正交試驗(yàn)法優(yōu)選復(fù)方丹參片提取工藝

1、優(yōu)選復(fù)方丹參薄膜衣片提取工藝及制劑生產(chǎn)工藝穩(wěn)定性考察尚海賓 （河南創(chuàng)新藥業(yè)有限公司，河南安陽456150） 摘要 目的：以制成口服復(fù)方丹參薄膜衣片每片重0.8g大片，減少服用數(shù)量為目標(biāo)，對丹參提取工藝進(jìn)行優(yōu)選，同時(shí)對其制劑生產(chǎn)工藝進(jìn)行穩(wěn)定性考察。方法：采用L9(3)4正交試驗(yàn)優(yōu)選提取工藝，選擇溶劑（乙醇/水）用量為考察因素，以每片含量丹參酮A、丹酚酸 B為考察指標(biāo)。結(jié)果：優(yōu)選提取工藝為：第一次提取時(shí)間90分鐘、95%乙醇用6倍量，第二次提取時(shí)間90分鐘、50%乙醇用6倍量，第三次提取時(shí)間120分鐘、提取水用8倍量。結(jié)論：優(yōu)選的提取工藝及制劑生產(chǎn)工藝穩(wěn)定，可用于實(shí)際生產(chǎn)。關(guān)鍵詞 復(fù)方丹參薄膜衣大

2、片；正交試驗(yàn)；提取工藝；制劑生產(chǎn)工藝；穩(wěn)定性考察。 Optimizing compound salvia miltiorrhiza film-coated tablet extraction technology and production process stabilityShangHaiBin（Henan innovation pharmaceutical co., LTD., henan anyang 456150）abstract objective: to make an oral compound salvia miltiorrhiza film-coated tablet ea

3、ch piece weighs 0.8 g, reduce the amount of taking as the goal, for optimizing the extraction technology of salvia miltiorrhiza, and stability study on its preparation process. Methods: using L9 (3) 4 orthogonal test optimization extraction process, choose the dosage of solvent (ethanol/water) to ex

4、amine factors, with every piece of content of tanshinone , Dan phenolic acid B as examining index. Results: optimum extraction process for the first time, extracting time 90 minutes, 6 times 95% ethanol by volume, the second time 90 minutes, 6 times with 50% ethanol, extracting time 120 minutes for

5、the third time, extracting water quantity with 8 times. Conclusion: the optimal extraction process and the preparation process is stable and can be used in practical production. key words compound danshen film blockbusters; The orthogonal experiment. Extraction process; Preparation process; Stabilit

6、y test.0引言復(fù)方丹參片是中國藥典2010版一部收載的品種，由丹參、三七、冰片3 味中藥組成。具有活血化瘀,理氣止痛。用于氣滯血瘀所致的胸痹，癥見胸悶、心前區(qū)刺痛；冠心病心絞痛見上述證候者1的中藥制劑。該品種為半浸膏片, 即丹參浸膏與三七細(xì)粉混合,干燥后粉碎成細(xì)粉制粒，與顆粒干燥后加入研細(xì)冰片混勻壓片，包薄膜衣而成。因本次工藝研究為復(fù)方丹參薄膜衣大片，同時(shí)丹參酮A對熱敏感, 其損失隨加熱溫度升高和加熱時(shí)間延長而增加2，易造成丹參酮A、丹酚酸 B含量不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，加大了制劑生產(chǎn)控制難度。故采用正交試驗(yàn)法對其提取工藝進(jìn)行優(yōu)選、對其制劑生產(chǎn)工藝進(jìn)行穩(wěn)定性考察，為該制劑的順利生產(chǎn)提供依據(jù)。1

7、實(shí)驗(yàn)材料1.1 設(shè)備：SF-75型錘擊式粉碎機(jī)（上?？铺鬯樵O(shè)備廠）、WCSJ20型萬能粗碎機(jī)（常熟市信誠中藥設(shè)備廠）、1793型索氏提取器（上海越磁電子科技有限公司）、R-210/R-215旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHB-III型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州世紀(jì)雙科實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）、HH-Z型數(shù)顯水浴鍋、電加熱套（鞏義英峪高科儀器廠）、TD-100多功能微型提取濃縮機(jī)組（瑞安天眾醫(yī)藥化工機(jī)械有限公司）、CHW-5型槽型混合機(jī)（江陰市祥達(dá)機(jī)械制造有限公司）、YK-90型搖擺式顆粒機(jī)（上海喬楓實(shí)業(yè)有限公司）、CT(CT-C)型熱風(fēng)循環(huán)烘箱 （常州力馬干燥工程有限公司 ）、XYP-7小型旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)（廣州雷邁機(jī)

8、械設(shè)備有限公司）、labcoating實(shí)驗(yàn)型高效包衣機(jī)(深圳市信宜特科技有限公司)、JWI-700W計(jì)重電子臺秤(上海畢勝實(shí)業(yè)有限公司）、1/1000電子天平（上海滬粵明科學(xué)儀器有限公司）、島津LC2010AC型高效液相色譜儀（上海納諾實(shí)業(yè)有限公司）、300ml帶刻度玻璃燒杯（河南三順教學(xué)儀器有限公司）、60mm研缽（河南三順教學(xué)儀器有限公司）、藥典篩（上海寶藍(lán)實(shí)驗(yàn)儀器制造有限公司）、電熱恒溫干燥箱（江西興業(yè)機(jī)械制造有限公司）。1.2.2 原輔料原料：丹參、三七、冰片等藥材購自安徽省亳州市藥材總公司中藥材公司,輔料乳糖購自山東聊城安信藥用輔料有限公司，藥用乙醇購自新鄉(xiāng)市先豐醫(yī)藥新材料有限公司，

9、淺紅色醇溶包衣粉購自安徽山河輔料公司經(jīng)公司檢驗(yàn)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 2 方法與結(jié)果 2.1提取工藝因素水平確定已知因素：提取次數(shù)、提取時(shí)間、溶劑（乙醇/水）濃度，選擇溶劑（乙醇/水）用量作為影響因素，每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平，L9(34)正交試驗(yàn)因素設(shè)計(jì)見表1按處方比例稱取原藥材丹參450g粗碎成粒徑5mm12mm顆粒，按設(shè)計(jì)的正交試驗(yàn)先浸泡2h再進(jìn)行提取。提取液分別水浴真空減壓濃縮，取三七藥材粗碎成粒徑5mm12mm顆粒，再用粉碎成100目細(xì)粉備用。浸膏干燥溫度<60，先水提取浸膏加入三七細(xì)粉141g干燥后粉碎成100目細(xì)粉；再50%乙醇提取浸膏加入浸膏細(xì)粉，干燥后粉碎成100目細(xì)粉；最后95%乙

10、醇提取浸膏加入浸膏細(xì)粉，干燥后粉碎成100目細(xì)粉，測定丹參酮A、丹酚酸B每片含量。 表1 元胡止痛片提取工藝正交試驗(yàn)因素水平 因素 A 第一次提取 B 第二次提取 C第三次提取 水平 95%乙醇用量（倍） 50%乙醇用量（倍） 水用量（倍） 1 4 5 6 2 5 6 7 3 6 7 8 2.2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果 采用L9(34)正交表安排試驗(yàn)，以粉碎后浸膏混合粉每片含量為考察指標(biāo)。試驗(yàn)安排及結(jié)果見表 2，丹參酮A方差分析結(jié)果見表 3，丹酚酸B方差分析結(jié)果見表 4。表2 元胡止痛片提取工藝正交試驗(yàn)安排及結(jié)果 A B C D 試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)號 95%乙醇用量 50%乙醇用量 水用量 空白 丹參酮A含

11、量 丹酚酸B含量 mg/片 mg/片 1 1 1 1 1 0.82 18.2 2 1 2 2 2 0.85 18.6 3 1 3 3 3 0.87 19.0 4 2 1 2 3 0.92 20.3 5 2 2 3 1 0.96 21.0 6 2 3 1 2 0.93 20.2 7 3 1 3 2 1.16 21.4 8 3 2 1 3 1.20 21.2 9 3 3 2 1 1.24 21.6 丹參酮A含量K11 0.847 0.967 0.983 1.007K12 0.937 1.003 1.003 0.980K13 1.200 1.013 0.997 0.997 R1 0.353 0.04

12、6 0.020 0.027丹酚酸B含量K21 18.660 19.967 19.867 20.267K22 20.500 20.267 20.167 20.067K23 21.400 20.267 20.467 20.167 R2 2.800 0.300 0.600 0.200表3 丹參酮A方差分析 方差來源 SS f MS F P A 0.202 2 0.101 185.776 0.005 B 0.004 2 0.002 3.327 0.231 C 0.001 2 0.000 0.571 0.636 誤差 0.001 2 0.001 F 0.05(1，1)=161 表4 丹酚酸B方差分析 方

13、差來源 SS f MS F P A 12.260 2 6.130 204.333 0.005 B 0.180 2 0.090 3.000 0.250 C 0.540 2 0.270 9.000 0.100 誤差 0.060 2 0.030 F 0.05(1，1)=1612.3結(jié)果分析方差分析結(jié)果表明，各因素水平間無顯著性差異，丹參酮A影響最大的因素為A，因素主次順序?yàn)?A>B>C；丹酚酸B影響最大的因素為A，因素主次順序?yàn)?A>C>B。綜合考慮最佳提取工藝為A3B2C3，即：第一次提取95%乙醇用6倍量、第二次提取50%乙醇用6倍量、第三次提取水用8倍量。 2.4 驗(yàn)證

14、試驗(yàn) 2.4.1 最佳提取工藝及制劑生產(chǎn)工藝驗(yàn)證2.4.1.1提取濃縮按以上最佳提取工藝，制備3批次（批量3330片）復(fù)方丹參薄膜衣片。取丹參藥材4500g粗碎成粒徑5mm12mm顆粒，置多功能微型提取濃縮機(jī)組，提取3次，減壓濃縮。提取前加入乙醇先浸泡2h再進(jìn)行提取。第一次提取時(shí)間90分鐘、95%乙醇用6倍量，單獨(dú)濃縮至適量放入潔凈不銹鋼容器，及時(shí)冷藏儲存?zhèn)溆?；第二次提取時(shí)間90分鐘、50%乙醇用6倍量，單獨(dú)濃縮至適量放入潔凈不銹鋼容器，第三次提取時(shí)間120分鐘、提取水用8倍量，單獨(dú)濃縮至適量放入潔凈不銹鋼容器。2.4.1.2浸膏干燥取三七藥材粗碎成粒徑5mm12mm顆粒，再粉碎成100目細(xì)粉

15、。先水提取浸膏加入三七細(xì)粉1410g混合，控制干燥溫度50-60，干燥后粉碎成100目細(xì)粉；再加入50%乙醇提取浸膏混合，控制干燥溫度50-60，干燥后粉碎成100目細(xì)粉；最后加入95%乙醇提取浸膏混合，控制干燥溫度50-60，干燥后粉碎成100目細(xì)粉。 2.4.1.3制粒取浸膏粉、乳糖適量(加至2700g)混合,混合時(shí)間10min，混合機(jī)轉(zhuǎn)速24r/min，加入80%乙醇適量制軟材，搖擺式顆粒機(jī)14目制粒、顆粒置熱風(fēng)循環(huán)烘箱，干燥溫度50-60；14目整粒，取冰片80g置研缽研至粉末狀細(xì)粉與顆粒和硬脂酸鎂適量，等量遞增加入顆?；靹颍颗稳訖z測顆粒丹參酮A 丹酚酸B含量。檢測結(jié)果見表5。2

16、.4.1.4壓片采用ZP37A旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)，異性沖模具，壓力：5KN-10KN，轉(zhuǎn)速：18r/min，片重：0.8g/片，每批次取樣檢測每片丹參酮A 丹酚酸B含量。檢測結(jié)果見表5。2.4.1.5包衣采用實(shí)驗(yàn)型高效包衣機(jī)，10%包衣液濃度（70%乙醇：淺紅色包衣粉配制），設(shè)定進(jìn)氣溫度為75-85；出風(fēng)溫度為60-75；噴霧壓縮空氣（壓力0.4mpa-0.45mpa），包衣機(jī)轉(zhuǎn)速為8r/min；控制包衣噴漿壓力為0.3mpa-0.35mpa，蠕動泵調(diào)節(jié)噴漿流量為100g/min；片床溫度控制為50包薄膜衣。每批次取樣檢測每片丹參酮A 丹酚酸B含量。檢測結(jié)果見表5。 2.4.2 檢測結(jié)果對顆粒、素片

17、和薄膜衣片每片丹參酮A、丹酚酸B含量進(jìn)行檢測，證明提取工藝及制劑生產(chǎn)工藝的實(shí)用性。2.4.2.1合格標(biāo)準(zhǔn)含量測定：丹參酮A每片不少于0.60mg，丹酚酸B每片不少于15.0mg，2.4.2.2檢測結(jié)果對比：檢測結(jié)果對比:制劑生產(chǎn)3批次，每批取樣1次進(jìn)行檢測，以確認(rèn)其重現(xiàn)性，結(jié)果見表5。表5 含量測定檢測結(jié)果 顆粒含量 素片含量 薄膜衣片含量 試驗(yàn)號 丹參酮A 丹酚酸B 丹參酮A 丹酚酸B 丹參酮A 丹酚酸B mg/片 mg/片 mg/片 mg/片 mg/片 mg/片 1 1.32 25.2 1.36 25.0 1.28 25.4 2 1.28 25.6 1.30 24.6 1.34 25.2

18、3 1.34 24.8 1.34 24.8 1.32 24.6 結(jié)論：通過檢測結(jié)果得出：顆粒、素片、薄膜衣片丹參酮A、丹酚酸B每片含量均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，表明優(yōu)選的提取工藝及制劑生產(chǎn)工藝可行。3.穩(wěn)定性考察包衣片3批次，包裝后各取20瓶，每瓶60片，采用電熱恒溫干燥箱，進(jìn)行加速實(shí)驗(yàn)，在（溫度45濕度75%）條件下，進(jìn)行有效期24個(gè)月穩(wěn)定性考察3。3.1 合格標(biāo)準(zhǔn)含量測定：丹參酮A每片不少于0.60mg，丹酚酸B每片不少于15.0mg，3.2 檢測結(jié)果對比：每批取樣1次進(jìn)行檢測，以確認(rèn)其重現(xiàn)性，結(jié)果見表6。表6 薄膜衣片加速試驗(yàn)對比檢測結(jié)果 試驗(yàn)1號含量測定 試驗(yàn)2號含量測定 試驗(yàn)3號含量測定 時(shí)間 丹參酮A 丹酚酸B 丹參酮A 丹酚酸B 丹參酮A 丹酚酸B （月） mg/片 mg/片 mg/片 mg/ mg/片 mg/片 0 1.32 25.2 1.36 25.4 1.30 24.8 1 1.28 25.0 1.30 25.0 1.24 24.8 2 1.30 24.6 1.32 24.8 1.32 25.0 3 1.34 24.8 1.26 25.0 1.26 24.6 6 1.32 25.0 1.28 24.4 1.28 25.0 12 1.26 25.2 1.24 24.6 1.30 24.8 18 1.30 24.2 1.30