毛細管氣相色譜法測定消腫止痛酊中樟腦與薄荷腦的含量

1、毛細管氣相色譜法測定消腫止痛酊中樟腦與薄荷腦 的含量作者：張曉霞 陳安家 張 一鳴 王潔 李霞 李進冉 【摘要】 目的建立測定消腫止痛酊中樟腦和薄 荷腦含量的方法。方法采用毛細管氣相色譜法。色譜柱為PEG-20M石英毛細管柱(30 m X 0.25 mmx 0.25卩m);載氣為氮氣；正辛醇為內(nèi)標；柱溫 160C；氫 火焰離子檢測器；檢測器和氣化室的溫度均為250C； N2流速3 ml/min ; H2流速30 ml/min ;空氣流速300 ml/min ;尾吹氣N2流速30 ml/min。結(jié)果樟腦、 薄荷腦和正辛醇能達到良好分離；樟腦的線性范圍3.0018.00卩g/ml(r=0.999

2、2 )，薄荷腦的線性范圍 3.2019.20卩g/ml (r=0.999 5 );樟腦 的回收率 98.5%101.5%，薄荷腦的回收率 97.6%101.7%。結(jié)論方法簡便、準 確、專屬性強、重復(fù)性好，可用于消腫止痛酊的質(zhì)量控制。 【關(guān)鍵詞】 毛 細管氣相色譜法；消腫止痛酊；樟腦； 薄荷腦 Abstract ：ObjectiveTo establish a method for GC determination of Camphor and Menthol in Xiaozhongzhitong Tincture. MethodsCapillary GC was adopted. The i

3、nternal standard method was employed with octanol as internal standard. The GC system consisted of a flame ionization detector,PEG20M capillary column(30 m x 0.25 mmx 0.25 卩 m), nitrogen as the carrier gas; oven temperature 160°C , detector temperature 250°C , N2 :3 ml/min, H2 : 30 ml/min,

4、 Air : 300ml/min， made up(N2) : 30ml/min.ResultsCamphor and Menthol could be separated well under the chromatographic conditions. The linear range of Camphor was 3.0018.00 卩 g/ml (r=0.999 2),and the linear range of the Menthol was 3.20 19.20 卩 g/ml(r=0.999 5); the recovery of Camphor was 98.5%101.5%

5、, and the recovery of Menthol was 97.6%101.7%. ConclusionThemethod is simple, sensitive, accurate and has good repeatability, and it can be used to control the quality of Xiaozhongzhitong Tincture.Key words ：Capillary Gas chromatography;XiaozhongzhitongTincture; Camphor; Menthol消腫止痛酊是由木香、防風、細辛、五加皮、沉

6、香、樟腦、薄荷腦、兩面針等藥材經(jīng)過適宜加工制成的廣西民 族藥，具有舒筋活絡(luò)、消腫止痛之功效。其中的樟腦、薄荷腦能選擇性地刺激 人體皮膚或黏膜的冷覺感受器，引起皮膚黏膜血管收縮從而產(chǎn)生消炎、止痛、 止癢等作用。樟腦和薄荷腦均為易揮發(fā)組分，含量測定多用氣相色譜法 1， 2，也有采用分光光度法 3和旋光光度法 4。消腫止痛酊系易串味藥 物，目前尚未見消腫止痛酊質(zhì)量控制方面的相關(guān)報道。為了更好地控制產(chǎn)品質(zhì) 量，本文建立了毛細管氣相色譜法測定消腫止痛酊中樟腦和薄荷腦的含量。樟 腦和薄荷腦化學結(jié)構(gòu)式見圖 1。1 儀器與試劑SP-2100 氣相色譜儀(北京普析通用儀器有限責任公司)；KQ-100型超聲波清洗

7、器(昆山市超聲儀器有限公司)；電子天平(BP-211D。樟腦對照品(中國藥品生物制品檢定 所)；薄荷腦對照品(中國藥品生物制品檢定所)；消腫止痛酊(廣西壯族自 治區(qū)花紅藥業(yè)集團股份有限公司，批號： 20070602， 20070710， 20070803， 20070901)；實驗用水為二次蒸餾水；其余試劑均為分析純。2 方法及結(jié)果 2.1 內(nèi)標物溶液的配制 精密量取正辛醇 0.1 ml ，置于 50 ml 的容 量瓶中，用 50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2.2 對照品溶液的配制精密稱取樟腦對照品15.0 mg，薄荷腦對照品16.0 mg,于25 ml的容量瓶中， 用50%乙醇稀釋至刻度，

8、搖勻，作為儲備液。精密吸取該儲備液2.5 ml ，內(nèi)標物溶液 1.0 ml ,置于 10 ml 的容量瓶中,用 50%乙醇稀釋至刻度,搖勻,即得 對照品溶液。 2.3 供試品溶液的配制 精密量取用微孔濾膜過濾后的樣 品2.0 ml （批號：20070710）,內(nèi)標物溶液 1.0 ml ,置于 10 ml 容量瓶中,用 50%乙醇稀釋至刻度,搖勻,即得供試品溶液。2.4 色譜條件 采用 SP-2100氣相色譜儀。PEG-20M毛細管色譜柱（30 mX 0.25 mmX 0.25卩m ；載氣 為氮氣；氫火焰離子化檢測器；柱溫 160C ;檢測器溫度250C ;氣化室溫度250C； N2流速 3 m

9、l/min ; H2流速 30 ml/min ; Air 流速 300 ml/min ;尾吹氣 N2流速30 ml/min ;進樣量為1卩l(xiāng) ;內(nèi)標物為正辛醇。結(jié)果見圖 23。2.5 工作曲線的繪制 精密量取對照品儲備液 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0 ml ,分別置于 10 ml 容量瓶中,各加入內(nèi)標物溶液 1.0 ml ,用 50%乙醇稀 釋至刻度,搖勻,從而配制成一系列濃度的標準溶液。按上述色譜條件進行測 定,分別以樟腦和薄荷腦的濃度為橫坐標,以相應(yīng)峰面積比值為縱坐標,將所 得數(shù)據(jù)進行線性回歸?；貧w曲線方程分別為：樟腦：丫=5.823 1C-0.027 2,r=

10、0.999 2薄荷腦： Y=6.339 9C-0.020 8,r=0.999 5樟腦在3.0018.00卩g/ml線性良好；薄荷腦在 3.2019.20卩g/ml線性良 好。 2.6 精密度實驗 對同一對照品溶液,連續(xù)進樣 6次,按照上述色 譜條件進行測定,分別求出樟腦和薄荷腦峰面積與內(nèi)標物峰面積的比值。樟腦 的RSC為0.43%;薄荷腦的RSD為0.21%。實驗表明，精密度良好。2.7重復(fù)性實驗 取同一批供試品,按“ 2.3”項下分別配制 6份。按照上述色譜條 件進行測定，分別求出樟腦和薄荷腦的含量。結(jié)果樟腦的RSD為0.64%,薄荷腦的RSD為0.57%。實驗表明，重復(fù)性良好。百事通2.8

11、加樣回收率實驗在已知量的供試品溶液中，精密加入一定量對照品儲備液和內(nèi)標物溶液，配制 成線性范圍內(nèi)高、中、低 3個濃度的溶液。在上述色譜條件下進行測定。結(jié)果 樟腦的回收率為 98.5%101.5%;薄荷腦的回收率為 97.6101.7%。結(jié)果見 表 12。表 1 樟腦的加樣回收率（略）表 2 薄荷腦的加樣回收率（略） 2.9 穩(wěn)定性實驗 取同一個供試品溶液，在上述色譜條件下，每隔 2 h 進樣 1 次，共進樣 5次，分別求出樟腦和薄荷腦峰面積與內(nèi)標物峰面積的比值。結(jié) 果：樟腦的RSD為0.79%,薄荷腦的RSD為0.74%。實驗表明：供試品溶液在 10 h 內(nèi)穩(wěn)定。 2.10 樣品中樟腦、薄荷腦

12、的含量測定按“ 2.3”項下方法配制4 種批號的供試品溶液，在上述色譜條件下進行測定。結(jié)果見表3。表 3 消腫止痛酊中樟腦和薄荷腦的含量測定結(jié)果（略）3 討論 3.1 酊劑中乙醇含量的測定 酊劑的制備過程中所用溶劑為乙醇，由于制劑中乙醇含量的 高低對于制劑中有效成份的含量、所含雜質(zhì)的類型和數(shù)量以及制劑的穩(wěn)定性等 都有影響，所以中國藥典規(guī)定對該類制劑需做乙醇含量的檢查5。本實驗在下述色譜條件下對消腫止痛酊中的乙醇含量進行了測定，色譜條件：程序 升溫，初始溫度80E，以5C /min升溫至110C ;氫焰離子化檢測器；檢測器 溫度200C ;氣化室溫度200C ;載氣為氮氣；進樣量為1卩l(xiāng) ;內(nèi)標

13、法測定； 內(nèi)標物為正丙醇。結(jié)果，測得樣品中的乙醇含量為 49.3，符合其質(zhì)量標準（編號：WS3-B-2411-97）的規(guī)定（乙醇含量要求：47%57%）。3.2內(nèi)標物的選擇 本實驗分別選用了萘、正辛醇、冰片、水楊酸甲酯作為內(nèi)標 物，綜合他們各自的分子量、沸點及出峰情況等因素，最后選定正辛醇為最佳 的內(nèi)標物，且供試品溶液在正辛醇峰的位置上沒有出現(xiàn)色譜峰，不存在干擾。3.3 樣品溶解性的考察 由于內(nèi)標物正辛醇不溶于水，不能用水作為稀釋溶 劑；且用無水乙醇作溶劑稀釋樣品時，發(fā)現(xiàn)溶液渾濁，結(jié)合樣品中乙醇的含量 為 49.3%，所以本實驗采用 50%乙醇作為稀釋溶劑。結(jié)果樣品澄清透明，而且內(nèi) 標物正辛醇

14、可以與 50%乙醇互溶。3.4 色譜條件的選擇 柱溫是色譜峰分離的一個重要參數(shù)，直接影響分離效果和分析速度6。文獻中測定樟腦和薄荷腦的含量多采用程序升溫的方法7。本實驗曾比較了程序升溫110 180C,升溫速率分別為 5, 10, 15, 20, 30C/min，以及恒溫120, 140, 160, 180C等測定條件，結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用程序升溫的方法，色譜峰拖尾因子高， 重復(fù)性差；而采用恒溫160C時，可以達到各色譜峰基線分離，分離度大于 1.5 ,且分析時間適中,峰形對稱,重復(fù)性高。本文建立的測定消腫止痛酊中樟腦和薄荷腦含量的方法,簡便、快速,結(jié)果準確、可靠,可用于消腫 止痛酊的質(zhì)量控制?！緟⒖嘉墨I】1李結(jié)瓊. 毛細管氣相色譜法測定通竅救心油中樟腦的含量 J . 海峽藥學, 2006,18:62.2李國穎 .氣相色譜法測定薄荷水 ( 濃) 和薄荷油中薄荷腦的含量 J . 廣東藥學院學報, 2002,18(3):191.3方維軍, 陳堅,吳芳. 雙波長分光光度法測定復(fù)方薄荷洗劑的含量 J . 中國醫(yī)院藥學雜志