兩個(gè)方向的復(fù)制速度不一定相同。由于DNA聚合酶不能從無(wú)到有合成新鏈,所以DNA復(fù)制需要有含3-OH的引物,引物由含有引物酶的引發(fā)體合成一段含310個(gè)核苷酸的RNA片段。延長(zhǎng):DNA復(fù)制時(shí),分別以?xún)蓷l親代DNA鏈為模板,當(dāng)復(fù)制叉沿DNA移動(dòng)時(shí),以親代35
25、鏈為模板時(shí),子鏈的合成方向是53,可連續(xù)進(jìn)行;以親代53鏈為模板時(shí),子鏈不能以35方向合成,而是先合成出許多53方向的岡崎片段,然后連接起來(lái)形成一條子鏈。終止:當(dāng)一個(gè)岡崎片段的3-OH與前一個(gè)岡崎片段的5-P接近時(shí),復(fù)制停止,由DNA聚合酶切除引物,填補(bǔ)空隙,連接酶連接相鄰的DNA片段。 3.線(xiàn)粒體DNA的復(fù)制模式? 4.DNA鏈延伸的幾個(gè)階段? 5.真核與原核生物的復(fù)制相同點(diǎn)與差異之處?相同點(diǎn):復(fù)制起始點(diǎn)都含有若干短的重復(fù)序列的獨(dú)特DNA片段;這些短的重復(fù)序列北多種結(jié)合蛋白所識(shí)別,這些蛋白質(zhì)在ori位點(diǎn)上的復(fù)合物對(duì)復(fù)制機(jī)構(gòu)的裝配起著關(guān)鍵的作用。復(fù)制起始點(diǎn)是富含A
26、-T的DNA序列。有利于雙螺旋DNA的解鏈。差異:真核生物的DNA比原核DNA分子大得多且不裸露,與組蛋白結(jié)合成核小體,以染色質(zhì)結(jié)構(gòu)形式存在;真核的每條染色體有多個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn),而原核只有一個(gè)起始位點(diǎn);真核染色體在全部復(fù)制完成之前各個(gè)起始點(diǎn)上不能開(kāi)始新一輪的復(fù)制,受到一種復(fù)制的調(diào)控。而原核DNA的起始點(diǎn)可以連續(xù)地開(kāi)始新的復(fù)制事件,表現(xiàn)為一個(gè)復(fù)制子上有多個(gè)復(fù)制叉存在。 6.DNA損傷修復(fù)的種類(lèi)?DNA的修復(fù)方式可分為直接修復(fù)和取代修復(fù)兩大類(lèi)。直接修復(fù)包括光復(fù)活、轉(zhuǎn)甲基作用和直接連接作用,均屬于無(wú)差錯(cuò)修復(fù)。取代修復(fù)包括切除修復(fù)、重組修復(fù)和SOS修復(fù),后兩者屬于有差錯(cuò)傾向修復(fù)。
27、7.原核DNA聚合酶的一般特性?原核細(xì)胞有三種DNA聚合酶,都與DNA鏈的延長(zhǎng)有關(guān)。DNA聚合酶是單鏈多肽,可催化單鏈或雙鏈DNA的延長(zhǎng);DNA聚合酶則與低分子脫氧核苷酸鏈的延長(zhǎng)有關(guān);DNA聚合酶在細(xì)胞中存在的數(shù)目不多,是促進(jìn)DNA鏈延長(zhǎng)的主要酶。分子生物學(xué)復(fù)習(xí)資料(二)第七章 基因的轉(zhuǎn)錄一、名詞解釋1.轉(zhuǎn)錄:是指以DNA為模板,合成RNA的信息傳遞過(guò)程。除了某些RNA病毒的基因組之外,所有的RNA都是轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。2.反義鏈:在基因的DNA雙鏈中,轉(zhuǎn)錄時(shí)作為mRNA合成模板的那條單鏈叫做模板鏈或反義鏈。3.上游順式作用元件:在真核基因中存在著很多的位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游的順式調(diào)
28、控序列,這些DNA序列稱(chēng)之為上游順式作用元件。是指與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列,包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件等,它們是通過(guò)與反式作用因子的相互作用來(lái)調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性。4.啟動(dòng)子:是基因DNA中一段特定的核苷酸序列,是與啟動(dòng)機(jī)因表達(dá)相關(guān)的順式作用元件,式RNA聚合酶在轉(zhuǎn)錄起始時(shí)對(duì)模板DNA的識(shí)別位點(diǎn)和結(jié)合位點(diǎn),是基因轉(zhuǎn)錄的開(kāi)始部位,也即是轉(zhuǎn)錄是否能起始的決定位點(diǎn)。5.終止子:促進(jìn)轉(zhuǎn)錄終止的DNA序列,在RNA水平上通過(guò)轉(zhuǎn)錄出的終止子序列形成莖-環(huán)結(jié)構(gòu)而起作用。又可分為依賴(lài)于因子的終止子和不依賴(lài)于因子的終止子兩類(lèi)。 二、思考題1.原核生物和真核生物基因
29、轉(zhuǎn)錄的異同?相同點(diǎn):轉(zhuǎn)錄過(guò)程是相似的,都是以DNA的一條鏈為模板,4種NTP為底物,經(jīng)過(guò)起始、延伸和終止三個(gè)階段,以53方向合成RNA。不同點(diǎn):原核生物真核生物只有一種RNA聚合酶合成所有的RNA三種RNA聚合酶分別合成不同的RNA不同的啟動(dòng)子間有相當(dāng)大的同源性各種不同啟動(dòng)子間差異很大聚合酶直接同啟動(dòng)子結(jié)合,不需要另外的蛋白質(zhì)成分聚合酶通過(guò)同轉(zhuǎn)錄因子的相互作用進(jìn)行轉(zhuǎn)錄無(wú)增強(qiáng)子有增強(qiáng)子序列對(duì)轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)控啟動(dòng)子一般位于結(jié)構(gòu)基因之前聚合酶的啟動(dòng)子位于被轉(zhuǎn)錄的序列之中 2.熟悉原核生物啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)與功能、其中的35區(qū)、10區(qū)等的結(jié)構(gòu)?域中的基序并與之結(jié)合,啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的起始。一般將DNA上的轉(zhuǎn)錄
30、位點(diǎn)定位+1來(lái)排序,其下游(右側(cè))為正值,其上游(左側(cè))為負(fù)值。原核生物不同基因的啟動(dòng)子雖然結(jié)構(gòu)也有一定的差異,但明顯具有共同的特點(diǎn)。結(jié)構(gòu)典型,都含有識(shí)別(R),結(jié)合(B)和起始(I)三個(gè)位點(diǎn);序列保守,如-35序列,-10序列結(jié)構(gòu)都十分保守;位置和距離都比較恒定;直接和多聚酶相結(jié)合;常和操縱子相鄰;都在其控制基因的5端;決定轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)和方向。-35序列又稱(chēng)為Sextama盒,其保守序列為T(mén)TGACA,與-10序列相隔1619bp。其功能是:為RNA 聚合酶的識(shí)別位點(diǎn)。RNA 聚合酶的核心酶只能起到和模板結(jié)合和催化的功能,并不能識(shí)別-35序列,只有亞基才能識(shí)別-35序列,為轉(zhuǎn)錄選擇模板鏈。-3
31、5序列和-10序列的距離是相當(dāng)穩(wěn)定的,過(guò)大或過(guò)小都會(huì)降低轉(zhuǎn)錄活性。這可能是因?yàn)镽NA 聚合酶本身的大小和空間結(jié)構(gòu)有關(guān)。-10序列也稱(chēng)為Pribnow框盒,其保守序列為T(mén)ATAAT,位于-10bp左右,其中3端的“T”十分保守。A,T較豐富,易于解鏈。它和轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)“I”一般相距5bp。其功能是:與 RNA聚合酶緊密結(jié)合;形成開(kāi)放啟動(dòng)復(fù)合體;使RNA聚合酶定向轉(zhuǎn)錄。 3.原核生物轉(zhuǎn)錄的起始分幾個(gè)階段?核心酶在因子參與下接觸到DNA上,形成特異性結(jié)合;起始識(shí)別,RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合,形成封閉性起始復(fù)合物;從封閉性轉(zhuǎn)變?yōu)殚_(kāi)放形起始復(fù)合物,酶結(jié)合在10序列,啟動(dòng)子活化,并解開(kāi)雙鏈結(jié)構(gòu),
32、暴露模板鏈;形成DNA酶底物NTP的三元起始復(fù)合物,酶移動(dòng)到轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),在起始位點(diǎn)加上開(kāi)頭的幾個(gè)核苷三磷酸。 4.真核生物基因類(lèi)型II啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)與功能?轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn):是RNA合成的開(kāi)始位置;基本啟動(dòng)子:和Inr一起構(gòu)成核心啟動(dòng)子;轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)下游元件:轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游元件:5.真核生物基因轉(zhuǎn)錄的一般規(guī)律?典型的真核基因轉(zhuǎn)錄單元為單順?lè)醋?,原核為多順?lè)醋?。真核生物的RNA聚合酶高度分工。轉(zhuǎn)錄的正常進(jìn)行,除了需要RNA聚合酶以外,還需要許多蛋白質(zhì)因子的參與。真核基因DNA的順式作用元件要比原核基因復(fù)雜得多。真核基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控以正調(diào)控為主。 第八章轉(zhuǎn)錄后加工一、名
33、詞解釋1.轉(zhuǎn)錄后加工:在轉(zhuǎn)錄中新合成的RNA往往是較大的前體分子,需要經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的加工修飾,才轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂猩飳W(xué)活性的、成熟的RNA分子,這一過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)錄后加工。2.多順?lè)醋樱涸谠思?xì)胞中,通常是幾種不同的mRNA連在一起,相互之問(wèn)由一段短的不編碼蛋白質(zhì)的間隔序列所隔開(kāi),這種mRNA叫做多順?lè)醋觤RNA。3.RNA編輯:某些mRNA的核苷酸序列,在生成轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物后還需插入、刪除或取代一些核苷酸殘基,方能生成具有正確翻譯功能的模板,遺傳信息在mRNA水平上的改變過(guò)程,稱(chēng)為RNA編輯。 二、思考題1、內(nèi)含子RNA剪接的三種方式?第一類(lèi):自我剪切。由于內(nèi)含子的特殊結(jié)構(gòu)而能自發(fā)地進(jìn)行剪切。第二類(lèi)
34、:蛋白質(zhì)參與剪切的內(nèi)含子,主要在tRNA前體中發(fā)現(xiàn)。剪切在一系列酶催化下進(jìn)行。第三類(lèi):內(nèi)含子是snRNP參與剪接的內(nèi)含子。 2、原核生物tRNA前體以幾種方式存在?多個(gè)相同tRNA串聯(lián)排列在一起;不同的tRNA串聯(lián)排列;tRNA與rRNA混合串聯(lián)排列在一起。因而RNA前體必須經(jīng)歷加工,在tRNA與一些RNA片段之間先切斷,完成此任務(wù)的似乎是RNase。然后,RNA片段再進(jìn)行5端、3端加工,某些堿基進(jìn)行修飾 3、真核生物RNA前體的加工過(guò)程包括?真核生物tRNA和rRNA前體的加工包括轉(zhuǎn)最初始產(chǎn)物中間隔序列的除去、內(nèi)含子的剪接、5和3端修飾、堿基的修飾等。這些過(guò)程需要酶和蛋白
35、質(zhì)的參與。 4、RNA前體的剪切過(guò)程要通過(guò)4個(gè)步驟:首先在5端切除非編碼的序列,生成41S中間物;41S的RNA切成32S和20S兩段,分別含有28S rRNA和18S rRNA,32S中還含有5.8S rRNA;20S剪切成18S;32S剪切成28S rRNA和5.8S rRNA,它們相互進(jìn)行堿基配對(duì)。 5、5端帽子結(jié)構(gòu)具有如下3個(gè)功能。對(duì)mRNA的保護(hù)作用,保護(hù)mRNA免受RNase從5端開(kāi)始的攻擊。5端帽子結(jié)構(gòu)使mRNA具有可翻譯能力。5端帽子有利于成熟的mRNA從細(xì)胞核輸送到細(xì)胞質(zhì),只有成熟的mRNA才能進(jìn)行輸送。 第九章
36、;蛋白質(zhì)生物合成和翻譯后加工一、名詞解釋1.tRNA荷載作用:翻譯起始之前不斷地供應(yīng)各種氨基酰-tRNA,也就是氨基酸必須被活化,共價(jià)連接在tRNA上,即為tRNA荷載作用。2.開(kāi)放閱讀框架:從mRNA 5端起始密碼子AUG到3端終止密碼子之間的核苷酸序列,各個(gè)三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一個(gè)蛋白質(zhì)多肽鏈,稱(chēng)為開(kāi)放閱讀框架(ORF)。3.肽鏈合成的延伸:是指第二個(gè)和以后的密碼子編碼的氨基酸不斷進(jìn)入核糖體,并形成肽鍵的過(guò)程。4.核定位信號(hào):是另一種形式的信號(hào)肽, 可位于多肽序列的任何部分。一般含有 48個(gè)氨基酸, 且沒(méi)有專(zhuān)一性, 作用是幫助親核蛋白進(jìn)入細(xì)胞核。5.共翻譯轉(zhuǎn)動(dòng)機(jī)制: 6.分子伴
37、侶和分子伴素:分子伴侶專(zhuān)指一類(lèi)多功能蛋白,它能通過(guò)阻止諸如聚合作用這樣的副反應(yīng)來(lái)促使其他蛋白質(zhì)按正確的方式進(jìn)行折疊,而它本身卻不是最終形成的功能蛋白的部分。分子伴素是指不對(duì)共價(jià)連接的蛋白質(zhì)能特異性地幫助折疊,而是非特異性地幫助蛋白質(zhì)折疊,建立起他的正確結(jié)構(gòu)。7.遺傳密碼的特點(diǎn):三聯(lián)密碼;無(wú)標(biāo)點(diǎn)符號(hào);不重疊;通用性和變異性,其中通用性是指各種生物共用一套遺傳密碼;簡(jiǎn)并性;起始密碼子和終止密碼子。8.擺動(dòng)假設(shè)要點(diǎn):密碼子和反密碼子之間的堿基配對(duì)中,密碼子的5´端前兩位堿基必須嚴(yán)格地按照堿基配對(duì)原則同反密碼子配對(duì)。密碼子的第3個(gè)核苷酸為A時(shí),由于受到立體化學(xué)因素的影響,將產(chǎn)生與G,U和C配
38、對(duì)的一組特異構(gòu)象。9.滑動(dòng)搜索模型:是闡述核糖體在帶有5´帽子結(jié)構(gòu)地真核生物mRNA上如何啟動(dòng)翻譯的起始反應(yīng)。10.三位點(diǎn)模型:現(xiàn)在認(rèn)為核糖體結(jié)合tRNA有三個(gè)位點(diǎn),即P位點(diǎn),A位點(diǎn)和E位點(diǎn)。在早期,普遍認(rèn)為核糖體只有兩個(gè)結(jié)合tRNA的位點(diǎn),即P位點(diǎn)和A位點(diǎn),后來(lái)發(fā)現(xiàn)還有E位點(diǎn)。因而提出三位點(diǎn)模型。11.信號(hào)肽和導(dǎo)肽的特點(diǎn):信號(hào)肽:幾乎所有的信號(hào)肽整體上都是疏水的。信號(hào)肽一般位于蛋白質(zhì)的N端,進(jìn)入膜后被信號(hào)肽酶水解,真核細(xì)胞信號(hào)肽酶位于ER膜,原核細(xì)胞位于質(zhì)膜內(nèi)側(cè)。信號(hào)肽中部常常由1214個(gè)殘基構(gòu)成疏水性酸,稱(chēng)為信號(hào)肽疏水酸。信號(hào)肽是初生蛋白質(zhì)穿過(guò)膜所必須的疏水性肽段,位于蛋白質(zhì)分子
39、的各個(gè)部位。信號(hào)肽幾乎沒(méi)有嚴(yán)格的專(zhuān)一性。信號(hào)肽可能不是以一直線(xiàn)通過(guò)雙脂層膜,而是一種環(huán)狀結(jié)構(gòu)。導(dǎo)肽的共性:帶正電荷的堿性氨基酸(特別是Arg)含量較豐富。不含或基本上不含帶有負(fù)電荷的酸性氨基酸。羥基氨基酸(特別是Ser)含量較高有形成兩親的螺旋結(jié)構(gòu)的傾向。 二、思考題1.核糖體的組分和立體結(jié)構(gòu)? 2.原核和真核生物翻譯的起始??jī)烧咂鹗挤磻?yīng)的比較?起始階段一樣:只在核糖體小亞基上結(jié)合荷載的起始tRNA;在mRNA上必須找到合適的起始密碼子;在已經(jīng)形成有小亞基,mRNA和起始tRNA的起始復(fù)合物之后,大亞基參與形成完整的起始復(fù)合物。差異:原核細(xì)胞中,mRAN首先與小亞基結(jié)合,再
40、有起始tRNA加入形成起始復(fù)合物。而真核細(xì)胞中,起始tRNA首先結(jié)合于小亞基,形成四元復(fù)合物,然后在多種因子參與下結(jié)合mRNA,才形成起始復(fù)合物。小亞基起始復(fù)合物在mRNA上尋找起始密碼子的方式不同。 3.翻譯延伸和終止的過(guò)程?延伸反應(yīng):進(jìn)位反映是延伸的開(kāi)始步驟;轉(zhuǎn)位和肽鍵的合成;移位反應(yīng)。終止的過(guò)程:終止密碼子;終止密碼的校正;釋放因子。 4.蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的3種機(jī)制?核孔對(duì)特定大分子起選擇性通道的作用,核孔以其充分折疊的構(gòu)象轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì);分泌蛋白的邊翻譯邊轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制;翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。 5.蛋白質(zhì)前體的共價(jià)修飾類(lèi)型,蛋白質(zhì)的剪切形式,內(nèi)含肽的剪切過(guò)程?共價(jià)修飾類(lèi)型:肽鏈
41、N端殘基fMet或Met的切除;二硫鍵的形成;氨基酸側(cè)鏈的共價(jià)修飾。蛋白質(zhì)的剪切形式:前胰島素原,胰凝乳蛋白酶原,凝血酶原的活化,及蛋白質(zhì)內(nèi)含子,外顯子和自我剪切。內(nèi)含肽的剪切過(guò)程:內(nèi)含肽的切除相應(yīng)于hnRNA中內(nèi)含子的剪切。內(nèi)含肽是蛋白質(zhì)的內(nèi)部片段,翻譯后很快被剪切,兩個(gè)外顯肽連接到一起。內(nèi)含肽的長(zhǎng)度一般在300 600個(gè)氨基酸之間。內(nèi)含肽的剪接位點(diǎn)的序列非常相似,第一個(gè)氨基酸通常是半胱氨酸,有時(shí)為絲氨酸,最后兩個(gè)氨基酸的序列一般總是組氨酸和天冬氨酸。下游外顯肽的第一個(gè)氨基酸是半胱氨酸、絲氨酸或蘇氨酸。剪接是由內(nèi)含肽自我催化的,具體機(jī)制不詳。 6.蛋白質(zhì)折疊的意義和過(guò)程及自動(dòng)裝配原
42、則?雙重意義:結(jié)構(gòu)上,這個(gè)過(guò)程使伸展的肽鍵成為特定的三維結(jié)構(gòu);功能上,它使無(wú)活性的分子具有特定生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)分子。自動(dòng)裝配原則:蛋白質(zhì)在離體就已具有自發(fā)裝配的能力,并且不需要外加能量。自裝配原則只適用于小分子的蛋白質(zhì)。 第十一章 原核生物基因和真核生物基因表達(dá)的調(diào)空1、名詞解釋1.操縱子:原核生物基因表達(dá)和調(diào)空的單位,包括功能相關(guān)的幾個(gè)結(jié)構(gòu)基因和能被調(diào)空基因產(chǎn)物識(shí)別的DNA 控制元件。2.結(jié)構(gòu)基因:是指一類(lèi)編碼細(xì)胞結(jié)構(gòu)和基本代謝活動(dòng)所必要的RNA、蛋白質(zhì)或酶。一般來(lái)說(shuō),它們不是調(diào)控因子。3.調(diào)控基因:是指那些編碼那些控制其他基因表達(dá)的RNA或蛋白質(zhì)的基因。調(diào)控基因的表達(dá)產(chǎn)物是調(diào)控因子。調(diào)控基因也是結(jié)構(gòu)基因,只是它的編碼蛋白質(zhì)具有基因調(diào)控的功能,是在基因水平上而不是蛋白質(zhì)水平上的控制。4.反式作用因子:指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過(guò)直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。5.誘導(dǎo)作
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