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文檔簡介
1、免疫球蛋白IgM測定1檢驗?zāi)康闹笇?dǎo)本室工作人員規(guī)范操作本檢測項目,確保檢測結(jié)果的準確。2原理免疫透射比濁法抗免疫球蛋白 M抗體和樣本中的抗原形成抗原抗體復(fù)合物,由現(xiàn)凝集,進行透射比濁檢測。通過加入PEG可促使反應(yīng)迅速達到終點,可增加靈敏度,降低樣本中抗原過剩導(dǎo)致假陰性的風(fēng)險。3標(biāo)本要求3.1 使用新鮮血清,不使用血漿.3.2 在采集血液后2h分離血清.3.3 8h內(nèi)不能及時測定血清可存放于2-8 0C冰箱保存,3天后測定的血清置一150C200C冰凍保存,但冰凍血清只能復(fù)融一次.3.4 嚴重溶血或脂血的標(biāo)本不能作測定.4試齊1J4.1 試劑:上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司IgM試劑盒,國械注進 20
2、142405056YZB/GER 5724-2014)4.1.1 試劑組成R1:TRIS 緩沖液:20 mmol/l ,pH 8.0;氯化鈉:200 mmol/L ;PEG 3.6%;防腐劑和穩(wěn)定劑。R2:抗人免疫球蛋白 M抗體(羊):取決于滴度;TRIS緩沖液:20 mmol/l ;氯化鈉:150 mmol/L ;防腐劑4.1.2 試劑準備:試劑為即用式。4.1.3 試劑穩(wěn)定性與貯存:2-8 C下保存期限:見試劑標(biāo)簽上的有效期。機上穩(wěn)定期:90天。4.1.4 變質(zhì)指示:當(dāng)試劑有濁度時,表明有細菌污染則試劑不能使用。4.2 校準品:使用羅氏多項生化校準品提供的IgM校準品對自動分析儀進行校準4
3、.3 質(zhì)控品:使用正常值、病理值復(fù)合控制品5儀器AU2700 生化分析儀,羅氏 P800生化分析儀,西門子ADVIA-2400生化分析儀,東芝 TBA-120生化分析儀6操作步驟6.1 樣品的準備:將標(biāo)好號的樣品離心后放到儀器規(guī)定的位 置。6.2 試劑的檢測:儀器開機后,檢查各種試劑的位置,體積 等確認無誤后方可進行測定。6.3 項目基本參數(shù): 參見生化檢驗 AU2700生化分析儀,羅 氏P800生化分析儀,西門子ADVIA-2400生化分析儀,東芝 TBA-120生化分析儀項目測定參數(shù)。6.4 儀器操作步驟:參見生化檢驗 AU2700生化分析儀,羅氏 P800生化分析儀,西門子 ADVIA-
4、2400生化分析儀,東芝 TBA-120生化分析儀操作規(guī)程。7質(zhì)量控制在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進行分析,以 2S為質(zhì)控警告限,3S為失控限,繪 制質(zhì)控圖,判斷是否在控。8計算方法以IgM復(fù)合校準品校準儀器后,在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi),儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果,以 g/l報告。9參考值成人0.4-2.3 g/L(40-230 mg/dL ; 0.4-2.4 umol/L)兒童及青少年0-1歲0.00-1.45 g/L(0-145 mg/dL; 0.00-1.49 umol/L)1-3歲0.19-1.46g/L(19-146 mg/dL ;0.19-1.50umo
5、l/L)4-6歲0.24-2.10g/L(24-210 mg/dL ;0.25-2.16umol/L)7-9歲0.31-2.08g/L(31-208 mg/dL ;0.32-2.14umol/L)10-11 歲0.31-1.79g/L(31-179mg/dL;0.32-1.84umol/L)12-13 歲0.35-2.39g/L(35-239 mg/dL ;0.36-2.46umol/L)14-15 歲0.15-1.88g/L(15-188 mg/dL ;0.15-1.94umol/L)16-19 歲0.23-2.59g/L(23-259 mg/dL ;0.24-2.67umol/L)我室的參
6、考范圍:0.35-2.6 g/l10臨床意義:正常的IgM由10個重以鏈和10個k或入輕鏈組成,IgM 分子中的k或入輕鏈總是相等的。還有1個J鏈將所有的以鏈連接在一起,簡言之,IgM與IgG相比,是五聚體的結(jié)構(gòu)。 IgM的相對分子量為900000,在免疫球蛋白中最大,但其只 占血漿免疫球蛋白的 6%。在感染后,IgM是最早由現(xiàn)的特異性抗體,能激活補體系統(tǒng)協(xié)助殺滅細菌。但是和IgG相比,在感染控制后IgM水平就會較快地下降。臨床上比較 IgG及IgM的滴度來鑒別急性 與慢性感染。如以IgM為主,感染是急性的;以IgG為主, 感染為慢性的(如:風(fēng)疹、病毒性肝炎) 。多克隆IgM水平升高見于病毒、細菌、和寄生蟲感染,肝病,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,硬皮病,膽囊纖維化,和海洛因吸 毒等。單克隆IgM水平升高見于 Waldenstrom 巨球蛋白血癥。IgM流失增加見于腸道病和燒傷的蛋白流失。IgM的合成減低見于獲得性及先天性免疫缺陷綜合
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