藥物的雜質(zhì)檢查PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1量量第1頁/共112頁第2頁/共112頁4.4.藥物的純度與化學(xué)試劑的純度藥物的純度與化學(xué)試劑的純度化學(xué)試劑的雜質(zhì)限量是從試劑使用時(shí)雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對試劑使用目的的影響加以規(guī)定，一步影響實(shí)際的適用范圍和目的確定；試劑有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純（化學(xué)試劑的雜質(zhì)限量是從試劑使用時(shí)雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對試劑使用目的的影響加以規(guī)定，一步影響實(shí)際的適用范圍和目的確定；試劑有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純（GRGR）、分析純（）、分析純（ARAR）、化學(xué)純（）、化學(xué)純（CPCP）、色譜純、光譜純。）、色譜純、光譜純。藥物的純度主要從藥物安全、有效角度考慮，雜質(zhì)限量的確定要考慮雜質(zhì)的生理作

2、用核對藥物穩(wěn)定性的影響，藥品只有兩個(gè)等級：合格或不合格。藥物的純度主要從藥物安全、有效角度考慮，雜質(zhì)限量的確定要考慮雜質(zhì)的生理作用核對藥物穩(wěn)定性的影響，藥品只有兩個(gè)等級：合格或不合格。第3頁/共112頁生產(chǎn)過程生產(chǎn)過程: :貯存運(yùn)輸過程：貯存運(yùn)輸過程：（1 1）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物 （2 2）試劑、溶劑、催化劑類）試劑、溶劑、催化劑類 （3 3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)的雜質(zhì)水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等聚

3、合、潮解和發(fā)霉等第4頁/共112頁雜質(zhì)雜質(zhì)一般雜質(zhì)：自然界廣泛存在，在多數(shù)藥物一般雜質(zhì)：自然界廣泛存在，在多數(shù)藥物的生產(chǎn)貯存中易引入的雜質(zhì)，如的生產(chǎn)貯存中易引入的雜質(zhì)，如ClCl- -、SOSO4 4 2-2-、水份、砷鹽、重金屬、有機(jī)溶劑等。、水份、砷鹽、重金屬、有機(jī)溶劑等。一般雜質(zhì)其檢查方法收載在藥典的附錄中。一般雜質(zhì)其檢查方法收載在藥典的附錄中。特殊雜質(zhì)：指在特定藥物的生產(chǎn)和貯存中特殊雜質(zhì)：指在特定藥物的生產(chǎn)和貯存中引入的雜質(zhì)，這類雜質(zhì)隨藥物不同而不同，引入的雜質(zhì)，這類雜質(zhì)隨藥物不同而不同，如阿斯匹林中游離的水楊酸。如阿斯匹林中游離的水楊酸。第5頁/共112頁按來源還可將雜質(zhì)分為：按來源

4、還可將雜質(zhì)分為：工藝雜質(zhì)工藝雜質(zhì)降解產(chǎn)物降解產(chǎn)物從反應(yīng)物和試劑中帶入的雜質(zhì)從反應(yīng)物和試劑中帶入的雜質(zhì)第6頁/共112頁2.按理化性質(zhì)分：按理化性質(zhì)分：SFDA、ICH、FDA采用這種分類采用這種分類無機(jī)雜質(zhì)無機(jī)雜質(zhì)有機(jī)雜質(zhì)有機(jī)雜質(zhì)溶劑殘留溶劑殘留第7頁/共112頁第8頁/共112頁第9頁/共112頁第10頁/共112頁限量檢查法限量檢查法定量測量法定量測量法對照法對照法靈敏度法靈敏度法比較法比較法即：即：第11頁/共112頁 （1 1）對照法：用已知雜質(zhì)對照品按）對照法：用已知雜質(zhì)對照品按最大限量最大限量要求配成對照液，與供試品溶液要求配成對照液，與供試品溶液平行試驗(yàn)平行試驗(yàn)，比較結(jié)果，判定是

5、否雜質(zhì)超標(biāo)。，比較結(jié)果，判定是否雜質(zhì)超標(biāo)。 供試液供試液 供試液供試液 對照液對照液 相同條件相同條件 反應(yīng)反應(yīng) 反應(yīng)反應(yīng) 下反應(yīng)下反應(yīng) 比較比較 供試液供試液 對照液對照液 對照液對照液 反應(yīng)反應(yīng) 反應(yīng)反應(yīng) 合格合格不合格不合格第12頁/共112頁供試品的量供試品的量雜質(zhì)最大允許量雜質(zhì)最大允許量雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量100 ）供試品的量（對照液的體積對照液的濃度（雜質(zhì)限量100)/gmlgSVCL單位：單位：C Cg/mlg/ml V V mlml S Sg g有關(guān)計(jì)算有關(guān)計(jì)算第13頁/共112頁SVCL所以，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的毫升數(shù)為所以，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的毫升數(shù)為：)(210100.410566m

6、lCSLV第14頁/共112頁)(5 .01040 .210166gLVCS第15頁/共112頁%1 .0%10010.00 .5100100 .2SVCL3 第16頁/共112頁第17頁/共112頁照品照品（3）比較法）比較法第18頁/共112頁比較法雜質(zhì)限量計(jì)算雜質(zhì)限量計(jì)算例例1.某藥物進(jìn)行中間體雜質(zhì)檢查：取該藥，加稀鹽酸制成某藥物進(jìn)行中間體雜質(zhì)檢查：取該藥，加稀鹽酸制成每毫升含每毫升含2mg的溶液，置的溶液，置1cm比色池中，于比色池中，于310nm處（雜處（雜質(zhì)有吸收，藥物無吸收）測吸收度，不得超過質(zhì)有吸收，藥物無吸收）測吸收度，不得超過0.05。另取。另取中間體對照品，用相同溶劑配成

7、每毫升含中間體對照品，用相同溶劑配成每毫升含10g的溶液，的溶液，在相同條件下測得吸收度為在相同條件下測得吸收度為0.435，試問該藥品中間體雜質(zhì)，試問該藥品中間體雜質(zhì)的限量是多少？的限量是多少？%05. 0%100200093. 0%100CCL 樣品樣品雜質(zhì)雜質(zhì)5 .4311010435. 0L.CAE3 00093. 015 .4305. 0L.EAC 雜質(zhì)雜質(zhì)第19頁/共112頁例例2.2.卡比馬唑片（每片含卡比馬唑片（每片含卡比馬唑卡比馬唑5mg）中甲巰咪唑的檢查）中甲巰咪唑的檢查: :取本品取本品2020片，研細(xì)，加三氯甲烷適量，研磨使卡比馬唑溶解，片，研細(xì)，加三氯甲烷適量，研磨使

8、卡比馬唑溶解，濾過，用三氯甲烷洗滌濾器，合并濾液與洗液，置濾過，用三氯甲烷洗滌濾器，合并濾液與洗液，置10ml10ml量瓶量瓶中，加三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取中，加三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取甲流咪甲流咪唑唑?qū)φ掌?，加三氯甲烷制成每對照品，加三氯甲烷制成?ml1ml中含中含100g100g的溶液，的溶液，作為對照品溶液。分別取上述兩種溶液作為對照品溶液。分別取上述兩種溶液10L10L，分別點(diǎn)于同一，分別點(diǎn)于同一硅膠硅膠G G薄層板上，展開，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液顯色，供薄層板上，展開，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液顯色，供試品如顯與對照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏

9、色與試品如顯與對照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對照品比較，對照品比較，不得更深。求雜質(zhì)限量。不得更深。求雜質(zhì)限量。%0 . 1%100101000205100%100CCL 樣品樣品雜質(zhì)雜質(zhì)第20頁/共112頁第21頁/共112頁第22頁/共112頁標(biāo)準(zhǔn)儲備液（標(biāo)準(zhǔn)儲備液（NaCl）供試品溶液供試品溶液33HNOAgNOAgCl 目視比較混濁程度、判斷是否超過限量目視比較混濁程度、判斷是否超過限量第23頁/共112頁第24頁/共112頁水水溶解溶解稀稀HNO310mlH2O供試品：供試品： 25ml 40ml水水溶解溶解稀稀HNO310mlH2O標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)NaCL： 25ml 40ml1mlAgN

10、O31mlAgNO3AgCLAgCL暗處黑色背景比較暗處黑色背景比較50ml50ml水水水水第25頁/共112頁第26頁/共112頁第27頁/共112頁練習(xí)練習(xí)1. 1. 藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是（）硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是（） A. A. 硫酸硫酸 B. B. 硝酸硝酸 C. C. 鹽酸鹽酸 D. D. 醋酸醋酸 E. E. 磷酸磷酸 練習(xí)練習(xí)2. 2. 中國藥典（中國藥典（20052005年版）規(guī)定，檢查氯化物雜質(zhì)時(shí)，一年版）規(guī)定，檢查氯化物雜質(zhì)時(shí)，一般取用標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液

11、（般取用標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（1010gClgCl/ml/ml）5 58ml8ml的原因是（）的原因是（）A. A. 使檢查反應(yīng)完全使檢查反應(yīng)完全B. B. 藥物中含氯化物的量均在此范圍藥物中含氯化物的量均在此范圍C. C. 加速反應(yīng)加速反應(yīng)D. D. 所產(chǎn)生的濁度梯度明顯所產(chǎn)生的濁度梯度明顯E. E. 避免干擾避免干擾 第28頁/共112頁練習(xí)練習(xí)3. 3. 采用硝酸銀試液檢查氯化物時(shí)，加入采用硝酸銀試液檢查氯化物時(shí)，加入硝酸使溶液酸化的目的是（）硝酸使溶液酸化的目的是（）A A加速生成氯化銀渾濁反應(yīng)加速生成氯化銀渾濁反應(yīng)B B消除某些弱酸鹽的干擾消除某些弱酸鹽的干擾C C消除碳酸鹽干擾消除碳酸鹽

12、干擾D D消除磷酸鹽干擾消除磷酸鹽干擾E E避免氧化銀沉淀生成避免氧化銀沉淀生成第29頁/共112頁練習(xí)練習(xí)4 4. 當(dāng)采用比濁法檢查氯化物雜質(zhì)時(shí)，若藥物本身有顏色而干擾檢查的話，應(yīng)該選用的處理方法為（）A內(nèi)消色法B外消色法C比色法D差示比濁法 E差示可見分光法 第30頁/共112頁練習(xí)練習(xí)5 5. 若要進(jìn)行高錳酸鉀中氯化物的檢查，最佳方法是（）A. 加入一定量氯仿提取后測定B. 氧瓶燃燒C. 倍量法D. 加入一定量乙醇E. 以上都不對第31頁/共112頁練習(xí)練習(xí)6 6. 下列哪些條件為藥物中氯化物檢查的必要條件（）A. 所用比色管需配套B. 稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C. 避光放置5

13、分鐘D. 用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液做對照E. 在白色背景下觀察 第32頁/共112頁K2SO4對照溶液對照溶液 BaSO4（限量）（限量）BaCL2樣樣 品品 溶溶 液液 BaSO4BaCL2H+判別：目視比較混濁程度判斷是否超限判別：目視比較混濁程度判斷是否超限硫酸鹽為信號雜質(zhì)，反映藥物的純度和生產(chǎn)過程是否正常。硫酸鹽為信號雜質(zhì)，反映藥物的純度和生產(chǎn)過程是否正常。第33頁/共112頁樣樣 品品 H2O溶解溶解40ml稀稀HCl 2ml比色管比色管5mlBaCl2(25%)標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)K2SO4 H2O溶解溶解40ml比色管比色管5mlBaCl2(25%)稀稀HCl 2ml搖勻，放置搖勻，放置10min搖

14、勻，放置搖勻，放置10min50ml水水比濁比濁第34頁/共112頁（三）測定條件（三）測定條件1. 1. 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)K K2 2SOSO4 4溶液溶液0.1mg/ml0.1mg/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含0.10.10.5mg0.5mg的所顯的所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)K K2 2SOSO4 4溶液溶液1 15ml5ml。2. 2. 反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml50ml供試溶液中含稀供試溶液中含稀鹽酸鹽酸2ml2ml為宜。（防止碳酸鋇和磷酸鋇的形成，但酸度過大可為宜。（防止碳酸鋇和磷酸鋇的形成，但酸度過大可是硫酸

15、鋇溶解而降低靈敏度）是硫酸鋇溶解而降低靈敏度）3. 3. 供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀濁而不是白色沉淀4. 4. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。 第35頁/共112頁 若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。例：藥物中硫酸鹽檢查時(shí)，所用的標(biāo)準(zhǔn)對照液是（）例：藥物中硫酸鹽檢查時(shí)，所用的標(biāo)準(zhǔn)對照液是（）A. A. 標(biāo)準(zhǔn)氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)氯化鋇B. B. 標(biāo)準(zhǔn)醋酸鉛溶液標(biāo)準(zhǔn)醋酸鉛溶液C. C. 標(biāo)準(zhǔn)硝酸銀溶液標(biāo)準(zhǔn)硝酸銀溶液D

16、. D. 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液E. E. 以上都不對以上都不對 （四）干擾及排除（四）干擾及排除第36頁/共112頁紅色紅色供試品溶液（含F(xiàn)e3+ ） Fe 標(biāo)準(zhǔn)液（用Fe(NH4)(SO4)2配制） 硫氰酸銨硫氰酸銨目視比色藥物中微量鐵鹽的存在可能會加速藥物的氧化和降解，藥物中微量鐵鹽的存在可能會加速藥物的氧化和降解，因此需要控制其存在量，常用以下兩種方法檢查。因此需要控制其存在量，常用以下兩種方法檢查。第37頁/共112頁供試品供試品 H2O25ml稀HCl4ml過硫酸銨50mg水到35ml30%NH4SCN3ml比色管中50mlH2O白背景比色標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品 4mlH2O25ml稀

17、HCl4ml過硫酸銨50mg水35ml30%NH4SCN3ml比色管中H2O50ml白背景比色第38頁/共112頁（1 1）用）用FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4) )2 212H12H2 2O O（硫酸鐵銨）配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（加（硫酸鐵銨）配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（加入硫酸防止入硫酸防止FeFe3+3+的水解），標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)的水解），標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液鐵溶液1010 g Feg Fe3+3+/ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含10105050 g g的的FeFe3+3+顯色梯度顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.01.05.0

18、ml 5.0ml （2 2）反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以）反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml50ml供試溶液中含供試溶液中含稀鹽酸稀鹽酸4ml4ml為宜。為宜。第39頁/共112頁第40頁/共112頁4. 干擾及排除干擾及排除 （2）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)700800熾灼破壞處理后再依法檢查。 （3）干擾離子的影響（四）（四） 干擾及排除干擾及排除（1 1）為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不）為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時(shí)，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。一致時(shí)，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。（2 2）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)

19、700700800800熾灼破壞處理后再依法檢查。熾灼破壞處理后再依法檢查。（3 3）某些藥物）某些藥物( (如葡萄糖、糊精和硫酸鎂等如葡萄糖、糊精和硫酸鎂等) )在檢在檢查過程中需加硝酸處理，則不再加過硫酸銨，但必查過程中需加硝酸處理，則不再加過硫酸銨，但必須加熱煮沸除去一氧化氮，因硝酸中可能含亞硝酸，須加熱煮沸除去一氧化氮，因硝酸中可能含亞硝酸，它能與硫氰酸根離子作用，生成紅色亞硝酰硫氰化它能與硫氰酸根離子作用，生成紅色亞硝酰硫氰化物，影響比色。物，影響比色。第41頁/共112頁例1. 中國藥典（2005年版）規(guī)定鐵鹽的檢查方法為（）A. 硫氰酸鹽法B. 巰基醋酸法C. 普魯士藍(lán)法D 鄰二

20、氮菲法E. 水楊酸顯色法第42頁/共112頁例2. 中國藥典（2005年版）規(guī)定，硫氰酸銨法檢查鐵鹽時(shí)，加入過硫酸銨的目的是（） A. 使藥物中鐵鹽都轉(zhuǎn)變?yōu)镕e3+ B. 防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色 C. 使產(chǎn)生的紅色產(chǎn)物顏色更深 D消除Cl-,SO42+,PO33-和枸櫞酸根離子 等與鐵鹽形成配位化合物而引起的干擾 E便于觀察、比較 第43頁/共112頁例3. 中國藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查（）A. FeB. Fe2+C. Fe3+D. Fe2+和Fe3+ E. 以上都不對 第44頁/共112頁第45頁/共112頁（一）第一法 硫代乙酰胺法1. 原理：對照法 SHCONHCHOHC

21、SNHCH223pH3.5223 黃色棕黑色藥物：PbSSHPbpH3.522 黃色棕黑色、對照：PbSSHPbNOpH3.523 Vc 適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。 第46頁/共112頁 2. 測定條件 （1 1）用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止）用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止PbPb2+2+水解），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液水解），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液1010 g Pbg Pb2+2+/ml/ml，適宜比色范圍為，適宜比色范圍為27ml27ml溶液中含溶液中含10102020 g g的的PbPb2+2+。（2 2）本法用）本法用2ml pH3

22、.52ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液的醋酸鹽緩沖液控制溶液pHpH值為值為3 33.53.5。 （3 3）顯色劑：從）顯色劑：從ChPChP（19901990）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑 第47頁/共112頁（1 1）供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。）供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。A.A.外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。B. B. 內(nèi)消色法內(nèi)消色法C. C. 改用第四法，微孔濾膜過濾法改用第四法，微孔濾膜過濾法 3. 干擾及排除干擾及排除第48頁/共112頁26（2 2）若

23、供試品中有微量）若供試品中有微量FeFe3+3+存在，會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（存在，會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.50.51.0g1.0g）還原）還原Fe3+為為FeFe2+2+，可消除干擾。，可消除干擾。（3 3）若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽劑消除干擾。如）若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽劑消除干擾。如ZnSO4ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加中重金屬的檢查，要在堿性下加KCNKCN掩蔽掩蔽ZnZn2+2+后，依第三法檢查后，依第三法檢查第49頁/共112頁 （二）第二法 熾灼殘?jiān)?適用于含芳環(huán)

24、、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。有機(jī)藥物。 含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝（因可腐蝕瓷坩堝，帶含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）入大量重金屬） 1. 1. 原理原理 對照法對照法500500600600熾灼后的殘?jiān)?，?jīng)處理后，依一法檢查。熾灼后的殘?jiān)?，?jīng)處理后，依一法檢查。第50頁/共112頁依一法檢查氯化物殘?jiān)蜜釄逯袠悠罚壕彌_液左右調(diào)節(jié)至、熾灼殘?jiān)?mlS0 . 25 . 3pHpH7.0OHNHOHHClHNO6005002323依一法檢查對照：空坩堝緩沖液溶液）（標(biāo)準(zhǔn)、 ml0 . 25 . 3pH

25、NOPbOHOHNHHClHNOSOH232233422. 操作方法第51頁/共112頁第52頁/共112頁 （三）第三法 硫化鈉法 適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。如磺胺類、巴比妥類。 1. 1. 原理原理 對照法對照法 黃色棕黑色藥物：PbSSNaPbNaOH22 黃色棕黑色、對照：PbSSNaPbNONaOH23 Vc2. 2. 測定條件測定條件（1 1）NaOHNaOH堿性條件下堿性條件下（2 2）顯色劑：硫化鈉）顯色劑：硫化鈉 。硫化鈉試液對玻璃有一定的腐。硫化鈉試液對玻璃有一定的腐蝕性，且久置后會

26、產(chǎn)生絮狀物，應(yīng)臨用新制蝕性，且久置后會產(chǎn)生絮狀物，應(yīng)臨用新制第53頁/共112頁（四）第四法 微孔濾膜法 適用于重金屬限量低（適用于重金屬限量低（ 2 25 5 g g ）藥物及有色供試液的）藥物及有色供試液的檢查。檢查。1.1.原理：原理：使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上，比較供試使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上，比較供試品和一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理后產(chǎn)生的色斑深淺，確定重品和一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理后產(chǎn)生的色斑深淺，確定重金屬是否超過限量。金屬是否超過限量。 我國我國藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，檢查新產(chǎn)品中重金屬中規(guī)定，檢查新產(chǎn)品中重金屬時(shí)，應(yīng)用該法。時(shí)，應(yīng)用該法。

27、 第54頁/共112頁第55頁/共112頁第56頁/共112頁例例1.1.重金屬檢查中，加入硫代乙酰胺時(shí)溶液控制最佳的重金屬檢查中，加入硫代乙酰胺時(shí)溶液控制最佳的pHpH值是值是（B B）A. 1.5 B. 3.5 CA. 1.5 B. 3.5 C7.5 D. 9.5 E. 11.57.5 D. 9.5 E. 11.5例例2.2.微孔濾膜法是用來檢查（微孔濾膜法是用來檢查（C C）A. A. 氯化物氯化物 B. B. 砷鹽砷鹽C. C. 重金屬重金屬 D. D. 硫化物硫化物E. E. 氰化物氰化物第57頁/共112頁例例3. 3. 中國藥典中國藥典(2005(2005年版年版) )重金屬檢查

28、法中，所使用的顯色劑重金屬檢查法中，所使用的顯色劑是（是（BCBC） A. A. 硫化氫試液硫化氫試液 B. B. 硫代乙酰胺試液硫代乙酰胺試液 C. C. 硫化鈉試液硫化鈉試液 D. D. 氰化鉀試液氰化鉀試液 E. E. 硫氰酸銨試液硫氰酸銨試液例例4 . 4 . 葡萄糖中進(jìn)行重金屬檢查時(shí)，適宜的條件是（葡萄糖中進(jìn)行重金屬檢查時(shí)，適宜的條件是（C C） A. A. 用硫代乙酰胺為標(biāo)準(zhǔn)對照液用硫代乙酰胺為標(biāo)準(zhǔn)對照液 B. B. 用用10ml10ml稀硝酸稀硝酸/50ml/50ml酸化酸化 C. C. 在在pH3.5pH3.5醋酸鹽緩沖溶液中醋酸鹽緩沖溶液中 D. D. 用硫化鈉為試液用硫化鈉

29、為試液 E. E. 結(jié)果需在黑色背景下觀察結(jié)果需在黑色背景下觀察第58頁/共112頁例例5. 5. 現(xiàn)有一藥物為苯巴比妥，欲進(jìn)行重金屬檢查，應(yīng)采用現(xiàn)有一藥物為苯巴比妥，欲進(jìn)行重金屬檢查，應(yīng)采用中國藥典中國藥典上收載的重金屬檢查的哪種方法（上收載的重金屬檢查的哪種方法（C C）A. A. 一法一法 B. B. 二法二法 C. C. 三法三法 D. D. 四法四法 E. E. 以上都不對以上都不對例例6. 6. 下面哪些方法為下面哪些方法為中國藥典中國藥典收載的重金屬檢查方法（收載的重金屬檢查方法（ACDACD） A. 500A. 500600600熾灼殘?jiān)鬅胱茪堅(jiān)? ,按一法操作按一法操作

30、B. pH3B. pH33.53.5條件下，加入硫化氫試液條件下，加入硫化氫試液 C. C. 堿性下，加入硫化鈉試液堿性下，加入硫化鈉試液 D. D. 按一法操作，結(jié)果用微孔濾膜過濾后觀察色斑按一法操作，結(jié)果用微孔濾膜過濾后觀察色斑 E. E. 以上都對以上都對第59頁/共112頁AsO33-+3Zn+9H+AsH3+3Zn 2+3H20 AsH3+2HgBr22HBr+AsH(HgBr)2黃色黃色AsH3+3HgBr23HBr+As (HgBr)3棕色棕色Zn與鹽酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥物作用生成揮發(fā)性的與鹽酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥物作用生成揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙，產(chǎn)生黃色到棕色的

31、砷斑。砷化氫，遇溴化汞試紙，產(chǎn)生黃色到棕色的砷斑。第60頁/共112頁標(biāo)準(zhǔn)砷斑標(biāo)準(zhǔn)砷斑標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)砷砷溶液溶液2ml 鹽酸鹽酸5ml 水水21ml， KI試液試液5ml SnCl2試液試液5d Zn(2g)25-40水水溶液溶液45min取出溴化汞取出溴化汞試紙?jiān)嚰?樣品砷斑樣品砷斑 藥物（含藥物（含AS） 鹽酸、水適量鹽酸、水適量 KI試液試液5ml SnCl2試液試液5d Zn(2g)25-40水水溶液溶液45min取出溴化汞試紙取出溴化汞試紙 比較砷斑深淺比較砷斑深淺2.操作：操作：第61頁/共112頁第62頁/共112頁導(dǎo)管導(dǎo)管C中裝有醋酸鉛棉花，中裝有醋酸鉛棉花，旋塞旋塞D上端有上端有H

32、gBr2試液試液 A、坤化氫發(fā)生瓶、坤化氫發(fā)生瓶 B、中空磨口塞、中空磨口塞 C、導(dǎo)氣管、導(dǎo)氣管 D、具孔有機(jī)玻璃旋塞、具孔有機(jī)玻璃旋塞 E、具孔有機(jī)玻璃塞、具孔有機(jī)玻璃塞蓋4.裝置裝置第63頁/共112頁5.5.注意：注意：a a、醋酸鉛棉花是為了防止、醋酸鉛棉花是為了防止s s2-2-干擾。干擾。b b、KIKI和和SnClSnCl2 2是還原劑，將是還原劑，將As()As()還原為還原為As(As() )，同時(shí)可抑制銻化氫的生成，同時(shí)可抑制銻化氫的生成， SnCl2 SnCl2還能與還能與ZnZn作用，在作用，在ZnZn粒表面形成鋅錫齊，其去極化作用，使氫氣均勻而連續(xù)的發(fā)生。粒表面形成鋅

33、錫齊，其去極化作用，使氫氣均勻而連續(xù)的發(fā)生。 AsO AsO4 43-3-+2I+2I- -+2H+2H+ +AsOAsO3 33-3-+I+I2 2+H+H2 2O O AsO AsO4 43-3-+Sn+Sn2+2+2H+2H+ +AAS SO O3 33-3-+ Sn+ Sn4+4+H+H2 2O O I I2 2+Sn+Sn2+2+2I2I- -+ Sn+ Sn4+4+第64頁/共112頁第65頁/共112頁含銻藥物的砷鹽檢查含銻藥物的砷鹽檢查-白田道夫法白田道夫法原理：氯化亞錫在酸性條件下將砷鹽還原為棕褐色的膠態(tài)砷，與同法處理后的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液比色，判斷藥物的砷含量。原理：氯化亞錫在酸性

34、條件下將砷鹽還原為棕褐色的膠態(tài)砷，與同法處理后的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液比色，判斷藥物的砷含量。第66頁/共112頁（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC法) SC2H5 N C SAg C2H5原理：原理：H3AS+6Ag（DDC）+3N(C2H5)36Ag+As(DDC)3+3(C2H5)3NHDDC第67頁/共112頁A、砷化氫發(fā)生瓶 B、中空磨口塞C、導(dǎo)氣 管D平底玻璃管 Ag（DDC）法檢坤裝置第68頁/共112頁操作：在試?yán)て恐胁僮鳎涸谠嚴(yán)て恐?對照標(biāo)準(zhǔn)液對照標(biāo)準(zhǔn)液砷標(biāo)準(zhǔn)液砷標(biāo)準(zhǔn)液鹽酸，水鹽酸，水 2mlKI 5dSnCl2 5ml Zn(2g)25-40水水浴浴45min導(dǎo)入比色管（導(dǎo)入

35、比色管（Ag-DDc一三乙胺）一三乙胺） 紅色紅色供試品溶液供試品溶液藥物藥物(含含As) 鹽酸，水鹽酸，水 2mlKI 5dSnCl2 5ml Zn(2g)25-40水水浴浴45min導(dǎo)入紅色管（導(dǎo)入紅色管（Ag-DDc一三乙胺）一三乙胺） 紅色紅色目視比色或測吸收度目視比色或測吸收度第69頁/共112頁六、溶液顏色檢查法六、溶液顏色檢查法 目的：控制有色雜質(zhì)的含量目的：控制有色雜質(zhì)的含量第一法：與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較第一法：與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較取規(guī)定量的供試品于比色管中取規(guī)定量的供試品于比色管中 10ml 10ml 取標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定色號的取標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定色號的標(biāo)準(zhǔn)比色液標(biāo)準(zhǔn)比色液10 ml10 ml于比色管

36、中于比色管中 白色背白色背景目視景目視比色比色標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制個(gè)色號標(biāo)準(zhǔn)比色液個(gè)色號標(biāo)準(zhǔn)比色液種色調(diào)種色調(diào)不同量水稀釋不同量水稀釋種色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液種色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液不同比例不同比例溶液溶液、50554CuSO2CoCl7O2Cr2K第70頁/共112頁第二法：分光光度法第二法：分光光度法取規(guī)定量的供試品加水溶解，取取規(guī)定量的供試品加水溶解，取10ml10ml透明溶液，按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定透明溶液，按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定波長處測吸收度，不能超過標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值。波長處測吸收度，不能超過標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值。第三法第三法 色差計(jì)法色差計(jì)法 全波長范圍定量全波長范圍定量測色儀器一般為光電積分型色差計(jì)測色儀器一般為光電積

37、分型色差計(jì) 第71頁/共112頁七、易炭化物檢查法七、易炭化物檢查法【目的目的】檢查遇檢查遇H H2 2SOSO4 4易炭化或氧化而呈色的微量雜質(zhì)。易炭化或氧化而呈色的微量雜質(zhì)?！痉椒ǚ椒ā吭诒壬苤袑⒁欢抗┰嚻分屑尤朐诒壬苤袑⒁欢抗┰嚻分屑尤?mlH5mlH2 2SOSO4 4，溶解后，溶解后靜止靜止15min15min，與標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的比色液，與標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的比色液( (5ml) )比較不得更深比較不得更深. .對照液：對照液：（1 1）“溶液顏色檢查溶液顏色檢查”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；（2 2）由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅）由比色用氯化鈷液，比色用重鉻

38、酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對照液；液按規(guī)定方法配成的對照液；（3 3）高錳酸鉀液）高錳酸鉀液比色：同置白色背景前，平視觀察比較。比色：同置白色背景前，平視觀察比較。第72頁/共112頁1 1 目的：檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)目的：檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì) 方法：按規(guī)定配制供試品溶液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液方法：按規(guī)定配制供試品溶液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液, ,同時(shí)同時(shí)置于傘棚燈下，在置于傘棚燈下，在1000Lx1000Lx比較兩者的濁度，應(yīng)不超過標(biāo)準(zhǔn)液。比較兩者的濁度，應(yīng)不超過標(biāo)準(zhǔn)液。2. 2. 濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼反應(yīng)原理：

39、烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁?？s合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。1.001.00硫酸肼溶液與硫酸肼溶液與1010烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液貯備液 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)原液 濁度標(biāo)準(zhǔn)液（濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5 5個(gè)級號個(gè)級號） 八、澄清度檢八、澄清度檢查查稀釋稀釋3.3.判斷判斷 藥典中規(guī)定的藥典中規(guī)定的“澄清澄清”，系指供試品溶液的澄清度相同于，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過所用溶劑，或未超過0.50.5號濁度標(biāo)準(zhǔn)液。號濁度標(biāo)準(zhǔn)液。第73頁/共112頁第74頁/共112頁九、熾灼殘?jiān)?/p>

40、檢查法【目的目的】檢查混入藥物中的無機(jī)雜質(zhì)檢查混入藥物中的無機(jī)雜質(zhì)【方法方法】殘?jiān)ê阒兀┱魵獬M至放冷至全部黑色、無煙霧，熾灼至恒重的坩堝樣品高溫灼燒濕潤，直火加熱直火緩緩加熱8007004215 .0SOHSOH42ml%100%供試品重空坩堝重殘?jiān)佰釄逯責(zé)胱茪堅(jiān)?5頁/共112頁 3. 注意事項(xiàng) （1 1）供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定。）供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定。（2 2）含氟的藥物對瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。）含氟的藥物對瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。（3 3）若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查，則）若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查，則500500600600熾灼

41、至恒重。熾灼至恒重。（4 4）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化 第76頁/共112頁第77頁/共112頁第78頁/共112頁干燥失重=100%mS第79頁/共112頁m第80頁/共112頁 第81頁/共112頁供試品中的水分供試品中的水分=100%（Vs-Vo）FM樣品消耗的體積空白消耗的體積純水校正獲得第82頁/共112頁測定裝置測定裝置 2.甲苯法甲苯法 適于制劑水分測定適于制劑水分測定第83頁/共112頁第84頁/共112頁 主要檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的主要檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害的有機(jī)溶劑有害的有機(jī)溶

42、劑 常采用常采用氣相色譜法氣相色譜法進(jìn)行檢查進(jìn)行檢查 直接進(jìn)樣法直接進(jìn)樣法 頂空進(jìn)樣法（適用于揮發(fā)性大的樣品測定）頂空進(jìn)樣法（適用于揮發(fā)性大的樣品測定） 第85頁/共112頁物理：外觀性狀、分配或吸附、對光的吸收的差異物理：外觀性狀、分配或吸附、對光的吸收的差異化學(xué)：對某一化學(xué)反應(yīng)的差別化學(xué)：對某一化學(xué)反應(yīng)的差別雜質(zhì)與試劑反應(yīng)雜質(zhì)與試劑反應(yīng)藥物無反應(yīng)藥物無反應(yīng)第86頁/共112頁特點(diǎn)：分離效能高，分離的同時(shí)進(jìn)行測定，應(yīng)特點(diǎn)：分離效能高，分離的同時(shí)進(jìn)行測定，應(yīng)用廣泛用廣泛需要對照品需要對照品第87頁/共112頁 供試品供試品A對照品對照品BA？B前沿前沿原點(diǎn)原點(diǎn)l0l第88頁/共112頁2.2.

43、高低濃度對比法高低濃度對比法當(dāng)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定、或無雜質(zhì)對照品時(shí)，采用此法當(dāng)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定、或無雜質(zhì)對照品時(shí)，采用此法要求：雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色與主成分斑點(diǎn)顏色相同或相近要求：雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色與主成分斑點(diǎn)顏色相同或相近供試供試液液稀釋稀釋對照對照液液點(diǎn)樣、展開、干燥、顯色點(diǎn)樣、展開、干燥、顯色結(jié)果判斷：供試液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與對照液主斑點(diǎn)結(jié)果判斷：供試液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與對照液主斑點(diǎn)比較，不得更深比較，不得更深（高）（高）（低）（低）第89頁/共112頁3.13.1法與法與2 2法并用法并用適用：當(dāng)藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)時(shí)，其中有的雜適用：當(dāng)藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)時(shí)，其中有的雜質(zhì)有對照品，有的雜質(zhì)沒有對照品或結(jié)構(gòu)未

44、知質(zhì)有對照品，有的雜質(zhì)沒有對照品或結(jié)構(gòu)未知第90頁/共112頁1.外標(biāo)法測定外標(biāo)法測定需要需要雜質(zhì)對照品，進(jìn)樣量能夠精確控制雜質(zhì)對照品，進(jìn)樣量能夠精確控制供試液：供試液：A A雜雜對照液：對照液：A A對對 比較，比較，A雜雜A A對對 或：或：對雜對雜CCAA對對雜雜ACAC（二）高效液相色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)第91頁/共112頁 2. 2.內(nèi)標(biāo)（加校正因子）測定法內(nèi)標(biāo)（加校正因子）測定法 需要需要雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品校正因子的測定校正因子的測定雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品+內(nèi)標(biāo)物質(zhì)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)測定測定對對內(nèi)內(nèi)C/AC/AfC/ AAC內(nèi)內(nèi)雜雜f供試品供試品+內(nèi)標(biāo)物質(zhì)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)測定測定雜雜

45、內(nèi)內(nèi)C/AC/ Af第92頁/共112頁3.加校正因子的主成分自身對照法加校正因子的主成分自身對照法雜質(zhì)結(jié)構(gòu)確定、但雜質(zhì)對照品不易獲得或價(jià)格昂貴時(shí)，采用此法。雜質(zhì)結(jié)構(gòu)確定、但雜質(zhì)對照品不易獲得或價(jià)格昂貴時(shí)，采用此法。建立方法時(shí)，需要雜質(zhì)對照品建立方法時(shí)，需要雜質(zhì)對照品雜質(zhì)檢查時(shí)，雜質(zhì)檢查時(shí)，不需不需雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品藥物對照品雜質(zhì)對照品藥物對照品 f 校正因子直接載入各品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中校正因子直接載入各品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中供試液供試液 對照液：供試液稀釋成與對照液：供試液稀釋成與L相當(dāng)?shù)娜芤合喈?dāng)?shù)娜芤?分別分別測定測定對雜對雜AACCfC雜雜第93頁/共112頁 4.4.不加校正因子主成分

46、對照法不加校正因子主成分對照法 用于用于雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定、或無雜質(zhì)對照品時(shí)，雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定、或無雜質(zhì)對照品時(shí)，時(shí)雜質(zhì)的檢查。時(shí)雜質(zhì)的檢查。 對照液：供試品的對照液：供試品的稀釋液，稀釋液，進(jìn)樣測得進(jìn)樣測得A A主主 供試液：進(jìn)樣測得雜質(zhì)供試液：進(jìn)樣測得雜質(zhì)A Ai i，雜質(zhì)，雜質(zhì)A Ai i A A主主即為合格即為合格. .例如例如: :樣品液樣品液( (1mg/ml1mg/ml),),取取1ml1ml稀釋至稀釋至100ml100ml作對照品溶液；作對照品溶液；對照液對照液( (0.01mg/ml0.01mg/ml) )進(jìn)樣進(jìn)樣20l,20l,調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)調(diào)靈敏度，使主峰達(dá) 10%10%30%30%，取樣品液，取樣品液20l20l進(jìn)樣，當(dāng)雜質(zhì)進(jìn)樣，當(dāng)雜質(zhì)A Ai iA A主主時(shí)，雜質(zhì)限量為時(shí)，雜質(zhì)限量為1.0%.1.0%.第94頁/共112頁i ii i第95頁/共112頁（三）氣相色譜法（三）氣相色譜法(GC)(GC) 主要用于藥物中主要用于藥物