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文檔簡介
1、分光光度法測鐵分光光度法測鐵一、一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 在在 pH=911.5 的的 NH3.H2O-NH4Cl 溶液中,溶液中,F(xiàn)e3+與磺基水楊酸反響生成組成比與磺基水楊酸反響生成組成比1:3的黃色穩(wěn)定配合物。的黃色穩(wěn)定配合物。Fe3+3COO-OHSO3-Fe36-COO-O-SO3-+ 3 H+(黃色配合物) 該配合物在堿性溶液中的最大吸收波長為該配合物在堿性溶液中的最大吸收波長為 420 nm,可在此波長下丈量吸光度,由朗伯可在此波長下丈量吸光度,由朗伯-比耳定律計(jì)算鐵含比耳定律計(jì)算鐵含量。量。1 1分光光度計(jì)儀器構(gòu)造分光光度計(jì)儀器構(gòu)造三、分光光度計(jì)的運(yùn)用方法
2、三、分光光度計(jì)的運(yùn)用方法2 2分光光度計(jì)運(yùn)用方法分光光度計(jì)運(yùn)用方法 通電通電-儀器自檢儀器自檢-預(yù)熱預(yù)熱20 min; 用用鍵設(shè)置測試方式為透射比鍵設(shè)置測試方式為透射比TMODE MODE 鍵鍵透射比透射比T T 波長選擇:用波長調(diào)理旋鈕設(shè)置所需的波長波長選擇:用波長調(diào)理旋鈕設(shè)置所需的波長 調(diào)零調(diào)零 翻開樣品室蓋,在翻開樣品室蓋,在“Transmittance方式下按方式下按“0%鍵,此時(shí)儀器自動(dòng)校正后顯示鍵,此時(shí)儀器自動(dòng)校正后顯示“000.0?!?%鍵鍵T T方式方式 調(diào)滿調(diào)滿 在比色皿槽中,依次放入?yún)⒈纫海瑯悠芬涸诒壬蟛壑?,依次放入?yún)⒈纫海瑯悠芬? 1和樣品液和樣品液2 2等,蓋上樣品室
3、蓋等,蓋上樣品室蓋( (留意透光截面垂直于光路方向留意透光截面垂直于光路方向) )。參比液參比液樣品液樣品液1 1樣品液樣品液2 2樣品液樣品液3 3 將參比液拉入光路中,按將參比液拉入光路中,按“100%T鍵調(diào)鍵調(diào)T為為100%,此,此時(shí)儀器顯示時(shí)儀器顯示“BLA,表示儀,表示儀器正在自動(dòng)校正,校正終了后器正在自動(dòng)校正,校正終了后顯示顯示“100.0。 樣品測定:樣品測定: 將將MODE轉(zhuǎn)換為轉(zhuǎn)換為“ABSORBANCE,顯色屏讀,顯色屏讀數(shù)為數(shù)為0.000,然后將樣品液分別拉入光路中,此時(shí)顯,然后將樣品液分別拉入光路中,此時(shí)顯示測得的樣品吸光度。示測得的樣品吸光度。分光光度計(jì)的運(yùn)用本卷須知
4、:分光光度計(jì)的運(yùn)用本卷須知: (1) 比色皿的清潔程度,直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此,比色皿的清潔程度,直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此,特別要將比色皿清洗干凈。裝樣前處置:自來水反復(fù)沖特別要將比色皿清洗干凈。裝樣前處置:自來水反復(fù)沖洗洗蒸餾水漂洗蒸餾水漂洗2次次待裝溶液漂洗待裝溶液漂洗2次。必要時(shí),需用次。必要時(shí),需用濃硝酸或鉻酸洗液短時(shí)間浸泡。濃硝酸或鉻酸洗液短時(shí)間浸泡。 用完后用自來水和蒸餾用完后用自來水和蒸餾水洗凈并用檫鏡紙檫干放回比色皿盒中。水洗凈并用檫鏡紙檫干放回比色皿盒中。 (2) 拿放比色皿時(shí),應(yīng)持其拿放比色皿時(shí),應(yīng)持其“毛面,不要接觸毛面,不要接觸“光面。光面。光面光面毛面毛面3假設(shè)比色皿外
5、外表有液體,運(yùn)用擦鏡紙朝同一方假設(shè)比色皿外外表有液體,運(yùn)用擦鏡紙朝同一方向拭干,以保證吸光度丈量不受影響。向拭干,以保證吸光度丈量不受影響。 (4) 比色皿內(nèi)盛液應(yīng)為其容量的比色皿內(nèi)盛液應(yīng)為其容量的2/3,過少會(huì)影響實(shí),過少會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,過多易在丈量過程中外溢,污染儀器。驗(yàn)結(jié)果,過多易在丈量過程中外溢,污染儀器。容容量量的的2/32/3 (5) 比色皿的光面要與光源在一條線上。比色皿的光面要與光源在一條線上。光透過窗口光透過窗口四、實(shí)驗(yàn)步驟四、實(shí)驗(yàn)步驟 取系列取系列50 mL容量瓶并編號,按下表配制系列溶液。容量瓶并編號,按下表配制系列溶液。以試劑空白作參比溶液,在以試劑空白作參比溶液,在420 nm波長下測定各溶液波長下測定各溶液的吸光度。的吸光度。xA 以吸
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