殘留溶劑分析方法驗證方案

1、*制藥股份有限公司驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 1 of 12*產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案20*年*月驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 2 of 12驗證方案的起草與審批驗證小組成員部門人員職責驗證小組組長部門人員職責負責組織起草驗證方案并按批準方案組織實 施；督促驗證人員做好記錄；負責各階段驗證 結果匯總及評價、組織起草驗證報告；組織相 關培訓方案審核審核簽名及日期驗證委員會方案批準批準人批準日期方案實施日期:驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方

2、法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 3 of 121 .驗證目的4.2 .方法簡介與確認范圍 4.3 . 標準品、供試品 4.4 . 風險評估4.5 .驗證的可接受標準 £.6 .驗證步驟6.6.1 系統(tǒng)適應性6.6.2 專屬性6.6.3 定量限與檢測限.7.6.4 線性7.6.5 準確度&.6.6 精密度9.6.7 范圍9.6.8 耐用性6.6.9 樣品測定107 .偏差1.Q8 .風險的接收與評審.109 .再驗證1Q10 .確認結果評審和結論1.011 .更改歷史.10.12 .附錄1.Q驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案

3、版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 4 of 121 .驗證目的根據(jù)法規(guī)的要求，分析方法應進行驗證，證明采用的方法適合于相應的檢測要求。這個驗證方案的目的是為驗證提供具體方法參數(shù)、可接受標準和研究步驟。2 .方法簡介與確認范圍*產(chǎn)品生產(chǎn)過程中用到有機溶劑乙醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氫吠喃，為 了準確測定溶劑在成品中的殘留量，現(xiàn)對該測定方法進行驗證，驗證包括方法的專屬性、 檢測限與定量限、線性、范圍、準確度、精密度及耐用性。3 .標準品、供試品3.1 標準品名稱批號來源3.2 供試品名稱批號來源4 .風險評估按照質(zhì)量風險管理規(guī)程，質(zhì)量控制部和質(zhì)量管理部共同對

4、分析方法進行了風險評 估，確定了需進行方法確認的項目。具體見下表：風險 因素風險可能影響效應現(xiàn)有控制措 施SPDRPN風險 級別建議采取措施專屬性不具有專屬性雜質(zhì)和主峰不能 后效分離，含量不 準確無33327中首次使用前， 對專屬性進行驗證定量限與檢測限定量限 高小的雜質(zhì)不能被 檢出無33327中對該方法的定 量限進行驗 證。精密度精密度 差不同時間或人員 測定的結果不一每次測試前進 行系統(tǒng)適用性33327中首次使用前，對精密度進行驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 5 of 12致測試驗證準確度回收率 低含量結果不準確無

5、33327中首次使用前，對準確度進行驗證線性線性不 好含量結果不準確無33327中首次使用前， 對線性進行驗 證范圍范圍窄濃度超過范圍后結果不準確無33327中首次使用前，對范圍進行驗證耐用性耐用性 差參數(shù)微小變化對 結果影響很大無33327中首次使用前， 對耐用性進行 驗證風險評估人：評估日期：5.驗證的可接受標準項目可接受標準專屬性各組分之間分離度不低于1.5,溶劑無干擾定量限與檢測限LOD&LOQ 乙醇00.05%LOD&LOQ 乙酸乙酯0 0.05%LOD&LOQ 丙酮0 0.05%LOD&LOQ 四氫吠喃& 0.0072%LOD&LOQ

6、 二氯甲烷0 0.012%各溶劑LOQ精密度：RSD%15%線性R2> 0.999準確度回收率在70130%®圍內(nèi)精密度重復性RSD%15%中間精密度 RSD%15%精密度：兩組數(shù)據(jù)平均檢測結果的相對偏差 < 20%范圍應至少為定量限濃度到指標的 120%驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 6 of 12耐用性評估柱溫、流速、色譜柱、溶液放置時間對檢測結果的影響6.驗證步驟 6.1系統(tǒng)適應性精密稱取乙醇200mg、丙酮200mg、二氯甲烷24mg、乙酸乙酯200mg、四氫吠喃28.8mg, 置于已加入

7、10ml二甲基亞碉的50ml量瓶中，用二甲基亞碉溶解并稀釋至刻度，作為對照 溶液儲備液；精密移取對照液儲備液 5ml,置于一 100ml量瓶中，用二甲基亞碉稀釋至刻 度；精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密圭同法配制6份，連續(xù)頂空進樣，記錄色譜 圖，相鄰組份之間的分離度 R均應不小于1.5,各組份峰面積白相對標準偏差（RSDa）均應 不大于10%。6.2 專屬性a）空白：精密移取二甲基亞碉 5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。頂空進樣，記錄色 譜圖，確定二甲基亞碉出峰位置，且溶劑對測定應無干擾。b）乙醇定位溶液：取乙醇約10mg,置于50ml量瓶中，用二甲基亞碉溶解并稀釋至刻 度（含乙醇約

8、200pg/ml）精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。頂空進樣，記錄色 譜圖，確定乙醇出峰位置，并不得有干擾峰，且與二甲基亞碉之間的分離度應不小于1.5。c）丙酮定位溶液：取丙酮約10mg,置于50ml量瓶中，用二甲基亞碉溶解并稀釋至刻 度（含丙酮約20O（i g/ml精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。頂空進樣，記錄色譜 圖，確定丙酮出峰位置，并不得有干擾峰，且與二甲基亞碉之間的分離度應不小于1.5。d）二氯甲烷定位溶液：取二氯甲烷約12mg,置于50ml量瓶中，用二甲基亞碉溶解并 稀釋至刻度，移取1.0ml,置于10ml量瓶中，用二甲基亞碉稀釋至刻度（含二氯甲烷約24仙g

9、/ml）;精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。頂空進樣，記錄色譜圖，確定二氯甲烷 出峰位置，并不得有干擾峰，且與二甲基亞碉之間的分離度應不小于1.5。e）乙酸乙酯定位溶液：取乙酸乙酯約10mg,置于50ml量瓶中，加二甲基亞碉溶解并 稀釋至刻度（含乙酸乙酯約200仙g/ml精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。頂空進 樣，記錄色譜圖，確定乙酸乙酯出峰位置，并不得有干擾峰，且與二甲基亞碉之間的分離 度應不小于1.5。f）四氫吠喃定位溶液：取四氫吠喃約 14.4mg,置于50ml量瓶中，用二甲基亞碉溶解 并稀釋至刻度，移取1.0ml,置于10ml量瓶中，用二甲基亞碉稀釋至刻度（含四氫

10、吠喃約 28.8 n g/mJ）精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。頂空進樣，記錄色譜圖，確定四 氫吠喃出峰位置，并不得有干擾峰，且與二甲基亞碉之間的分離度應不小于1.5。i）對照液：精密稱取乙醇200mg、丙酮200mg、二氯甲烷24mg、四氫吠喃28.8mg、驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 7 of 12乙酸乙酯200mg,置于已加入10ml二甲基亞碉的50ml量瓶中，用二甲基亞碉溶解并稀釋 至刻度；精密移取5ml,置于一 100ml量瓶中，用二甲基亞碉稀釋至刻度；精密移取 5ml, 置于20ml頂空瓶中，

11、密封。頂空進樣，記錄色譜圖，確認相鄰組份之間的分離度應不小于 1.5。j）樣品液：取樣品約0.2g,置于20ml頂空瓶中，精密加二甲基亞碉 5ml,密封。頂空進樣，記錄色譜圖，各組份之間的分離度應不小于1.5。k）樣品+對照液：取樣品約0.2g,置于20ml頂空瓶中，精密加上述對照液 5ml,密封。頂空進樣，記錄色譜圖，各組份之間的分離度應不小于1.5。6.3 定量限與檢測限檢測限（LOD）:取系統(tǒng)適用性項下對照液，用二甲基亞碉分步稀釋成一定濃度的溶液，精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。頂空進樣，獲得的色譜圖中，組份的峰高 約為基線噪音高的35倍，則此時溶液的濃度即為組份的檢測限。定

12、量限（LOQ）:取系統(tǒng)適用性項下對照液，用二甲基亞碉分步稀釋成一定濃度的溶液，精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。頂空進樣，獲得的色譜圖中，組份的峰高 約為基線噪音高的1020倍，則此時溶液的濃度即為組份的定量限。LOQ精密度：根據(jù)定量限（LOQ）測試結果確定的LOQ濃度，同法配制6個LOQ溶液進樣，各組分峰面積的相對標準偏差應不大于15%。乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫吠喃的定量限均應不大于各組份規(guī)定限度值的10%,二氯甲烷的定量限應不大于規(guī)定限度值的 20%。LOQ準確度（以回收率計算）：空白樣品溶液：取本品0.2g,精密稱定，置于20ml頂空瓶中，精密加入5ml二甲基 亞碉，密封。同

13、法配制3個溶液。對照溶液：取LOQ溶液，置于20ml頂空瓶中，精密加入5ml二甲基亞碉，密封。同 法配制3個溶液?；厥章蕼y試溶液：取LOQ濃度溶液，加0.2g本品，精密稱定，置于20ml頂空瓶中， 精密加入5ml二甲基亞碉，密封。同法配制 3個溶液。測試結果記錄如下，要求回收率在70130%之間?；厥章史弦?，LOQ即為報告限 度。如果回收率不符合要求，則要選取合適的濃度重新驗證回收率作為報告限度。6.4 線性取系統(tǒng)適用性項下對照液儲備液一定量， 置于100ml量瓶中，分別移取3.0ml, 4.0ml,驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P

14、)貝碼：Page 8 of 121.1 ml, 6.0ml至100ml容量瓶中，用二甲亞碉稀釋至刻度，制成線性 L2、L3、L4、L5儲 備溶液。L1:精密移取5mlLOQ溶液置于20ml頂空瓶中，密封。同法配制 3個溶液，頂空進 樣，記錄色譜圖。L2L5:精密移取5ml線性L2L5儲備溶7置于20ml頂空瓶中，用二甲亞碉稀釋至 刻度密封。同法配制3個溶液，頂空進樣，記錄色譜圖。以組份的濃度（pg/m的橫坐標，以組份峰面積為縱坐標計算各組份的線性，范圍為雜 質(zhì)的定量限濃度至120%雜質(zhì)限度濃度的相關系數(shù) R2應不小于0.99, Y軸截距應在100% 響應值的30%以內(nèi)。1.5 準確度a）溶劑空

15、白：精密移取二甲基亞碉 5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。b）對照液：精密稱取乙醇200mg、丙酮200mg、二氯甲烷24mg、乙酸乙酯200mg、四 氫吠喃28.8mg,置于已加入10ml二甲基亞碉的50ml量瓶中，用二甲基亞碉溶解并稀釋至 刻度（作為對照液儲備液）；精密移取5ml,置于一 100ml量瓶中，用二甲基亞碉稀釋至刻 度；精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，密封。同法配制3份。c）樣品空白：取樣品0.200g,精密稱定，置于20ml頂空瓶中，精密加二甲基亞碉 5ml, 密封。同法配制3份。d）回收率測試液1:精密移取上述對照液儲備液 4ml,置于一 100ml量瓶中，用二甲基

16、 亞碉稀釋至刻度；精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，精密加樣品0.2g,密封。同法配制 3份。（也可以選擇LOQ準確度測試項下回收率測試溶液及結果）e）回收率測試液2:精密移取上述對照液5ml,置于20ml頂空瓶中，精密加樣品0.2g, 密封。同法配制3份。f）回收率測試液3:精密移取上述對照液儲備液6ml,置于一 100ml量瓶中，用二甲基 亞碉稀釋至刻度；精密移取5ml,置于20ml頂空瓶中，精密加樣品0.2g,密封。同法配制 3份。取溶劑空白進樣，記錄色譜圖；取對照液頂空進樣，記錄色譜圖；取樣品空白、回收率測 試液1、回收率測試液2、回收率測試液3分別頂空進樣，記錄色譜圖，以外標法分

17、別計 算各組份的量，同時計算各組份的回收率，每一個的回收率及平均回收率均應在70130%范圍內(nèi)，所有回收率的相對標準偏差均應不大于15%。驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 9 of 121.6 精密度a）重復性:對照液：同系統(tǒng)適應性溶液。樣品液：取本品0.2g,精密稱定，置于20ml頂空瓶中，精密加入5ml二甲基亞碉， 密封。同法配制6份。頂空進樣測試，各溶劑測定結果的相對標準偏差均應不大于15%。b）中間精密度：不同檢驗人員、不同時間、不同儀器，按重復性項目對照液及樣品配 制方法，新配制對照液、樣品液，與重復性測試測同

18、一批樣品，頂空進樣測試，各溶劑測 定結果的相對標準偏差均應不大于 15%。c）精密度測試結果：不同檢驗人員、不同時間測定結果的平均值的相對偏差應不大于 20% 01.7 范圍根據(jù)線性、精密度和準確度確定方法的范圍，在該濃度范圍內(nèi)，方法具有良好的精密 度、線性和準確度。范圍至少在定量限到質(zhì)量指標的120%范圍內(nèi)。1.8 耐用性在其他條件不變的情況下，分別改變?nèi)芤悍胖脮r間、柱溫、流速、色譜柱，取系統(tǒng)適 用性項下對照液和供試品溶液頂空進樣，考察對結果的影響。對照品溶液中各組分的最小 分離度不小于1.5,供試品結果的相對0h的偏差不大于20%。1.8.1 溶液放置時間按本方法配制對照溶液和供試品溶液，

19、分別放置0h,4h,8h,24h, 48h, 36h后進樣測定。1.8.2 改變柱溫正常柱溫為40C,設置柱溫為：35c和45 C,配制對照液和供試品溶液頂空進樣， 考察對照液中各組分的最小分離度和供試品檢測結果。1.8.3 改變流速正常流速為3.0ml/min,設置流速為：2.7ml/min和3.3ml/min ,配制對照液和供試品溶 液頂空進樣，考察對照液中各組分的最小分離度和供試品檢測結果。1.8.4 更換相同填料的另一根色譜柱，配制對照液和供試品溶液頂空進樣，考察對照液中各 組分的最小分離度和供試品檢測結果。驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13

20、-001(P)貝碼：Page 10 of 121.9 樣品測定應用本方法，對3批樣品進行測定，樣品含量均應能夠符合規(guī)定。7 .偏差驗證過程中如果出現(xiàn)偏差應及時進行調(diào)查和上報，并且采取適當?shù)拇胧┻M行處理，并 及時記錄。如經(jīng)調(diào)查確定偏差的性質(zhì)會對驗證結果產(chǎn)生實質(zhì)影響，應確定原因并采取必要 措施后重新進行驗證。8 .風險的接收與評審經(jīng)分析，對上一步判斷的風險采取的控制措施，若經(jīng)檢查確認符合要求，則其相應的 風險可降至為可接受風險。否則，需采取進一步的措施降低風險。9 .再驗證發(fā)生下列情形之一時，需進行再驗證。(1)原輔料來源、生產(chǎn)工藝發(fā)生改變。(2)檢查方法發(fā)生改變。10 .確認結果評審和結論驗證小

21、組負責收集各項驗證、試驗結果記錄，根據(jù)驗證、試驗結果起草驗證報告，報 驗證委員會。驗證委員會負責對驗證結果進行綜合評審，做出驗證結論，確認再驗證周期。對驗證 結果的評審應包括：確認試驗是否有遺漏？確認試驗過程中對驗證方案有無修改，修改原因、依據(jù)以及是否經(jīng)過批準？確認記錄是否完整？確認試驗結果是否符合標準要求？偏差及對偏差說明是否合理？是否需要進一步補充試驗？11 .更改歷史版本號生效日期主要變更描述第1版本文檔為新訂12.附錄附錄1 *產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證名稱XX產(chǎn)品殘留溶劑分析方法驗證方案版本號：第1版驗證編號YZ-FX-13-001(P)貝碼：Page 11 of 12附錄1 *產(chǎn)品殘

22、留溶劑分析方法1標準品及試劑乙醇分析純或色譜純丙酮分析純或色譜純二氯甲烷分析純或色譜純乙酸乙酯分析純或色譜純四氫吠喃分析純或色譜純二甲基亞碉色譜純2色譜條件儀器：氣相色譜儀（配有頂空進樣器），氫火焰離子化檢測器（島津公司GC2010氣相色譜儀，島津公司AOC5000頂空進樣器）。色譜柱：用6%氟丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷聚合物為固定相的石英毛細管柱 （DB-624）,膜厚為3 pm,柱長30m,內(nèi)徑為0.53mm；載氣為氮氣，流速為3ml/分鐘。柱溫在40c維持10分鐘，再以每分鐘20c的速率升至200c并彳持2分鐘。進樣口溫度為140C,檢測器溫度為250C o頂空進樣瓶加熱溫度為80C,加熱時間為30分鐘，進樣量為1ml,分流比為5:1。3溶液制備空白溶液：精密移取5