UV-2600型紫外分光光度計操作指導(dǎo)書

1、UV-2600型紫外分光光度計操作指導(dǎo)書1概況1.1儀器概況：UV-2600型紫外分光光度計是由日本島津(Shimadzu )生產(chǎn)制造，與功能強(qiáng)大的操作軟件UVProbe結(jié)合，操作簡單方便，且符合 SH/T0181方法的測量精度要求。1.2主要技術(shù)參數(shù)波長圍185nm900nm（使用積分球附件ISR-2600Plus 時 220nm1400nm）分辨率0.1 nm波長準(zhǔn)確性± 0.3nm譜帶圍0.1、0.2、0.5、1、2、5nm測光方式雙光束方式雜散光0.005%以下檢測器光電倍增管R-928測光圍-5 5Abs比色池1cm光源50W鹵素?zé)簟㈦疅魡紊髑心釥?特納單色器主電壓AC1

2、00V240V主頻率50/60Hz1.3使用條件操作溫度：1535 C操作濕度：30%805%2儀器結(jié)構(gòu)儀器由UV-2600型紫外分光光度計和計算機(jī)組成。3操作步驟3.1開機(jī)在使用前先確認(rèn)儀器和計算機(jī)的工作電源， 檢查儀器樣品室應(yīng)無遮擋光路的物品。 確認(rèn) 后先開啟計算機(jī)，然后開啟儀器電源。 待分光光度計外側(cè)的指示燈顯示綠色時， 啟動電腦桌 面上的UVPROBE程序。首先從下拉式菜單的儀器項(xiàng)上追加需要的儀器，操作完畢如下圖所示， 然后點(diǎn)擊上圖的連接鍵，這樣儀器與計算機(jī)連接(當(dāng)然，中間的通訊電纜的連接、通訊口的指定等都是必須的，此處不再贅述）并開始下示的初始化面。UV-240I - R* ODjL

3、SI杖帕化HUM臉測HAM卷測濾進(jìn)謡電動枳初姑化 弘繆冃站機(jī)和蛇化 切電時機(jī)初爼優(yōu)廠創(chuàng)林位皆梗索廣光原點(diǎn)1搜盍_ WI燈業(yè)晝栓測=L X最大位蛋捷拳"知能且栓側(cè)廠尤貶由2妓審Tr待命=di)(12)(13)(14)r測試*咲股通過初始化大約需要5分鐘左右，進(jìn)行一系列的檢查和初置， 如一切順利通過就可以開始測3.2測定首先選擇測定的方式，在主菜單上能發(fā)現(xiàn)右圖區(qū)總 所示的各鍵，自左至右分別為： 報告生成器：用于制作各種格式的報告。 動力學(xué)測定方式：一般測定吸收值隨時間的變化，通常用于酶反應(yīng)隨時間的變化。 光度測定（定量）方式：可進(jìn)行多波長、單波長、峰高或峰面積定量。校準(zhǔn)曲線可使用多點(diǎn)、單

4、點(diǎn)、K因子等方法。由于具有自定義方程的功能，DNA/蛋白質(zhì)測定等以前需要特殊選購的軟件才能進(jìn)行的工作，使用UVPROBE可自編程序進(jìn)行測定。 光譜測定方式：可進(jìn)行紫外可見區(qū)的光譜測定。3.3光譜測定方式參數(shù)的設(shè)定點(diǎn)擊菜單欄上的鍵，即可出現(xiàn)如下圖所示的選擇測定條件的畫面:在此對話框中可選擇波長測定的圍、掃描的速度、采樣間隔等條件。點(diǎn)擊圖中試樣準(zhǔn)備標(biāo)簽，可輸入重量、體積、稀釋因子、光程長等信息。點(diǎn)擊圖中儀器參數(shù)標(biāo)簽，可選擇測定種類（吸收值、透射率、能量、反射率）以及通帶（狹逢）等條件。 可分別開關(guān)圖象面板（圖中的左鍵）、數(shù)據(jù)處理面板點(diǎn)擊主菜單上的阪獸他I鍵,（中）以及方法面板（右鍵） 數(shù)據(jù)處理面板

5、方法面板圖象面板3.3.2光譜測定首先點(diǎn)擊上圖的進(jìn)行基線校正，然后點(diǎn)擊波長設(shè)置到500nm,再點(diǎn)擊自動調(diào)零。為何要如此做？原因非常簡單，由于一般的分光光度計的能量在500nm左右最強(qiáng)，在此自動調(diào)零可得到最正確的基線。通常上述操作在開機(jī)后進(jìn)行一次就足夠了。此后，設(shè)置樣品點(diǎn)擊鍵即可開始測定。3.4光度測定方式341參數(shù)的設(shè)定點(diǎn)擊菜單欄中的EL鍵，出現(xiàn)下圖：列名測定的方式選擇測定波長的選擇和登錄波長此處顯示的波長類型是“點(diǎn)”表示測定高度，如果選擇的是圍，則需輸入起始和結(jié)束 波長，并可選擇最大、最小、峰、谷或面積等作為定量的依據(jù)。無論如何選擇，波長都是必須的，并要加入以后才有效。在某單欄上有右列各鍵，

6、點(diǎn)擊以后分別出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)表（最左）、樣 品表（左2）、工作曲線圖（右2）和樣品圖（最右）標(biāo)準(zhǔn)表工作曲線樣品圖樣品表定量測定首先如前所述，選擇了點(diǎn)及波長，然后在方法中選擇校準(zhǔn)， 在此決定用工作曲線法定量,并選擇多點(diǎn)、單點(diǎn)或 K因子法等。進(jìn)行定量測定也需要基線校正和自動調(diào)零，方法如前面所述。此后，樣品室逐個放入標(biāo)準(zhǔn)，點(diǎn)擊上圖下方的讀數(shù)鍵即可。注意，無論是測定標(biāo)準(zhǔn)或未知樣品，必須輸入名稱才有效。標(biāo)準(zhǔn)測定完畢，工作曲線自動顯示。接下去就可測定未知樣品的濃度了。有時不測定濃度，只測定某些波長的讀數(shù)，則在校準(zhǔn)方法中選擇“原始數(shù)據(jù)” 在登錄時選擇若干需要的波長，即可測定各波長的讀數(shù)。使用SH/T0181方法標(biāo)準(zhǔn)

7、進(jìn)行光譜測定時，點(diǎn)擊設(shè)置波長到287.5nm，再放入兩只均裝有光譜純異辛烷的比色皿，點(diǎn)擊自動調(diào)零，最后，將外面一只比色皿中裝入需要測定的樣品，點(diǎn)擊鍵讀數(shù)，即可測得在該波長處的樣品的吸光度值。見下在工作曲線圖象上點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，選擇屬性，可從該圖象上得到許多有用的信息,圖:只需在這些顯示的項(xiàng)目中做標(biāo)記，相應(yīng)的信息即出現(xiàn)在工作曲線圖象的左下方。見下圖的劃圈部分:所謂K因子法實(shí)際上可稱為已知工作曲線法（而且不局限于直線） ，即工作曲線回歸方 程的系數(shù)和次數(shù)已知，故而只要輸入這些系數(shù)以及工作曲線的次數(shù)。 這一方法對工作曲線較 為穩(wěn)定的日常分析非常有效。設(shè)置方法見下圖：3.5動力學(xué)分析在菜單欄中點(diǎn)擊方法鍵

8、得到如下圖象:此處的計時方式選擇的是“自動”，時間總量中需手動設(shè)置測定的時間。由于是自動計時方式，所以采樣步長（圖中為時間周期）和讀數(shù)次數(shù)將根據(jù)時間總量自動設(shè)置。此外可設(shè)置波長以及活度計算的開始和結(jié)束時間。設(shè)置大短的活度圍會出現(xiàn)錯誤信息。相反，如果計時方式選擇的是手動的話，則可輸入時間周期和讀取次數(shù)，而時間總量（測定時間）會根據(jù)輸入的時間周期和讀取次數(shù)自動計算得到?；疃葒糜诿阜磻?yīng)隨時間的變化，如果單純進(jìn)行時間掃描的話，則可不考慮活度圍。測定的波長欄可選擇單波長或雙波長（波長I-波長2或波長1/波長2）兩種方法。選擇后輸入相應(yīng)的波長。主菜單中有如右阪瓦叵風(fēng)各鍵，自主到右分別是時間掃描圖象、數(shù)據(jù)

9、處理面板、F圖中表示已經(jīng)測定得到數(shù)據(jù)測定參數(shù)面板和酶活度圖象。點(diǎn)擊各鍵屏幕出現(xiàn)相應(yīng)的板塊。的顯示情況。4定期維護(hù)檢查表檢查維護(hù)項(xiàng)目每天1年2年3年檢查樣品室O檢杳外觀O確認(rèn)光源點(diǎn)燈時間O更換W1（鹵素）燈O更換D2 （氘）燈O性能確認(rèn)OOO5常見故障及排除5.1初始化室的異常狀況（以下編號見前文初始化窗口中容）編號檢杳位置處理措施關(guān)閉（off本產(chǎn)品的電源開關(guān)后再次打開（ON,進(jìn)新儀器初始化。、（12）樣品室池架上是否有遮擋光線的物品？暫時關(guān)閉（OFF本產(chǎn)品的電源開關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開（ON電源。觀察光源室，W1是否漏光？如果沒有漏光將 W1熄滅。暫時關(guān)閉（off本產(chǎn)品的電源開關(guān)后再

10、次打開（ON。如果光源不亮，請更換 W1燈。光源的使用時間是否超過使用壽命？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示“配 置”窗口后單擊“點(diǎn)燈時間”選項(xiàng)卡。如果各光源燈的點(diǎn)燈時間超過“燈壽命”，請更換光源。(11)、(13)樣品室池架上是否有遮擋光線的物品？暫時關(guān)閉（OFF本產(chǎn)品電源開關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開（ON電源，對儀器進(jìn)行初始化。樣品室蓋是否敞開？暫時關(guān)閉（OFF本產(chǎn)品電源開關(guān)。關(guān)閉樣品室蓋后再次打開（ON電源開關(guān)，對儀器進(jìn)行初 始化。光源的使用時間是否超過使用壽命？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示“配 置”窗口后單擊“點(diǎn)燈時間”選項(xiàng)卡。如果

11、各光源燈的點(diǎn)燈時間超過“燈壽命”，請更換光源。5.2故障癥狀與處理方法故障（癥狀）主要原因處理方法打開電源開關(guān)后不通電。AC電源線插頭是否插好？正確連接AC電源線插頭。AC電源線是否被壓，或電源線 彎曲？如果AC電源線損壞，更換相同型號的電 源線。供電電源是否符合儀器的電源規(guī)格？使用與儀器的電源規(guī)格相符的電源。保險絲是否燒斷？需要確認(rèn)和更好保險絲時請與所在區(qū)域 的島津分公司聯(lián)系。無法與UVProbe通訊。是否確保正確連接 USB纜線？請確切到PC和儀器上。是否正確設(shè)置PC的COM端口？在PC顯示器右卜方確認(rèn)本產(chǎn)品 COM端 口 號后，電極UVProbe “儀器”菜單的“配 置”，設(shè)置連接端口。

12、是否正確安裝USB驅(qū)動程序？按照UVProbe軟件的安裝窗口安裝 USB驅(qū)動程序。測光值異常。光源是否熄滅？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配 置”，顯示“配置”窗口然后單擊“維護(hù)”選項(xiàng)卡?！肮庠礌顩r”的“ W” “D2”復(fù) 選框未被激活時，A處理：光源熄燈時，激活“ W仁“D2” 的復(fù)選框。在 UVProbe中單擊“斷開”，關(guān)閉（OFF）與UVProbe的通訊；關(guān)閉（OFF） 儀器電源。稍后再打開電源；單擊“連接”， 進(jìn)行儀器初始化。如果光源燈未亮，顯示錯誤時，再進(jìn)行“ B 處理”。光源燈點(diǎn)亮，隨后又熄滅時進(jìn)行“ C處理”。B處理：光源未亮。請更換新燈。C處理：儀器檢出異常時強(qiáng)行將

13、燈熄滅； 檢測風(fēng)扇是否停止或基板上的溫度感應(yīng) 器是否過熱；關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域 的島津分公司聯(lián)系。波長等測定參數(shù)設(shè)置是否正確？請重新檢查輸入的參數(shù)。測光值異常。狹縫寬度是否合適？改變狹縫寬度，重新進(jìn)行測定。光源的使用時間收費(fèi)超過使用壽命？如果光源的使用時間超過使用壽命，請更換光源。測定的樣品是否正確？請檢查所取樣品是否正確。使用的吸收池是否合適？請使用符合測定目的的吸收池。使用玻璃池時無法測定紫外區(qū)，請使用石英池。儀器附近是否使用手機(jī)？手機(jī)種類的信號強(qiáng)度可能光度值有影響。樣品室安裝的特殊附件和連接器的連接是否正確？請檢查特殊附件是否正確安裝到樣品室， 或連接器是否止確連接？在儀器前方是否聽

14、到發(fā)動機(jī)的異常聲響？扇形發(fā)動機(jī)可能運(yùn)行異常。請與所在區(qū)域 的島津分公司聯(lián)系。異常警報發(fā)出蜂鳴聲，LED顯示紅色。排氣風(fēng)扇的排氣口是否堵塞？關(guān)閉電源開關(guān)。檢查排氣風(fēng)扇出口處10cm以是否存在阻礙物， 如果有請清除。 由于可能出現(xiàn)溫度異常，請稍后再重新打 開電源開關(guān)。如果仍未解決，請與所在區(qū) 域的島津分公司聯(lián)系。排氣風(fēng)扇是否停止？確認(rèn)空氣從左后方的排氣口排出。如果風(fēng)扇停止運(yùn)行，關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。光源是否熄滅？如果光源的使用時間超過使用壽命，請更換光源。兩側(cè)光源都未 亮。排氣風(fēng)扇是否停止？確認(rèn)空氣從左后方的排氣口排出。如果風(fēng)扇停止運(yùn)行，關(guān)閉電源開關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。UVProbe 啟動慢。儀器記錄文件的容量是否增加？由于加載存儲的儀器記錄需要時間，軟件的啟動可能會變慢。按照以下順序?qū)?/p>