拉米夫定聯(lián)合抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子對(duì)慢乙肝療效及免疫功能影響的觀察

1、拉米夫定聯(lián)合抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子對(duì)慢乙肝療效及免疫功能影響的觀察         09-09-18 15:39:00     編輯：studa20                      作者：黎琮毅 涂燕云 方健強(qiáng) 邱琦 【摘要】  目的 觀察拉米

2、夫定聯(lián)合抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子治療慢性乙型病毒性肝炎的療效及對(duì)免疫功能的影響。方法 將60例慢乙肝患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，各30例,兩組均予拉米夫定100mg每日早晨空腹頓服1年,治療組加用抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子4ml肌肉注射,療程6個(gè)月。檢測(cè)治療前及治療后3個(gè)月、6個(gè)月、1年后兩組患者的ALT水平及HBeAg、HBVDNA、淋巴細(xì)胞亞群。結(jié)果 治療3個(gè)月、6個(gè)月、1年后,治療組的HBVDNA陰轉(zhuǎn)率和ALT復(fù)常率均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),外周血CD4亞群水平上調(diào)，CD4/CD8比值趨于正常,與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療1年后，治療組HBVYMDD變異的發(fā)生

3、率低于對(duì)照組。結(jié)論 拉米夫定和抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子聯(lián)合治療慢性乙型肝炎療效顯著,提高了機(jī)體的免疫能力，且療效持久。 【關(guān)鍵詞】  慢性乙型肝炎 淋巴細(xì)胞亞群 拉米夫定 抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子【Abstract】  Objective  To observe the effect of combined application of Lamivudine and anti-HBV placenta transfer factor in treating patients with chronic hepatitis B and its influence on immun

4、ity. Methods  60 patients were enrolled and randomized into two groups：The treated group (30 cases) and the control group (30 cases). Both groups received Lamivudine 100mg daily for 12 month and treat group combined with anti-HBV placenta transfer factor 4mg daily for 6 month. Both groups were

5、received 3 month and 6 month and 12 month treatment. ALT, HBeAg, HBVDNA,T-cell subset were evaluated. Results  After 3 month and 6 month and 12 month treatment,the negative rate of serumHBVDNA and ALT normalization rate in treated group were than in control group(P0.05).CD4 T-cell leves increas

6、ed and CD4/CD8 became normal in treated group，and there significant difference between treat and control groups(P0.05). the differentiation rate of HBVYMDD in treated group were than in control group after 12 month. Conclusions  Lamivudine and anti-HBV placenta transfer factor combination can s

7、ignificantly treat patients with chronic hepatitis B and enhance body immune level for a long time.    【Key words】  Chronic Hepatitis B  T-cell subset  Lamivudine  Anti-HBV placenta transfer factor    慢性乙型肝炎（以下簡(jiǎn)稱(chēng)慢乙肝）是指人感染乙型肝炎病毒（HBV）后，病毒持續(xù)6個(gè)月仍未被清除的常見(jiàn)傳

8、染病。慢乙肝的發(fā)病機(jī)制目前公認(rèn)與乙型肝炎病毒感染有直接關(guān)系,多數(shù)學(xué)者還認(rèn)為與機(jī)體調(diào)節(jié)功能低下、感染乙肝后出現(xiàn)免疫調(diào)節(jié)功能紊亂,導(dǎo)致肝損害有關(guān)1。目前廣為應(yīng)用的抗病毒藥拉米夫定是我國(guó)和全球被批準(zhǔn)用于治療慢性乙型肝炎的第1種口服藥，其作用靶位是抑制乙型肝炎病毒基因組（HBVDNA）聚合酶的活性；抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子注射液是一種新型特異性免疫調(diào)節(jié)劑，以HBVM-Ab陽(yáng)性胎盤(pán)為原材料提取，即傳統(tǒng)中藥紫河車(chē)中提取。由于目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)滿(mǎn)意的治療方法和特效藥物抑制、殺滅乙肝病毒，作者應(yīng)用拉米夫定聯(lián)合抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子注射液治療慢性乙型肝炎并進(jìn)行隨訪觀察。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。   

9、1  臨床資料    1.1  病例選擇  60例慢性乙型肝炎患者均為作者所在兩家醫(yī)院肝膽內(nèi)科門(mén)診或住院患者，年齡1865歲，均符合我國(guó)2005年制訂的病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）HBsAg陽(yáng)性，HBeAg陽(yáng)性或陰性，HBVDNA陽(yáng)性；2ULNALT10ULN；YMDD變異株檢測(cè)陰性；無(wú)HAV、HCV、HDV、HEV、HIV重疊感染；不伴有失代償性肝硬化；無(wú)明顯的心、腦、腎病史，無(wú)精神病和糖尿病史，無(wú)酗酒和吸毒史；非妊娠及哺乳期婦女；半年內(nèi)未使用過(guò)抗病毒藥及免疫調(diào)節(jié)劑、糖皮質(zhì)激素。隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，每組30例。治療組30例中,男1

10、8例,女12,年齡1665歲（平均33歲）；對(duì)照組30例中,男14例,女16例,年齡1568歲（平均32.8歲）。兩組患者均有相關(guān)輕重不一的自覺(jué)癥狀。兩組患者性別、年齡、病程，以及治療前平均HBVDNA含量、HBeAg陽(yáng)性陰性例數(shù)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，具有可比性。詳見(jiàn)表1。表1  兩組患者病程、平均HBVDNA含量、HBeAg陽(yáng)性陰性情況比較    1.2  血清檢查  （1）HBVM：均采用ELISA法，應(yīng)用鄭州博賽酶標(biāo)檢查儀。（2）HBVDNA：用美國(guó)ABI Prisa 7000型基因擴(kuò)增儀,深圳匹基生物工程股份有限公

11、司試劑盒,采用熒光定量PCR檢測(cè)HBVDNA定量，以103copies/ml定為陰性,每月檢測(cè)1次。（3）肝功能：采用比色法，檢測(cè)儀器為美國(guó)杜邦德林公司Dimension全自動(dòng)生化分析儀器，試劑為配套DADE BEARING BC4148,每月檢測(cè)1次。（4）T淋巴細(xì)胞：檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群的流式細(xì)胞儀和免疫熒光標(biāo)記試劑均為美國(guó)BD公司產(chǎn)品，分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），取患者靜脈血5ml,肝素抗凝，按常規(guī)方法用淋巴細(xì)胞分層液分離PBMC，用Hank液洗滌3次，將PBMC濃度調(diào)整到1X109/ml，測(cè)定T淋巴細(xì)胞亞群按照說(shuō)明書(shū)操作,每月檢測(cè)1次。    1.3&

12、#160; 治療方法  治療組給予拉米夫定(英國(guó)葛蘭素史克公司)100mg口服,1次/d,療程1年，同時(shí)給予抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子（希百壽藥業(yè)有限公司）4ml肌肉注射,1次/d，療程半年;對(duì)照組僅給予拉米夫定100mg口服,1次/d,療程1年。兩組每天都口服一般劑量的維生素1和,不給其他治療肝病藥物。兩組均治療3個(gè)月、6個(gè)月、1年后進(jìn)行觀察對(duì)照。    1.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理  采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料采用2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢測(cè)。HBVDNA定量結(jié)果進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換。    2 

13、; 結(jié)果    2.1  兩組治療前后ALT變化比較  見(jiàn)表2。表2  兩組治療前后ALT變化比較 注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。    2.2  兩組治療后乙型肝炎病毒學(xué)指標(biāo)比較  見(jiàn)表3。表3  兩組治療6個(gè)月、12個(gè)月后乙型肝炎病毒學(xué)指標(biāo)比較 注：與對(duì)照組比較治療,*P<0.05。    2.3  兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群比較  見(jiàn)表4。 表4  兩組治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化比較注：與

14、對(duì)照組比較治療，*P<0.05。    2.4  兩組治療后HBVYMDD變異比較  見(jiàn)表5。兩組HBVYMDD變異情況比較，1年后治療組變異率優(yōu)于對(duì)照組。表5  兩組HBVYMDD變異情況比較     09-09-18 15:39:00     編輯：studa20    3  討論    慢乙肝是一種全球分布，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的常見(jiàn)傳染病。HBV感染人體后可導(dǎo)致肝組織持續(xù)性免疫

15、性損害,部分甚至?xí)葑優(yōu)橹匕Y肝炎、肝硬化、肝癌。臨床實(shí)踐證明,治療慢乙肝要采取綜合治療措施,包括抗病毒、調(diào)節(jié)免疫、保護(hù)肝細(xì)胞和阻止肝纖維化等。其中打破免疫耐受提高對(duì)HBV的特異性免疫調(diào)節(jié)是免疫清除的關(guān)鍵。治療慢乙肝抗病毒和調(diào)節(jié)免疫是最關(guān)鍵的治療措施，而慢性乙型肝炎患者體內(nèi)病毒能持續(xù)存在，主要與T淋巴細(xì)胞免疫功能不全有關(guān)2。人體外周T淋巴細(xì)胞由不同的亞群組成,T淋巴細(xì)胞是宿主抗病毒、抗腫瘤免疫反應(yīng)中起主導(dǎo)作用的免疫活性細(xì)胞,構(gòu)成了免疫系統(tǒng)的主要部分。人類(lèi)外周T淋巴細(xì)胞分為CD+4和CD+8兩個(gè)亞群,CD+4代表輔助性T淋巴細(xì)胞,CD+8代表抑制性T淋巴細(xì)胞,CD+4和CD+8相互協(xié)同和抑制,維持

16、機(jī)體的平衡。慢性肝炎患者常存在細(xì)胞免疫功能紊亂，CD+8、細(xì)胞明顯增加,而且隨著病情由輕向中向重發(fā)展,CD+8、細(xì)胞的百分率也隨之上升，CD+4亞群下調(diào)，CD+8亞群上調(diào)，這些可導(dǎo)致機(jī)體抗病毒能力下降，免疫功能紊亂、HBV持續(xù)存在和大量復(fù)制與肝細(xì)胞不斷破壞。    拉米夫定抗HBV作用是通過(guò)抑制DNA聚合酶,減少HBVDNA的合成和人類(lèi)免疫缺陷病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶活性,而不損傷細(xì)胞組織線粒體,從而抑制HBVDNA復(fù)制,降低HBVDNA水平,改善肝臟組織病變3。但由于拉米夫定對(duì)肝細(xì)胞核內(nèi)共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(ccc DNA)無(wú)抑制作用,故部分患者停藥后易反彈,其耐藥性也隨著

17、臨床治療時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。耐藥性產(chǎn)生的原因是原感染的病毒出現(xiàn)變異,特別是HBV的YMDD基序和氨基酸變異4。目前認(rèn)為,打破免疫耐受、提高對(duì)HBV的特異性免疫功能是免疫清除的關(guān)鍵。根據(jù)HBV感染的慢性炎癥的發(fā)病機(jī)制,試用免疫調(diào)節(jié)劑改善提高病體免疫功能,進(jìn)而抑制清除體內(nèi)HBV。國(guó)內(nèi)徐菊芬5使用拉米夫定聯(lián)合雙環(huán)醇片抗病毒和提高免疫功能治療慢性乙型肝炎,治療組總有效率88.24%,高于對(duì)照組的78.0%（P<0.05）。我國(guó)近年研制的新型免疫調(diào)節(jié)劑抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子,從抗HBs陽(yáng)性胎盤(pán)內(nèi)提取制成。胎盤(pán)即為我國(guó)的傳統(tǒng)中藥紫河車(chē)，其味甘、咸、溫,入肺、肝、腎經(jīng),具有補(bǔ)氣養(yǎng)血、補(bǔ)腎益精之功效。現(xiàn)代藥理

18、研究表明,紫河車(chē)具有抗感染、增強(qiáng)機(jī)體抵抗力作用,對(duì)四氯化碳及乙硫基丁氨酸引起的肝脂肪沉著,有明顯的抑制作用6。紫河車(chē)內(nèi)含細(xì)胞因子包括胎盤(pán)免疫調(diào)節(jié)因子、胎盤(pán)免疫調(diào)節(jié)胎、干擾素和白細(xì)胞揭素等，具有免疫調(diào)節(jié)作用7。馬布仁等8證實(shí)從胎盤(pán)中也可提取出類(lèi)似轉(zhuǎn)移因子的小分子活性多肽。臨床研究9已經(jīng)證實(shí)：抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子可以調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答水平。鑒于以上情況,作者試將抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子和拉米夫定聯(lián)合應(yīng)用,抗病毒和調(diào)節(jié)免疫雙管齊下,取得甚為理想效果。治療1年后，HBVDNA陰轉(zhuǎn)率達(dá)到93.33%,上升的ALT有明顯的下調(diào)。T淋巴細(xì)胞亞群分析研究表明，聯(lián)合治療6個(gè)月和12個(gè)月后，HBV慢性感染時(shí)明顯下降的淋巴

19、細(xì)胞亞群CD+4和上升的CD+8逐漸正?；蚪咏＃瑑烧弑戎第呌谡?，明顯優(yōu)于單獨(dú)使用拉米夫定（P<0.05）。    本研究結(jié)果表明，拉米夫定和抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子聯(lián)合治療慢乙肝6個(gè)月后，治療組HBVDNA陰轉(zhuǎn)率達(dá)到90.0%，明顯高于對(duì)照組的56.7%；治療組HBeAg陰轉(zhuǎn)率達(dá)57.1%，明顯高于對(duì)照組的17.4%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在血清病毒指標(biāo)陰轉(zhuǎn)、T淋巴細(xì)胞亞群、ALT復(fù)常等方面均優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05）。停用抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子后至1年時(shí)，HBVDNA陰轉(zhuǎn)率等仍顯著優(yōu)于對(duì)照組，這與抗乙肝胎盤(pán)轉(zhuǎn)移因子有效提高機(jī)體的免疫能力，抑制HBVDNA復(fù)制，對(duì)乙肝病毒(HBV)具有特異性免疫活性有關(guān)10，并且能更持久的抑制和殺滅乙肝病毒，防止了反