無菌檢驗方法學驗證方案研討

1、文件名稱無菌檢驗方法學驗證方案總頁數文件編號起草部門起草人起草日期備注審核部門審核人審核意見審核日期生產技術部主管起草部門主管審批部門審批人審批意見審批日期總工辦負責人質量部主管目錄1、驗證對象、范圍及時間2、目的3、實施驗證的人員分工及職責4、可接受標準5、驗證操作方法6、驗證結論7、結果分析與評價8、漏項與偏差表9、再驗證周期10、最終批準11、附錄1、驗證對象及范圍本實驗是關于產品無菌檢查試驗的驗證。參照中國藥典2005年版二部附錄無菌檢查方法進行試驗。結果采用直接接種法對人工污染的六種菌株進行試驗，產品對枯草芽孢桿菌、生孢梭菌有不同程度的抑菌作用。采用薄膜過濾法用 0.9%氯化鈉 10

2、0mL進行樣品稀釋，然后用 500mL的pH7.0氯化鈉緩沖液分幾次沖洗，可消除其抑菌成分。驗證結果應顯示對產品無菌試驗方法。2、目的本方案的目的在于為分析評價無菌檢驗方法，以確認采用適宜的檢驗方法。3、實施驗證的人員分工及職責表 1 無菌檢驗方法學驗證小組職責分工驗證職責負責部門負責人起草驗證方案起草驗證報告無菌檢驗方法學驗證實施檢驗審核驗證方案和驗證報告批準驗證方案和驗證報告4、接受標準已對生化檢驗人員進行專業(yè)培訓。5、驗證操作方法5、1 概述本產品為三類醫(yī)療器械無菌產品。無菌檢查法是對該產品質量控制的重要檢查項目， 2005年版藥典要求建立產品的無菌檢查法時要進行方法學的驗證，來確認所采

3、用的方法適用。按照中國藥典2005年版要求，以金葡球菌，銅綠假單胞菌，枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌，黑曲霉菌作為實驗菌種，對甲磺酸羅哌卡因注射液無菌檢查方法進行了驗證實驗。5、 2 驗證主要文件文件名稱編號實際情況無菌工作服管理規(guī)程AM·SMP·De23-05-I初始污染菌檢驗5、3 無菌服洗衣消毒滅菌程序純化水浸泡適量加洗滌劑15分鐘洗滌脫水2分鐘0.1新潔爾滅浸泡15分鐘純化水漂洗消毒純化水漂洗5分鐘3分鐘脫水晾干放入無菌袋滅菌121， 30min放入傳遞窗緩沖區(qū)指定地點5、4 取樣將浸有滅菌生理鹽水的棉拭子在無菌服的門衣襟、袖上來回涂抹 10 次（往返為一次）

4、采樣面積為 5cm×5cm，將棉拭子放入 10ml 滅菌生理鹽水的試管中。5、6 檢驗方法將已采集的樣品在6h 內送檢，將每個采樣管震打80 次，混勻， 10 倍遞減稀釋，對每個稀釋度（取3 個稀釋度）分別取1ml 放于滅菌平皿內，用普通瓊脂培養(yǎng)基作傾注培養(yǎng)，每個樣品平行接種兩塊平皿, 置 37恒溫箱培養(yǎng) 48h，計數平板上細菌菌落數，觀察結果。5、7 檢驗項目5、7、1 外觀檢查目測法可接受標準：清洗后無菌服外觀清潔，無可見的殘留物或殘留氣味。5、7、2 微生物合格標準： 細菌總數附： 1. 驗證記錄2. 檢驗報告單6、驗證結論7、結果分析與評價評定人：審核人：8、漏項與偏差值9、再驗證周期250CFU/標樣（ 25cm）日期：日期：9、1 正常生產時，每年應進行一次