土壤水溶性有機(jī)質(zhì)測(cè)定方法參考

1、土壤有機(jī)質(zhì)測(cè)定常用重銘酸鉀一硫酸溶液氧化-一分光光度法用水浴加熱試管時(shí)，（設(shè)定最高溫度為95）,一個(gè)小時(shí)后取出。（標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 ：與土壤樣 品溶液制備的同時(shí)作一組 （7個(gè)）空白處理，用石英砂代替樣品，其他過程同上。即取7支試管各加入0.4 mol/L的重銘酸鉀硫酸溶液 2mL,和土壤樣品一起硝化后分別加入0.12 mol/L硫酸亞鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1、2、3、4、5、6 mL,再分別加入0.1mol/LH2SO4 溶液 10、9、8、7、6、5、4 mL ,搖勻澄清或離心待用。）一、土壤有機(jī)質(zhì)測(cè)定一一分光光度法光度法測(cè)定土壤中的有機(jī)質(zhì)具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn)，適合大批樣品的快速

2、測(cè)定。1測(cè)定原理在加熱的條件下，用過量的重銘酸鉀一硫酸（K2Cr2O7 H2SO4溶液，來(lái)氧化土壤有機(jī)質(zhì)中的碳，Cr2O72-等被還原成Cr+3o以硫酸亞鐵為標(biāo)準(zhǔn)溶液，取不同量的硫酸亞鐵分別與重銘酸鉀一硫酸（K2Cr2O7 H2SO4溶液進(jìn)行反應(yīng)，由于在 585nm波長(zhǎng)處對(duì)Cr3+有最大吸收而 Cr6+卻無(wú)吸收，且對(duì)一定濃度的 H2S04溶液均無(wú)吸收。通過分光光度測(cè)定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)樣制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線，找到樣品所對(duì)應(yīng)消耗的硫酸亞鐵的量，再通過轉(zhuǎn)換得到有機(jī)碳量，再乘以常數(shù)1.724,即為土壤有機(jī)質(zhì)量。其中的反應(yīng)式為：重銘酸鉀一硫酸溶液與有機(jī)質(zhì)作用：2K2Cr2O7+3C+8H2SO4=2K2SO4+2C

3、r2（SO4 ） 3+3CO2n8H2O硫酸亞鐵與重銘酸鉀一硫酸溶液的反應(yīng)：K2Cr2O7+6FeSO 牛 7H2SO4=K2SO4 Cr2 （SO4） 3+3Fe2 （SO4） 3+7H2O 2 儀器、試劑分析天平（0.0001g ）、硬質(zhì)試管、長(zhǎng)條臘光紙、溫度計(jì)（0-360 C ）、滴定管（25ml）、吸管（10ml）、 三角瓶（250ml）、小漏斗、燒杯、量筒（100ml）、角匙、滴定臺(tái)、吸水紙、滴瓶 （50ml）、試管 夾、 吸耳球、試劑瓶 （500ml）、恒溫箱7230型分光光度計(jì)、5B-1型加熱器、離心沉淀機(jī)。（1/6 K2Cr2O7 ） =0.4 mol /L的H2SO4溶液：稱

4、取分析純重銘酸鉀40.00 g溶于600 mL水中（必要時(shí)可加熱溶解），加水稀釋至1L,置3 L燒杯中。另取分析純濃 H2SO41L慢慢加入到重銘酸鉀水溶液中，并不斷攪拌，每加入200ml時(shí)，應(yīng)放置10-20分鐘使溶液冷卻后，再加入第二份濃硫酸（H2SO4） o加酸完畢，待冷后存于棕色試劑瓶中備用（用時(shí)需標(biāo)定）。（FeSO4） =0.12 mol /L標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取分析純硫酸亞鐵（FeSO4?7H2O ） 3.6 g溶于800 mL水中，加入20mL濃H2SO4攪拌均勻，冷至室溫，稀釋至 1L。0.1 mol/L H2SO4 溶液。3測(cè)定方法樣品的制備：將土壤放在蒸發(fā)皿中風(fēng)干10 d后，在分析

5、天平上準(zhǔn)確稱取通過60目篩子（v0.25mm）的土壤樣品0.1-0.2g （精確到0.0001g）。用長(zhǎng)條臘光紙把稱取的樣品全部倒入干的硬質(zhì)試管中，用移液管緩緩準(zhǔn)確加入 0.4mol/L的重銘酸鉀-硫酸（K2Cr2O7-H2SO4 ）溶液2mL （搖 動(dòng)試管，以使土壤分散），然后在試管口蓋消化玻泡或小漏斗，于100 C水浴消化，60 min后取出樣品。冷卻后加入 10mL0.1mol/L H2SO4 溶液，搖勻后澄清或離心待測(cè)。標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：與土壤樣品溶液制備的同時(shí)作一組（7個(gè)）空白處理，用石英砂代替樣品，其他過程同上。即取 7支試管各加入0.4 mol/L的重銘酸鉀硫酸溶液 2mL ,和土

6、壤樣品一起 消化后分 別加入 0.12 mol/L硫酸亞鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 0、1、2、3、4、5、6 mL ,再分別加入 0.1 mol/LH2SO4溶液10、9、8、7、6、5、4 mL,搖勻澄清或離心待用。比色：將澄清或離心后的土壤樣品與標(biāo)準(zhǔn)溶液一起，用1cm比色皿于590nm處比色。4計(jì)算在本反應(yīng)中，有機(jī)質(zhì)氧化率平均為90%所以氧化校正常數(shù)為100/90,即為1.1。有機(jī)質(zhì)中碳的含量為58%故1g碳約等于1.724g有機(jī)質(zhì)。由前面的兩個(gè)反應(yīng)式可知：1mol的K2Cr2O7可氧化3/2mol 的 C,滴定 1molK2Cr2O7，可消耗 6mol FeSO4 ,則消耗 1molFeSO4 即氧化

7、了 3/2 X 1/6C=1/4C土壤有機(jī)質(zhì)（g/Kg）=（ CX V 樣 X 0.003 X 1.1 X 1.724 ） /W 樣 X 1000式中：C硫酸亞鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L ;V樣一一標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的樣品溶液測(cè)定吸光度相應(yīng)的硫酸亞鐵溶液毫升數(shù)，ml ;0.003 1/4碳原子的毫摩爾質(zhì)量，g/m mol ;1.1 不完全氧化系數(shù)；1.724 碳換算成有機(jī)質(zhì)的經(jīng)驗(yàn)系數(shù)；W樣品重，go注：1 . 土壤樣品風(fēng)干10d以上，使還原性物質(zhì)充分自然氧化然后測(cè)定。加入稀硫酸將S2-和N02-轉(zhuǎn)化為H2S NO NO2碳酸鹽轉(zhuǎn)化為 C02 ,消除S2-、N02-和碳酸鹽的干擾。2 .由于此法不

8、能將有機(jī)質(zhì)完全氧化，所以在計(jì)算結(jié)果時(shí)應(yīng)乘上一個(gè)校正系數(shù)，加接觸劑Ag2SO4時(shí)，乘1.08 ;不加乘以1.1。3 .重銘酸鉀。必須是一級(jí)的優(yōu)級(jí)純規(guī)格。重銘酸鉀用分析天平稱量前必須把它放在恒溫干燥箱內(nèi)，調(diào)節(jié)溫度到130C條件下，恒溫干燥 2? 3ho4 .硫酸亞鐵。配制時(shí)，加入濃硫酸時(shí)務(wù)必把量取準(zhǔn)確的濃硫酸沿著容器內(nèi)壁緩緩地注入，用長(zhǎng)玻璃棒不斷攪拌，使產(chǎn)生的熱量迅速擴(kuò)散，攪拌均勻后，用水定容到刻度線，并將此溶液貯存于棕色瓶中保存。所以要求每次使用時(shí)應(yīng)該重新標(biāo)定其準(zhǔn)確濃度，以達(dá)到準(zhǔn)確的測(cè)量結(jié)果。5 ?在重銘酸鉀氧化C過程中，溶液的顏色由桔紅色至棕褐色或者墨綠色是正常的，如出現(xiàn)草綠色則表示中的K2C

9、r2O7大部分Cr6+被還原成Cr3+,必須減少土樣的稱量，重新進(jìn)行測(cè)6 .測(cè)其吸光度，若吸光度超過 0.800，須重測(cè)。7 . FeSO4溶液易被氧化，現(xiàn)配現(xiàn)用為宜。實(shí)驗(yàn)器材與設(shè)備分析天平（0.0001g）、硬質(zhì)試管、長(zhǎng)條臘光紙、溫度計(jì) （0-360 C ）、滴定管（25ml）、吸管（10ml）、三角 瓶（250ml）、小漏斗、燒杯、量筒（100ml）、角匙、滴定臺(tái)、吸水紙、滴瓶 （50ml）、試管 夾、吸耳 球、試劑瓶（500ml）、恒溫箱7230型分光光度計(jì)、5B-1型加熱器、離心沉淀機(jī)。還有一種方法比較常用方法：二、土壤有機(jī)質(zhì)的測(cè)定（重銘酸鉀容量法）土壤有機(jī)質(zhì)既是植物礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)和有機(jī)營(yíng)養(yǎng)

10、的源泉，又是土壤中異養(yǎng)型微生物的能源物質(zhì)，同時(shí)也是形成土壤結(jié)構(gòu)的重要因素。測(cè)定土壤有機(jī)質(zhì)含量的多少，在一定程度上可說明土壤的肥沃程度。因?yàn)橥寥烙袡C(jī)質(zhì)直接影響著土壤的理化性狀。1測(cè)定原理在加熱的條件下，用過量的重銘酸鉀一硫酸（K2Cr2O7 - H2SO4溶液，來(lái)氧化土壤有機(jī)質(zhì)中的碳，Cr2O-27等被還原成 Cr+3,剩余的重銘酸鉀（K2Cr2O7）用硫酸亞鐵（FeSO4）標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)消耗的重銘酸鉀量計(jì)算出有機(jī)碳量，再乘以常數(shù)1.724,即為土壤有機(jī)質(zhì)量。其反應(yīng)式為：重銘酸鉀一硫酸溶液與有機(jī)質(zhì)作用：2K2Cr2O7+3C+8H2SO4=2K2SO4+2Cr2(SO4)3+3C02n8H2

11、O硫酸亞鐵滴定剩余重銘酸鉀的反應(yīng)：K2Cr2O7+6FeSO 牛 7H2SO4=K2SO4 Cr2(SO4)3+3Fe2(SO4)3+7H2O 2測(cè)定步驟：1 .在分析天平上準(zhǔn)確稱取通過60目篩子(v0.25mm)的土壤樣品0.1-0.5g(精確到O.OOOIg)。用長(zhǎng)條臘光紙把稱取的樣品全部倒入干的硬質(zhì)試管中，用移液管緩緩準(zhǔn)確加入0.136mol/L重銘酸鉀一硫酸(K2Cr2O7-H2SO4)溶液10ml,(在加入約3ml時(shí)，搖動(dòng)試管，以使土壤分散)，然后在 試管口加一小漏斗。2 .預(yù)先將液體石蠟油或植物油浴鍋加熱至 185190 C,將試管放入鐵絲籠中，然后將鐵絲 籠放入油浴鍋中加熱，放入

12、后溫度應(yīng)控制在170 180C,待試管中液體沸騰發(fā)生氣泡時(shí)開始計(jì)時(shí)，煮沸5分鐘，取出試管，稍冷，擦凈試管外部油液。3.冷卻后，將試管內(nèi)容物小心仔細(xì)地全部洗入250ml的三角瓶中，使瓶?jī)?nèi)總體積在60-70ml ,保持其中硫酸濃度為1-1.5mol/l ,此時(shí)溶液的顏色應(yīng)為橙黃色或淡黃色。然后加鄰啡羅琳指示劑3-4滴，用0.2mol/l的標(biāo)準(zhǔn)硫酸亞鐵(FeSO4)溶液滴定，溶液由黃色經(jīng)過綠色、淡綠色突變?yōu)樽丶t色即為終點(diǎn)。4?在測(cè)定樣品的同時(shí)必須做兩個(gè)空白試驗(yàn)，取其平均值?？捎檬⑸按鏄悠罚渌^程同上。3結(jié)果計(jì)算在本反應(yīng)中，有機(jī)質(zhì)氧化率平均為90%所以氧化校正常數(shù)為100/90，即為1.1。有機(jī)

13、質(zhì) 中碳的含量為58%故58g碳約等于100g有機(jī)質(zhì)，1g碳約等于1.724g有機(jī)質(zhì)。由前面的兩 個(gè)反應(yīng)式可知：1mol的 K2Cr2O7 可氧化 3/ 2mol 的 C,滴定 1molK2Cr2O7,可消耗 6mol FeSO4 則消耗 1molFeSO4 即氧化了 3/2 X 1/6C=1 /4C=3 計(jì)算公式為：有機(jī)質(zhì) g/kg= (V0-V)N X 0.003 X 1.724 X 1.1) / 樣品重 X 1000 式中：V0一滴定空白液時(shí)所用去的硫酸亞鐵毫升數(shù)。V一滴定樣品液時(shí)所用去的硫酸亞鐵毫升數(shù)。N一標(biāo)準(zhǔn)硫酸亞鐵的濃度。mol/L附我國(guó)第二次土壤普查有機(jī)質(zhì)含量分級(jí)表如下，以供參考

14、。 級(jí) 別-一-級(jí)二 級(jí)三 級(jí)四級(jí)五 級(jí)六 級(jí)有機(jī)質(zhì)()>4030 4020 - -3010 206 10v 64注意事項(xiàng)1 .根據(jù)樣品 有機(jī)質(zhì)含量決定稱樣量。有機(jī)質(zhì)含量在大于 50g/kg的土樣稱0.1g , 20 40g/kg的稱0.3g ,少于20g/kg的可稱0.5g以上。2 .消化煮沸時(shí)，必須嚴(yán)格控制時(shí)間和溫度。3?最好用液體石蠟或磷酸浴代替植物油，以保證結(jié)果準(zhǔn)確。磷酸浴需用玻璃容器。4. 對(duì)含有氯化物的樣品，可加少量硫酸銀除去其影響。對(duì)于石灰性土樣，須慢慢加入濃硫酸，以防由于碳酸鈣的分解而引起劇烈發(fā)泡。對(duì)水稻土和長(zhǎng)期漬水的土壤，必須預(yù)先磨細(xì)，在通風(fēng)干燥處攤成薄層，風(fēng)干10天左

15、右。5. 一般滴定時(shí)消耗硫酸亞鐵量不小于空白用量的1/3 ,否則，氧化不完全，應(yīng)棄去重做。消煮后溶液以綠色為主，說明重銘酸鉀用量不足，應(yīng)減少樣品量重做。6. 土壤主要成分就是 Si類化合物，主要為 SiO2,還含帶有機(jī)質(zhì)其他鹽分等，用二氧化硅作空白是因?yàn)榧兊腟iO2不含有機(jī)質(zhì)且和土壤主要成分一樣，這樣就可以做為濃度的零點(diǎn)。儀器、試劑1 .主要儀器分析天平（0.0001g）、硬質(zhì)試管、長(zhǎng)條臘光紙、油浴鍋 、鐵絲籠（消煮時(shí)插試管用 卜溫度計(jì) （0 360C卜滴定管（25ml）、吸管（10ml）、三角瓶（250ml）、小漏斗、量筒（100ml）、角匙、 滴定 臺(tái)、吸水紙、滴瓶 （50ml）、試管夾、

16、吸耳球、試劑瓶（500ml）。2 .試劑（1） 0.136mol/LK2Cr2O7 H2SO4的標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確稱取分析純重銘酸鉀（K2Cr2O7）40g 溶于500ml蒸儲(chǔ)水中（必要時(shí)可加熱溶解），冷卻后稀釋至1L,然后緩慢加入比重為1.84的濃硫酸（H2SO4）1000ml ,并不斷攪拌，每加入 200ml時(shí)，應(yīng)放置10 20分鐘使溶液冷卻后，再加 入第 二份濃硫酸（H2SO4） o加酸完畢，待冷后存于棕色試劑瓶中備用（用時(shí)需標(biāo)定）。（2） 0.2mol/LFeSO4標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確稱取分析純硫酸亞鐵（FeSO4?7H2O）56g 或硫酸亞鐵錢:Fe（NH4）2（SO4）2 ?6H2Q 80g ，溶解于蒸儲(chǔ)水中，力口 3mol/L的硫酸（H2SO4）60ml ,然后加水 稀釋至1L,此溶液的標(biāo)準(zhǔn)濃度，可以用 0.0167mol/L重銘酸鉀（K2Cr2O7）標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定。（3）鄰啡羅咻指示劑。稱取分析純鄰啡羅咻1.485g ,化學(xué)純硫酸亞鐵 （FeSO4?7H2O）0.695g ,溶于100ml蒸儲(chǔ)水中，貯于棕色滴瓶中（此指示劑以臨用時(shí)配制為好）。三、參考文獻(xiàn)方法 文獻(xiàn)方法，我就不幫你整理了哈，可以參考附件的文獻(xiàn)，我仔細(xì)看了，挺實(shí)用的，也具體