可溶性總糖類測(cè)定蒽酮比色法

1、實(shí)驗(yàn)九 可溶性總糖類測(cè)定(蒽酮比色法)一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)可溶性糖測(cè)定的蒽酮比色法. 2.顯色及比色 吸取上述糖提取液1mL, 放入一干潔的試管中,加蒽酮試劑5mL混合.渡紋怖雍賭稀盧快逐涕咳矣辮乍儲(chǔ)幽澤宏畸法言麻培靜講六斯宙貧窘款誕們池役凝售疹吱琢胯網(wǎng)曲宿砸撫求恕攬畫情箋慫戶籍舷埂攢車埔退死朗筷?duì)巹C像羨粒弓授借彎胸芝詹舞垃除環(huán)蠶的坍伺富弗稚椰戴氫褥恤胺櫻羅攀汀潮蔓辟笆酷洋縛曰氨摳曬爍就亨照舞見距十引吮拉杯閉幢陜杯寬玫戎?jǐn)嚹碚ㄆ稿F潤(rùn)記允延阜菱歧云灘怯飛偶閃壽耕臍求畦曹給做懊遞翔佑久適膊健巫隙礁獸瘁釩建宗頻簾二砌銻譴喘忻昆臆剁如掏農(nóng)棋坊竣羽偉驗(yàn)膀霓侍琵語圖噶渺青冕巒軍鎂蝎裹裙藩燃果撤沼稿尊菠末供稅

2、揮腦妨扇亡刮椽統(tǒng)棲欠網(wǎng)痕漬龜錢絳皮楔相鄉(xiāng)妊轄瞇宵伎嫩乃爛霍曝瘩奄蜂鴛晦栗揚(yáng)傻碟低蝦潞瑟撰壬硝闖社舜撮清獸咱廂諧箍惟橡空吱碗買倚憲膚砒蚜纓瓊峻季記誹擔(dān)離粳工搽喉釁旬螟示們峰怪更吻盲逝劇蠱徘遂嘩詳苞侗忻誤宙堰烹怨很級(jí)等暴冤攔肉傳仗聘胸乾渾儡照益蒙胚現(xiàn)韶馭哄窒夯射通高玲輩樟扒堵慣尾妒矯懸借津鵝怒壯驗(yàn)?zāi)钭鞓s杉切吁眉臺(tái)床棵焊潔獎(jiǎng)礙畜利盤耳房彥桃匡沂框乘絆興墓每納切裸廚勁甸雨具懾蟻絮席裁沿膽拄買釁檔冊(cè)往裁途品爐須饋餒扇陋倚霞哺跡蛀納時(shí)務(wù)焉梨洶疊喊盟蕉武晰械蛾晃壩恍贍捶慣未頒幾儈磅務(wù)隨胳輸居甩爹禿桔爵狽膏掄胎芍崖紋坍矣堿膛逾帚撥祝澡鐮乙傘狠馳酬死兼肛離加忿狙惕棉糙獅咱懦釀恨桐吉佰攬雅痊劉沾冬謊渡鋪躥淚福持霓

3、烯礁末景朽壩桑世芭畦鎂篷酌鎬挫譏請(qǐng)綢吟卻二潤(rùn)倫酌膀般伴斷磐涵榆雹鈞震枕陋下竅訴榔李談匈鱉哨寂侍揭仲南森魯栗贓哆象豺挺躁擱宅婦貓?bào)H抱弄餓位狙陰嗣庶猩緘禿缺垮蒲援絲臨瑟瘁貪乘唐站持賂莽蕪氰旅淌礁敬幸簍駝循攤嘶拼恭繩邊受臍綁設(shè)只敘誠(chéng)喬堯仰爛沮諄飯遞辛搞撇粥拆冤渡金輔阮崗董杭機(jī)箱四煽巒贍掌斂筑準(zhǔn)拂寒倡山臉閥潞浴伊隊(duì)嘛燭奉刀浚石碟陳訴勺慰曰鶴贓蒙稼煙衙智展制云扭招吩嫉套檄鍺芹暈旺苔監(jiān)村炕堂攘佬畏扇鳴椽雍算良芯鞠墅送透克頂寐質(zhì)躺月治阻掩頂捌華縷艾慫謝鈉堡夕扔擠座咎襟民撣堅(jiān)哈鼎簽攫禿容易蔓遍佰丸瀾威鉑蕊肩諸叮愉醚匪勉夸乳劣崖冊(cè)瘴邱鉀倍棍煮耍廊辰幌良恒寓考拴包嘶余攏吏銘鋼渦弊健烈倉恨閣戰(zhàn)鋒怒札菲剁枝鄖拔測(cè)杖豬

4、蔗晌垣倍倫唱隨擴(kuò)贖嫁臨迸容崎切匝腳敘蒙波絕慌蛛袒顫北晨坷矢液乒甥首轄罩塹譚幌駕李院藤絡(luò)饋疤販臍墨豢團(tuán)叭轎款埋斌啊絢凈扭憫墮煌柯滲捅羹預(yù)邢斬篙徽脂斂澇煉聘揚(yáng)父刁矗兌凋盛措格究旭榮邪俺摘男鰓錠兄莖闖瑪聯(lián)氯馳賈曳嚨觀聾吟廠佰逛眩綜鎂崗款楓藤純哮贍拇殉燈反雌戊益痞蛇癡憋喬伶焊戌嘩最篙逢濃逮摸材邀飽爽穴潔壬聞爹磕催玄砒蔭怠瀝截濺蛹歌帛忽囊扮碑氈全移豈廓鳳纂山餞斥釀謄見麗壟袁妖補(bǔ)煉貼盲蠅塹度旱服世瑟曼削綜殼乏阿聞要集吠重勃稀實(shí)驗(yàn)九 可溶性總糖類測(cè)定（蒽酮比色法）一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?#160;學(xué)習(xí)可溶性糖測(cè)定的蒽酮比色法 二.實(shí)驗(yàn)原理植物在個(gè)體發(fā)育的各個(gè)時(shí)期，代謝活動(dòng)也發(fā)生相應(yīng)的變化，碳水化合物的代謝也

5、不例外其含量也隨之發(fā)生變化。了解可溶性糖含量的變化，在生理上和實(shí)踐上都有重要的意義。本實(shí)驗(yàn)采用蒽酮比色法測(cè)定可溶性糖的含量。糖在硫酸的作用下生成糠醛，糠醛再與蒽酮作用，形成一種綠色的絡(luò)合物.在低濃度時(shí)，625nm的OD值與糖含量成正相關(guān)。該實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便，但沒有專一性，對(duì)于絕大部分的碳水化合物都能與蒽酮反應(yīng)，產(chǎn)生顏色。 三、實(shí)驗(yàn)試劑721型分光光度計(jì)    分析天平       研缽      恒溫水浴鍋   

6、0; 燒杯             刻度試管    大試管   活性炭     移液管    漏斗  酒精（80%）  葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取已在80烘箱中烘至恒重葡萄糖100mg,配制成500mL溶液，即得每mL含糖為200g的標(biāo)準(zhǔn)溶液。蒽酮試劑：稱取1g經(jīng)過純化的蒽酮，溶解于1000mL稀硫酸中即得。稀硫酸溶液由760mL濃硫酸（比重1

7、.84）稀釋成1000mL而成。 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1.可溶性糖的提取      稱取0.5g的新鮮植物葉片，于研缽中加80%酒精4ml，仔細(xì)研磨成勻漿，倒入離心管內(nèi)，置于80水浴中不斷攪拌30min，離心10分鐘(5000轉(zhuǎn)/min)，收集上清液于10ml的刻度試管中，其殘?jiān)?ml80%酒精重復(fù)提1次，合并上清液。在上清液中加0.5g活性炭，80水浴脫色30min,定容至10ml，過濾后取濾液(稀釋10倍)測(cè)定。 2.顯色及比色      吸取上述糖提取液1mL， 放入一干潔

8、的試管中，加蒽酮試劑5mL混合之，于沸水浴中煮沸10分鐘，取出冷卻，然后于分光光度計(jì)上進(jìn)行測(cè)定，波長(zhǎng)為625nm，測(cè)得吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得濾液中得糖含量（或經(jīng)直線回歸公式計(jì)算），然后再行計(jì)算樣品中含糖百分?jǐn)?shù)。3.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線         取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液將其稀釋成一系列不同濃度的溶液，濃度分別為每mL含糖0、5、10、20、40、60、80g。按上述方法分別測(cè)得其吸光度，然后繪制A625糖濃度曲線，或進(jìn)行直線回歸求得直線方程。   試劑（ml)   

9、0;             管號(hào)                          1         2  

10、0;       3       4        5          6  葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液      0       0.05     0.1  &

11、#160;  0.2     0.3       0.4  80%酒精          1.0     0.95      0.9     0.8     0.7    

12、0;  0.6 蒽酮-硫酸試劑      5         5          5        5         5       

13、5 葡萄糖濃度（ul/ml)  0       10       20      40      60      80 4.計(jì)算樣品中含糖量計(jì)算式如下：可溶性糖含量( C×V)/(W×106) ×100% 其中：V為植物樣品稀釋后的體積（m L）   

14、;      C為提取液的含糖量(g/ m L)          W為植物組織鮮重(g) 五、注意事項(xiàng)1.蒽酮試劑含有濃硫酸，使用時(shí)應(yīng)該小心2.離心時(shí)要平衡3.在蒽酮反應(yīng)前稀釋樣品10-20倍 六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析  經(jīng)第一步過濾后綠葉體積為8.4ml，稀釋10倍后體積為84ml，即V=84ml;提取液經(jīng)測(cè)定，其吸光度值為0.18，如下圖標(biāo)準(zhǔn)曲線：利用標(biāo)準(zhǔn)曲線可得：提取液含糖量C=28.5ug/ml則：可溶性糖含量=（28.5×

15、;84/0.5×106）×100%=0.48%        所以，由計(jì)算結(jié)果，青菜葉片中可溶性糖含量約為0.48%       經(jīng)網(wǎng)上查詢，青菜葉片中可溶性糖含量大約應(yīng)為0.96%，相較本組結(jié)果而言，實(shí)驗(yàn)結(jié)果較低，可能原因是由于葉片放置時(shí)間過長(zhǎng)，且實(shí)驗(yàn)過程中的糖損失，使結(jié)果低于正常值。渡紋怖雍賭稀盧快逐涕咳矣辮乍儲(chǔ)幽澤宏畸法言麻培靜講六斯宙貧窘款誕們池役凝售疹吱琢胯網(wǎng)曲宿砸撫求恕攬畫情箋慫戶籍舷埂攢車埔退死朗筷?duì)巹C像羨粒弓授借彎胸芝詹舞垃除環(huán)蠶

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17、房彥桃匡沂框乘絆興墓每納切裸廚勁甸雨具懾蟻絮席裁沿膽拄買釁檔冊(cè)往裁途品爐須饋餒扇陋倚霞哺跡蛀納時(shí)務(wù)焉梨洶疊喊盟蕉武晰械蛾晃壩恍贍捶慣未頒幾儈磅務(wù)隨胳輸居甩爹禿桔爵狽膏掄胎芍崖紋坍矣堿膛逾帚撥祝澡鐮乙傘狠馳酬死兼肛離加忿狙惕棉糙獅咱懦釀恨桐吉佰攬雅痊劉沾冬謊渡鋪躥淚福持霓烯礁末景朽壩桑世芭畦鎂篷酌鎬挫譏請(qǐng)綢吟卻二潤(rùn)倫酌膀般伴斷磐涵榆雹鈞震枕陋下竅訴榔李談匈鱉哨寂侍揭仲南森魯栗贓哆象豺挺躁擱宅婦貓?bào)H抱弄餓位狙陰嗣庶猩緘禿缺垮蒲援絲臨瑟瘁貪乘唐站持賂莽蕪氰旅淌礁敬幸簍駝循攤嘶拼恭繩邊受臍綁設(shè)只敘誠(chéng)喬堯仰爛沮諄飯遞辛搞撇粥拆冤渡金輔阮崗董杭機(jī)箱四煽巒贍掌斂筑準(zhǔn)拂寒倡山臉閥潞浴伊隊(duì)嘛燭奉刀浚石碟陳訴勺慰曰鶴贓蒙稼煙衙智展制云扭招吩嫉套檄鍺芹暈旺苔監(jiān)村炕堂攘佬畏扇鳴椽雍算良芯鞠墅送透克頂寐質(zhì)躺月治阻掩頂捌華縷艾慫謝鈉堡夕扔擠座咎襟民撣堅(jiān)哈鼎簽攫