基因工程技術原理與應用

1、基因工程技術原理與應用（ 總分： 1046.00 ，做題時間： 90 分鐘 ）一、填空題 （ 總題數(shù)： 51，分數(shù)： 198.00）1. BarnH I是識別6個核苷酸的酶，其切割產物的平均長度的理論值是1。（分數(shù)： 1.50 ）填空項 1: （正確答案： 40）解析：2. 通過比較用不同組合的限制性內切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的大小不同的片段，可以構建顯 示該區(qū)域各限制酶切位點位置的 1 。（分數(shù)： 1.50 ）填空項 1: （正確答案：限制酶切圖譜）解析：3. EC0K是I類限制性內切酶，分子組成是a 2 B 2丫。a亞基的作用是; B亞基的作用是亞基的作用是 。（分數(shù)： 4.50

2、 ）填空項 1: （正確答案：限制 修飾 識別）解析：4. 個體之間DNA限制性片段長度的差異稱為1。（分數(shù)： 1.50 ）填空項 1: （正確答案：限制性片段長度多態(tài)性）解析：5. 限制性內切核酸酶的命名原則是：第一個字母來自 ；第二、三兩個字母來自 ；第四個字母則表示 。（分數(shù)： 4.50 ）填空項 1: （正確答案：屬名 種名 菌株名）解析：6. 在限制性內切核酸酶切反應管中添加各種成分后，需要離心數(shù)秒鐘，其目的是和（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：混勻 防止部分酶切）解析：7. 為了進行部分酶切可以采用下列措施： 、和等。（分數(shù)： 4.50 ）填空項 1: （正確答案：降

3、低酶量 縮短反應時間 增大反應體積）解析：8限制性內切核酸酶的識別序列分別由4、6、8對堿基組成，它們在 DNA序列上的切割頻率的理論值分別是 、 和 。（分數(shù)： 4.50 ）填空項 1:解析：9. 限制性內切核酸酶通常保存在（正確答案： 44 4 8 4 8）1 濃度的甘油溶液中。（分數(shù)： 1.50 ）填空項 1: （正確答案： 50%）解析：10.測序酶是修飾了的 T7 DNA聚合酶，它只有 酶的活性，而沒有 活性。（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1:解析：11. 切口平移 （nick translation）（正確答案：5' -3'合成 3' -5'外切）法

4、標記DNA勺基本原理在于的和的作用（分數(shù)： 4.50 ）填空項1: （正確答案：DNA酶I內切酶活性 DNA聚合酶I的5' -3'合成酶活性）解析：12.欲將某一具有突出單鏈末端的雙鏈DNA分子轉變?yōu)槠侥┒说碾p鏈形式，通常采用的方法是 和（分數(shù)： 3.00 ）填空項1: （正確答案：DNA聚合酶I 5' -3'外切酶 5' -3'合成酶）解析：13.反轉錄酶具有催化 DNA合成的作用，同時還具有 的作用，可以將 DNA-RNA雜合雙鏈中的 消化掉。（分數(shù)： 3.00 ）填空項1: （正確答案：RNAB H RNA解析：14. 基因工程中所用的載體

5、主要有三類： 、 和（分數(shù)： 4.50 ）填空項 1: （正確答案：質粒 病毒 人工染色體）解析：15. 一個最簡單的質粒載體必須包括以下幾個部分： 、 和16. 如果兩個質粒不能穩(wěn)定共存于同一個寄主細胞中，則屬于 群，這是因為他們的 所致。（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：同一不親和群 復制機制相同）解析：17. 質粒的拷貝數(shù)是指細胞中 1 。（分數(shù)：1.50 )填空項 1解析：: （正確答案：質粒的拷貝數(shù)與基因組數(shù)的比值）18.ColEl 質粒復制的起始需要三種酶： 、 和（分數(shù)： 4.50 ）填空項1: （正確答案：DNA聚合酶RNA聚合酶RNA酶H）解析：19. 那些沒有

6、可以檢測表型的質粒稱為 1 。（分數(shù)： 1.50 ）填空項 1: （正確答案：隱蔽性質粒）解析：20. 噬菌體可以被改造作為基因工程載體，主要是由于 和 （分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：在大腸桿菌細胞中繁殖復制 背景知識清楚）解析：21. 入噬菌體載體主要有兩種類型， 插入型和置換型。就酶切位點來說，插入型為 個；置換型為 個。（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：一個 兩個）解析：22. M13噬菌體DNA的復制分為三個階段：、和（分數(shù)： 4.50 ）填空項1: （正確答案：S4R RFRF RPSS解析：23. 噬菌粒是由質粒和噬菌體 DNA共同構成的.其中來自質

7、粒的結構主要是 和;來自噬菌體的主要結構是 。24. 入噬菌體由于包裝的限制，插入外源DNA片段后，總長度應在噬菌體基因組的1范圍內。（分數(shù)： 1.50 ）填空項1: （正確答案：75% 105%解析：25. 引物在基因工程中至少有 4 方面的用途： 、 、和 （分數(shù)： 4.50 ）填空項1: （正確答案：合成 CDNA合成探針PCR引物DNA序列測定）解析：26. 利用Taq DNA聚合酶進行PCF反應所得產物不是平末端，而是在 端帶有一個突出的 ;據(jù)此人們設計了 PCR產物的隆法。（分數(shù)： 4.50 ）填空項 1: （正確答案： 3' A T 載體）解析：27. 簡并引物PCR主要

8、是依據(jù)蛋白質的氨基酸序列設計1引物來擴增相應的基因（分數(shù)： 1.50 ）填空項 1: （正確答案：簡并）解析：28. 現(xiàn)有的克隆基因的策略大體上可以分為三類： 、和分數(shù)： 4.50 ）填空項 1:（正確答案：定位克隆功能克隆 表型克?。┙馕觯?9.DNA重組連接的方法大致有4 種： 、 、和 。（分數(shù)： 6.00 ）填空項 1:（正確答案：黏末端平末端 同聚物加尾接頭連接法）解析：30.SD序列是mRN毋子中與結合的序列， 位于_密碼子的上游;在基因組中的對應位置是位點與 位點之間（分數(shù)： 6.00 ）填空項 1: （正確答案：核糖體 起始 轉錄起始 翻譯起始）解析：31. 攜帶有外源基因并能

9、持久傳遞給子代的植物稱為 植物；這些外源基因就叫做 （分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：轉基因 轉基因）解析：32. 重組子的篩選有兩層含義，一是 ；二是 。（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：區(qū)分重組子和非重組子 區(qū)分帶有重組子和非重組子的大腸桿菌）解析：33限制性內切核酸酶切割 DNA后產生5'端突出的黏性末端，可以用 進行3'端標記；如果限制性內切核酸酶切割DNA后產生3'端突出的黏性末端，可以用 進行5'端標記。（分數(shù)： 3.00 ）填空項1: （正確答案：Klenow酶T4DNA聚合酶）解析：34. 為了獲得單鏈標記的 DNA探

10、針可以采用以下三種方法：、和（分數(shù)： 4.50 ）填空項1: （正確答案：M13載體反轉錄不對稱PCR解析：35. 根據(jù) Northern 雜交的結果可以說明 ；根據(jù) Southern 雜交的結果可以說明 ；根據(jù) western雜交的結果可以說明 ；根據(jù)原位雜交的結果可以說明 。（分數(shù)： 6.00 ）填空項1: （正確答案：基因是否轉錄和mRNA勺大小DNA是否存在和酶切片段的大小 相應抗原的存在 互補序列的位置）解析：36. Northern 雜交和 Southern 雜交的根本區(qū)別在于 和 。（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：樣品的區(qū)別 電泳方式的區(qū)別）解析：37. 欲將某一

11、具有單鏈突出末端的雙鏈DNA分子轉變成平末端的雙鏈形式，通常采用的方法有 和（分數(shù)： 3.00 ）填空項1: （正確答案：S1核酸酶切割DNA聚合酶補平）解析：38. 由于不同構型的DNA插入EB的量的不同，它們在瓊脂糖凝膠電泳中遷移率也不同，scDNA的泳動速度; oc DNA的泳動速度 ; 1DNA居中。39. 在基因工程中，導入外源基因的主要方法有 、和 等。（分數(shù)： 6.00 ）填空項 1: （正確答案：轉化 噬菌體侵染 顯微注射 基因槍）解析：40. 在基因組計劃中用來構建人基因組DNA文庫的載體通常有4種，分別是、和（分數(shù)： 6.00 ）填空項1: （正確答案：質粒 入噬菌體YAC

12、 BAC）解析：41. 反向PCR的方法通常用來 ;重組PCF的方法通常用來 ;原位PCR的方法通常用來 分數(shù)： 4.50 ）連接兩個DNA片段獲得靶序列的填空項 1: （正確答案：擴增已知片段兩側的序列 位置信息） 解析：42. 核酸凝膠電泳中常用的染料是 1（分數(shù)： 1.50 ）填空項 1: （正確答案： EB）解析：43. 為對某一生物的基因進行全面的研究，只需建立 個基因組文庫，同時必須建立 個CDNA文庫。（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：一個 多個）解析：44. 雙脫氧鏈終止法測定 DNA堿基序列需要的試劑為 、和等。（分數(shù)： 6.00 ）填空項1: （正確答案：dN

13、TP ddNTP引物DNA聚合酶）解析：45. Taq DNA聚合酶需要適當濃度的 Mg+才能發(fā)揮作用。Mg+濃度升高對Taq DNA聚合酶的效應是; Mg+濃度降低，對Taq DNA聚合酶的效應是 。（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1: （正確答案：活性升高特異性降低 活性降低特異性升高）解析：46. 普通質粒載體、入噬菌體載體、黏粒載體和噬菌粒的容量由大到小依次為 、 、和（分數(shù)： 6.00 ）填空項1: （正確答案：黏粒載體入噬菌體載體 噬菌粒 普通質粒載體）解析：47. 目前栽培面積較大的 5種農作物是 、和。其中以 為最大（分數(shù)： 9.00 ）填空項 1: （正確答案：大豆 玉米 棉花

14、 油菜 馬鈴薯 大豆）解析：48. 外源基因導入植物細胞的方法為 、和。（分數(shù)： 4.50 ）填空項 1: （正確答案： Ti 質粒 Ri 質粒 基因槍）解析：（分數(shù)： 7.50 ）填空項 1:解析：50. 大腸桿菌中選擇性標記一般為49. 外源基因導人動物受精卵的方法有 、 、和 （正確答案：顯微注射 病毒侵染 細胞移植 細胞核移植 精子介導）；酵母菌中選擇性標記一般為 。（分數(shù)： 3.00 ）填空項 1:（正確答案：抗生素抗性基因營養(yǎng)缺陷型）解析：51. 核型多角體病毒有兩種表現(xiàn)型和 ；分別感染 _和 （分數(shù)： 6.00 ）填空項 1: （正確答案：包埋型 出芽型病毒 不同個體 同一個體的

15、不同細胞）解析：二、判斷題（總題數(shù)： 26，分數(shù)： 26.00）52. 限制與修飾現(xiàn)象是宿主的一種保護體系，它是通過對外源DNA的修飾和對自身DNA的限制而實現(xiàn)的。（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：53. 限制性內切核酸酶在 DNA中的識別/切割位點的二級、三級結構也影響酶切效率。（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：54. 能夠產生限制酶從而防御病毒的侵染的細菌，其本身的基因組DNA中沒有該酶的識別序列。（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：55. 限制性酶切圖譜和限制性片段長度多態(tài)性圖譜的區(qū)別在于前者是物理圖譜，而后者是連鎖圖譜。（

16、 ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：56. 某一限制酶在一環(huán)狀 DNA上有3個切點，用此酶切割該環(huán)狀DNA可以得到3個片段。（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：57. 基因工程中所使用的內切酶不僅具有內切核酸酶活性，也具有甲基化的活性。（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：58. 用同一種限制性內切核酸酶切割載體和外源DNA得到黏性末端后，為防止它們自身環(huán)化，要用CIP將他們脫磷酸。 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V 解析：59. Gap和Nick的含義是不同的，前者是指DNA的單鏈中有較小的缺失， 后者僅是斷開了

17、一個磷酸二酯鍵。 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：61. 有a、b、c三個質粒，a和b能夠共存于一個細胞中，a和c也可以共存于一個細胞中，所以b和c也一定能夠共存于一個細胞中。 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：62. 如果兩個質粒可以穩(wěn)定共存于一個細胞中，這兩種質粒則屬于同一個不親和群。（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：63. 能夠在不同的宿主細胞中復制的質粒叫穿梭質粒。 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：64. 置換型載體是指同一種限制性內切

18、核酸酶在入DNA中具有兩個切點，外源DNA通過取代這兩個點間的片段被克隆。 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：65. 噬菌體載體集質粒和絲狀噬菌體的有利特征于一身的載體，既能合成單鏈DNA又能合成雙鏈 DNA （）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：66. 入噬菌體DNA和M13單鏈噬菌體DNA在成熟前的DNA復制都是用滾環(huán)模型。（）分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：67. 所謂引物就是與DNA互補的一小段RNA分子。（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：68. 簡并引物是根據(jù)已知 DNA序列設計的引物群。（）（分數(shù)：

19、1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：69. 通過原位雜交得到的陽性克隆就是重組子，但不能判斷插入的外源基因是否表達了。（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：70. 核酸雜交的原理是根據(jù) DNA分子間的互補。（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：71. 突出的 3' 端或凹端的 3' 端都可以用 Klenow 酶進行末端標記。 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：72. 用氯霉素處理細菌可以使內含的嚴緊型質粒大量擴增，從而極大地提高其產量。（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：73. 為了在大腸

20、桿菌中高效表達外源蛋白質，常需要考慮的因素有啟動子的強弱、SD序列、蛋白的存在方式以及 Poly（A） 加尾信號等。 （ ）分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：74. 反轉錄酶是一種依賴于 RNA的DNA聚合酶。（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：75. 反轉錄酶催化的信息流是蛋白質-RNA>DNA （）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：76. 在克隆載體pUC系列中，lacZ'基因提供了一個外源基因的選擇標記，藍色的轉化菌落通常表明克隆是 失敗的。 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確 VB. 錯誤解析：77. 只有用同一種

21、限制性內切核酸酶切割獲得的DNA片段末端才能夠用 DNA連接酶連接起來。（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 正確B. 錯誤 V解析：三、選擇題 （總題數(shù)： 72，分數(shù)： 72.00）78. 在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 化學合成法B. 基因組文庫法C. cDNA文庫法D. 聚合酶鏈反應E. 差異顯示法 V解析：79. 在下列進行DNA部分酶切的條件中，控制哪一項最好?（）分數(shù)： 1.00 ）A. 反應時間B. 酶量 VC. 反應體積D. 酶反應的溫度解析：80. T4 DNA連接酶是從T4噬菌體感染的E.coli中分離的，這種酶（）（分數(shù)：

22、1.00 ）A. 催化連接反應時既能以 ATP又能以NAD乍為能量來源B. 既能催化平末端連接又能催化黏性末端連接VC. 是一種單肽酶，分子質量為 74kDaD. 既能催化單鏈DNA連接又能催化雙鏈DNA連接 解析：81. 限制性片段長度多態(tài)性是 （ ） 。（分數(shù)： 1.00 ）A. 用于遺傳的“指紋結構”模式分析的技術B. 二倍體細胞中的兩個等位基因限制性圖譜的差別C. 物種中的兩個個體限制性圖譜的差別 VD. 兩個物種中個體間的限制性圖譜的差別E. 兩種酶在單個染色體上限制性圖譜的差別 解析：82. 建cDNA文庫時，首先需分離細胞的（）。（分數(shù)： 1.00 ）A. 染色體 DNAB. 線

23、粒體 DNAC. 總 mRNA VD. tRNAE. rRNA解析：83. 從大腸桿菌的兩個菌株中提純的一種質粒， 一個可以被某種限制性內切核酸酶切開而另一個不可以， 因為 （ ） 。（分數(shù)： 1.00 ）A. 該質粒在一個菌株中有切割B. 該質粒在一個菌株中是線性的C. 該質粒在一個菌株中被甲基化了 VD. 不能被酶切的質粒是線性的解析：84. 外源基因在大腸桿菌中高效表達受很多因素影響，其中SD序列的作用是（）分數(shù)： 1.00 ）A. 提供一個mRNA專錄終止子B. 提供一個 mRNA起始點C. 提供一個核糖體結合位點 VD. 提供一個翻譯的終點解析：85. 在基因工程技術中，不常用到的酶

24、是 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 限制性內切核酸酶B. DNA聚合酶C. DNA連接酶D. 反轉錄酶E. DNA解鏈酶 V解析：86限制性內切核酸酶切割 DNA后產生（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 3' 磷酸基末端和 5' 羥基末端B. 5' 磷酸基末端和 3' 羥基末端 VC. 3' 磷酸基末端和 5' 磷酸基末端D. 5' 羥基末端和 3' 羥基末端E. 3' 羥基末端、 5' 羥基末端和磷酸 解析：87. 最常用的篩選轉化細菌是否含質粒的方法是 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 營養(yǎng)互補篩選B. 抗藥性篩

25、選 VC. 免疫化學篩選D. PCR篩選E. 分子雜交篩選解析：88. PCR變性溫度一般為（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 94CVB. 85CC. 72CD. 62CE. 55C解析：89. 在切口平移標記DNA探針時只能使用（）（分數(shù)： 1.00 ）A. Klenow 酶B. DNA聚合酶IVC. DNA聚 合酶UD. DNA聚合酶山解析：90. RFLP產生自（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 使用不同的限制性內切核酸酶B. 每種類型的染色體有兩條C. 染色體中堿基的隨機變化VD. Southern 印跡E. 不同探針的使用 解析：91. 山型限制性內切核酸酶（）。（分數(shù)： 1.00 ）A.

26、 由兩個亞基組成，僅識別半甲基化位點B. 甲基化和限制活性相互排斥：MS亞基促使甲基化，R亞基促使限制C. 由兩個亞基組成，在識別位點附近識別并進行甲基化或限制VD. 在錯配修復中起關鍵作用，因為酶結合到DNA上是以結構扭曲為基礎，而不是序列錯誤識別解析：92. 限制性內切核酸酶可以特異性的識別 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 雙鏈DNA的特定堿基對B. 雙鏈DNA的特定堿基序列VC. 特定的三聯(lián)體密碼D. 以上都正確解析：93. 以質粒為載體將外源基因導入受體菌的過程稱 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 轉化 VB. 轉染C. 感染D. 轉導解析：94. Klenow酶與DNA聚合酶相比，

27、前者喪失了 （）活性（分數(shù)： 1.00 ）A. 5' -3合成酶B. 3' 5'外切酶C. 5' -3'外切酶VD. 轉移酶解析：95. CDNA文庫包括該種生物的（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 某些蛋白質的結構基因VB. 所有蛋白質的結構基因C. 所有的結構基因D. 內含子和調控區(qū)解析：96. 基因工程研究中所用的質粒大多是經(jīng)過改造的， 真正的天然質粒載體很少。 在下列載體中被視為基因工 程載體的天然質粒是 （ ） 。（分數(shù)： 1.00 ）A. pBR322B. pSC101 VC. pBSD. pUC18解析：97. 限制性內切核酸酶的星號活性是指

28、（ ） 。（分數(shù)： 1.00 ）A. 在非常規(guī)條件下，識別和切割序列發(fā)生變化的活性VB. 活性大大提高C. 切割速度大大加快D. 識別序列與原來的完全不同解析：98. 切口平移是指在（ ） 作用下，使 （ ） 帶上放射性標記。（分數(shù)： 1.00 ）A. DNA聚合酶I,B. DNA聚合酶I,C. DNA聚合酶山，D. DNA聚合酶山，解析：RNADNA VRNADNA99. a互補篩選法屬于（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 抗藥性標志篩選B. 酶聯(lián)免疫篩選C. 標志補救篩選 VD. 原位雜交篩選E. 免疫化學篩選解析：100. DNA被某限制性內切核酸酶切割后，電泳得到的電泳帶有些擴散，下列原因

29、中哪一項不太可能?（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 酶失活 VB. 底物DNA不純，污染有蛋白質C. 酶切條件不合適D. 由外切核酸酶污染解析：101. 要對一雙鏈的DNA分子進行3'端標記可用（）（分數(shù)： 1.00 ）A. Klenow 酶B. DNA聚合酶IC. T4 DNA聚合酶VD. T7 DNA聚合酶解析：102. 下面哪一種不是產生星號活性的主要原因?（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 甘油含量過量B. 反應體系中含有有機溶劑C. 含有非Mg+的二價陽離子D. 酶切反應時酶濃度過低 V 解析：103. 基因工程技術常用的限制性內切核酸酶為 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. I類

30、酶B. U類酶 VC. m類酶D. W類酶E. V類酶解析：104. 用于 Northern 雜交的探針可以是放射性標記的 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. DNA VB. dNTPC. 抗體D. 抗原解析：105. 有關理想質粒載體的特點，正確的是 （ ）分數(shù)： 1.00 ）A. 為線性單鏈 DNAB. 含有多種限制酶的單一切點VC. 含有同一限制酶的多個切點D. 其復制受宿主控制E. 不含耐藥基因解析：106. M13K07是一種輔助噬菌體，可以用來幫助噬菌粒制備單鏈DNA這是由于（）（分數(shù)： 1.00 ）A. M13K07能夠進行滾環(huán)復制，得到大量單鏈噬菌體DNAB. M13K07能夠提

31、供成熟包裝蛋白質C. M13K07提供成熟包裝所需的信號D. M13K07提供噬菌粒進行單鏈復制所需的所有蛋白質V解析：107. 同一種質粒DNA可以以三種不同的形式存在，它們的遷移速率是（）（分數(shù)： 1.00 ）A. oc DNA > sc DNA> 1DNAB. sc DNA > 1DNA> oc DNA VC. 1DNA>oc DNA>sc DNAD. sc DNA>oc DNA>1DNA解析：108. 第1個作為重組DNA載體的質粒是（）。（分數(shù)： 1.00 ）A. pBR3222B. ColE1C. pSC101 VD. pUC18解析

32、：109. 基因工程技術中實現(xiàn)目的基因與載體DNA連接的酶是（）。（分數(shù)： 1.00 ）A. DNA聚合酶B. RNA聚合酶C. DNA連接酶 VD. RNA連接酶E. 限制性內切核酸酶解析：110. 能夠用來克隆30kb以上大小外源DNA片段的質粒載體是（）（分數(shù)： 1.00 ）A. charomidB. plasmidC. cosmidVD. phagemid解析：111. 隨機引物標記探針，下列各項中哪一項是不正確的 ?（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 雙鏈DNA單鏈DNA RNA都是可以標記的B. 不需用DNA酶I預處理C. 反應時可用 Klenow 酶D. 反應時可用DNA聚合酶IV

33、解析：112. 將Pstl限制酶切割后的目的基因與用相同內切酶切割后的載體DNA連接屬（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 同聚物加尾連接B. 人工接頭連接C. 平端連接D. 黏性末端連接 VE. 非黏性末端連接 解析：113. 選用融合蛋白的表達策略的主要優(yōu)點是 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 容易檢測表達蛋白B. 構建表達載體方便C. 表達產物較穩(wěn)定 VD. 易獲得有天然活力的蛋白質 解析：114. 為了正確地構建一個真核基因組的物理圖譜 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 必須分離單條染色體B. 必須從單倍體細胞中分離 DNA這樣避免由于二倍體細胞中同源染色體的存在而產生的干擾C. 必須進行單

34、個染色體分析D. 必須找到對于每個染色體只切割一次的限制酶E. 必須首先分離核DNA和細胞器DNA然后分別對它們作圖 V解析：115. 下面關于細菌人工染色體的特征描述，除了 （ ） 外都正確。（分數(shù)： 1.00 ）A. 通過電激法將其轉化大腸桿菌比CaCb的轉化率提高了 10100倍B. 細菌人工染色體在細菌中以超螺旋環(huán)狀存在，使分離操作相對容易C. 細菌人工染色體在大腸桿菌中保持高拷貝數(shù) VD. 克隆到細菌人工染色體上的外源片段可以直接進行序列測定以獲得末端序列 解析：116. 用下列方法進行重組體的篩選，表明出現(xiàn)了外源基因的產物的方法是分數(shù)： 1.00 )A. Southern 印跡B.

35、 Northern 印跡C. Western 印跡 VD. 菌落原位雜交 解析：117. 關于穿梭質粒載體，下面哪一種說法最正確 ?（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 在不同的宿主中具有不同的復制機制B. 在不同的宿主中使用不同的復制起點 VC. 在不同的宿主中使用不同的復制酶D. 在不同的宿主中具有不同的復制速率 解析：118. 關于質粒的相容性，下面哪種說法不正確 ?（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 不同不相容群的質粒能夠共存于同一細胞中B. 質?？梢苑譃槿舾蓚€不相容群，但不能分為若干相容群C. 如果 a、b 兩種質粒不相容，說明它們的復制機制相同D. 屬于同一個不相容群的質粒，不僅復制機制

36、相同，而且拷貝數(shù)和相對分子質量也相同V解析：119. 基因工程中，可以用堿性磷酸酶 （ ） 。（分數(shù)： 1.00 ）A. 防止DNA的自身環(huán)化 VB. 降解DNA樣品中混雜的RNAC. 制備突出的 3' 端D. 上述方法都正確解析：120. 胰島素通常以融合蛋白的方式在大腸桿菌中表達，利用融合處有一個甲硫氨酸殘基，可以用何種方法 將胰島素從融合蛋白上切下來。 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 氫氟酸裂解B. 羥氨裂解C. 蛋白水解酶D. 溴化氰裂解 V解析：121. 分析限制性內切核酸酶切割DNA所得到的片段長度有助于物理作圖，這是因為（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 即使只有一種限制酶

37、，因為 DNA是線性的，所以也可以迅速準確確定限制片段序列B. 內切酶在等距離位點切割 DNA同時對于每個生物體的長度是特異的C. DNA的線性意味著單限制酶切片段的長度之和等于DNA勺總長 VD. 內切酶的消化活性是物種特異的E. 這一技術同時為核苷酸序列提供了廣泛信息 解析：122. CDNA是指（）。分數(shù)： 1.00 ）A. 在體外經(jīng)反轉錄合成的與 RNA互補的DNA VB. 在體外經(jīng)反轉錄合成的與 DNA互補的DNAC. 在體外經(jīng)轉錄合成的與 DNA互補的RNAD. 在體內經(jīng)轉錄合成的與 DNA互補的RNA解析：123. 下面關于松弛型質粒性質的描述中，不正確的是 （ ）（分數(shù)： 1.

38、00 ）A. 質粒的復制只受本身的遺傳結構的控制，而不受染色體復制機制的制約B. 可以用氯霉素作用進行擴增C. 通常帶有抗藥性標記 VD. 同嚴緊型質粒融合后，雜合質粒優(yōu)先使用松弛型復制子 解析：124. U型限制性內切核酸酶（）。（分數(shù)： 1.00 ）A. 具內切酶和甲基化酶活性且經(jīng)常識別回文序列B. 僅有內切核酸酶活性，甲基化酶活性有另一種酶提供VC. 限制性識別非甲基化的核苷酸序列D. 有外切核酸酶和甲基化酶活性解析：125. 基因組代表一個細胞或生物體的 （ ） 。（分數(shù)： 1.00 ）A. 部分遺傳信息B. 整套遺傳信息 VC. 可轉錄基因D. 非轉錄基因E. 可表達基因 解析：12

39、6. 以質粒為載體將重組 DNA導入受體細胞的過程稱為（）分數(shù)： 1.00 ）A. 轉化 VB. 轉導C. 接合D. 轉染解析：127. 關于DNA接頭在基因工程中的作用，下面的說法中哪一項不正確?（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 給外源DNA添加適當?shù)拿盖形稽cB. 人工構建載體C. 調整外源基因的可讀框D. 增加調控元件 V 解析：128. 關于多克隆位點的描述不正確的是 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 僅位于質粒載體中 VB. 具有多種酶的識別序列C. 不同酶的識別序列可以有重疊D. 一般是人工合成后添加到載體中的 解析：129. Ti 質粒（ ） 。（分數(shù)： 1.00 ）A. 存在于所有

40、農桿菌細胞中B. 作為雙鏈DNA被轉移C. 在植物中導致腫瘤VD. 在植物細胞中作為染色體外質粒解析：130. 通過限制酶切片段分析，可以對等位基因進行精確的分析比較，其原因是（ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 限制性內切核酸酶只切割兩個變異等位基因中的一個B. 它利用限制性位點作為遺傳標記 VC. 一個特定細胞中等位基因的核苷酸序列不會是相同的D. 限制性內切核酸酶的酶切位點被限制在編碼區(qū)域內 解析：131. 在細菌轉化實驗中，如將DNA酶加入培養(yǎng)基，將使轉化（）分數(shù)： 1.00 ）A. 不能實現(xiàn) VB. 加速C. 不受影響D. 失去規(guī)律解析：132. 下列常用于原核表達體系的是 （ ）（分數(shù)

41、： 1.00 ）A. 酵母細胞B. 昆蟲細胞C. 哺乳類細胞D. 真菌E. 大腸桿菌 V解析：133. 下列哪個酶要求有引物才能發(fā)揮作用 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 限制性內切核酸酶B. DNA連接酶C. 末端轉移酶D. 反轉錄酶 V解析：134. 黏粒是一種人工構建的載體， （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 具有 cos 位點，因此可以進行體外包裝 VB. 具有質粒DNA的復制特性，必須利用 CaCIz制備的感受態(tài)細胞轉化入大腸桿菌C. 進入受體細胞后，可引起裂解反應D. 進入受體細胞后，可引起溶原化反應 解析：135. 在藍白斑篩選法中，IPTG的作用是（）。（分數(shù)： 1.00 ）A

42、. 誘導宿主合成B -半乳糖苷酶的羧基端VB. 誘導宿主合成B -半乳糖苷酶的氨基端C. 作為酶反應的底物D. 作為顯色反應的指示劑 解析：136. 下列酶中，催化反應不需要ATP的是（）。分數(shù)： 1.00 ）A.EcoKB. EcoBC. T4 DNA 連接D. BamHIV解析：137. 當大量的RNA與有限的DNA雜交時（）(分數(shù)： 1.00 )A. 所有的DNA都雜交上了B. 50%的DNA雜交上了VC. 50%的RNA雜交上了D. 沒有RNA雜交上，而所有的 DNA全部復性成為雙鏈DNA 解析：138. 用菌落原位雜交法篩選重組子時， ( ) 。(分數(shù)： 1.00 )A. 需要外源基

43、因的轉錄產生 mRNA才能進行。B. 需要外源基因的翻譯產生蛋白質，才能進行。C. 所用探針必須與克隆的基因有同源性VD. 上述說法都正確解析：139. 下列哪種酶不能用于聚合酶鏈反應 (PCR)?( )(分數(shù)： 1.00 )A. Taq DNA合成酶B. T7 DNA合成酶C. 引物酶 VD. Klenow 片段 解析：140. 報道基因 ( ) 。(分數(shù)： 1.00 )A. 必須是原核生物的基因B. 以其易于分析的啟動子區(qū)代替感興趣基因的啟動區(qū)C. 產物容易檢測D. 能用于確定啟動子何時何處有活性 V解析：141. 目前在轉基因小鼠中常用的基因敲除技術是根據(jù) ( ) 的原理而設計的(分數(shù)：

44、 1.00 )A. 反義核苷酸的抑制作用B. 轉座成分的致突變作用C. 離體定向誘變作用D. 同源重組 V解析：142. 就分子結構而論，質粒是 ( )分數(shù)： 1.00 )A. 環(huán)狀雙鏈DNA分子 VB. 環(huán)狀單鏈DNA分子C. 環(huán)狀單鏈RNA分子D. 線狀雙鏈DNA分子E. 線狀單鏈DNA分子解析：143. 重疊群是一群克隆，在這個克隆群體中各克?。?）（分數(shù)： 1.00 ）A. 相互間重疊 VB. 都是來自不同生物間的克隆C. 插入片段位于不同染色體的不同區(qū)段D. 位于同一染色體的不同區(qū)段 解析：144. 催化聚合酶鏈反應的酶是 （ ） 。（分數(shù)： 1.00 ）A. DNA連接酶B. 反轉

45、錄酶C. 末端轉移酶D. 堿性磷酸酶E. Taq DNA聚合酶 V解析：145. 在對目的基因和載體 DNA進行同聚物加尾時，需采用（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 反轉錄酶B. 多聚核苷酸激酶C. 引物酶D. RNA聚合酶E. 末端轉移酶 V解析：146. 在基因工程中通常所使用的質粒存在于 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 細菌染色體B. 酵母染色體C. 細菌染色體外 VD. 酵母染色體外E. 以上都不是解析：147. 在基因工程中通常所使用的質粒是 （ ）（分數(shù)： 1.00 ）A. 細菌的染色體 DNAB. 細菌染色體外的 DNA VC. 病毒染色體 DNAD. 病毒染色體外的 DNAE.

46、 噬菌體 DNA 解析：148. 下列載體中對外源DNA片段的容量最大的是（）（分數(shù)： 1.00 ）A. 質粒B. 黏粒C. 酵母人工染色體 （YAC）D. 入噬菌體 V解析：149. 構建基因組DNA文庫時，首先需要分離細胞的 （）（分數(shù)： 1.00 ）A. 染色體 DNA VB. 線粒體 DNAC. 總 mRNAD. tRNAE. rRNA解析：四、簡答題（總題數(shù)： 50，分數(shù)： 750.00）150. 當兩種限制性內切核酸酶的作用條件不同時，若進行雙酶切，應采取何種措施?為什么 ?（分數(shù)： 15.00 ） 正確答案： （ 用通用緩沖液；先用低鹽酶，后用高鹽；先低溫后高溫。 ） 解析：15

47、1. 什么是限制性內切核酸酶的星號活力?它受哪些因素的影響 ?分數(shù)： 15.00 ） 正確答案： （ 酶切條件的改變會對限制性內切核酸酶的專一性造成影響， 識別序列和切割都有一些變化， 改 變后的活性就是星號活力。誘發(fā)因素包括：甘油濃度大于 5%限制酶過量；低離子強度；高 pH;有機溶劑 的存在；非Mg+的二價陽離子存在等。）解析：152. 按照適當?shù)捻樞?，列出將一種 mRNA經(jīng)反轉錄克隆到表達載體所用到的酶。分數(shù)： 15.00 ）正確答案：（反轉錄酶、DNA聚合酶、SI核酸酶、限制性內切核酸酶、連接酶。）解析：153. 什么是測序酶 （sequenase）?分數(shù)： 15.00 ）正確答案：（

48、采用缺失的方法，使野生型的酶失去3'-5'外切酶活性，保留聚合酶活性，聚合能力提高了數(shù)倍。屬于序列測定專用酶。 ）解析：154. 什么是 Klenow 酶?具有哪些活性 ?簡要說明其在基因工程中的用途。分數(shù)： 15.00 ） 正確答案：（用枯草桿菌蛋白水解酶處理 DNA聚合酶I,得到一個大的片段，具有3-5'外切酶活性和5'-3' 聚合酶活性，失去了 5' -3'外切酶活性的酶。主要用途包括：補平 DNA的突出單鏈末端；標記 3'突出端; 隨機引物法標記DNA探針等。）解析：155. 如何利用T4 DNA聚合酶進行雙鏈 DNA的

49、3'端標記？分數(shù)： 15.00 ） 正確答案：（首先利用該酶的3' -5'外切酶活性在無 dNTP的條件下切割雙鏈 DNA產生突出的5'端，然后 加入放射性標記的dNTP,利用5' -3'聚合酶活性進行 DNA合成，得到兩端 3'端都被標記的雙鏈 DNA ） 解析：156. YAC載體上具有什么樣的功能性DNA序列？分數(shù)： 15.00 ）正確答案：（復制起點、著絲粒和端粒。具有克隆數(shù)百kb堿基對DNA的能力。因此，利用它作載體構建基因文庫可以顯著減少克隆的數(shù)目，降低在因文庫篩選的難度，同時也加快了染色體步移的速度。）解析：157. 作為一

50、個理想的質粒載體必須具備什么樣的特征 ?分數(shù)： 15.00 ） 正確答案： （ 復制起點、選擇性標記、克隆位點。 ） 解析：158. 什么是質粒的不親和性 ?其分子機制如何 ?分數(shù)： 15.00 ） 正確答案： （ 兩種質粒不能穩(wěn)定共存于同一個細胞中的現(xiàn)象。同一不親和群中的質粒具有相同的復制機制，相互間產生干擾。同時，細胞分裂時細胞質的不均等分配也是其原因之一。）解析：159. 簡述質粒載體的發(fā)展改造過程。分數(shù)： 15.00 ） 正確答案： （ 改造質粒的復制特性和可選擇性，把選擇性標記引入到松弛型質粒中；調整質粒的結構，提高 載體的效率，把載體的長度降低到最小，添加多克隆位點；在質粒中引入多

51、種用途的輔助序列。 ） 解析：160. 什么是藍白斑篩選 ?為什么藍白斑篩選也會有假陽性 ?分數(shù)： 15.00 ） 正確答案： （質粒上含有 lacZ' 基因，此基因為 lacZ 的5'端，編碼氨基端；宿主菌中含有 lacZ 基因的 3' 端，編碼羧基端；二者同時存在時發(fā)生分子內互補，成為具有活性的 LacZ 蛋白；當培養(yǎng)基中含有 IPTG 和 X-gal 時可以形成藍色化合物。 ）解析：161. 什么是輔助噬菌體 ?它和相應的噬菌粒是如何協(xié)同工作的 ?分數(shù)： 15.00 ）正確答案：（在主要基因間隔區(qū)含有突變，使得自身DNA復制效率低下的一類噬菌體突變體。但它們可以為

52、寄主中噬菌粒的復制與包裝提供蛋白酶與外殼蛋白，同時噬菌粒中所具有的復制子完全正常，可以利用這 些蛋白質迅速復制自身。 ）解析：162. 什么是接頭連接法 ?人工接頭在基因工程中有何用途 ?分數(shù)： 15.00 ）正確答案：（人工合成的一段含有限制性內切核酸酶識別位點的一小段DNA連接到載體或外源DNA片段上,從而方便地制造出新的酶切位點，便于二者的連接。主要用途是介導載體和插入片段的高效結合。）解析：163. CDNA文庫和基因組文庫有何區(qū)別 ？分數(shù)： 15.00 ）正確答案： （ 前者不含內含子，后者有。前者僅是部分結構基因的克隆，后者包含了基因組的全部信息。）解析：164. 什么是黏粒 ?為

53、什么它可以克隆大片段外源 DNA?分數(shù)： 15.00 ）正確答案：（具有cos位點的質粒載體就是黏粒。由于它具有該位點可以被入噬菌體的包裝蛋白包裝，從而具有克隆大片段外源 DNA的能力。）解析：165. 如果知道某一基因的功能及其相應的蛋白質的氨基酸序列組成，可以通過何種方法克隆該基因?分數(shù)： 15.00 ）正確答案：（簡并引物PCR合成寡核苷酸探針篩選基因組文庫或cDNA文庫、構建cDNA表達文庫利用相應的抗體篩選。 ）解析：166. 某一質粒載體具有 Tetr和Kanr的選擇性標記，在 Kanr基因內部有一 BarnH I切點?，F(xiàn)用Barn H I切 割該載體進行基因克隆， 問： （1） 轉化后涂皿時應加何種抗生素 ?（2） 培養(yǎng)后長出的菌落具有什么樣的抗性表 型?（3） 如何利用抗性變化篩選到含有插入片段的重組子 ?分數(shù)： 15.00 ）正確答案：（加抗生素Tet ;抗Tet，對Kan敏感；把涂皿形成的菌落影印到新的含Kan的平皿中，凡是不能生長的克隆就是陽性克隆。 ）解析：167. 簡單比較 Sotlthern 印跡、 North