瓊脂擴散實驗ppt課件

1、實驗十三實驗十三 瓊脂分散實驗瓊脂分散實驗一、實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康?學(xué)習(xí)掌握瓊脂分散實驗的原理與運用學(xué)習(xí)掌握瓊脂分散實驗的原理與運用 熟習(xí)掌握其根本操作方法熟習(xí)掌握其根本操作方法二、實驗原理二、實驗原理 沉淀反響是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異沉淀反響是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合，在二者比例適當并有電解質(zhì)存在性結(jié)合，在二者比例適當并有電解質(zhì)存在及一定的溫度條件下，可構(gòu)成肉眼可見的及一定的溫度條件下，可構(gòu)成肉眼可見的沉淀物的反響。沉淀物的反響。 根據(jù)反響中運用的介質(zhì)和檢測方法不同，根據(jù)反響中運用的介質(zhì)和檢測方法不同，可將沉淀反響分為液相沉淀反響和凝膠內(nèi)可將沉淀反響分為液相沉淀反響和凝膠內(nèi)沉淀反

2、響兩種類型沉淀反響兩種類型適宜比例性適宜比例性抗體含量抗體含量抗原含量抗原含量前帶前帶后帶后帶等價帶等價帶網(wǎng)格學(xué)說網(wǎng)格學(xué)說lattice theory抗體過剩抗原過?？贵w抗體比例適宜液相沉淀反響液相沉淀反響 環(huán)狀沉淀環(huán)狀沉淀 絮狀沉淀免疫比濁絮狀沉淀免疫比濁凝膠內(nèi)沉淀反響凝膠內(nèi)沉淀反響 單向瓊脂分散單向瓊脂分散 雙向瓊脂分散雙向瓊脂分散 免疫電泳免疫電泳凝膠內(nèi)沉淀反響凝膠內(nèi)沉淀反響免疫分散技術(shù)免疫分散技術(shù)免疫電泳技術(shù)免疫電泳技術(shù)單向分散實驗單向分散實驗雙向分散實驗雙向分散實驗火箭電泳火箭電泳對流電泳對流電泳免疫電泳免疫電泳免疫分散免疫分散 根據(jù)沉淀線的數(shù)量、位置和外形，根據(jù)沉淀線的數(shù)量、位置和

3、外形，與知的規(guī)范與知的規(guī)范(或正常或正常)抗原抗體構(gòu)成抗原抗體構(gòu)成的沉淀線比較，即可對樣品中所含的沉淀線比較，即可對樣品中所含成分及其性質(zhì)進展分析、鑒定。成分及其性質(zhì)進展分析、鑒定。 由于電場的作用，限制了抗原、抗體的由于電場的作用，限制了抗原、抗體的自在分散，而使其定向泳動，因此添加自在分散，而使其定向泳動，因此添加了實驗的靈敏度，并縮短反響時間。了實驗的靈敏度，并縮短反響時間。 根據(jù)樣品的沉淀峰長度即可計算出待測根據(jù)樣品的沉淀峰長度即可計算出待測抗原的含量；反之，當瓊脂中抗原濃度抗原的含量；反之，當瓊脂中抗原濃度固定時，便可測定待測抗體的含量。固定時，便可測定待測抗體的含量。三、實驗器材三、實驗器材 兔抗兔抗BSA抗體抗體 BSA 0.01mol/LPBS緩沖液緩沖液 1%離子瓊脂離子瓊脂 打孔器打孔器四、實驗內(nèi)容及步驟四、實驗內(nèi)容及步