食品中農(nóng)殘的檢測技術(shù)

1、銀川能源學(xué)院論文(設(shè)計) 銀川能源學(xué)院 論文(設(shè)計)題 目 食品中農(nóng)藥殘留的檢測技術(shù) 指導(dǎo)老師 專業(yè)班級 精細化工（1401）班 姓 名 周晶 學(xué) 號 1220150066 2016年5月2日 摘 要：最初農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)僅限于化學(xué)法、比色法和生物測定法，檢測方法缺乏專一性，靈敏度也不高。20世紀(jì)60年代氣相色譜應(yīng)用于農(nóng)藥和藥物殘留分析，大大提高了農(nóng)藥和藥物殘留量的檢測水平。20世紀(jì)80年代以來，高效液相色譜法開始廣泛應(yīng)用于對熱不穩(wěn)定和離子型農(nóng)藥及其代謝物的分析。色譜法雖然定量準(zhǔn)確、靈敏度高，但所需設(shè)備昂貴，需要專業(yè)人員操作，且分析時間長不利于現(xiàn)場監(jiān)測。本文就當(dāng)前農(nóng)藥和藥物殘留快速檢測分析技術(shù)

2、研究進展做一綜述。關(guān)鍵詞:農(nóng)藥殘留檢測技術(shù) 目 錄引言31.農(nóng)藥的殘留31.1危害31.2主要成份32.農(nóng)藥檢測的必要性42.1農(nóng)藥檢測43.檢測方法與發(fā)展43.1氣象色譜-質(zhì)譜4 3.2快速檢測技術(shù)44. 農(nóng)藥殘留速測儀55. 4.1概述5 4.2原理55.測試儀的使用方法6 5.1使用方法66.農(nóng)藥殘留導(dǎo)致的急性中毒事件7 6.1農(nóng)藥殘留的危害及事件7結(jié)論7參考文獻8引言 農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展使農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)越來越依賴于農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)。我國農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品的用量居高不下，而這些物質(zhì)的不合理使用必將導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)，影響消費者食用安全，嚴(yán)重時會造成消費者致病、發(fā)育不正常，甚至直

3、接導(dǎo)致中毒死亡。農(nóng)藥殘留超標(biāo)也會影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易，世界各國對農(nóng)藥殘留問題高度重視，對各種農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留都規(guī)定了越來越嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)，使中國農(nóng)產(chǎn)品出口面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。目前農(nóng)藥殘留快速檢測方法種類繁多，究其原理來說主要分為兩大類：生化測定法和色譜檢測法。其中生化測定法中的酶抑制率法由于具有快速、靈敏、操作簡便、成本低廉等特點，被列為國家推薦標(biāo)準(zhǔn)方法（GB/T 5009.199-2003），已成為對果蔬中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留進行現(xiàn)場快速定性初篩檢測的主流技術(shù)之一，得到了越來越廣泛的應(yīng)用1. 農(nóng)藥的殘留1.1危害 農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于環(huán)境、生物體和食品中的農(nóng)藥母體、衍生物、代謝物、

4、降解物和雜質(zhì)的總稱。造成蔬菜農(nóng)藥殘留量超標(biāo)的主要是一些國家禁止在蔬菜生產(chǎn) 農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于環(huán)境、生物體和食品中的農(nóng)藥母體、衍生物、代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。造成蔬菜農(nóng)藥殘留量超標(biāo)的主要是一些國家禁止在蔬菜生產(chǎn)中使用的有機磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，如甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷、對硫磷中使用的有機磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，如甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷、對硫磷、甲基對硫磷等。食用含有大量高毒、劇毒農(nóng)藥殘留引起的食物會導(dǎo)致人、畜急性中毒事故。長期食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的農(nóng)副產(chǎn)品，雖然不會導(dǎo)致急性中毒，但可能引起人和動物的慢性中毒，導(dǎo)致疾病的發(fā)生，誘發(fā)癌癥，甚至影響到下一代。1.2主要成份 有機磷、

5、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯是目前市場上最主要的3 類殺蟲劑, 特別是有機磷類殺蟲劑仍在生產(chǎn)上起主導(dǎo)作用, 更是菜農(nóng)首選使用的一類殺蟲劑。針對有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥, 科學(xué)工作者在農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)方面做了大量的研究,并取得了較大的進步。2. 農(nóng)藥檢測的必要性2.1農(nóng)藥檢測 隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展，農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)越來越依賴于農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)。我國農(nóng)藥在糧食、蔬菜、水果、茶葉上的用量居高不下，而這些物質(zhì)的不合理使用必將導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)，影響消費者食用安全，嚴(yán)重時會造成消費者致病、發(fā)育不正常，甚至直接導(dǎo)致中毒死亡。農(nóng)藥殘留超標(biāo)也會影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易。3. 檢測方法與發(fā)展3.1氣象色譜

6、-質(zhì)譜控制農(nóng)藥殘留對人體的危害，最為有效的方法之一是加強對食品中農(nóng)藥殘留檢測的力度。當(dāng)今世界農(nóng)殘的檢測分析向多殘留、快速分析發(fā)展，要保證高通量的檢測方法的準(zhǔn)確性，需要有嚴(yán)格的農(nóng)藥殘留確證技術(shù)。GC/MS是農(nóng)藥殘留分析最廣泛使用的方法，使用GC/MS進行農(nóng)殘分析，為了追求更高靈敏度和準(zhǔn)確度，往往使用選擇離子模式（SIM），依據(jù)保留時間和特征離子及離子比例關(guān)系對目標(biāo)物進行確證。在美國，一般要求樣品中目標(biāo)物保留時間和標(biāo)準(zhǔn)品相比偏差小于0.05分鐘;每個目標(biāo)物至少有3個特征離子， 其相對離子比例與標(biāo)準(zhǔn)品相比絕對值在10%以內(nèi);同時還要考慮基質(zhì)對目標(biāo)物帶來的其他影響;實驗回收率一般在70%120%之間。

7、在歐盟，使用SIM模式要求每個目標(biāo)物至少有2個大于m/z200或3個大于m/z100的特征離子;目標(biāo)物特征離子比例與標(biāo)準(zhǔn)品相比處于70%130%即可;日常檢測回收率控制在60%140%，確證分析則需要在70%110%之間。3.2快速檢測技術(shù)但是傳統(tǒng)的GC/MS等農(nóng)殘分析技術(shù)檢測成本高、時間長，這就給食品安全監(jiān)管部門對農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)前、產(chǎn)中、產(chǎn)后的監(jiān)督工作帶來了許多不便，因此也催生出大量的快速農(nóng)藥殘留的檢測技術(shù)，常見的有化學(xué)速測法、免疫分析法、酶抑制法和活體檢測法等。（1）化學(xué)速測法，主要根據(jù)氧化還原反應(yīng)，水解產(chǎn)物與檢測液作用變色，用于有機磷農(nóng)藥的快速檢測，但是靈敏度低，使用局限性，且易受還原性物質(zhì)干

8、擾。（2）免疫分析法，主要有放射免疫分析和酶免疫分析，最常用的是酶聯(lián)免疫分析（ELISA），基于抗原和抗體的特異性識別和結(jié)合反應(yīng)，對于小分子量農(nóng)藥需要制備人工抗原，才能進行免疫分析。（3）酶抑制法，是研究最成熟、應(yīng)用最廣泛的快速農(nóng)殘檢測技術(shù)，主要根據(jù)有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酶的特異性抑制反應(yīng)。（4）活體檢測法，主要利用活體生物對農(nóng)藥殘留的敏感反應(yīng)，例如給家蠅喂食樣品，觀察死亡率來判定農(nóng)殘量。該方法操作簡單，但定性粗糙、準(zhǔn)確度低，對農(nóng)藥的適用范圍窄。4.農(nóng)藥殘留速測儀 4.1概述農(nóng)藥殘留快速檢測儀是根據(jù)我國國情和市場需要而研制開的專用儀器?？梢詫崿F(xiàn)有機磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的現(xiàn)場快

9、速檢測。它可以廣泛適用于各級食品安全監(jiān)督部門、各級食品安全監(jiān)測部門、蔬菜生產(chǎn)基地、蔬菜批發(fā)基地、農(nóng)貿(mào)市場、食品超市、食品安全檢測流動車、衛(wèi)生防疫、環(huán)境保護等領(lǐng)域的蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留檢測。4.2原理農(nóng)藥殘留快速檢測儀是根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T5009.199-2003）和農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法（NY/T448-2001）中的酶抑制率法，結(jié)合快速檢測方法研制的全新食品安全檢測設(shè)備，能準(zhǔn)確、快速檢測出蔬菜、水果中有機磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量。在一定條件下，有機磷和氨基甲酸類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑

10、反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計測定412nm下吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留。5. 測試儀的使用方法5.1使用方法1、開機插上電源，打開儀器背面綠色電源開關(guān)，儀器顯示開機畫面，按畫面提示操作，按下回車鍵，儀器開始自檢，時間約1min。自檢完畢后，儀器進入待機檢測狀態(tài)。2、試劑配制（配套試劑：LS農(nóng)殘速測試劑）2.1、緩沖液：取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中，攪拌溶解制成磷酸緩沖液（pH7.6）, 常溫保存。2.2、顯色劑：取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解，使用時取100L，4冰箱保存。2.3、底 物：取1瓶底物加

11、12.5mL蒸餾水或純凈水溶解，使用時取100L，4冰箱保存；或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解 ，使用時取20L，4冰箱保存。2.4、 膽堿酯酶：酶制劑無需配制，可直接取用，使用時取100L，4冰箱保存。3、樣品提取取2g果蔬樣品（塊莖類取4g)，葉菜剪成25px左右見方的碎片，塊莖類取橫截面樣品或取其表皮，放入三角瓶中，加入10mL緩沖液，振蕩12min ，倒出提取液，靜置2min，待測。若提取液混濁或雜質(zhì)太多可過濾后再測。4、 測試4.1、 對照測試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液，再分別加入100L酶液和顯色劑，混勻，靜置反應(yīng)10min后加入100L（或20L）底物，搖勻并立即

12、倒入比色杯中，及時放入儀器的測量室第1通道，合上蓋。按B鍵，顯示屏下方延遲10s后，測量時間開始倒計時，計時完畢，顯示屏顯示吸光度增量(0)及抑制率。在進行對照測試時，28通道可同時進行樣品測試。4.2、樣品測試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測液，再分別加入100L酶液和顯色劑，混勻，靜置反應(yīng)10min后加入100L（或20L）底物，搖勻并立即倒入比色杯中，及時放入儀器的測量室通道，合上蓋。按M鍵，顯示屏下方延遲10s后，測量時間開始倒計時，計時完畢，顯示屏顯示吸光度增量（t)及抑制率。數(shù)據(jù)自動保存，如有需要按P鍵打印。 6.農(nóng)藥殘留導(dǎo)致的急性中毒事件 6.1農(nóng)藥殘留的危害及事件 農(nóng)殘不僅導(dǎo)致急

13、性中毒，更嚴(yán)重的是慢性中毒； 菜該吃還得吃； 千萬別相信蟲眼菜；如果暫時還吃不上綠色蔬菜和無公害蔬菜，那么菜買回家后該洗的好好洗，該削皮的削皮；2003年5月23日，福州一幼兒園38名幼兒園幼兒因食用含有甲胺磷的空心菜而中毒。1999年4月，福建安溪60名小學(xué)生因誤食帶農(nóng)殘的李子而中毒，另2名未上學(xué)女幼童在就醫(yī)途中死亡。這僅僅是每年農(nóng)殘中毒事件中的兩例，這僅僅是"看得見"的急性中毒。其實，農(nóng)藥殘留的后果更多的是蓄積在消費者體內(nèi)，累積若干年后"突變"，引發(fā)或直接導(dǎo)致某些疾病。結(jié)論 目前農(nóng)藥殘留檢測：發(fā)光菌技術(shù)主要應(yīng)用于水質(zhì)檢測及環(huán)境規(guī)劃，隨著技術(shù)的發(fā)展發(fā)光

14、菌法將和電子技術(shù)以及光電技術(shù)相結(jié)合，逐步發(fā)展為在線監(jiān)測系統(tǒng)，為有機磷農(nóng)藥現(xiàn)場監(jiān)測提供更加快速的檢測分析手段?；瘜W(xué)發(fā)光是近年來發(fā)展起來的一種高靈敏的微量及痕量有機磷殘留檢測分析技術(shù)，今后在改進和完善原有發(fā)光試劑和體系的同時，新發(fā)光試劑的合成及與其他技術(shù)(如微流控芯片技術(shù)、傳感器技術(shù)等)的聯(lián)用，更顯示出化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)快速、靈敏、簡便的優(yōu)點。ELISA技術(shù)與生物傳感器技術(shù)目前還處于起步階段，隨著分析技術(shù)的不斷改進，ELISA減少交叉反應(yīng)的發(fā)生，進一步提高靈敏度及穩(wěn)定性，免疫試劑盒不斷的商業(yè)化；生物傳感器的多功能化(1個傳感器可檢測多種農(nóng)藥殘留)，降低產(chǎn)品成本，提高靈敏度、穩(wěn)定性和延長壽命，它們在農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)