親核素βkpnβelisa試劑盒說明書

1、親核素3 (KPN3 )ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本：體液親核素3 (KPNI3 )ELISA試劑盒試驗(yàn)原理：BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)( ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物， 然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。親核素3 (KPNI3 )ELISA試劑盒自備材料1 .蒸鐳水。2 .加樣器：5ul、10u

2、l、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3 .振蕩器及磁力攪拌器等。 安全性1 .避免直接接觸終止液和底物 A、Bo 一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。2 .實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3 .不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。親核素3 (KPN 3 )ELISA試劑盒 操作注意事項(xiàng)1 .試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2 .實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3 .不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4 .使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分

3、的加樣器。5 .使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6 .洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7 .底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取 OD值。8 .加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9 .按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。親核素3 (KPN 3 )ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000 橇心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿

4、-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000 離g 30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液-1000 離，IX 10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存-如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分 -70 C保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37c或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50 戶的稀釋：蒸儲(chǔ)水50倍稀釋。親核素3 (KPN 3 )ELISA試劑盒操作步驟1 .使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的

5、泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2 .根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3 .加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37c溫育1小時(shí)。4 .甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5 .每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻，37c溫育30分鐘6 .甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30秒，甩去

6、洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7 .每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻，37c溫育10分鐘。避免光照。8 .取出酶標(biāo)板，迅速加入 50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9 .在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。親核素3 （KPN 3 ）ELISA試劑盒性能1 .靈敏度：最小的木測(cè)濃度小于 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.99002 .特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3 .重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。親核素3 （KPN3 ）

7、ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的 OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y）,相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X）,做得相應(yīng)的曲線， 樣品的BFGF含量可由I（據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0 pg/mlAGEs人晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格： 48T/96Textein 人外顯肽規(guī)格：48T/96TSA人唾液酸規(guī)格：48T/96TDUTP人脫氧尿三磷酸規(guī)格： 48T/96TDPD人脫氧膠原此咤交聯(lián)規(guī)格： 48T/96TDNase-1 人脫氧核糖核酸酶I規(guī)格：48T/96TDPD 人脫氧口比咤酚/脫氧口比咤咻規(guī)格：48T/96TDHEA-S 人脫氫表雄酮硫酸酯規(guī)格：48T/96TMT人褪黑素規(guī)格： 48T/96THAase人透明質(zhì)酸酶規(guī)格： 48T/96THABP 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白規(guī)格：48T/96THA人透明質(zhì)酸 規(guī)格：48T/96TCP/CER人銅藍(lán)蛋白規(guī)格：48