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1、精品文檔精品文檔姓名*學(xué)號(hào) *科目 動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)同組者 *、* 日期 *家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹? .學(xué)習(xí)直接測(cè)定家兔動(dòng)脈血壓的急性實(shí)驗(yàn)方法。2 .觀察神經(jīng)、體液因素對(duì)心血管活動(dòng)的影響。【實(shí)驗(yàn)原理】-主動(dòng)脈在正常生理狀況下,人和高等動(dòng)物的動(dòng)脈血壓( arterial blood pressure , ABP)是相對(duì)穩(wěn)定的。這種相對(duì)穩(wěn)定性是通過神經(jīng)和體液因素的調(diào)節(jié)而實(shí)現(xiàn)的,其中以頸總動(dòng)脈弓壓力感受性反射尤為重要。此反射既可使升高的血壓下降,又可使降低的血壓升高,故有血壓緩沖反射之稱謂。家兔的主動(dòng)脈神經(jīng)在解剖上獨(dú)成一支,易于分離與觀察其作用。本實(shí)驗(yàn)是應(yīng)用液導(dǎo)系統(tǒng)直接測(cè)定動(dòng)脈血壓。
2、即由動(dòng)脈插管與壓力傳感器連通,其內(nèi)充滿抗凝液體,構(gòu)成液導(dǎo)系統(tǒng),將動(dòng)脈插管插入動(dòng)脈內(nèi),動(dòng)脈內(nèi)的壓力及其變化,可通過封閉的 液導(dǎo)系統(tǒng)傳遞到壓力傳感器,并由計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)記錄下來?!緦?shí)驗(yàn)材料】1 .材料:家兔。2 .器具:兔體手術(shù)臺(tái),常用手術(shù)器械,剪毛剪,解剖刀,咬骨鉗,止血鉗,氣管插管,動(dòng) 脈插管,三通管,動(dòng)脈夾,壓力傳感器,計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng),照明燈,注射器,棉花,棉 線,銀絲電極(雙電極)。3 .試齊J: 20 %氨基甲酸乙酯,4 %檸檬酸鈉溶液,肝素鈉溶液,生理鹽水。【實(shí)驗(yàn)步驟】(一)實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備1 .打開計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng), 接通壓力傳感器。從控制界面的菜單 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”中選取 循環(huán)實(shí)驗(yàn)” 的家兔
3、血壓的調(diào)節(jié)”條,或者直接將相應(yīng)采集通道的模式調(diào)整為壓力”模式。使圖線顯示壓力讀數(shù)。2 .連接液導(dǎo)系統(tǒng)并制壓將壓力傳感器的下方支管,通過輸液管連接三通管, 再連接動(dòng)脈插管。上側(cè)管供制壓時(shí)排除管內(nèi)空氣使用。先用裝有20m14%檸檬酸鈉的注射器, 通過三通管向連接動(dòng)脈插管的輸 液管內(nèi)推注,使之充滿液體(不要使動(dòng)脈插管高過壓力傳感器的上方支管)后,再用止血鉗夾住動(dòng)脈插管端的輸液管。然后繼續(xù)向三通管內(nèi)推注,直至充滿壓力傳感器的上方支管,并用塞子塞住(注意:液導(dǎo)系統(tǒng)內(nèi)不可有氣泡)。繼續(xù)向三通管內(nèi)推注,同時(shí)觀察顯示器上壓力的變化。當(dāng)加壓到 120mmHg (1mmHg=1.3310 2Pa)左右即可關(guān)閉三通
4、管。觀察壓力是否 變化,如果壓力下降,則需要檢查液導(dǎo)系統(tǒng)的漏液原因,并重新制壓。調(diào)節(jié)血壓顯示器的靈敏度,使30130mmHg的變化都能在顯示器上明顯地反映出來。將動(dòng)脈插管端的導(dǎo)管內(nèi)充 滿肝素鈉溶液。(二)動(dòng)物準(zhǔn)備1. 麻醉動(dòng)物:取一只家兔,稱重并剪去耳緣靜脈上的被毛。用 20ml 注射器由耳緣靜脈緩慢推注20%氨基甲酸乙酯(5g/1kg體重)進(jìn)行麻醉。2. 固定與剪毛:將動(dòng)物背位固定于手術(shù)臺(tái)上,用剪毛剪將頸部手術(shù)野的被毛剪去,即可進(jìn)行手術(shù)。(三)手術(shù)1. 切開皮膚:一手的拇指和食指按住家兔頸部?jī)蓚?cè),另一只手持手術(shù)刀,在緊靠喉嚨下緣,沿頸部正中線作一長(zhǎng)57cm 的皮膚切口。2. 分層分離肌肉:持
5、止血鉗輕輕提起少許氣管正上方的肌肉,然后用止血鉗將肌肉縱向打開一個(gè)小口, 用止血鉗將創(chuàng)口擴(kuò)大, 直至看見肌肉層下方的氣管。 用止血鉗向兩側(cè)拉開肌肉,暴露氣管。3. 氣管插管:先在甲狀腺后方的氣管背面穿過一條棉線,并打一活結(jié)備用,然后在氣管上方作一倒“磔1切口,將與氣管口徑相近的氣管插管,沿向心方向插入氣管,并扎緊備用線,將線固定于氣管插管的分叉處,以防氣管插管松脫。4. 分離頸總動(dòng)脈、神經(jīng):家兔頸部的神經(jīng)、頸總動(dòng)脈被結(jié)締組織膜包在一起,形成血管神經(jīng)束, 位于氣管兩側(cè)。 用彎頭玻璃分針輕輕劃開局部結(jié)締組織束膜, 仔細(xì)辨認(rèn) 3 種神經(jīng)與頸總動(dòng)脈:頸總動(dòng)脈呈紅色,有波動(dòng),壁有較強(qiáng)的彈性;迷走神經(jīng)最粗
6、,有較好的韌性,色潔白,一般位于外側(cè);交感神經(jīng)較細(xì),略呈灰色,一般位于內(nèi)測(cè);主動(dòng)脈神經(jīng)最細(xì),一般位于兩神經(jīng)之間。在一側(cè)頸總動(dòng)脈下穿線,打一活結(jié)備用,分離同側(cè) 3 根神經(jīng): 用一玻璃分針將3 根神經(jīng)挑起, 向外拉, 使 3 根神經(jīng)分開, 用另一玻璃分針沿縱向先分開最細(xì)的 2 條神經(jīng) (頸減壓神經(jīng)和頸交感神經(jīng)) ,在分離最粗的神經(jīng)(頸迷走神經(jīng)) ,然后在 3 根神經(jīng)下分別穿2條線分別打活結(jié)備用;在對(duì)側(cè)分離出 23cm 長(zhǎng)的頸總動(dòng)脈,穿 2 條線,分別打活結(jié),將2條線分別拉至分離出的動(dòng)脈兩端備用。5. 動(dòng)脈插管:首先用注射器吸1-2ml 生理鹽水,再吸100ul 肝素鈉溶液, 從耳緣靜脈注入肝素鈉溶
7、液,以防凝血。然后在一側(cè)動(dòng)脈行動(dòng)脈插管術(shù)以記錄血壓。方法如下:將動(dòng)脈遠(yuǎn)心端的備用線盡可能靠頭端結(jié)扎(務(wù)必扎緊,以防漏血) ,然后在另一備用線的向心端, 用動(dòng)脈夾夾閉。 輕輕提起動(dòng)脈頭端的結(jié)扎線, 用銳利的眼科剪在靠近扎線的稍后方,沿向心方向斜向剪開動(dòng)脈上壁。另一只手將準(zhǔn)備好的動(dòng)脈插管,順勢(shì)輕輕推進(jìn)6-8mm ,用備用線將動(dòng)脈聯(lián)通進(jìn)入的插管扎緊, 并將余線系在插管的固定側(cè)支上, 以免滑脫。 輕輕取下向心端動(dòng)脈夾, 可見動(dòng)脈血與插管內(nèi)液體混合, 血液在小管內(nèi)搏動(dòng)。 再取下通向壓力感受器的止血鉗,此時(shí)顯示器上出現(xiàn)血壓的波動(dòng)曲線?!緦?shí)驗(yàn)觀察及結(jié)果】實(shí)驗(yàn)中所用到的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重2.6公斤,注射麻醉劑的量為
8、 13ml 。( 1 )觀察正常血壓曲線: 調(diào)節(jié)掃描速度與增益,可明顯地觀察到心室射血與主動(dòng)脈回縮形成的壓力變化與收縮、 舒張壓的度數(shù)。 有時(shí)可以觀察到血壓曲線隨呼吸變化, 心搏為一級(jí)波,呼吸波為二級(jí)波。然后將掃面速度調(diào)慢,觀察正常血壓曲線。呼吸波心臟跳動(dòng) IF'hWA/WWVWAA/WAA/WWWW,-rn圖1 正常血壓曲線結(jié)果分析:此時(shí)觀察到家兔血液波動(dòng)的收縮壓約為100mmHg,舒張壓約為80mmHg。由于插管處血液輕微滲漏,可能會(huì)使血壓的值略有降低。在血壓曲線上,可清楚分辨心臟跳動(dòng)波 和呼吸波。(2)刺激迷走神經(jīng): 使刺激輸出端連接保護(hù)電極,輕輕提起迷走神經(jīng)上的備用線,小心地
9、將神經(jīng)置于保護(hù)電極之上。紀(jì)錄對(duì)照血壓曲線后,再用中等強(qiáng)度的連續(xù)電脈沖信號(hào)通過保護(hù) 電極刺激神經(jīng)。血壓出現(xiàn)明顯下降后即可停止刺激 (如果血壓下降很快、很低,應(yīng)立即停止 刺激),并待血壓恢復(fù)。圖2刺激迷走神經(jīng)對(duì)血壓的影響結(jié)果分析:刺激迷走神經(jīng)后,血壓迅速下降, 且頻率變慢,說明迷走神經(jīng)具有減壓以及降低 心臟活動(dòng)的作用。停止刺激后,血壓漸漸恢復(fù)到初始值。(3)分別刺激迷走神經(jīng)中樞端和外周端: 雙結(jié)扎迷走神經(jīng)后(務(wù)必扎緊),從兩結(jié)扎線之間剪斷神經(jīng)。記錄對(duì)照血壓后,同法分別刺激神經(jīng)的中樞端和外周端, 觀察并記錄血壓變化。NWWWA/WxA/WWWVWW 而-100.-00.L IUU, 2圖4 刺激迷走
10、神經(jīng)外周端對(duì)血壓的影響結(jié)果分析:刺激迷走神經(jīng)中樞端與外周端都能引起減壓反射。是因?yàn)椋好宰呱窠?jīng)為自主神經(jīng),刺激外周端時(shí),能夠引起效應(yīng)器官的反應(yīng),如血壓降低、心率變慢;刺激中樞端時(shí),也可以 通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)后,傳至外周端,產(chǎn)生效應(yīng)。(4)刺激交感神經(jīng): 用同樣的方法刺激交感神經(jīng),觀察血壓曲線是否有變化。結(jié)果分析:在實(shí)驗(yàn)過程中,無論如何刺激交感神經(jīng),血壓曲線都無明顯變化。原因:刺激交 感神經(jīng)使心臟的活動(dòng)加強(qiáng),血壓應(yīng)該有一定程度上升,然而交感神經(jīng)對(duì)血壓進(jìn)行的是微調(diào), 變化并不明顯,因此很難記錄到血壓曲線的變化。在實(shí)驗(yàn)中,并未剪斷主動(dòng)脈神經(jīng),分別刺激中樞端和外周端。(5)刺激主動(dòng)脈神經(jīng)(減壓神經(jīng)):用同
11、樣的方法刺激主動(dòng)脈神經(jīng),觀察血壓曲線是否有 變化。結(jié)果分析:在實(shí)驗(yàn)過程中,無論如何刺激主動(dòng)脈神經(jīng),血壓曲線都無明顯變化,說明刺激的 并非主動(dòng)脈神經(jīng),或主動(dòng)脈神經(jīng)受到了損壞,神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)受到阻斷,失去了其生理活性。 經(jīng)查閱資料得知:刺激主動(dòng)脈神經(jīng)會(huì)導(dǎo)致血壓下降。原因:當(dāng)電刺激主動(dòng)脈神經(jīng)時(shí):主動(dòng)脈 神經(jīng)傳入沖動(dòng)增多, 使心迷走中樞興奮、 心交感中樞抑制、縮血管中樞抑制,使迷走神經(jīng)傳 出沖動(dòng)增加,交感神經(jīng)傳出沖動(dòng)減少,而至心率減慢、心收縮力減弱、小靜脈舒張,回心血 量減少,心輸出量減少,外周阻力降低,最終導(dǎo)致血壓下降。由于刺激完整的主動(dòng)脈神經(jīng),血壓曲線無明顯變化,在實(shí)驗(yàn)中,并未剪斷主動(dòng)脈神經(jīng), 分
12、別刺激中樞端和外周端。后來得知:刺激整體主動(dòng)脈神經(jīng),血壓曲線無明顯變化,并不代表分別刺激中樞端和外周端,血壓曲線不會(huì)出現(xiàn)變化。很遺憾,實(shí)驗(yàn)結(jié)果缺少了部分實(shí)驗(yàn)結(jié) 果。(6)閉氣:紀(jì)錄對(duì)照血壓曲線后,用棉花堵住氣管插管的兩個(gè)開口,觀察并記錄血壓曲線 變化。當(dāng)血壓明顯上升時(shí),打開氣管插管的開口,并記錄血壓的恢復(fù)過程。AAA/VWVWWVWV-|可-100.-eo.結(jié)果分析:的原因?yàn)?阻塞呼吸,圖5 O2含量減少對(duì)血壓的影響阻塞呼吸后,血壓雖略有升高,且出現(xiàn)了血壓的周期性搏動(dòng)。分析出現(xiàn)這一現(xiàn)象阻塞呼吸后,血液中O2的含量下降,CQ的含量增加,*導(dǎo)致血壓升高。由于家兔呼吸困難,身體出現(xiàn)規(guī)律性掙扎,因此對(duì)
13、血壓造成了周期性的影響。(7)生理鹽水對(duì)血壓的影響:紀(jì)錄對(duì)照血壓曲線后,用20ml注射器,從而緣靜脈注入15-20ml圖6注射生理鹽水后血壓的變化結(jié)果分析:注射生理鹽水后血壓有一定程度的升高,過一段時(shí)間后恢復(fù)到正常水平。原因?yàn)?注射大量生理鹽水后,血管內(nèi)液體的量增加,循環(huán)血量增加,血壓出現(xiàn)一定程度的上升,刺激壓力感受器,引起減壓反射,使血壓最終恢復(fù)到正常水平。(8)按壓頸動(dòng)脈竇:紀(jì)錄對(duì)照血壓曲線后,用手指按壓頸動(dòng)脈竇(下頜下方內(nèi)側(cè)),觀察并記錄血壓變化。當(dāng)血壓明顯下降時(shí),則停止按壓,待血壓恢復(fù)。(如果血壓反而升高,說明按壓的是血管,需要重新尋找按壓位置)。結(jié)果分析:按壓頸動(dòng)脈竇后,血壓由正常狀
14、態(tài)下的收縮壓100mmHg,舒張壓為80mmHg,下降到收縮壓80mmHg以下,舒張壓60mmHg以下。是因?yàn)椋涸谕饨鐗毫Υ碳は?,頸動(dòng)脈 竇壓力感受器感受到壓力的上升,并引起減壓反射,致使血壓降低。解除外在壓力后血壓逐漸恢復(fù)到正常值。(9)夾閉對(duì)側(cè)頸總動(dòng)脈:輕輕提起對(duì)側(cè)完好頸總動(dòng)脈上的備用線,用棉線結(jié)扎(于結(jié)扎前紀(jì)錄動(dòng)脈通常時(shí)的血壓曲線),觀察并記錄血壓變化。結(jié)果分析:結(jié)扎一側(cè)頸總動(dòng)脈后,動(dòng)脈中的血量減少,血壓降低,導(dǎo)致同側(cè)的頸動(dòng)脈竇壓力感受器感受到的壓力減小,引起增壓反射,導(dǎo)致家兔血壓升高:由正常狀態(tài)下的收縮壓 100mmHg,舒張壓80mmHg,升高到收縮壓 120mmHg,舒張壓100m
15、mHg。一段時(shí)間后, 收縮壓和舒張壓都有所降低,但由于是對(duì)頸總動(dòng)脈進(jìn)行的不可回復(fù)性結(jié)扎,血壓恢復(fù)穩(wěn)定后,仍然略高于最初血壓,在接下來的實(shí)驗(yàn)中,初始值會(huì)受到一定程度的影響。【注意事項(xiàng)】1 .注射時(shí)注意:先從耳緣靜脈盡可能遠(yuǎn)心端注射(第一次注射不成功時(shí),可稍向近心一些 注射。注射時(shí)速度要緩慢,并隨時(shí)觀察動(dòng)物情況。當(dāng)動(dòng)物四肢松軟、呼吸變深變慢、角膜反 應(yīng)遲鈍時(shí),表明動(dòng)物已被麻醉,即可停止注射。2 .手術(shù)時(shí),注意切口不可偏離氣管上方,不可橫向剪斷肌肉,以免造成血管斷裂而出血。切口也不要過于擴(kuò)大,以免造成氣胸。3 .氣管插管時(shí),切勿損傷甲狀腺及其血管,否則會(huì)出血不止。4 .分離神經(jīng)、頸總動(dòng)脈時(shí),要小心,避免將神經(jīng)、血管弄斷。5 .在動(dòng)脈上壁剪開口時(shí),不可只剪開血管外包膜,也切勿剪斷整個(gè)動(dòng)脈,剪口的大小約為 管徑的一半。6 .動(dòng)脈插管時(shí),插管應(yīng)與動(dòng)脈血管的方向一致,以防止插管尖端扎破動(dòng)脈管壁。如果手感
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