1分子生物學(xué)第六章-基因重組

1、Chapter 6 Genetic recombination遺傳重組 重組recombination: 是已存在的遺傳物質(zhì)產(chǎn)生新的組合的過(guò)程。 分子間或染色體間重組：離散的染色體混合時(shí)產(chǎn)生新的組合。如真核染色體減數(shù)分裂時(shí)的染色體獨(dú)立分配。不依賴酶。 分子內(nèi)或染色體內(nèi)重組：通過(guò)DNA的剪切和連接產(chǎn)生新的染色體類型。依賴酶。分子內(nèi)重組 同源重組homological recombination：同源性依賴，非序列專一性依賴。在大腸桿菌由RecA蛋白指導(dǎo)。 位點(diǎn)特異性重組site specific recombination：序列專一性依賴，非同源性依賴。由位點(diǎn)特異性重組酶指導(dǎo)。 轉(zhuǎn)座transp

2、osition：非同源性依賴。由轉(zhuǎn)座酶、整合酶指導(dǎo)。酶識(shí)別轉(zhuǎn)座因子兩端特異序列，但受體位點(diǎn)相對(duì)非特異。 不正常重組或非常規(guī)重組illegitimate recombination：很少或不需要同源性。一般使用不正常底物進(jìn)行細(xì)胞正常加工。與癌癥相關(guān)。 人工重組artificial recombination: 體外進(jìn)行DNA的剪切和連接引起的重組，即基因重組。一、同源重組 功能：減數(shù)分裂時(shí)染色體分配、DNA修復(fù)、特定噬菌體的復(fù)制、酵母的交配型轉(zhuǎn)換、真核基因組的遺傳作圖、基因?qū)?模型：拷貝-選擇：在DNA復(fù)制中，新生鏈延伸時(shí)轉(zhuǎn)換為新的模板。如DNA修復(fù)。斷裂-重新連接：重組沒(méi)有在復(fù)制中產(chǎn)生，DN

3、A鏈在雙鏈間斷裂、交換和重新連接。如減數(shù)分裂時(shí)染色體交換雜合模型：包括上面兩種特征。修復(fù)損傷DNA的同源重組真核生物同源重組的斷裂與重接模型真核生物同源重組的斷裂與重接模型 Darlingtong D. C.于于1936年提出：減數(shù)分年提出：減數(shù)分裂同源染色體聯(lián)會(huì)時(shí)，非姊妹染色單體由于纏繞而裂同源染色體聯(lián)會(huì)時(shí)，非姊妹染色單體由于纏繞而產(chǎn)生張力，兩個(gè)染色單體在同一位置斷裂、重節(jié)，產(chǎn)生張力，兩個(gè)染色單體在同一位置斷裂、重節(jié)，以消除張力，從而產(chǎn)生重組。以消除張力，從而產(chǎn)生重組。 證據(jù)證據(jù)：姊妹染色單體的交換：姊妹染色單體的交換 Diploid eukaryotes: crossing over (

4、雙倍體染色體交換)1. Homologous chromosomes line up in meiosis (when)2. The nonsister chromatids exchange equivalent sections (what)同源重組 發(fā)生在兩條DNA雙鏈之間 重組酶能以任何的同源序列為底物 重組的頻率在整組基因中并不很頻繁，但對(duì)整體和局部都有影響 重組的總頻率在精子和卵子中并不相同，在人類中女性是男性的兩倍 在整組基因內(nèi)部，同源重組的頻率與染色體的構(gòu)象有關(guān)，例如，十字結(jié)構(gòu)將阻止附近的DNA重組變異。 染色體的重組包含部分的物理性的改變：破損與再聯(lián)合細(xì)線期偶線期粗線期雙線期

5、終變期同化作用在DNA雙鏈中制造一個(gè)破損兩條DNA雙鏈分子的聯(lián)接作用是基因重組的關(guān)健環(huán)節(jié) 同 源 染 色 體 兩 對(duì)DNA雙鏈在相應(yīng)點(diǎn)產(chǎn)生nick，一條單鏈離開(kāi)它的伙伴，與另一個(gè)雙鏈分子的相應(yīng)位置倒易位置 ， 創(chuàng) 造 了 兩 個(gè)DNA雙鏈之間的連系，這種連接在一起的一對(duì)雙鏈叫做交差分子。 一個(gè)鏈與另一個(gè)鏈的連接點(diǎn)叫做重組關(guān)節(jié)。 重組關(guān)節(jié)能沿著DNA雙鏈分子移動(dòng)，這種移動(dòng)叫做枝狀遷移 在一條鏈被另一條鏈取代的過(guò)程中，分叉點(diǎn)可以沿任一個(gè)方向移動(dòng) 交差分子旋轉(zhuǎn)后形成一個(gè)平面結(jié)構(gòu)-Holliday結(jié)構(gòu)細(xì)菌基國(guó)重組中的單鏈同化作用 single-strand assimilation DNA分子的單鏈部

6、分通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)轉(zhuǎn)移到另一DNA雙鏈分子中，稱為單鏈吸收或單鏈同化。 有三個(gè)必備條件：其中一個(gè)DNA分子必須有單鏈區(qū)其中一個(gè)DNA分子必須有自由3端單鏈區(qū)和3端必須設(shè)置在兩分子互補(bǔ)區(qū)內(nèi)RecA催化單鏈的同化作用 RecA催化單、雙鏈DNA的反應(yīng)分為三個(gè)階段： RecA在單鏈DNA上慢慢聚合。 單鏈DNA與其互補(bǔ)物在雙鏈上快速配對(duì)反應(yīng)，產(chǎn)生異源雙鏈連接 單鏈從雙鏈中慢慢轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生一個(gè)長(zhǎng)的異源雙鏈DNA區(qū)帶。 SSB(單鏈結(jié)合蛋白)的存在刺激了這個(gè)反應(yīng)RecA promotes the assimilation of invading single strands into duplex DNA

7、 so long as one of the reacting strands has a free end. RecA catalyzes single-strand assimilation RecA介導(dǎo)的DNA修復(fù)重組熱點(diǎn) 重組起始于雙鏈破損。雙鏈破損在軸素形成期產(chǎn)生，在聯(lián)會(huì)絲復(fù)合物形成階斷消失(60min) 在染色體上容易發(fā)生雙鏈破損的位點(diǎn)，稱為重組熱點(diǎn)。Chi序列刺激它周?chē)浇闹亟M 與重組有關(guān)的基因稱為Rec基因 Rec突變體不能進(jìn)行同源重組 大約1020個(gè)與重組有關(guān)的DNA位點(diǎn)通過(guò)E. coli 的Rec基因突變體鑒定 Chi序列能刺激它周?chē)浇闹亟M： 5GCTGGTGG 3

8、3CGACCACC 5 Chi序列在大腸桿菌中每510kb出現(xiàn)一次 Chi是一個(gè)被RecBCD基因編碼的酶的作用目標(biāo)。RecBCD是有強(qiáng)烈降解DNA能力的核酸酶，在SSB存在下，有解開(kāi)DNA雙鏈的酶活性和ATP酶活性，它在重組中所起的作用便是提供帶有自由3端的單鏈DNA。Haploid prokaryotes ( (單倍體生物原核同源重組）單倍體生物原核同源重組）Between the two homologous DNA duplex (where) partially duplicated DNA of the chromosome between chromosomal DNA and

9、“ “foreign” ” DNA1. Nicks made near Chi (GCTGGTGG/each 4 kb) sites by a nuclease with recBCD.2. RecA binds to ssDNA to form RecA-ssDNA.How: Holliday model 3. RecA-ssDNA filaments search the opposite DNA duplex for corresponding sequence (invasion).4. Seal the nicks and form a four-branched Holliday

10、structure5. Branch migration & resolving Holliday junctionHaploid prokaryotes ( (原核同源重組）原核同源重組）Haploid prokaryotes ( (原核同源重組）原核同源重組）Resolving Holliday junction二、位點(diǎn)專一性重組 非序列同源性 重組位點(diǎn)特異 由識(shí)別特異重組位點(diǎn)的酶指導(dǎo) 導(dǎo)致DNA序列發(fā)生重排 舉例： l l噬菌體插入細(xì)菌基因組噬菌體插入細(xì)菌基因組 l l噬菌體從細(xì)菌基因組中切離噬菌體從細(xì)菌基因組中切離1. 1. l l-encoded integrase (Int

11、 整合酶整合酶): makes staggeredcuts交錯(cuò)切點(diǎn)交錯(cuò)切點(diǎn)in the specific sites （15bp seq）2. Int and IHF (integration host factor encoded by bacteria): recombination and insertion3. 3. l l-encoded excisionase (XIS): excision of the phage DNA Site-specific recombination: ( ( 位點(diǎn)專一性重組）位點(diǎn)專一性重組）bacteriophage l l insertion 整合

12、過(guò)程要求在attp和attB之間進(jìn)行識(shí)別；而移除過(guò)程則需要在attL和attR之間進(jìn)行識(shí)別 重組過(guò)程是可逆的，但反應(yīng)條件不同：整合反應(yīng)需要int產(chǎn)物和IHF因子；移除反應(yīng)還需要噬菌體xis基因產(chǎn)物。 xis基因產(chǎn)物決定噬菌體是否進(jìn)行復(fù)制 整合的過(guò)程: A. 具有對(duì)特異性DNA強(qiáng)烈親和力的Int與attP和attB位點(diǎn)結(jié)合；B. Int的拓?fù)洚悩?gòu)酶活性，使兩條雙鏈各自斷開(kāi)一條單鏈，瞬間旋轉(zhuǎn)然后交換連接，形成Holliday中間提，C. 在另兩條單鏈之間發(fā)生同樣的斷裂重接，從而完成雙鏈間的重組。位點(diǎn)專一性重組的位點(diǎn)專一性重組的核苷酸序列核苷酸序列 1. attP: POP:O為15bp(核心)富含

13、A-T的非對(duì)稱序列； P為-160 O的160bp序列 P為O 80的80bp序列 共240bp 2. attB: BOB:B為-11 O序列 B為O 11序列 共23bp重組后形成BOP(attL,91bp)和POB(attR,171bp)特異性重組可以在體外進(jìn)行 特異性重組可以通過(guò)Int和IHF在體外進(jìn)行，它包括在缺少任何DNA合成下的破損與再結(jié)合，兩個(gè)臂的功能可以通過(guò)在兩側(cè)產(chǎn)生缺失來(lái)研究 attp發(fā)揮作用要240bp，而attB只需要由-11到+11的23bp的片斷即可發(fā)揮作用，在這個(gè)片段中，核心兩側(cè)只有4bp通路克隆系統(tǒng)gateway cloning system 一種位點(diǎn)特異的DNA

14、重組技術(shù)，包括LR和BP兩個(gè)反應(yīng)體系?？珊?jiǎn)單表示為： attBXattP attLXattR用途： PCR產(chǎn)物的定向克隆 DNA片斷高效、廣泛的亞克隆 氨基或羧基末端的融合蛋白表達(dá)LR反應(yīng)和BP反應(yīng) LR 反應(yīng)：通路克隆的主要反應(yīng),LR 克隆酶(整合酶( Int) 和整合宿主因子( IHF) 蛋白)識(shí)別attL 和attR 重組位點(diǎn)后,催化入口克隆(entry clone) 的外源DNA 及其兩端部分位點(diǎn)取代目標(biāo)載體(destination vector) 的ccdB 基因及其兩端部分位點(diǎn)(灰色) ,形成表達(dá)克隆(expression clone) 。 BP 反應(yīng)：與LR 反應(yīng)反向, BP 克

15、隆酶混和物(Int 、IHF 和切除酶(Xis) )催化表達(dá)載體attB 間的目的基因轉(zhuǎn)到供體載體中,形成新的入口克隆,此克隆又可與其它目標(biāo)載體重組產(chǎn)生新的表達(dá)載體。PCR產(chǎn)物的產(chǎn)物的BP反應(yīng)反應(yīng)三、轉(zhuǎn)座重組特點(diǎn)：1.自身攜帶有轉(zhuǎn)座酶基因，末端有反向重復(fù)序列 ;2.轉(zhuǎn)座過(guò)程中出現(xiàn)共聯(lián)體；3.轉(zhuǎn)座以后,可以造成原來(lái)轉(zhuǎn)座子位置的DNA缺失(非復(fù)制轉(zhuǎn)座)，也可以依然保持在原位，而在靶序列上復(fù)制了一個(gè)轉(zhuǎn)座子(復(fù)制轉(zhuǎn)座);4.轉(zhuǎn)座完成以后可以在靶序列上造成同向重復(fù)序列5.轉(zhuǎn)座子插入后可影響所在位置的基因的表達(dá)轉(zhuǎn)座子 轉(zhuǎn)座子指能將自身插入基因組中其它位置的一段DNA序列。插入位置與轉(zhuǎn)座子序列沒(méi)有相關(guān)性。

16、病毒、細(xì)菌和真核細(xì)胞的質(zhì)?；蚧蚪M中都含有轉(zhuǎn)座子。 多數(shù)轉(zhuǎn)座子在插入新位點(diǎn)的過(guò)程中依賴其特異的插入序列去完成。 原核生物轉(zhuǎn)座因子包括：插入序列；轉(zhuǎn)座子；轉(zhuǎn)座噬菌體IS element基因組的進(jìn)化既賴于獲得新的序列又賴于重排目前的序列。轉(zhuǎn)座子可引起其它基因組順序的重排，提供基因組里變異的主要來(lái)源。重排可以產(chǎn)生新的序列和改變目前序列的作用。細(xì)菌、噬菌體、病毒(尤其是逆轉(zhuǎn)錄病毒) 可以通過(guò)傳染傳遞遺傳信息。 轉(zhuǎn)座子的特征性結(jié)構(gòu)是它的末端具有反向重復(fù)序列，而兩側(cè)宿主DNA的鄰接末端是短的同向重復(fù)序列。 當(dāng)考查DNA序列時(shí)，這種結(jié)構(gòu)類型是判斷轉(zhuǎn)座子的鑒別特征，并且是這種序列起源于轉(zhuǎn)座作用的初步證據(jù)。轉(zhuǎn)座

17、因子IS線型宿主DNA插入后引起目標(biāo)序列產(chǎn)生同向重復(fù)Tn10 插入環(huán)狀DNA內(nèi)Tn10 再移動(dòng)時(shí)可能從兩個(gè)方向移動(dòng)，產(chǎn)生新的轉(zhuǎn)座子Nonreplicative transposition describes the movement of a transposon that leaves a donor site (usually generating a double-strand break) and moves to a new site.Replicative transposition describes the movement of a transposon by a mecha

18、nism in which first it is replicated, and then one copy is transferred to a new site.復(fù)制轉(zhuǎn)座非復(fù)制轉(zhuǎn)座轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的效應(yīng) Recombination between direct repeats excises the material between them同向重復(fù)序列之間重組造成重復(fù)間序列缺失 Recombination between inverted repeats inverts the region between them. 反向重復(fù)序列之間重組造成重復(fù)間序列倒位 Transposition is

19、 initiated by nicking the transposon ends and target site and joining the nicked ends into a strand transfer complex. 轉(zhuǎn)座機(jī)制：在轉(zhuǎn)座酶作用下，在轉(zhuǎn)座子和目標(biāo)序列的反式位點(diǎn)產(chǎn)生缺刻，轉(zhuǎn)座子通過(guò)末端聯(lián)會(huì)插入到目標(biāo)序列中，形成共合體 Transposition may fuse a donor and recipient replicon into a cointegrate共合體. Resolution releases two replicons復(fù)制子, each contai

20、ning a copy of the transposon. 復(fù)制轉(zhuǎn)座：在共合體分解時(shí)轉(zhuǎn)座子產(chǎn)生兩個(gè)拷貝 缺刻重組復(fù)制斷裂重接則造成非復(fù)制轉(zhuǎn)座Nonreplicative transposition proceeds by breakage and reunion Each controlling element family has both autonomous and nonautonomous members. Autonomous elements are capable of transposition. Nonautonomous elements are deficient i

21、n transposition. Pairs of autonomous and nonautonomous elements can be classified in 4 families.Controlling elements 控制因子控制因子in maize form families of transposons 可用于轉(zhuǎn)座子插入突變自主轉(zhuǎn)座子非自主轉(zhuǎn)座子The role of transposable elements in hybrid dysgenesis 雜種雜種不育不育帶有P因子P品系的精子DNA釋放到卵細(xì)胞中時(shí)，精子基因組上的P因子被激活，發(fā)生轉(zhuǎn)座，引起突變The ret

22、roviral life cycle proceeds by reverse transcribing the RNA genome into duplex DNA, which is inserted into the host genome, in order to be transcribed into RNA.The retrovirus反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄病毒病毒life cycle involves transposition like eventsLTR is an abbreviation for long-terminal repeat.自然界中的其它自然界中的其它基因轉(zhuǎn)移與重組現(xiàn)象

23、基因轉(zhuǎn)移與重組現(xiàn)象 一、接合作用一、接合作用(conjugation)二、轉(zhuǎn)化二、轉(zhuǎn)化(transformation)和轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction) 三、轉(zhuǎn)染三、轉(zhuǎn)染(transfection)四、免疫分子的多樣性四、免疫分子的多樣性接合作用：當(dāng)細(xì)接合作用：當(dāng)細(xì)胞與細(xì)胞、或細(xì)胞與細(xì)胞、或細(xì)菌通過(guò)菌毛相互菌通過(guò)菌毛相互接觸時(shí)，質(zhì)粒接觸時(shí)，質(zhì)粒DNADNA就可以從一個(gè)細(xì)就可以從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞（細(xì)至另一細(xì)胞（細(xì)菌）的方式。菌）的方式。轉(zhuǎn)化：轉(zhuǎn)化：通過(guò)自動(dòng)獲取或人為地供給外源通過(guò)自動(dòng)獲取或人為地供給外源DNADNA，使細(xì)胞使細(xì)胞或培養(yǎng)的受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型。

24、或培養(yǎng)的受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型。 轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)導(dǎo)：當(dāng)病毒從被感染的供體細(xì)胞釋放出來(lái)，再次感當(dāng)病毒從被感染的供體細(xì)胞釋放出來(lái)，再次感染另一受體細(xì)胞時(shí)，發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的染另一受體細(xì)胞時(shí)，發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組即為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用轉(zhuǎn)移及基因重組即為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用三、轉(zhuǎn)染(transfection)l 轉(zhuǎn)染是轉(zhuǎn)化的一種特殊形式。轉(zhuǎn)染是轉(zhuǎn)化的一種特殊形式。 由transformation（轉(zhuǎn)化）和 infection（感染）兩詞構(gòu)成。l 原指將噬菌體、病毒或以其為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入受體細(xì)胞的過(guò)程。l 通過(guò)通過(guò)感染方式將外來(lái)將外來(lái)DNA引入宿主細(xì)胞，并導(dǎo)致宿引入宿主細(xì)胞，并導(dǎo)致宿

25、主細(xì)胞主細(xì)胞遺傳性狀改變的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)染。的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)染。l 將任何類型DNA轉(zhuǎn)移至動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程均可叫轉(zhuǎn)染。思考題 解釋解釋:recombination; single-strand assimilation; 同源重組在生命活動(dòng)和基因工程中的作用是什么? 同源重組的斷裂重接模型的基本內(nèi)容是什么?(提示:考慮斷裂和重接的機(jī)制) 位點(diǎn)專一性重組有哪些主要特點(diǎn)?基因工程中是如何利用其原理進(jìn)行基因克隆的? 轉(zhuǎn)座子的特征性結(jié)構(gòu)是什么? 轉(zhuǎn)座可產(chǎn)生哪些的生物學(xué)或遺傳學(xué)效應(yīng)? 自然界中存在哪些基因轉(zhuǎn)移與重組現(xiàn)象自然界中存在哪些基因轉(zhuǎn)移與重組現(xiàn)象?（至少寫(xiě)出（至少寫(xiě)出5種以上）種以上） 試比較同源重組、位

26、點(diǎn)專一性重組、轉(zhuǎn)座重組和人工重試比較同源重組、位點(diǎn)專一性重組、轉(zhuǎn)座重組和人工重組間的異同點(diǎn)。組間的異同點(diǎn)。四、免疫分子的多樣性四、免疫分子的多樣性 體液免疫反應(yīng)免疫球蛋白（免疫球蛋白（Immunoglobulin）：）：高度特異性、龐大多樣性L鏈（214aa）VL、CL和兩種，對(duì)一個(gè)Ig唯一H鏈（426aa）VH、 CH1、CH2、CH3恒定區(qū)的序列有 、和五種類型VL和VH內(nèi)有高變區(qū)真正抗原結(jié)合部位負(fù)責(zé)抗體分子對(duì)抗原的識(shí)別互補(bǔ)決定區(qū)CDRIgG、IgA、IgM、IgD和IgE （人體） 免疫球蛋白基因的組織免疫球蛋白基因的組織 Ig基因有三個(gè)獨(dú)立的基因家族分別編碼兩個(gè)輕鏈（和）、 一個(gè)重鏈（

27、小鼠 6、16和12號(hào)染色體） 輕鏈基因家族的組成：L、V、J、C四類基因片段 Lleader segment V variable segment Jjioning segment Cconstant segment 重鏈家族：L、V、D、J、C五類片段 Ddiversity segment 高變區(qū) J J和和C C之間有增強(qiáng)子之間有增強(qiáng)子 種系中基因數(shù)目變動(dòng)較大 FamilyV GenesC GenesManMouseManMouseLambda64Kappa100098人的重鏈基因簇包括了所有組織重鏈的基因信息（重人的重鏈基因簇包括了所有組織重鏈的基因信息（重鏈恒定區(qū)九種鏈恒定區(qū)九種C

28、C片段、兩個(gè)假基因）片段、兩個(gè)假基因）家族V基因后跟隨著幾個(gè)以J片段作為前導(dǎo)的C基因k k家族（人和老鼠）的組成：家族（人和老鼠）的組成： V V 基因（人基因（人300、鼠、鼠1000 ）、）、5 5個(gè)個(gè) J J（一個(gè)假基因）、一個(gè)假基因）、 1 1個(gè)個(gè) C C基因基因免疫球蛋白基因形成過(guò)程中的重組機(jī)制免疫球蛋白基因形成過(guò)程中的重組機(jī)制 除淋巴細(xì)胞外，所有細(xì)胞免疫球蛋白基因簇的結(jié)構(gòu)都是 相同的種系結(jié)構(gòu) 骨髓干細(xì)胞在分化為成熟骨髓干細(xì)胞在分化為成熟B B淋巴細(xì)胞時(shí)出現(xiàn)免疫球蛋白淋巴細(xì)胞時(shí)出現(xiàn)免疫球蛋白 基因的體細(xì)胞重排基因的體細(xì)胞重排 即淋巴細(xì)胞中重組產(chǎn)生活性基因使免疫系統(tǒng)為基因組 的改變提供

29、了廣泛的基礎(chǔ) 抗體分子的多樣性抗體分子的多樣性1 1、輕鏈基因、輕鏈基因V V和和J J片段的重組片段的重組 a） 鏈的重組 每個(gè)C片段前有 J跟隨 只發(fā)生一次重組 在V和J-C之間 (V和J的重組) b） 鏈的重組 基因簇只有一個(gè)C V與C之間 5個(gè)J（一個(gè)假基因） 用到的每個(gè) J都可以成為 V的外元終端整合J右邊的J片段作為含子被剪切整合J左邊的每個(gè)J片段都會(huì)缺失掉 重鏈的可變 區(qū)由V和J基 因及第三個(gè) D基因片段 編碼 重鏈的可變 區(qū)重組有兩 個(gè)階段 D-J重組、 VH和DJ重組2 2、重鏈基因、重鏈基因V V、D D和和J J片段的重組片段的重組 一個(gè)指定的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生、其中之一輕鏈同重鏈結(jié)合 輕鏈中表現(xiàn)為同型性項(xiàng)斥（isotypic exclusion） 往往只有鏈基因重組失敗，才發(fā)動(dòng)鏈基因重組 抗體中大部分輕鏈?zhǔn)?鏈，鏈往往占少部分 人類有約60%的輕鏈?zhǔn)?/p>