高三生物一輪復(fù)習 專題1.2微生物的利用同步 新人教版

1、專題2 微生物的利用 平板劃線法和稀釋涂布平板法對大腸桿菌的純化的比較平板劃線法和稀釋涂布平板法對大腸桿菌的純化的比較(1)(1)平板劃線法中由于劃線時，每次從上一次劃線的末端開始，平板劃線法中由于劃線時，每次從上一次劃線的末端開始，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，能使細菌的數(shù)目隨著線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。的菌落。(2)(2)稀釋涂布平板法中，由于將菌液進行了一系列的梯度稀釋稀釋涂布平板法中，由于將菌液進行了一系列的梯度稀釋和涂布培養(yǎng)，集聚在一起

2、的微生物將被分散成單個細胞，形成和涂布培養(yǎng)，集聚在一起的微生物將被分散成單個細胞，形成單個菌落。單個菌落。 判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染，需將未接種的培養(yǎng)基判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染，需將未接種的培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)；判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用，需設(shè)立同時進行培養(yǎng)；判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用，需設(shè)立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，進行對比得出結(jié)論。菌落數(shù)目，進行對比得出結(jié)論。 (1) (1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，因培纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，因培養(yǎng)基中無凝固劑，利用液體培養(yǎng)基以增加

3、纖維素分解菌的濃養(yǎng)基中無凝固劑，利用液體培養(yǎng)基以增加纖維素分解菌的濃度。度。(2)(2)選擇培養(yǎng)基以纖維素作為碳源和能源，其他絕大多數(shù)微選擇培養(yǎng)基以纖維素作為碳源和能源，其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長；鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，故為固體培養(yǎng)基，生物不能正常生長；鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，故為固體培養(yǎng)基，剛果紅染色法就是應(yīng)用的此培養(yǎng)基。剛果紅染色法就是應(yīng)用的此培養(yǎng)基。(3)(3)流程中的流程中的“選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)”是為了擴大培養(yǎng)液中的微生物數(shù)是為了擴大培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量，具體需要與否要看土樣中微生物的數(shù)量。量，具體需要與否要看土樣中微生物的數(shù)量。1.1.關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述中，錯誤的關(guān)于制備牛

4、肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述中，錯誤的是是( )( )A.A.操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B.B.牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻棒取出稱量紙牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻棒取出稱量紙C.C.待培養(yǎng)基冷卻至待培養(yǎng)基冷卻至5050左右時，進行倒平板左右時，進行倒平板D.D.待平板冷卻凝固約待平板冷卻凝固約5 min5 min10 min10 min后，將平板倒過來放置后，將平板倒過來放置【解析】【解析】選選A A。本題考查牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制備過程。本題考查牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制備過程。其順序為：計算其順序為：計算稱量稱量溶化溶化滅菌

5、滅菌倒平板，故倒平板，故A A項錯誤。項錯誤。2.2.可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是( )( )A.A.以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B.B.以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C.C.以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑試劑D.D.以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑【解析】【解析】選選A A。在以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中，不能分解。在以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中，不能分解尿素獲得氮源的細

6、菌不能生長，而分解尿素的細菌能利用尿尿素獲得氮源的細菌不能生長，而分解尿素的細菌能利用尿素作氮源，將尿素分解為氨，使素作氮源，將尿素分解為氨，使pHpH升高。若培養(yǎng)基中加入酚升高。若培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑將變紅。此培養(yǎng)基既屬于選擇培養(yǎng)基，又紅指示劑，指示劑將變紅。此培養(yǎng)基既屬于選擇培養(yǎng)基，又屬于鑒別培養(yǎng)基。屬于鑒別培養(yǎng)基。3.3.下列說法不正確的有下列說法不正確的有( )( )A.A.從牛胃中分離纖維素分解菌并計數(shù)，與分離醋酸菌相比，從牛胃中分離纖維素分解菌并計數(shù)，與分離醋酸菌相比，最主要的實驗條件差別是保證無氧環(huán)境最主要的實驗條件差別是保證無氧環(huán)境B.B.用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往

7、往比活菌的實際數(shù)目少用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目少C.C.提取和分離纖維素酶的過程中，為了避免外界酸和堿對酶提取和分離纖維素酶的過程中，為了避免外界酸和堿對酶活性的影響，需向提取液和分離液中添加緩沖溶液活性的影響，需向提取液和分離液中添加緩沖溶液D.D.若探究纖維素酶活性的最適溫度，可設(shè)置不同的溫度梯度若探究纖維素酶活性的最適溫度，可設(shè)置不同的溫度梯度進行空白對照進行空白對照【解析】【解析】選選D D。牛胃是一個無氧的環(huán)境，所以其中的纖維素。牛胃是一個無氧的環(huán)境，所以其中的纖維素分解菌與需氧型醋酸菌培養(yǎng)條件有所不同。因是活菌計數(shù)，分解菌與需氧型醋酸菌培養(yǎng)條件有所不同。因是活菌

8、計數(shù)，所以部分死亡菌無法計數(shù)。另外當菌落重合時，只能計為一所以部分死亡菌無法計數(shù)。另外當菌落重合時，只能計為一個菌落，所以比實際數(shù)目少。探究最適溫度可設(shè)置一系列的個菌落，所以比實際數(shù)目少。探究最適溫度可設(shè)置一系列的溫度梯度相互對照，其他無關(guān)變量要適宜。溫度梯度相互對照，其他無關(guān)變量要適宜。4.4.某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計數(shù)。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題：請回答與此實驗相關(guān)的問題：(1)(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉

9、分別為細菌培養(yǎng)提供了培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了_和和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是是_和和_。(2)(2)對培養(yǎng)基進行滅菌，應(yīng)該采用的方法是對培養(yǎng)基進行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_。(3)(3)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在3737。要。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種_作為對照進行實驗。作為對照進行實驗。(4)(4)培養(yǎng)

10、培養(yǎng)2020小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有這說明湖水樣品中有_種細菌。一般來說，菌落總數(shù)越種細菌。一般來說，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越多，湖水遭受細菌污染的程度越_。(5)(5)如果提高培養(yǎng)基中如果提高培養(yǎng)基中NaClNaCl的濃度，可以用于篩選耐的濃度，可以用于篩選耐_細菌，這種培養(yǎng)基被稱為細菌，這種培養(yǎng)基被稱為_?！窘馕觥俊窘馕觥勘绢}主要考查微生物的培養(yǎng)與分離知識。培養(yǎng)基中本題主要考查微生物的培養(yǎng)與分離知識。培養(yǎng)基中含有的蛋白胨主要提供氮源，淀粉主要提供碳源，還需要水含有的蛋白胨主要提供氮源，淀粉主要提

11、供碳源，還需要水及無機鹽等；培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌后，還要檢驗滅菌效及無機鹽等；培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌后，還要檢驗滅菌效果；用選擇培養(yǎng)基可以將耐鹽細菌分離出來。果；用選擇培養(yǎng)基可以將耐鹽細菌分離出來。答案：答案：(1)(1)氮源氮源( (碳源不作要求碳源不作要求) ) 碳源碳源 無機鹽無機鹽 水水(2)(2)高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 (3)(3)恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱 無菌水無菌水(4)(4)多多 大大 (5)(5)鹽鹽( (或或NaCl) NaCl) 選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基的種類一、培養(yǎng)基的種類 (1) (1)加入培養(yǎng)基中的凝固劑加入培養(yǎng)基中的凝固劑( (如瓊脂如瓊脂) )，一般，一般

12、不能被微生物利用，只能起到凝固作用。不能被微生物利用，只能起到凝固作用。(2)(2)選擇培養(yǎng)基一般只生長具有特定目的的微生物，鑒別培選擇培養(yǎng)基一般只生長具有特定目的的微生物，鑒別培養(yǎng)基可以存在其他微生物，而且能鑒別特定的微生物。養(yǎng)基可以存在其他微生物，而且能鑒別特定的微生物。(3)(3)基本營養(yǎng)要素：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、基本營養(yǎng)要素：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽。此外還要滿足不同微生物生長對無機鹽。此外還要滿足不同微生物生長對pHpH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。以及氧氣的需求?！纠C【例證1 1】(2009(2009上海高考上海高考) )氯苯化合物

13、是重要的有機化工氯苯化合物是重要的有機化工原料，缺點是不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列原料，缺點是不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案實驗方案( (如圖如圖1)1)，篩選出能高效降解氯苯的微生物，篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1SP1菌，菌，培養(yǎng)基配方如下表。培養(yǎng)基配方如下表。(1)(1)配制配制號固體培養(yǎng)基時，除添加號固體培養(yǎng)基時，除添加號液體培養(yǎng)基成分外，號液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加還應(yīng)添加1%1%的的_。(2)(2)培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)pHpH的先后順序是的先后順序是_。(3)(3)從用途上來說，從用途上來說，號培養(yǎng)基和號培養(yǎng)基和號培養(yǎng)基分別

14、屬于號培養(yǎng)基分別屬于_培養(yǎng)基和培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基。在號培養(yǎng)基中，為號培養(yǎng)基中，為SP1SP1菌提供氮源的成分是菌提供氮源的成分是_。(4)(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，SP1SP1的菌體會變成一個圓形的的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為休眠體，這種休眠體被稱為_。(5)(5)將將SP1SP1菌接種在含不同濃度氯苯的菌接種在含不同濃度氯苯的號培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得號培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到生長曲線到生長曲線( (如圖如圖2)2)。從圖。從圖2 2中可知中可知SP1SP1菌在菌在_培養(yǎng)條培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是件下最早停止生長，其原因是_。 【解題關(guān)鍵】【解

15、題關(guān)鍵】解答本題應(yīng)突破以下幾個方面：解答本題應(yīng)突破以下幾個方面：根據(jù)根據(jù)圖表提取有效信息。圖表提取有效信息。明確選擇培養(yǎng)基的作用。明確選擇培養(yǎng)基的作用。理解微生理解微生物的生長與營養(yǎng)物質(zhì)的關(guān)系。物的生長與營養(yǎng)物質(zhì)的關(guān)系。【精講精析】【精講精析】本題主要考查培養(yǎng)基的相關(guān)知識。本題主要考查培養(yǎng)基的相關(guān)知識。(1)(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂。固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂。(2)(2)為了防止雜菌污染，配制培養(yǎng)基時，應(yīng)先調(diào)節(jié)為了防止雜菌污染，配制培養(yǎng)基時，應(yīng)先調(diào)節(jié)pHpH，然后，然后滅菌。滅菌。(3)(3)號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培養(yǎng)基，號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培養(yǎng)

16、基，號培養(yǎng)基是為選擇出號培養(yǎng)基是為選擇出SP1SP1菌株，屬于選擇培養(yǎng)基，菌株，屬于選擇培養(yǎng)基，號培號培養(yǎng)基成分中含氮物質(zhì)為硝酸銨，可以為養(yǎng)基成分中含氮物質(zhì)為硝酸銨，可以為SP1SP1菌株提供氮源。菌株提供氮源。(4)(4)當環(huán)境條件較差時，一些菌體會形成芽孢休眠體，來適當環(huán)境條件較差時，一些菌體會形成芽孢休眠體，來適應(yīng)不良環(huán)境。應(yīng)不良環(huán)境。(5)SP1(5)SP1菌株以氯苯為碳源，當氯苯消耗盡時，菌株因缺少碳菌株以氯苯為碳源，當氯苯消耗盡時，菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，SP1SP1菌株越早停止生菌株越早停止生長。長。答案：答案：(1)(1)

17、瓊脂瓊脂 (2)(2)先調(diào)先調(diào)pHpH，后滅菌，后滅菌(3)(3)通用通用 選擇選擇 硝酸銨硝酸銨 (4)(4)芽孢芽孢(5)20mg/L(5)20mg/L氯苯氯苯 氯苯最早耗盡氯苯最早耗盡 【規(guī)律方法】【規(guī)律方法】微生物分離的常用方法微生物分離的常用方法(1)(1)培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的改變可達到分離微生物的目的，如培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的改變可達到分離微生物的目的，如培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮微生物。培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮微生物。(2)(2)當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學成分時，也具有分當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學成分時，也具有分離效果，如石油是惟一碳源時，可以抑制不能利用石油

18、的微離效果，如石油是惟一碳源時，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達到分離出能生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達到分離出能消除石油污染的微生物的目的。消除石油污染的微生物的目的。(3)(3)改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達到分離微生物的目的，改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)，只能得到耐高溫的微生物。如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)，只能得到耐高溫的微生物。 【變式訓練】關(guān)于滅菌和消毒的理解【變式訓練】關(guān)于滅菌和消毒的理解, ,不正確的是不正確的是( )( )A.A.滅菌是指殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子滅菌

19、是指殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子B.B.消毒和滅菌實質(zhì)上是相同的消毒和滅菌實質(zhì)上是相同的C.C.接種環(huán)用灼燒法滅菌接種環(huán)用灼燒法滅菌D.D.常用的滅菌方法有加熱法、紫外線法、化學藥品法常用的滅菌方法有加熱法、紫外線法、化學藥品法【解析】【解析】選選D D。逐項分析如下：。逐項分析如下：二、細菌的分離與計數(shù)二、細菌的分離與計數(shù)1.1.篩選菌株篩選菌株(1)(1)原則：人為提供有利于目的菌生長的條件，同時抑制或原則：人為提供有利于目的菌生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物的生長。阻止其他微生物的生長。(2)(2)菌株篩選原理的比較菌株篩選原理的比較2.2.統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法統(tǒng)計菌落數(shù)目

20、的方法(1)(1)顯微鏡直接計數(shù)法顯微鏡直接計數(shù)法原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計數(shù)板計數(shù)。方法：用計數(shù)板計數(shù)。缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。(2)(2)間接計數(shù)法間接計數(shù)法( (活菌計數(shù)法活菌計數(shù)法) )原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品

21、中大約含有多少活菌。菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=(C=(CV)V)M M，其中，其中,C,C代表代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V V代表涂布平板時代表涂布平板時所用的稀釋液的體積所用的稀釋液的體積(mL)(mL)，M M代表稀釋倍數(shù)。代表稀釋倍數(shù)。操作：設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準確性。同時為操作：設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在3030300300的平板進行計的平板進行計數(shù)。數(shù)。3.3.設(shè)置對照設(shè)

22、置對照(1)(1)目的：排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提目的：排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。高實驗結(jié)果的可信度。(2)(2)方法：方法：證明培養(yǎng)基未被污染，用空白培養(yǎng)基作對照。證明培養(yǎng)基未被污染，用空白培養(yǎng)基作對照。證明選擇培養(yǎng)基的選擇作用，用基礎(chǔ)培養(yǎng)基接種等量同種證明選擇培養(yǎng)基的選擇作用，用基礎(chǔ)培養(yǎng)基接種等量同種菌液作對照。菌液作對照?！纠C【例證2 2】下面是探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計數(shù)】下面是探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計數(shù)的實驗，完成下列問題：的實驗，完成下列問題：實驗原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。實驗原理：農(nóng)田的

23、表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土壤制成的稀泥漿，接種到無氮培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。將用表層土壤制成的稀泥漿，接種到無氮培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法，在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細菌分離?？梢詫⒆陨痰c其他細菌分離。材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛有養(yǎng)基、盛有9mL9mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛有菌培養(yǎng)皿、盛有90mL90mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。無菌

24、水的錐形瓶、恒溫箱。(1)(1)方法步驟：方法步驟：倒平板：分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，倒平板：分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，應(yīng)在應(yīng)在_操作。操作。制備土壤稀釋液：取土樣制備土壤稀釋液：取土樣10g10g加入盛有加入盛有90mL90mL無菌水的錐形無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液瓶中，充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液1mL1mL，轉(zhuǎn)至盛有，轉(zhuǎn)至盛有9mL9mL的無菌水的試管中，依次稀釋到的無菌水的試管中，依次稀釋到10107 7稀釋度。稀釋度。涂布：按照由涂布：按照由10107 710103 3稀釋度的順序分別吸取稀釋度的順序分別吸取0.1mL0.1

25、mL進行平進行平板涂布，每個稀釋度下，無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布板涂布，每個稀釋度下，無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布_個平個平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布_個。個。培養(yǎng)：放入恒溫箱內(nèi)，在培養(yǎng)：放入恒溫箱內(nèi)，在28 28 30 30 下培養(yǎng)下培養(yǎng)3d3d4d4d。細菌的計數(shù)：當菌落數(shù)目穩(wěn)定時，選取菌落數(shù)在細菌的計數(shù)：當菌落數(shù)目穩(wěn)定時，選取菌落數(shù)在_的的平板進行計數(shù)。如果測試的平均值為平板進行計數(shù)。如果測試的平均值為5050，則每克樣品中的菌，則每克樣品中的菌落數(shù)是落數(shù)是_。( (稀釋度是稀釋度是10105 5) )(2)(2)預(yù)期結(jié)果：相同稀釋度下，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌預(yù)期結(jié)果：相同

26、稀釋度下，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)落數(shù)_(_(填填“多于多于”或或“少于少于”) )無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。原因是原因是_。 【解題關(guān)鍵】【解題關(guān)鍵】明確稀釋涂布平板法的操作過程，學會根明確稀釋涂布平板法的操作過程，學會根據(jù)計算結(jié)果得出相關(guān)的結(jié)論。據(jù)計算結(jié)果得出相關(guān)的結(jié)論?！揪v精析】【精講精析】本題主要考查微生物的培養(yǎng)、分離和計數(shù)等。在本題主要考查微生物的培養(yǎng)、分離和計數(shù)等。在酒精燈火焰旁倒平板，可以減少雜菌污染。為了保證結(jié)果準確，酒精燈火焰旁倒平板，可以減少雜菌污染。為了保證結(jié)果準確，一般設(shè)置一般設(shè)置3 35 5個平板，選擇菌落數(shù)在個平板，選擇菌落數(shù)在303030030

27、0的平板進行計數(shù)，的平板進行計數(shù)，并取平均值，則每克樣品中的菌落數(shù)為并取平均值，則每克樣品中的菌落數(shù)為(50(500.1) 0.1) 10105 5=5=510107 7。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照，以消除無關(guān)變。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照，以消除無關(guān)變量對實驗結(jié)果的影響，該培養(yǎng)基適合其他細菌生存，所以，它量對實驗結(jié)果的影響，該培養(yǎng)基適合其他細菌生存，所以，它比無氮培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目多。比無氮培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目多。答案：答案：(1)(1)酒精燈火焰旁酒精燈火焰旁 3 13 13030300 5300 510107 7(2)(2)多于多于 無氮培養(yǎng)基上只有土壤中的自生固氮菌生存繁殖，無氮培養(yǎng)基上

28、只有土壤中的自生固氮菌生存繁殖，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類生存而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類生存 【變式訓練】測定土壤中細菌的數(shù)量一般選【變式訓練】測定土壤中細菌的數(shù)量一般選10104 4、10105 5和和10106 6倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)；而真菌的數(shù)量，一般選用倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)；而真菌的數(shù)量，一般選用10102 2、10103 3和和10104 4倍稀釋，其原因是倍稀釋，其原因是( )( )A.A.細菌個體小，真菌個體大細菌個體小，真菌個體大B.B.細菌易稀釋，真菌不易稀釋細菌易稀釋，真菌不易稀釋C.C.細菌在土壤中含量比真菌高細菌在土壤中含量比真菌

29、高D.D.隨機的，沒有原因隨機的，沒有原因【解析】【解析】選選C C。根據(jù)土壤中不同微生物的數(shù)量來確定稀釋度，。根據(jù)土壤中不同微生物的數(shù)量來確定稀釋度，細菌含量較多，稀釋度應(yīng)該大一些。細菌含量較多，稀釋度應(yīng)該大一些。【例證】下表是幾種微生物能利用的碳源和氮源物質(zhì)的描述，【例證】下表是幾種微生物能利用的碳源和氮源物質(zhì)的描述，其中描述錯誤的微生物有幾種其中描述錯誤的微生物有幾種A.1A.1種種B.2B.2種種C.3C.3種種D.4D.4種種【精講精析】【精講精析】選選C C。硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型生物，以。硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型生物，以COCO2 2為為碳源，以碳源，以NHNH3 3為氮源。圓褐固

30、氮菌屬于異養(yǎng)固氮菌，碳源為含為氮源。圓褐固氮菌屬于異養(yǎng)固氮菌，碳源為含碳有機物，氮源為分子態(tài)氮。甲烷氧化菌對碳源要求嚴格，碳有機物，氮源為分子態(tài)氮。甲烷氧化菌對碳源要求嚴格，只能是甲烷或甲醇。乳酸菌屬于異養(yǎng)厭氧型菌，其碳源和氮只能是甲烷或甲醇。乳酸菌屬于異養(yǎng)厭氧型菌，其碳源和氮源均為有機物。源均為有機物。1.(20111.(2011衡陽模擬衡陽模擬) )下列關(guān)于大腸桿菌的培養(yǎng)中敘述不正確下列關(guān)于大腸桿菌的培養(yǎng)中敘述不正確的是的是( )( )A.A.在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮pHpH、溫度和滲透壓等條件溫度和滲透壓等條件B.B

31、.在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行消毒和培養(yǎng)皿進行消毒C.C.若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的稀釋度保證待測樣品稀釋的稀釋度D.D.使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄【解析】【解析】選選B B。本題主要考查微生物培養(yǎng)和無菌操作的相關(guān)知。本題主要考查微生物培養(yǎng)和無菌

32、操作的相關(guān)知識。培養(yǎng)過程中，除營養(yǎng)條件要滿足需要外，還要考慮溫度、識。培養(yǎng)過程中，除營養(yǎng)條件要滿足需要外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件是否適宜；滅菌是使用強烈的理化因酸堿度和滲透壓等條件是否適宜；滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以，對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以，對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌而不是消毒；使用稀釋涂布平板法時要保證樣品稀釋行滅菌而不是消毒；使用稀釋涂布平板法時要保證樣品稀釋比例合適，這樣才會有更科學的數(shù)據(jù)；有的大腸桿菌會釋放比例合適，這樣才會有更科學的數(shù)據(jù)；有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴重癥狀，所以使用一種強烈的毒

33、素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴重癥狀，所以使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。止培養(yǎng)物的擴散。2.(20102.(2010全國卷全國卷)下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問題，請回答：下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問題，請回答：(1)(1)某細菌固體培養(yǎng)基的組成成分是某細菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KHKH2 2POPO4 4、NaNa2 2HPOHPO4 4、MgSOMgSO4 4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是_，碳源是，碳源是_，氮源是，氮源是_。已知只有能合成脲酶的細菌才能在

34、該。已知只有能合成脲酶的細菌才能在該培養(yǎng)基上生長，故該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基上生長，故該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。從同化作用類培養(yǎng)基。從同化作用類型上看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細菌屬于型上看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細菌屬于_。(2)(2)將少量細菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中，適宜條件下將少量細菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)，定時取樣測定菌體數(shù)目，以時間為橫坐標，以細菌數(shù)培養(yǎng)，定時取樣測定菌體數(shù)目，以時間為橫坐標，以細菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標，可得到細菌的目的對數(shù)為縱坐標，可得到細菌的_曲線。該曲線中以曲線。該曲線中以菌體數(shù)目的對數(shù)作為縱坐標的原因是菌體數(shù)目的對數(shù)作為縱坐標的原因是_。實驗室中，為。實驗室

35、中，為了獲得形態(tài)和生理特征一致的菌體，一般應(yīng)在了獲得形態(tài)和生理特征一致的菌體，一般應(yīng)在_期取材；期取材；在生產(chǎn)中，常搜集培養(yǎng)至在生產(chǎn)中，常搜集培養(yǎng)至_期的細菌用于次級代謝產(chǎn)物期的細菌用于次級代謝產(chǎn)物的提取。的提取?！窘馕觥俊窘馕觥勘绢}主要考查理解能力，考查微生物的培養(yǎng)。本題主要考查理解能力，考查微生物的培養(yǎng)。(1)(1)該培養(yǎng)基中，瓊脂為凝固劑，葡萄糖為碳源，尿素為氮源；該培養(yǎng)基中，瓊脂為凝固劑，葡萄糖為碳源，尿素為氮源；由于只有能合成脲酶的細菌才能在該培養(yǎng)基上生長，可以用來由于只有能合成脲酶的細菌才能在該培養(yǎng)基上生長，可以用來選擇出能夠合成脲酶的細菌，在功能上稱為選擇培養(yǎng)基；由于選擇出能夠合

36、成脲酶的細菌，在功能上稱為選擇培養(yǎng)基；由于其化學成分明確，故又稱為合成培養(yǎng)基；由于該培養(yǎng)基中存在其化學成分明確，故又稱為合成培養(yǎng)基；由于該培養(yǎng)基中存在著有機碳源葡萄糖，故可推測從同化作用類型上看，用該培養(yǎng)著有機碳源葡萄糖，故可推測從同化作用類型上看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細菌屬于異養(yǎng)型?；囵B(yǎng)的細菌屬于異養(yǎng)型。(2)(2)在恒定容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)微生物，定期取樣，然后在恒定容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)微生物，定期取樣，然后以時間為橫坐標，以細菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標，所得的曲線稱以時間為橫坐標，以細菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標，所得的曲線稱為微生物的群體生長曲線，以菌體數(shù)目的對數(shù)作為縱坐標的原為微生物的群體生長曲

37、線，以菌體數(shù)目的對數(shù)作為縱坐標的原因是菌體數(shù)目往往非常大，且變化率也很高，直接以菌體數(shù)目因是菌體數(shù)目往往非常大，且變化率也很高，直接以菌體數(shù)目為縱坐標不利于作圖。實驗室中，為了獲得形態(tài)和生理特征一為縱坐標不利于作圖。實驗室中，為了獲得形態(tài)和生理特征一致的菌體，一般應(yīng)在對數(shù)期取材；在生產(chǎn)中，常搜集培養(yǎng)至穩(wěn)致的菌體，一般應(yīng)在對數(shù)期取材；在生產(chǎn)中，常搜集培養(yǎng)至穩(wěn)定期的細菌用于次級代謝產(chǎn)物的提取。定期的細菌用于次級代謝產(chǎn)物的提取。答案：答案：(1)(1)瓊脂瓊脂 葡萄糖葡萄糖 尿素尿素 選擇選擇 異養(yǎng)型異養(yǎng)型(2)(2)群體生長群體生長 菌體數(shù)目往往非常大，且變化率也很高，以菌菌體數(shù)目往往非常大，且變

38、化率也很高，以菌體數(shù)目的對數(shù)為縱坐標有利于作圖體數(shù)目的對數(shù)為縱坐標有利于作圖 對數(shù)對數(shù) 穩(wěn)定穩(wěn)定3.(20113.(2011銀川模擬銀川模擬) )從自然界微生物中篩選某菌種的一般步從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣驟是：采集菌樣富集培養(yǎng)富集培養(yǎng)純種分離純種分離性能測定。性能測定。(1)(1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應(yīng)從培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應(yīng)從_環(huán)境中采集。環(huán)境中采集。(2)(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)

39、設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇_的培養(yǎng)基，并在的培養(yǎng)基，并在_條件下培養(yǎng)。條件下培養(yǎng)。(3)(3)接種前要對培養(yǎng)基進行接種前要對培養(yǎng)基進行_處理。在整個微生物的分離處理。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在和培養(yǎng)中，一定要注意在_條件下進行。條件下進行。(4)(4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的如圖是采用純化微生

40、物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的具體方法。效果圖，請分析接種的具體方法。獲得圖獲得圖A A效果的接種方法是效果的接種方法是_，圖，圖B B效果的接種方法是效果的接種方法是_。一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌。一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是落連成一片，最可能的原因是_，應(yīng)當怎樣操作才可避，應(yīng)當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？免此種現(xiàn)象？_。(5)(5)如果探究溫度對纖維素酶活性的影響，自變量是如果探究溫度對纖維素酶活性的影響，自變量是_，應(yīng)該保持應(yīng)該保持_等不變等不變( (至少答兩項至少答兩項) )?！窘馕觥俊窘馕觥?1)(1)篩

41、選菌種應(yīng)從適于目的菌種生長、繁殖的環(huán)境中篩選菌種應(yīng)從適于目的菌種生長、繁殖的環(huán)境中尋找，故培養(yǎng)噬鹽菌應(yīng)從高鹽環(huán)境中采集。尋找，故培養(yǎng)噬鹽菌應(yīng)從高鹽環(huán)境中采集。(2)(2)富集培養(yǎng)時培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件應(yīng)能促進目的菌的生長、繁富集培養(yǎng)時培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件應(yīng)能促進目的菌的生長、繁殖。殖。(3)(3)微生物的分離及培養(yǎng)中必須保證無菌，包括培養(yǎng)基的滅菌微生物的分離及培養(yǎng)中必須保證無菌，包括培養(yǎng)基的滅菌和操作過程的滅菌等。和操作過程的滅菌等。(4)(4)純化培養(yǎng)中接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前純化培養(yǎng)中接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前一種方法形成的菌落分布較均勻，后一種方法形成的菌落分一種方

42、法形成的菌落分布較均勻，后一種方法形成的菌落分布不均勻，先劃線的部分菌落密集甚至相連，后劃線的部分布不均勻，先劃線的部分菌落密集甚至相連，后劃線的部分菌落分布稀疏。菌落分布稀疏。(5)(5)探究溫度對酶活性的影響時，溫度為自變量，酶活性為因探究溫度對酶活性的影響時，溫度為自變量，酶活性為因變量，其他凡能影響酶活性的變量如底物和酶的用量、變量，其他凡能影響酶活性的變量如底物和酶的用量、pHpH、反應(yīng)時間等均為無關(guān)變量。反應(yīng)時間等均為無關(guān)變量。答案：答案：(1)(1)海灘等高鹽海灘等高鹽 (2)(2)以淀粉為惟一碳源以淀粉為惟一碳源 高溫高溫(3)(3)高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 無菌無菌(4)(4

43、)稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 平板劃線法平板劃線法 菌液濃度過高菌液濃度過高增大稀釋倍數(shù)增大稀釋倍數(shù)( (或培養(yǎng)過程被雜菌污染或培養(yǎng)過程被雜菌污染 嚴格無菌操作；或用嚴格無菌操作；或用接種針劃下一區(qū)域前接種針沒有滅菌接種針劃下一區(qū)域前接種針沒有滅菌 每劃一個新區(qū)域前都每劃一個新區(qū)域前都要對接種針進行滅菌處理要對接種針進行滅菌處理)()(原因與操作要對應(yīng)原因與操作要對應(yīng)) )(5)(5)溫度溫度 纖維素的量與濃度、反應(yīng)時間、纖維素的量與濃度、反應(yīng)時間、pHpH一、選擇題一、選擇題( (共共4 4小題，每小題小題，每小題2 2分，共分，共8 8分分) )1.1.配制的培養(yǎng)基成分是：纖維素粉、配制

44、的培養(yǎng)基成分是：纖維素粉、NaNONaNO3 3、NaNa2 2HPOHPO4 4、KHKH2 2POPO4 4、MgSOMgSO4 4、KClKCl、酵母膏、水解酪素，該培養(yǎng)基能使下面哪種微生、酵母膏、水解酪素，該培養(yǎng)基能使下面哪種微生物大量繁殖物大量繁殖( )( )A.A.酵母菌酵母菌B.B.自生固氮菌自生固氮菌C.C.各種細菌各種細菌D.D.纖維素分解菌纖維素分解菌【解析】【解析】選選D D。該培養(yǎng)基中加入了纖維素粉，而只有纖維素分。該培養(yǎng)基中加入了纖維素粉，而只有纖維素分解菌能利用纖維素。解菌能利用纖維素。2.2.用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時用平板劃線法或稀釋涂布平板法純

45、化大腸桿菌時( )( )可以用相同的培養(yǎng)基可以用相同的培養(yǎng)基都需要使用接種針進行接種都需要使用接種針進行接種都需要在火焰旁進行接種都需要在火焰旁進行接種都可以用來計數(shù)活菌都可以用來計數(shù)活菌A.A.B.B.C.C.D.D.【解析】【解析】選選C C。平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)。平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，故基，故正確；平板劃線法采用接種針進行操作，而稀釋涂正確；平板劃線法采用接種針進行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進行操作，故布平板法采用涂布器進行操作，故錯誤；純化時，要進行錯誤；純化時，要進行無菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培無菌操作，需要在火

46、焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，故養(yǎng)基，故正確；平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù)，故正確；平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù)，故錯誤。錯誤。3.3.細菌培養(yǎng)過程中，分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒細菌培養(yǎng)過程中，分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理方法，這些方法可依次用于消滅或殺滅哪等幾種不同的處理方法，這些方法可依次用于消滅或殺滅哪些部位的雜菌些部位的雜菌( )( )A.A.接種針、手、培養(yǎng)基接種針、手、培養(yǎng)基B.B.培養(yǎng)基、手、接種針培養(yǎng)基、手、接種針C.C.手、接種針、培養(yǎng)基手、接種針、培養(yǎng)基D.D.培養(yǎng)基、接種針、手培養(yǎng)基、接種針、手【解析】【解析】選選B B。高

47、壓蒸汽、酒精、火焰灼燒的處理方法可依次。高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒的處理方法可依次用于消滅或殺滅培養(yǎng)基、手、接種針等處的雜菌。用于消滅或殺滅培養(yǎng)基、手、接種針等處的雜菌。4.4.下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述，錯誤的是下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述，錯誤的是( )( )A.A.微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行消毒微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行消毒B.B.測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法C.C.分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D.D.分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中惟一的氮分離能分解尿素

48、的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中惟一的氮源源【解析】【解析】選選A A。微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行滅菌處理，要。微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行滅菌處理，要將所有的微生物殺死；當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表將所有的微生物殺死；當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；土壤面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；土壤中各類微生物的數(shù)量是不同的，為獲得不同類型的微生物，中各類微生物的數(shù)量是不同的，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進行分離，同時還應(yīng)當有針對性地提就需要按不同的稀釋度進行分離，同時還應(yīng)當有針對性地提供選擇培養(yǎng)的條件。供選擇培養(yǎng)的條件

49、。二、非選擇題二、非選擇題( (共共3 3小題，共小題，共4242分分) )5.(95.(9分分) )如圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程，如圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程，據(jù)此回答有關(guān)問題：據(jù)此回答有關(guān)問題：(1)(1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫熱泉要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫熱泉中尋找耐熱菌，這說明中尋找耐熱菌，這說明_。(2)(2)某同學根據(jù)需要，配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下，整某同學根據(jù)需要，配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下，整個實驗過程嚴格執(zhí)行無菌操作。個實驗過程嚴格執(zhí)行無菌操作。 如果將其中的纖維素粉換成如果將其中的纖維素粉

50、換成_，菌落數(shù)，菌落數(shù)_，即，即可說明選擇培養(yǎng)基的作用?？烧f明選擇培養(yǎng)基的作用。(3)(3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實驗宜采用實驗宜采用_法，原因是法，原因是_。【解析】【解析】(1)(1)因為纖維素分解菌與耐熱菌有不同的生活習性，因為纖維素分解菌與耐熱菌有不同的生活習性，生活在不同的環(huán)境中，故要根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求，生活在不同的環(huán)境中，故要根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。(2)(2)因為葡萄糖是纖維素水解的、能因為葡萄糖是纖維素水解的、能被微生物直接利用的有機小分子物

51、質(zhì)，所以如果將其中的纖維被微生物直接利用的有機小分子物質(zhì)，所以如果將其中的纖維素粉換成葡萄糖，纖維素分解菌及其他細菌會生長繁殖得更快，素粉換成葡萄糖，纖維素分解菌及其他細菌會生長繁殖得更快，故菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基。故菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基。(3)(3)因為稀釋涂布平板法要將因為稀釋涂布平板法要將菌液進行一系列的梯度稀釋，故該法可根據(jù)稀釋體積計算每克菌液進行一系列的梯度稀釋，故該法可根據(jù)稀釋體積計算每克樣品中的細菌數(shù)，而平板劃線法則不能這樣，所以本實驗宜采樣品中的細菌數(shù)，而平板劃線法則不能這樣，所以本實驗宜采用稀釋涂布平板法。用稀釋涂布平板法。答案：答案：(1)(1)根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境

52、的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找去尋找(2)(2)葡萄糖葡萄糖 明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)(3)(3)稀釋涂布平板稀釋涂布平板 平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計算每克平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計算每克樣品中的細菌數(shù)樣品中的細菌數(shù)6.(166.(16分分) )在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常常需要在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常常需要進行微生物的培養(yǎng)和計數(shù)。進行微生物的培養(yǎng)和計數(shù)。(1)(1)如圖是利用如圖是利用_法進行微生物接法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步種，把聚集的菌種逐步_分散到培分散到培養(yǎng)基的表面。養(yǎng)基的表面。(2)(2)分析下面培養(yǎng)基的配方

53、：分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNONaNO3 3、KHKH2 2POPO4 4、NaHNaH2 2POPO4 4、MgSOMgSO4 47H7H2 2O O、KClKCl、H H2 2O O。若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細。若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細菌，則應(yīng)除去上述菌，則應(yīng)除去上述_成分，并加入成分，并加入_，以補充，以補充_源。源。(3)(3)三位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)量。三位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)量。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為10106 6的培養(yǎng)基中，得到以下統(tǒng)計結(jié)果：甲同的培養(yǎng)基中，得到以下統(tǒng)計結(jié)果：甲同學涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是

54、學涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是236236和和260260，取平均值，取平均值248248；乙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是乙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是210210、240240和和250250，取，取平均值平均值233233；丙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是；丙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是2121、212212和和256256，取平均值，取平均值163163；在三位同學的統(tǒng)計中，只有一位同；在三位同學的統(tǒng)計中，只有一位同學的統(tǒng)計是正確的，指出另兩位同學的統(tǒng)計為什么不正確。學的統(tǒng)計是正確的，指出另兩位同學的統(tǒng)計為什么不正確。(4)(4)若在稀釋倍數(shù)為若在稀釋倍數(shù)為101

55、06 6的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為為233233，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是( (涂布平板時所用稀釋涂布平板時所用稀釋液的體積為液的體積為0.2mL)_0.2mL)_?！窘馕觥俊窘馕觥勘绢}考查微生物的培養(yǎng)和計數(shù)。圖示為用平板劃線本題考查微生物的培養(yǎng)和計數(shù)。圖示為用平板劃線法進行微生物接種，通過多次劃線將微生物分散；分解尿素法進行微生物接種，通過多次劃線將微生物分散；分解尿素的細菌是用尿素為氮源的異養(yǎng)微生物，大腸桿菌是異養(yǎng)微生的細菌是用尿素為氮源的異養(yǎng)微生物，大腸桿菌是異養(yǎng)微生物，給出的培養(yǎng)基缺少有機碳源和氮源；統(tǒng)計某一稀釋

56、度下物，給出的培養(yǎng)基缺少有機碳源和氮源；統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，一般要統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，一般要統(tǒng)計3 3個平板，再計算出平板菌落數(shù)個平板，再計算出平板菌落數(shù)的平均值，如果沒有操作上的失誤，這三個平板上的菌落數(shù)的平均值，如果沒有操作上的失誤，這三個平板上的菌落數(shù)應(yīng)該差別不太大；根據(jù)每克樣品中的菌株數(shù)應(yīng)該差別不太大；根據(jù)每克樣品中的菌株數(shù)= =某一稀釋度下平某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)板上生長的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)涂布平板時所用的稀釋涂布平板時所用的稀釋液的體積液的體積(mL)(mL)，每克菌液大約相當于一毫升。，每克菌液大約相當于一毫升。答案：答案：(1)(1)平板劃線平板劃線 稀釋稀釋(2)NaNO(2)NaNO3 3 尿素和葡萄糖尿素和葡萄糖 氮、碳氮、碳(3)(3)甲同學只涂布了兩個平板，實驗數(shù)據(jù)說服力不夠；丙同學甲同學只涂布了兩個平板，實驗數(shù)據(jù)說服力不夠；丙同學雖然涂布了三個平板，但其中一個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個雖然涂布了三個平板，但其中一個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠，說明操作過程出現(xiàn)錯誤，實驗數(shù)據(jù)缺乏正確性。相差太遠，說明操作過程出現(xiàn)錯誤，實驗數(shù)據(jù)缺乏正確性。(4)1.17(4)1.1710109 9 【方法技巧】【方法技巧】微生物實驗設(shè)計的常見要點微生物實驗設(shè)計的常見要點微生物的相關(guān)實驗設(shè)計，往往以微生物培養(yǎng)