第7章 食品中有毒有害物質(zhì)的測定

1、第7章 食品中有毒有害物質(zhì)的測定【本章提要】本章介紹了有（介紹了）食品中有害元素、農(nóng)藥殘留量、黃曲霉毒素、亞硝基化合物、苯并芘、獸藥殘留、甲醛、甲醇等常見有毒有害物質(zhì)的危害、性質(zhì)，并結(jié)合現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)介紹了上述物質(zhì)的檢測方法。在自然界中，當(dāng)某些物質(zhì)或含有該物質(zhì)的物料被按其原來的用途正常使用時(shí)，若因該物質(zhì)而導(dǎo)致人體生理機(jī)能、自然環(huán)境或生態(tài)平衡遭受破壞，則稱該物質(zhì)為有害物質(zhì)。從對人體健康影響的角度可將有害物質(zhì)分為普通有害物質(zhì)、有毒物質(zhì)、致癌物和危險(xiǎn)物。凡是以小劑量進(jìn)入人體，通過化學(xué)或物理化學(xué)作用能夠?qū)е陆】凳軗p的物質(zhì)，稱為有毒物質(zhì)。劑量決定著一種成分的毒性大小，因而，一般有毒物質(zhì)的毒性分級也是以中毒

2、劑量作為基準(zhǔn)的。參考表7-1。表7-1 毒物毒性分級毒性分級大白鼠一次口服半數(shù)致死量LD50(mg/kg)人一次性致死量(g/kg)劇毒10.05高毒150.050.5中等毒505000.55.0低毒50050005.015微毒500015食品中的有害物質(zhì)可分為三類：一是生物性有害物質(zhì)，如黃曲霉、李斯特菌、口蹄疫致病菌等；二是化學(xué)性有害物質(zhì)，如DDT、BHC、氯丙醇、河豚毒素、重金屬、放射性元素等；三是物理性有害物質(zhì)，如金屬屑、石子、動(dòng)物排泄物等。這些有害物質(zhì)的主要來源有：不當(dāng)?shù)氖褂棉r(nóng)藥、獸藥，包括施藥過量、施藥期不當(dāng)或使用被禁藥物；來自加工、貯藏或運(yùn)輸中的污染，如操作不衛(wèi)生、殺菌不合要求或貯

3、藏方法不當(dāng)?shù)?；來自特定食品加工工藝，如肉類熏烤、蔬菜腌制等；來自包裝材料中的有害物質(zhì)，某些有害物質(zhì)可能移溶到被包裝的食品中；來自環(huán)境污染物，如二惡英、多氯聯(lián)苯等；以及來自食品原料中固有的天然有毒物質(zhì)。我國是農(nóng)產(chǎn)品總量第一的農(nóng)業(yè)大國，增加農(nóng)民收入的關(guān)鍵在于大力發(fā)展農(nóng)產(chǎn)品的深加工，而農(nóng)產(chǎn)品深加工的關(guān)鍵是食品加工。我國加入世貿(mào)組織 (WTO) 后，每年有大量農(nóng)產(chǎn)品、水產(chǎn)品進(jìn)出口貿(mào)易。加入世貿(mào)組織要求履行世貿(mào)組織的貿(mào)易技術(shù)壁壘協(xié)議(TBT)和實(shí)施衛(wèi)生與動(dòng)植物檢疫措施協(xié)議(SPS)，這使食品安全衛(wèi)生方面的壁壘日益突出，給我國農(nóng)水產(chǎn)品的出口造成嚴(yán)重影響。另一方面，隨著社會的發(fā)展人們越來越關(guān)心自身健康，對食

4、品安全性的要求越來越高，使得世界各國不斷降低食品中有害物質(zhì)的最高殘留限量 (MRL) 的數(shù)值，這對檢測水平提出了新的要求。第1節(jié) 食品中有害元素的測定食品中有毒有害元素主要是指鉛、鎘、汞、砷等，其主要來源是工業(yè)“三廢”、化學(xué)農(nóng)藥、食品加工原輔料等方面的污染。它們污染食品后，隨食物進(jìn)入人體，將危害人的健康，甚至使人終身殘疾或死亡。因此，必須對食品中有害元素進(jìn)行檢測，對食品中有害元素的種類及含量的了解，既可防止有害元素危害人的健康，又可給食品生產(chǎn)和衛(wèi)生管理提供科學(xué)依據(jù)。一、鉛的測定(一)原子吸收分光光度法1. 原理 樣本經(jīng)消化后，導(dǎo)入原子吸收分光光度計(jì)中，經(jīng)火焰原子化后，吸收波長283.3nm的共

5、振線，其吸光度與鉛含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2. 試劑(1) 混合酸 硝酸與高氯酸 (5+1) 混合。(2) 硝酸 (0.5mol/L) 量取32mL硝酸，加入適量的水中，用水稀釋并定容至1000mL。(3) 鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液 精確稱取1.0000g金屬鉛 (純度大于99.99) 或1.5980g的硝酸鉛 (優(yōu)級純)，加適量硝酸 (1+1) 使之溶解，移入1000mL容量瓶中，用0.5mol/L硝酸定容至刻度，貯存于聚乙烯瓶內(nèi)，于冰箱內(nèi)保存。此溶液每毫升相當(dāng)于1mg鉛。(4) 鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液 吸取鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液10.0mL置于100mL的容量瓶中，用0.5mol/L硝酸溶液稀釋至刻度，該溶液每毫

6、升相當(dāng)于100ug鉛。3. 儀器 原子吸收分光光度計(jì)，帶鉛空心陰極燈；電熱板；馬弗爐。玻璃儀器：所用玻璃儀器使用前必須用20的硝酸浸泡24h以上，然后分別用水和去離子水沖洗干凈后晾干。4. 操作步驟(1) 樣品濕法消化 固體樣品：精確稱取樣品25g于150mL的錐形瓶中，放入幾粒玻璃珠，加入混合酸2030mL，蓋一玻片，放置過夜。次日于電熱板上逐漸升溫加熱，溶液變成棕紅色。如發(fā)現(xiàn)消化液顏色變深，再滴加濃硝酸，繼續(xù)加熱消化至冒白色煙霧，取下放冷后，加入約10mL水繼續(xù)加熱趕酸至冒白煙為止。放冷后用去離子水洗至25mL的刻度試管中。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。 液體樣品：吸取均勻樣品1020mL于150m

7、L三角燒瓶中，加入幾粒玻璃珠。酒類和碳酸類飲品先于電熱板上小火加熱除去酒精和二氧化碳，然后加入20mL的混合酸，于電熱板上加熱至顏色由深變淺，至無色透明冒白煙時(shí)取下，放冷后加入10mL的水繼續(xù)加熱趕酸至冒白煙為止。冷卻后用去離子水洗至25mL的刻度試管中。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。(2) 樣品干法灰化 稱取制備好的均勻樣品2.05.0g置于50mL瓷坩堝中，于電爐上小火炭化至無煙后移入馬弗爐中，于500灰化約8h后取出，放冷后再加入少量混合酸，小火加熱至無碳粒，待坩堝稍涼，加入0.5mol/L的硝酸，溶解殘?jiān)⒁迫?0mL容量瓶中，再用0.5mol/L的硝酸洗滌坩堝，洗液并入容量瓶中，并稀釋至刻度，

8、混勻備用。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。(3) 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 吸取0.0mL、0.5mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別置于50mL容量瓶中，以硝酸(0.5mol/L)稀釋至刻度，混勻，此標(biāo)準(zhǔn)系列各含鉛0.0、1.0、2.0、5.0、10.0ug/mL。(4) 儀器條件 測定波長為283.3nm。燈電流、狹縫、空氣乙炔流量及燈頭高度均按儀器說明調(diào)至最佳狀態(tài)。(5) 樣品測定 將鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑空白液和處理好的樣品溶液分別導(dǎo)入火焰原子化器進(jìn)行測定，記錄其對應(yīng)的吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。5. 結(jié)果計(jì)算：式中：樣品中鉛的含量，mg/kg或mg/mL； 測定用樣液中鉛的含量，ug/kg；

9、 試劑空白液中鉛的含量，ug/kg； 樣品處理液的總體積，mL；樣品質(zhì)量 (或體積)，g或mL。(二) 雙硫腙比色法1. 原理 樣品經(jīng)消化后，在pH為8.59.0時(shí)，鉛離子與雙硫腙生成紅色配合物，溶于三氯甲烷。加入檸檬酸銨、氰化鉀和鹽酸羥胺等，防止銅、鐵、鋅等離子干擾，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2. 試劑(1) 氨水：1+1。(2) 鹽酸：1+1。(3) 酚紅指示液：1g/L。(4) 鹽酸羥胺溶液：200g/L。稱取20g 鹽酸羥胺，加水溶解至50mL，加2滴酚紅指示液，加氨水 (1+1)，調(diào)pH至8.59.0 (由黃變紅，再多加2滴)，用雙硫腙三氯甲烷溶液提取至三氯甲烷層綠色不變?yōu)橹梗儆萌燃淄?/p>

10、洗兩次，棄去三氯甲烷層，水層加鹽酸 (1+1) 呈酸性，加水至100mL。(5) 檸檬酸銨溶液：200g/L。稱取50g檸檬酸銨，溶于100mL水中，加2滴酚紅指示液，加氨水 (1+1)，調(diào)pH至8.59.0，用雙硫腙三氯甲烷溶液提取數(shù)次，每次1020mL，至三氯甲烷層綠色不變?yōu)橹梗瑮壢ト燃淄閷?，再用三氯甲烷洗兩次，每?mL，棄去三氯甲烷層，加水稀釋至250mL。(6) 氰化鉀溶液：100g/L。(7) 三氯甲烷：不應(yīng)含氧化物。(8) 淀粉指示液：稱取0.5g可溶性淀粉，加5mL水搖勻后，慢慢倒入100mL沸水中，隨倒隨攪拌，煮沸，放冷備用。臨用時(shí)配制。(9) 硝酸：1+99。(10) 雙

11、硫腙三氯甲烷溶液：0.5g/L。稱取精制過的雙硫腙0.5g，加1L三氯甲烷溶解，保存于冰箱中。(11) 雙硫腙使用液：吸取1.0mL雙硫腙溶液，加三氯甲烷至10mL搖勻。用1cm比色皿，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長510nm處測吸光度 (A)，用下式算出配制100mL雙硫腙使用液(70%透光度)所需雙硫腙溶液的體積(V)：(12) 硝酸硫酸混合液：4+1。(13 )鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液：精密稱取0.1598g硝酸鉛，加10mL硝酸(1+99)，全部溶解后，移入100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg鉛。(14) 鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取1.0mL鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于100mL容量瓶中，加水

12、稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于10.0ug鉛。3. 儀器 分光光度計(jì)。4. 分析步驟(1) 樣品預(yù)處理 在采樣和制備過程中，應(yīng)注意不使樣品被污染。糧食、豆類去雜物后，磨碎，過20目篩 ，貯于塑料瓶中保存?zhèn)溆?；蔬菜、水果、魚類、肉類及蛋類等水分含量高的鮮樣，用勻漿機(jī)打成勻漿，貯于塑料瓶中，保存?zhèn)溆谩?2) 樣品消化(灰化法)。 糧食及其他含水分少的食品。稱取5.00g樣品，置于石英或瓷坩堝中，加熱至炭化，然后移入馬弗爐中，500灰化3h，放冷，取出坩堝，加1mL硝酸 (1+1)，潤濕灰分，用小火蒸干，再于500灼燒1h，放冷，取出坩堝。加lmL硝酸 (1+1)，加熱，使灰分溶解，移入50mL容量

13、瓶中，用水洗滌坩堝，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。 含水分多的食品或液體樣品。稱取5.00g或吸取5.00mL樣品，置于蒸發(fā)皿中，先在水浴上蒸干，再按自“加熱至炭化”起依法操作。 測定。吸取10.0mL消化后的定容溶液和同量的試劑空白液，分別置于125mL分液漏斗中，各加水至20mL。吸取0.00mL、0.10mL、0.20mL、0.30mL、0.40mL、0.50mL鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0ug、1ug、2ug、3ug、4ug、5ug鉛)，分別置于125mL分液漏斗中，各加硝酸(1+99)至20mL。于樣品消化液、試劑空白液和鉛標(biāo)準(zhǔn)液中各加2mL檸檬酸銨溶液 (20g/L)，1mL鹽酸

14、羥胺溶液 (200g/L) 和2滴酚紅指示液，用氨水 (1+1) 調(diào)至紅色，再各加2mL氰化鉀溶液 (100g/L)，混勻。各加5.0mL雙硫腙使用液，劇烈振搖1min，靜止分層后，三氯甲烷層經(jīng)脫脂棉濾入1cm比色皿中，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長510nm處測吸光度，各點(diǎn)減去零管吸收值后，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較進(jìn)行定量。5. 結(jié)果計(jì)算式中：X樣品中鉛的含量，mg/kg或mg/L； 測定用樣品消化液中鉛的質(zhì)量，ug； 試劑空白液中鉛的質(zhì)量，ug； 樣品質(zhì)量或體積，g或mL； 樣品消化液的總體積，mL； 測定用樣品消化液體積，mL。二、鎘的測定(一) 原子吸收分光光度法1. 原理樣品經(jīng)處

15、理后，在酸性溶液中鎘離子與碘離子形成配合物，并經(jīng)4-甲基-2-戊酮萃取分離，導(dǎo)入火焰原子吸收分光光度計(jì)中，原子化以后，吸收228.8nm共振線，其吸收值與鎘含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2. 儀器原子吸收分光光度計(jì)，附鎘空心陰極燈；常用玻璃儀器。3. 試劑(1) 4-甲基-2-戊酮 (MIBK，又名甲基異丁酮)。(2) 磷酸 (1+10)。(3) 鹽酸 (1+11)。(4) 鹽酸 (5+7)。(5) 混合酸： 硝鹽與高氯酸3+1混合。(6) 硫酸(1+1)。(7) 碘化鉀溶液(25)。(8) 鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液 準(zhǔn)備稱取1.0000g金屬鎘 (99.99)，溶于20mL鹽酸 (5+7)中，加入2滴

16、硝酸后，移入1000mL容量瓶中，以去離子水稀釋至刻度，混勻，貯于聚乙烯瓶中。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg鎘。(9) 鎘標(biāo)準(zhǔn)使用液 吸取10.0mL鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液，置于100mL容量瓶中，以鹽酸 (1+11) 稀釋至刻度，混勻。如此多次稀釋至每毫升相當(dāng)于0.20ug鎘。4. 操作步驟(1) 樣品處理 稱取約5.0010.00g樣品置于50mL瓷坩堝中，小火炭化至無煙后移入馬弗爐中，00±25灰化約8h后，取出坩堝，放冷后再加入少量混合酸，小火加熱，不使干涸，必要時(shí)再加少許混合酸，如此反復(fù)處理，直至殘?jiān)袩o碳粒，待坩堝稍冷，加10mL鹽酸(1+11)溶解殘?jiān)⒁迫?0mL容量瓶中，再用鹽

17、酸 (1+11) 反復(fù)洗滌坩堝，洗液并入容量瓶中，并稀釋至刻度，混勻備用。取與樣品處理相同量的混合酸和鹽酸 (1+11) 按同一操作方法做試劑空白試驗(yàn)。(2) 萃取分離 吸取25mL (或全量) 上述制備的樣液及試劑空白液，分別置于125mL分液漏斗中，加10mL硫酸(1+1)，再加10mL水，混勻。吸取 0.00、0.25mL、0.50mL、1.50mL、2.50mL、3.50mL、5.00mL 鎘標(biāo)準(zhǔn)使用液 (相當(dāng)于 0.00 、0.05ug、0.10ug、0.30ug、0.50ug、0.7ug、1.00ug鎘)，分別置于125mL分液漏斗中，各加鹽酸 (1+11) 至25mL，再加10m

18、L硫酸 (1+1) 及10mL水，混勻。于樣品溶液、試劑空白液及鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液中各加10mL碘化鉀溶液(25)，混勻，靜置5min，再各加10mL MIBK，振搖2min，靜置分層約0.5h，棄去下層水相，以少許脫脂棉塞入分液漏斗下頸部，將MIBK層經(jīng)脫脂棉濾至10mL具塞試管中，備用。(3) 測定 將有機(jī)相導(dǎo)入火焰原子化器進(jìn)行測定，測定參考條件：燈電流67mA，波長228.8nm，狹縫0.150.2nm，空氣流量5L/min，進(jìn)行背景校正 (也可根據(jù)儀器型號，調(diào)至最佳工作條件)。繪制鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品液及試劑空白液中鎘的含量。5. 計(jì)算式中：樣品中鎘的含量，mg/kg ；測定用樣品

19、液中鎘的質(zhì)量，ug ；試劑空白液中鎘的質(zhì)量，ug ；樣品質(zhì)量，g ；樣品處理液的總體積，mL ；測定用樣品處理液的體積，mL。(二) 分光光度法1. 原理 樣品經(jīng)消化后，在堿性溶液中，鎘離子與6-溴苯并噻唑偶氮萘酚形成紅色配合物，溶于三氯甲烷，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2. 試劑(1) 三氯甲烷。(2) 二甲基甲酰胺。(3) 混合酸：硝酸高氯酸(3+1)。(4) 酒石酸鉀鈉溶液：400g/L。(5) 氫氧化鈉溶液：200g/L。(6) 檸檬酸鈉溶液：250g/L。(7) 鎘試劑：稱取38.4mg 6-溴苯并噻唑偶氮萘酚，溶于50mL二甲基甲酰胺，貯于棕色瓶中。(8) 鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取1.0000

20、g金屬鎘 (99.99)，溶于20mL鹽酸 (5+7) 中，加入2滴硝酸后，移入1000mL容量瓶中，以水稀釋至刻度，混勻，貯于聚乙烯瓶中。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg鎘。(9) 鎘標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取10.0mL鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于100mL容量瓶中，以鹽酸 (1+11)稀釋至刻度，混勻。如此多次稀釋至每毫升相當(dāng)于1.0ug鎘。3. 儀器 分光光度計(jì)4. 分析步驟(1) 樣品消化 稱取5.0010.00g樣品，置于150mL錐形瓶中，加入1520mL混合酸(如在室溫放置過夜，則次日易于消化)，小火加熱，待泡沫消失后，可慢慢加大火力，必要時(shí)再加少量硝酸，直至溶液澄清無色或微帶黃色，冷卻至室溫。取與消化

21、樣品相同量的混合酸、硝酸按同一操作方法做試劑空白試驗(yàn)。(2) 測定 將消化好的樣液及試劑空白液用20mL水分?jǐn)?shù)次洗入125mL分液漏斗中，以氫氧化鈉溶液(200g/L)調(diào)節(jié)至pH = 7左右。吸取0.0mL、0.5mL、1.0mL、3.0mL、5.0mL、7.0mL、10.0mL鎘標(biāo)準(zhǔn)使用液 (相當(dāng)于0ug、0.5ug、1.0ug、3.0ug、5.0ug、7.0ug、10.0ug鎘)，分別置于125mL分液漏斗中，再各加水至20mL。用氫氧化鈉溶液(200g/L)調(diào)至pH=7左右。于樣品消化液、試劑空白液及標(biāo)準(zhǔn)液中依次加入3mL檸檬酸鈉溶液 (250g/L)、4mL酒石酸鉀鈉溶液(400g/L

22、)及1mL氫氧化鈉溶液 (200g/L)，混勻。再各加5.0mL三氯甲烷及0.2mL鎘試劑，立即振搖2min，靜置分層后，將三氯甲烷層經(jīng)脫脂棉濾于試管中，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于1cm比色皿在波長585nm處測吸光度。 5. 結(jié)果計(jì)算 式中：樣品中鎘的含量，mg/kg；測定用樣液中鎘的質(zhì)量，ug；試劑空白液中鎘的質(zhì)量，ug；樣本質(zhì)量，g。三、汞的測定(一) 冷原子吸收分光光度法1. 原理汞蒸氣對波長253.7nm的特征譜線具有強(qiáng)烈的吸收作用。樣品經(jīng)酸消化后，汞以離子狀態(tài)存在，在強(qiáng)酸性介質(zhì)中以氯化亞錫還原成元素汞，用冷原子吸收測定生成的汞蒸氣，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2. 儀器(1) 消化裝置(2)

23、測汞儀(附氣體干燥和抽氣裝置)3. 試劑(1) 硝酸(2) 硫酸(3) 氯化亞錫溶液 (300g/L) 稱取30g氯化亞錫 (SnCL2·2H2O)，加入少量水，并加入2mL硫酸使之溶解后，加水稀釋至100mL，放置冰箱保存。(4) 無水氯化鈣 (干燥用)(5) 混合酸 (1+1+8) 量取10mL硫酸，再加10mL硝酸，慢慢倒入50mL水中，冷卻后加水至100mL。(6) 汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液準(zhǔn)確稱取0.1354g干燥的二氧化汞，加混合酸溶解后，移入100mL容量瓶中，并稀釋至刻度，混勻。此溶液每毫升含1.0mg汞。(7) 汞標(biāo)準(zhǔn)使用液吸取1.0mL汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液，置于100mL容量瓶中，加

24、混合酸 (1+1+8) 稀釋至刻度，混勻。此溶液每毫升含10ug汞。再吸取此溶液1.0mL，置于100mL容量瓶中，加混合酸 (1+1+8) 稀釋至刻度，混勻。此溶液每毫升含0.1ug汞。臨用時(shí)現(xiàn)配。4. 操作步驟(1) 樣品消化 稱取10g樣品置于消化回流裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒，加45mL硝酸，10mL硫酸，轉(zhuǎn)動(dòng)錐形瓶防止局部炭化。裝上冷凝管后，小火加熱，發(fā)泡停止后，加熱回流2h。如加熱過程中溶液變棕色，再加5mL硝酸，繼續(xù)回流2h，放冷后從冷凝管上端小心加水20mL，繼續(xù)加熱回流10min，放冷，用適量水沖洗冷凝管，洗液并入消化液中，將消化液經(jīng)玻璃棉過濾于100mL容量瓶中，用少量水沖

25、洗錐形瓶、過濾器，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混勻。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。(2) 測定 吸取10.0mL樣品消化液，置于汞蒸氣發(fā)生器中，連接抽氣裝置，沿壁迅速加入3mL氯化亞錫溶液，立即通過流速為1.0L/min氮?dú)饣蚪?jīng)活性炭處理的空氣，使汞蒸氣經(jīng)過氯化鈣干燥管進(jìn)入測汞儀中，讀取測汞儀上最大讀數(shù)，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。 吸取0.00mL、0.10mL、0.20mL、0.30mL、0.40mL、0.50mL汞標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)于0.00ug、0.01ug、0.02ug、0.03ug、0.04ug、0.05ug汞)，置于試管中，各加10mL混合酸(1+1+8)，以下按中“置于蒸汞氣發(fā)生器中”起依法操作

26、，給制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5. 結(jié)果計(jì)算式中：樣品中汞的含量，mg/kg； 測定用樣品消化液中汞的含量，ug；試劑空白液中汞的含量，ug；樣品消化液總體積，mL；測定用樣品消化液體積，mL；樣品質(zhì)量，g。(二) 雙硫腙比色法1. 原理 雙硫腙氯仿溶液與樣品溶液中的汞在酸性條件下生成雙硫腙汞，在氯仿溶液中呈橙黃色，其顏色深淺與汞離子濃度成正比，可進(jìn)行比色測定。2. 試劑(1) 硝酸。(2) 硫酸。(3) 鹽酸羥胺溶液 (200g/L) 吹清潔空氣，可使含有的微量汞揮發(fā)除去。(4) 硫酸溶液c(1/2H2SO4)= 0.1mol/L。(5) 乙二胺四乙酸二鈉(Na2-EDTA)溶液(40g/L)。(6) 乙

27、酸溶液 (30) 取冰乙酸溶液30mL，用水稀釋至100mL。(7) 標(biāo)準(zhǔn)汞溶液 (1mg/mL) 準(zhǔn)確稱取分析純二氯化汞(經(jīng)干燥器干燥過)0.1354g，溶于0.5mol/L硫酸溶液中，并稀釋至100mL。(8) 汞標(biāo)準(zhǔn)使用液 (1ug/mL) 臨用前，用0.5mol/L硫酸溶液稀釋至所需濃度。(9) 雙硫腙貯備液 同鉛的測定(二)2.(10)(10) 雙硫腙使用液 臨用前，按鉛的測定(二)2.(11)的方法稀釋，以氯仿調(diào)零點(diǎn)，測定波長為492nm。3. 儀器(1) 消化回流裝置。(2) 分光光度計(jì)。4. 操作方法(1) 樣品處理稱取搗碎并混合均勻的樣品2030g于凱氏燒瓶中，加玻璃珠34粒

28、及320mL硝酸、1015mL硫酸，搖動(dòng)燒瓶，防止局部碳化。裝上冷凝管后，小火加熱，溶液開始發(fā)泡時(shí)即停止加熱。待劇烈反應(yīng)平息后，再加熱回流1.53h。溶液澄清透明后，停止加熱，稍冷后緩緩加入鹽酸羥胺溶液10mL，繼續(xù)加熱回流10min，以分解剩余的硝酸。冷卻后，用適量重蒸餾水沖洗冷凝管，洗液并入消化液中，取下燒瓶，消化液經(jīng)快速濾紙過濾到250mL容量瓶中，用水洗滌燒瓶，洗液一并濾入容量瓶中，加水至刻度。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取分液漏斗6個(gè)，各加100mL硫酸溶液c(1/2H2SO4)=0.1mL/L（0.1mol/L），然后分別準(zhǔn)確加入汞標(biāo)準(zhǔn)使用液0、1mL、2mL、3mL、

29、4mL、5mL，再各加入鹽酸羥胺溶液2.5mL、乙酸溶液5mL、EDTA溶液2.5mL，隨后添加0.5mol/L硫酸溶液至總體積為140mL。準(zhǔn)確加入雙硫腙使用液10mL，劇烈振搖2min，靜止分層后，經(jīng)脫脂棉將三氯甲烷層濾入2cm比色皿中，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，在波長492nm處測定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，汞含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(3) 樣品測定取樣品消化液100mL于分液漏斗中，準(zhǔn)確加入鹽酸羥胺溶液2.5mL、乙酸溶液5mL、EDTA溶液2.5mL，然后加水至總體積為140mL。加氯仿10mL，振搖1min，靜止分層后，棄去氯仿層。再準(zhǔn)確加入雙硫腙工作液10mL，劇烈振搖2min，靜

30、止分層后，經(jīng)脫脂棉將氯仿層濾入2cm比色皿中，以試劑空白調(diào)零點(diǎn)，在波長492nm處測定吸光度5. 計(jì)算式中：X樣品中汞含量，mg/kg； C 由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的測定用樣品試液中的汞量，ug；m樣品質(zhì)量，g；V1測定用樣液的體積，mL； V2樣品處理液的總體積，mL。6. 注意事項(xiàng)(1) 汞是易揮發(fā)的金屬，在樣品消化過程中，必須保持氧化狀態(tài)，即要有過量的硝酸存在，以免損失。但硝酸量不應(yīng)過量太多，以防殘留的硝酸分解不盡而氧化雙硫腙。硝酸的用量視不同樣品而適當(dāng)增減，如遇產(chǎn)品在消化過程中變?yōu)樽睾稚瑧?yīng)立即補(bǔ)加硝酸。(2) 溶液中可能存在一些能與雙硫腙作用的干擾離子，其中，F(xiàn)e3+ 、Sn4+被鹽酸羥胺

31、還原成Fe2+、Sn2+，在酸性溶液中與雙硫腙形成的絡(luò)合物不穩(wěn)定；加入EDTA可掩蔽Cu2+；加入乙酸可抑制雙硫腙汞絡(luò)合物的光分解。(3) 在加硝酸和硫酸消化前應(yīng)將樣品以冰水冷卻，以免甲基汞等揮發(fā)，分解后的樣品如不及時(shí)分析，可暫不加鹽酸羥胺(鹽酸羥胺即是一種掩蔽劑，也是一種還原劑)，以免汞吸附在器皿上，一但還原應(yīng)立即分析。(4) 本實(shí)驗(yàn)最好避光操作，在暗室中進(jìn)行比較穩(wěn)定，保持12h。四、砷的測定(一) 銀鹽法1. 原理樣品經(jīng)消化后，以碘化鉀、氯化亞錫將高價(jià)砷還原為三價(jià)砷，然后與鋅粒和酸產(chǎn)生的新生態(tài)氫生成砷化氫，經(jīng)銀鹽溶液吸收后，形成紅色膠態(tài)物，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。2. 試劑(1) 硝酸。(2) 硫

32、酸。(3) 鹽酸。(4) 硝酸高氯酸混合液 (4+1) 量取80mL硝酸，加20mL高氯酸，混勻。(5) 氧化鎂。(6) 硝酸鎂及硝酸鎂溶液 稱取15g硝酸鎂 Mg(NO3)2·6H2O 溶于水中，并稀釋至100 mL。(7) 15碘化鉀溶液 貯存于棕色瓶中。(8) 酸性氯化亞錫溶液 稱取40g氯化亞錫 (SnCl2·2H2O)，加鹽酸溶解并稀釋至100 mL。加入數(shù)顆金屬錫粒。(9) 6mol/L鹽酸 量取50 mL鹽酸加水稀釋至100mL。(10) 10乙酸鉛溶液。(11) 乙酸鉛棉花 用10%乙酸鉛溶液浸透脫脂棉后，壓除多余溶液，并使疏松，在100以下干燥后，貯存于玻

33、璃瓶中。(12) 無砷鋅粒。(13) 20%氫氧化鈉溶液。(14) 10%硫酸 量取5.7 mL硫酸加入80 mL水中，冷后再加水稀釋至100 mL。(15) 二乙氨基二硫代甲酸銀三乙醇胺三氯甲烷溶液 稱取0.25g二乙氨基二硫代鉀酸銀(C2H5)2NCS2Ag置于研缽中，加少量三氯甲烷研磨，移入100 mL量筒中，加入1.8 mL三乙醇胺，再用三氯甲烷分次洗滌研缽，洗液一并移入量筒中，再用三氯甲烷稀釋至100 mL，放置過夜。濾入棕色瓶中貯存。(16) 砷標(biāo)準(zhǔn)溶液 精確稱取0.1320g經(jīng)硫酸干燥器干燥或在100干燥2h的三氧化二砷，加20%氫氧化鈉溶液5mL，溶解后加20硫酸25mL，移入

34、1000mL容量瓶中，用新煮沸后冷卻的水稀釋至刻度，貯存于棕色玻璃瓶中。此溶液每毫升相當(dāng)于0.1mg砷。(17) 砷標(biāo)準(zhǔn)使用液 吸取1.0 mL砷標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于100mL容量瓶中，加10硫酸1mL，加水稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于1ug砷。3. 儀器(1) 分光光度計(jì)(2) 砷化氫吸收裝置：裝置組成如圖7-1所示。4. 操作方法(1) 樣品消化： 濕法消化：同第五章第三節(jié)鋅的測定 灰化法：稱取5.0g或吸取5.0mL樣品，置于坩堝中(液體樣品需先在水浴上蒸干)，加1g氧化鎂及10mL硝酸鎂溶液，混勻，浸泡4h。置水浴鍋上蒸干。用小火炭化至無煙后移入高溫爐中加熱至550，灼燒34h，冷卻后取出

35、。加5mL無離子水濕潤灰分后，用細(xì)玻璃棒攪拌，再用少量無離子水洗下玻棒上附著的灰分至坩堝內(nèi)。放水浴鍋上蒸干后移入高溫爐550灰化2h，冷卻后取出。加入5mL無離子水濕潤灰分，再慢慢加入6mol/L鹽酸10mL，然后將溶液移入50 mL容量瓶中，坩堝用6mol/L鹽酸洗滌3次，每次5 mL，再用水洗滌3次，每次5 mL，洗液均并入容量瓶中。再用無離子水定容至刻度，混勻。定容后的溶液10mL相當(dāng)于1g樣品，相當(dāng)于加入鹽酸量(中和需要量除外)1.5 mL。全量供銀鹽法測定時(shí)，不必再加鹽酸。取與灰化樣品相同量的氧化鎂和硝酸鎂溶液，按同一操作方法做試劑空白試驗(yàn)。(2) 測定： 吸取一定量的濕法消化后的定

36、容溶液(相當(dāng)于5g樣品)及同量的試劑空白液，分別置于150 mL錐形瓶中，補(bǔ)加硫酸至總量為5 mL，加水至5055mL。吸取0.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL、10.0 mL砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0.0ug、2.0ug、4.0ug、6.0ug、8.0ug、10.0ug砷)，分別于150 mL錐形瓶中，加水至40 mL，再加 (1+1) 硫酸10 mL。 于樣品消化液、試劑空白液及砷標(biāo)準(zhǔn)溶液中各加15碘化鉀溶液3mL、酸性氯化亞錫溶液0.5mL，混勻，靜置15min。各加入3g鋅粒，立即分別塞上裝有乙酸鉛棉花導(dǎo)氣管的膠塞，并使導(dǎo)氣管尖端插入盛有銀鹽溶液4mL的刻度試管中的液面

37、下，在常溫下反應(yīng)45min后，取下刻度試管，加三氯甲烷補(bǔ)足4mL。用1cm比色皿，以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長520nm處測定吸光度。 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5. 結(jié)果計(jì)算式中：X樣品中砷的含量，mg/kg或mg/L；m1測定用樣品消化液中砷的含量，ug；m2試劑空白液中砷的含量，ug；m樣品質(zhì)量(體積)，g(mL)；V1樣品消化液的總體積，mL；V2測定用樣品消化液的體積，mL。 6. 說明(1) 氯化亞錫 (SnCl2) 試劑不穩(wěn)定，在空氣中能氧化生成不溶性氯氧化物，失去還原劑作用。配制時(shí)加鹽酸溶解為酸性氯化亞錫溶液，加入數(shù)粒金屬錫，經(jīng)持續(xù)反應(yīng)生成氯化亞錫，新生態(tài)氫具還原性，以保持試劑溶液的穩(wěn)定的還原性

38、。氯化亞錫在本試驗(yàn)中的作用是：還原As5+成As3+以及在鋅粒表面沉淀錫層以抑制產(chǎn)生氫氣作用過猛。(2) 乙酸鉛棉花，塞入導(dǎo)氣管中，是為吸收可能產(chǎn)生的硫化氫，使其生成硫化鉛而滯留在棉花上，以免吸收液吸收產(chǎn)生干擾，因?yàn)榱蚧锱c銀離子生成灰黑色的硫化銀。(3) 不同形狀和規(guī)格的無砷鋅粒，因其表面積不同，與酸反應(yīng)的速度就不同，這樣生成氫氣氣體流速不同，將直接影響吸收效率及測定結(jié)果。一般認(rèn)為蜂窩狀粒鋅粒3g或大顆粒鋅粒5g均可獲得良好結(jié)果。確定標(biāo)準(zhǔn)曲線與試樣均用同一規(guī)格的鋅粒為宜。(4) 二乙氨基二硫代甲酸銀或稱二乙基二硫代氨基甲酸銀鹽，分子式為(C2H5)2NCS2Ag，不溶于水而溶于三氯甲烷，性質(zhì)

39、極不穩(wěn)定，遇光或熱，易生成銀的氧化物而呈灰色，因而配制濃度不易控制。若市售品不適用，實(shí)驗(yàn)室可以自行制備，其方法如下：分別溶解1.7g硝酸銀、2.3g二乙氨基二硫代甲酸鈉 (DDCNa，銅試劑) 于100mL蒸餾水中，冷卻到20以下，緩緩攪拌混合，過濾生成的檸檬黃色銀鹽 (AgDDC)沉淀，用冷的無離子水洗滌沉淀數(shù)次，在干燥器內(nèi)干燥，避光保存?zhèn)溆?。吸收液中AgDDC濃度以0.2%0.25%為宜，濃度過低將影響測定的靈敏度和重現(xiàn)性。因此，配置試劑時(shí)，應(yīng)放置過夜或在水浴上微熱助溶，輕微的渾濁可以過濾除去。若試劑溶解度不好時(shí)，應(yīng)重新配置，吸收液必須澄清。(5) 樣品消化液中的殘余硝酸需設(shè)法驅(qū)盡，硝酸的

40、存在影響反應(yīng)與顯色，會導(dǎo)致結(jié)果偏低，必要時(shí)需添加測定用硫酸的加入量。(6) 砷化氫發(fā)生及吸收應(yīng)防止在陽光直射下進(jìn)行，同時(shí)應(yīng)控制溫度在25左右，防止反應(yīng)過激或過緩，作用時(shí)間以1h為宜，夏季可縮短為45min。室溫高時(shí)氯仿部分揮發(fā)，在比色前用氯仿補(bǔ)足4mL，并不影響結(jié)果。(7) 吸收液中含有水分時(shí)，當(dāng)吸收與比色環(huán)境的溫度改變，會引起輕微混濁，比色時(shí)可微溫使澄清。(8) 吸收液吸收砷化氫后呈色在150min內(nèi)穩(wěn)定。(二) 砷斑法1. 原理試樣經(jīng)消化后，以碘化鉀、氯化亞錫將高價(jià)砷還原為三價(jià)砷，然后與鋅粒和酸產(chǎn)生的新生態(tài)氫生成砷化氫，再與溴化汞試紙生成黃色的色斑至橙色的色斑，與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較定量。2. 試

41、劑(1) 硝酸(2) 硫酸(3) 鹽酸(4) 氧化鎂(5) 硝酸高氯酸混合溶液 (4+1)(6) 硝酸鎂溶液 (150g/L)：稱取15g硝酸鎂溶于水中，并稀釋至100mL。圖7-2 測砷裝置1錐形瓶；2橡皮塞； 3測砷管；4管口；5玻璃帽(引自：GB食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法理化檢驗(yàn)部分.2004.)(7) 溴化汞乙醇溶液 (50g/L)：稱取25g溴化汞用少量乙醇溶解后，再 定容至500mL。 (8) 溴化汞試紙：將剪成直徑2cm的 圓形濾紙片，在溴化汞乙醇溶液 (50g/L) 中浸漬1h以上，保存于冰箱中，臨用前取出置暗處陰干備用。3. 儀器 測砷裝置見圖7-2。 4. 分析步驟 試樣消化同銀鹽法

42、。 吸取一定量試樣消化后定容的溶液及同量的試劑空白液分別置于測砷瓶中，加5mL碘化鉀溶液 (150g/L)、5滴酸性氯化亞錫溶液及5 mL鹽酸(試樣如用濕法消化液，則要減去試樣中硫酸毫升數(shù)；如用灰化法消化液，則要減去試樣中鹽酸毫升數(shù))，再加適量水至35 mL。吸取0.0mL、0.5 mL、1.0 mL、2. 0mL砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)于0.0ug、 0.5ug 、1.0ug、 2.0 ug)分別置于測砷瓶中，各加5 mL碘化鉀溶液 (150g/L)、5滴酸性氯化亞錫溶液及15mL鹽酸，各加水至35mL。于盛試樣消化液、試劑空白液及砷標(biāo)準(zhǔn)溶液的測砷瓶中各加3g鋅粒，立即塞上預(yù)先裝有乙酸鉛棉花及溴化

43、汞試紙的測砷管，于25放置1h，取出試樣及試劑空白的溴化汞試紙與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較。5. 結(jié)果計(jì)算同銀鹽法。6. 說明及注意事項(xiàng)(1) H2S對本法有干擾，遇溴化汞試紙亦會產(chǎn)生色斑。乙酸鉛棉花應(yīng)松緊合適，能順利通過氣體，又能消除H2S。(2) 同一批測定用的溴化汞試紙的質(zhì)量必須一致，否則因疏密不同而影響色斑深度，制作時(shí)應(yīng)避免手接觸到紙，晾干后貯于棕色試劑瓶內(nèi)。第2節(jié) 食品中農(nóng)藥殘留量的測定一、概述農(nóng)藥 (pesticides) 是指用于預(yù)防、消滅或者控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病、蟲、草及其他有害生物，以及的調(diào)節(jié)植物、昆蟲生長的藥物總稱。農(nóng)藥殘留 (pesticides residue) 指農(nóng)藥本身及代謝物

44、等在環(huán)境、動(dòng)植物或食品中的殘留現(xiàn)象，殘留的數(shù)量稱為殘留量。表示單位為mg/kg或g/。目前，全世界使用的農(nóng)藥品種有上千種，其中絕大部分為化學(xué)合成農(nóng)藥。農(nóng)藥按用途可分為殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、殺螨劑、植物生長調(diào)節(jié)劑和殺鼠藥等；按化學(xué)成分可分為有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、有機(jī)氯類、擬除蟲菊酯類、苯氧乙酸類、有機(jī)錫類等。導(dǎo)致食物中農(nóng)藥殘存數(shù)量超過最大殘留限量 (MRL)時(shí)，將對人和動(dòng)物產(chǎn)生不良影響。世界衛(wèi)生組織 (WHO) 和我國對農(nóng)藥在食品中的最高殘留限量作了規(guī)定，并制定了其殘留量的檢測方法。這對于我們正確使用農(nóng)藥，控制殘留，保障食品安全具有重要意義。二、食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測定(一) 有機(jī)氯農(nóng)藥

45、的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì) 有機(jī)氯農(nóng)藥 (Organochlorine pesticides，OCPs) 是具有殺蟲活性的氯代烴的總稱。通常，OCPs分為三種主要的類型，即DDT及其類似物、六六六(也稱BHC)和環(huán)戊二烯衍生物。它們均為神經(jīng)毒性物質(zhì)，不溶于或微溶于水，易溶于多種有機(jī)溶劑、植物油及動(dòng)物脂肪中，在生物體內(nèi)的蓄積具有高度選擇性，多貯存于機(jī)體脂肪組織或脂肪多的部位和谷類外殼富含臘質(zhì)的部分，在堿性環(huán)境中易分解失效。常見的有機(jī)氯農(nóng)藥有滴滴涕、六六六、林丹 (lindane，99-BHC)、氯丹 (chlordane)、硫丹 (endosulfan)、毒殺芬 (camphechlor)、七氯 (hep

46、tachlor)、艾氏劑 (aldrin)、狄氏劑(dieldrin)、異狄氏劑 (endrin)等。1. 滴滴涕 (Dichlorodiphenyl trichloroethane，DDT) DDT產(chǎn)品為白色或淡黃色固體，純品DDT為白色結(jié)晶，熔點(diǎn)108.5109，在常溫下具有一定蒸氣壓，不溶于水和稀酸、稀堿，易溶于脂肪及丙酮、四氯化碳、苯、氯苯、乙醚等有機(jī)溶劑。DDT對酸、日光均很穩(wěn)定，對熱亦較穩(wěn)定，但溫度高于其本身熔點(diǎn)時(shí)，DDT會脫去HCl而生成毒性較低DDE。在堿性溶液中，紫外光照射或在鐵、鉛、鉻鹽作用下易被分解放出氯化氫。半衰期為24年，在土壤中消失95，平均需要10年。2. 六六六

47、(Benzene hexachl oride BHC)六六六為白色或淡黃色固體，純品為無色無臭晶體，工業(yè)品有霉臭味。BHC在常溫下具有一定蒸氣壓，不溶于水，可溶于脂肪及丙酮、乙醚、石油醚及環(huán)已烷等有機(jī)溶劑。在高溫、日光、強(qiáng)酸中穩(wěn)定，在堿性溶液中，除-666分解較慢外，其他異構(gòu)體都迅速脫去氯化烴，有鐵、鉻鹽存在時(shí)分解速度更快。六六六在自然界可長期殘存，土壤中消失95的時(shí)間，平均為6.5年。有機(jī)氯農(nóng)藥一般難溶于水，易溶于多種有機(jī)溶劑、植物油及動(dòng)物脂肪中，在動(dòng)植物組織中的主要蓄積部位是富含脂肪的組織和谷類外殼富含臘質(zhì)的部分。我國食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)對各類食品中六六六和滴滴涕的殘留量規(guī)定見表7-2，WHO建議

48、的BHC和DDT在某些食品中允許殘留量見表7-3。食品中有機(jī)氯農(nóng)藥的測定方法有氣相色譜法或薄層色譜法。最為廣泛使用的檢測技術(shù)是氣相色譜-電子捕獲檢測器(GC-ECD)，它具有靈敏度高、分離效果好、定量準(zhǔn)確等特點(diǎn)。(二) 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測定1. 原理 樣品經(jīng)提取、凈化后、以氣相色譜法測定，在一定溫度下，載氣攜帶氣化后表7-2 我國主要食品中BHC和DDT殘留限量標(biāo)準(zhǔn)食品種類指標(biāo)(mg/kg)BHCDDT糧食(成品糧食)、麥乳精(含乳固體飲料)0.30.2肉：脂肪含量在10以下(以鮮重計(jì))脂肪含量在10以上(以脂肪計(jì))0.44.00.22.0魚(其他水產(chǎn)品參照魚)2.01.0蔬菜，

49、水果、干食用菌0.20.1綠茶和紅茶0.40.2牛乳、鮮食用菌、蘑菇罐頭0.10.1蛋(去殼)1.01.0蛋制品按蛋折算按蛋折算乳制品按牛乳折算按牛乳折算表7-3 WHO建議的BHC和DDT在某些食品中允許殘留量標(biāo)準(zhǔn)食品種類DDT(mg/kg)食品種類-BHc(mg/kg)瓜果、蔬菜7.0萵苣、畜肉脂肪2.0熱帶水果3.5水果、蔬菜0.5全脂奶0.05奶脂、甜菜根及葉、米、蛋(去殼)0.1蛋類(去殼)0.5馬鈴薯0.05的樣品，通過色譜柱，而被逐一分離，隨即通過電子捕獲檢測器，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。出峰順序：-BHC、- BHC、- BHC、五氯硝基苯、- BHC、七氯、艾氏劑、除螨酯、

50、環(huán)氧七氯、殺螨酯、狄氏劑、p，p-DDE、p，p-DDD、o，p-DDT、p，p-DDT、胺菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、-氰戊菊酯、溴氰菊酯。 2. 試劑 (1) 丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)已烷、正已烷：均為重蒸。(2) 石油醚：沸程3060，分析純，重蒸餾。(3) 氯化鈉、無水硫酸鈉。(4) 凝膠：Bil-Beads S-X3 200目400 目。(5) 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：- BHC、- BHC、- BHC、-六六六、- BHC、p，p-DDT、o，p-DDT、p，p-DDE、p，p-DDD、五氯硝基苯 (quintozene)、七氯、環(huán)氧七氯 (heptachlor epoxide)、艾氏劑、狄氏

51、劑、除螨酯 (fenson)、殺螨酯 (chlortenson)、胺菊酯 (phthalthrin)、氯菊酯(permethrin)、氯氰菊酯 (cypermethrin)、-氰戊菊酯(-fenvalerate)、溴氰菊酯(deltamethrin)， 純度均99。(6) 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 分別準(zhǔn)確稱取上述標(biāo)準(zhǔn)品，用少量苯溶解，再以正已烷稀釋成一定濃度的儲備液。根據(jù)各農(nóng)藥在儀器上的響應(yīng)情況，以正已烷配制混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。3. 儀器(1) 氣相色譜儀：具電子捕獲檢測器。(2) 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。(3) 凝膠凈化柱：長30cm，內(nèi)徑2.5 cm具活塞玻璃層析柱，柱底墊少許玻璃棉。用洗脫劑乙酸乙酯-環(huán)已烷(1

52、+1)浸泡凝膠以濕法裝入柱中，柱床高約26 cm，膠床始終保持在洗脫劑中。4. 操作方法(1) 提取與分配 蛋類：稱取去殼、混勻蛋類樣品20g (精確到0.01 g)，于100 mL具塞三角瓶中，加水5 mL，加40 mL丙酮，振搖30min，加氯化鈉6 g，充分搖勻，再加30 mL石油醚，振搖30 min。取35 mL上清液，經(jīng)無水硫酸鈉濾于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，濃縮至約1 mL，加2 mL乙酸乙酯-環(huán)已烷(1+1)溶液再濃縮，如此重復(fù)3次，濃縮至約1 mL。 肉類：稱取搗碎混勻的樣品20 g (精確至0.01 g)，加水6 mL (視樣品水分含量加水，使總水量約20g。通常鮮肉水分含量約70，加水

53、6 mL即可)，以下按照蛋類樣品的提取、分配步驟處理。 乳類：稱取混勻的樣品20 g (精確到0.01 g。鮮乳不需加水，直接加丙酮提取。)以下按蛋類樣品的提取、分配步驟處理。(3)凈化 將此濃縮液經(jīng)凝膠柱以乙酸乙酯環(huán)已烷 (1+1) 溶液洗脫，棄去035 mL流分，收集3570 mL 流分，將其旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至約1 mL ，再經(jīng)凝膠柱凈化收集35 mL70 mL 流分，蒸發(fā)濃縮，用氮?dú)獯党軇?，以石油醚定容? mL，供分析用。(4) 測定 氣相色譜參考條件 色譜柱：涂以0 V-101 0.25m，30 m×0.32 mm(內(nèi)徑)，石英彈性毛細(xì)管柱。柱溫：程序升溫280，10 min

54、23540/ min 17060，1 min 2/ min 40/ min進(jìn)樣口溫度：270。檢測器：電子捕獲檢測器(ECD)，300。載氣流速：氮?dú)?(N2)：1 mL/ min；尾吹，50 mL/ min。 色譜分析 分別量取1L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品凈化液注入氣相色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)的峰高或峰面積比較定量。 色譜圖 色譜圖見圖7-3。 5. 結(jié)果計(jì)算 按下式計(jì)算 圖7-3 20種有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分色譜圖1-BHC；2- BHC；3- BHC； 4五氯硝基苯；5- BHC；6七氯；7艾氏劑； 8除螨酯； 9環(huán)氧七氯；10殺螨酯； 11狄氏劑；12p，p-DDE；13p，p-DDD；14o， p-DDT； 15p，p-DDT；16胺菊酯；17氯菊酯；18氯氰菊酯；19-氰戊菊酯； 20溴氰菊酯式中：X樣品中各農(nóng)藥的含量，mg/kg；M1被測樣液中各農(nóng)藥的含量，ng；m樣品質(zhì)量，g；V1樣液進(jìn)樣體積，L；V2樣液最后定容體積，mL；本法為為(為)國家標(biāo)準(zhǔn)方法(GB/T 5009.1622003)，適用于肉類、蛋類及乳類動(dòng)物性食品中-BHC、-BHC、-BHC、-BHC等常用有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的分析。(三) 植物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多種殘留的測定1. 原理 同(二)動(dòng)物性食品中有機(jī)