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文檔簡(jiǎn)介
1、1、食品加工中的主要危害分為哪三個(gè)方面,每一方面又包括哪些主要危害因素?答:在食品加工中主要危害分為生物性危害、化學(xué)性危害和物理性危害;生物性危害又包括細(xì)菌性危害、真菌性危害、病毒性危害、寄生蟲危害、蟲鼠害;化學(xué)性危害包括天然毒素及過(guò)敏原、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、激素殘留、重金屬超標(biāo)、添加劑濫用和非法使用、包裝材料、容器與設(shè)備帶來(lái)危害;物理性危害主要指非正常外來(lái)雜質(zhì)(如玻璃、石頭、金屬、塑料等)。2、快速檢測(cè)答:即在短時(shí)間內(nèi),如幾分鐘、十幾分鐘,采用不同方式方法檢測(cè)出被檢物質(zhì)是否處于正常狀態(tài),檢測(cè)得到的結(jié)果是否符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值,被檢物質(zhì)本身是不是有毒有害物質(zhì),由此而發(fā)生的操作行為稱之為快速檢測(cè)。3、
2、簡(jiǎn)述食品安全快速檢測(cè)的意義?答:1)快速檢測(cè)是食品安全監(jiān)管人員的有利工具:在日常衛(wèi)生監(jiān)督過(guò)程中,除感官檢測(cè)外,采用現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法,及時(shí)發(fā)現(xiàn)可疑問(wèn)題,迅速采取相應(yīng)措施,這對(duì)提高監(jiān)督工作效率和力度,保障食品安全有著重要的意義。2)快速檢測(cè)是實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)的有益補(bǔ)充: 為了保障食品安全,需要檢測(cè)的產(chǎn)品、半成品以及生產(chǎn)環(huán)節(jié)有很多,一一采集樣品送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是不現(xiàn)實(shí)的。采用快速檢測(cè),可使食品安全預(yù)警前移,可以擴(kuò)大食品安全控制范圍。對(duì)有問(wèn)題的樣品必要時(shí)送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步檢測(cè),既提高了監(jiān)督監(jiān)測(cè)效率,又能提出有針對(duì)性的檢測(cè)項(xiàng)目,達(dá)到現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的有益互補(bǔ)。3)快速檢測(cè)是大型活動(dòng)衛(wèi)生保障與應(yīng)急事件處理的有效
3、措施::在大型活動(dòng)衛(wèi)生保障中,為了防止發(fā)生群發(fā)性食物中毒;在應(yīng)急事件處理中,快速篩查食物中毒可疑因子,快速檢測(cè)方法有其特殊的作用可以發(fā)揮。4)快速檢測(cè)是中國(guó)國(guó)情的一種需要:中國(guó)近30年來(lái)經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展,社會(huì)處于轉(zhuǎn)型時(shí)期,而且還會(huì)持續(xù)相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)期。在這種迅猛的商品經(jīng)濟(jì)運(yùn)行中,食品安全也出現(xiàn)了一些問(wèn)題,如農(nóng)藥、鼠藥、甲醇、亞硝酸鹽等群發(fā)性食物中毒,甲醛、吊白塊、注水肉、瘦肉精、三聚氰胺等事件的發(fā)生等。中國(guó)在提高食品安全整體水平方面仍有很長(zhǎng)的路要走,快速檢測(cè)將會(huì)在其中起到積極有效的作用。4、現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法的主要形式有哪些?答:1)試紙法:用試紙直接顯色來(lái)定性并作為限量指示:如農(nóng)藥等;用試紙層析顯
4、色或?qū)游龊竽z體金顯色來(lái)定性或作為 限量指示:如蘇丹紅、瘦肉精等;用試紙顯色的深淺來(lái)半定量:如食用油酸價(jià)、過(guò)氧化值等;2)試管法:用速測(cè)管顯色來(lái)定性:如毒鼠強(qiáng)、生豆?jié){等;用速測(cè)管顯色的深淺半定量:如亞硝酸鹽、甲醇、二氧化硫等,比色定量可以是目視,也可以用便攜式光度計(jì);3)滴瓶法:將標(biāo)準(zhǔn)溶液放在滴瓶中,根據(jù)消耗的滴數(shù)來(lái)判定被檢物質(zhì)的含量。如食醋中乙酸、醬油中氨基酸態(tài)氮等;4)便攜式儀器法:本方法是將實(shí)驗(yàn)室中的光度儀微型化,將可以用比色進(jìn)行定量的檢測(cè)項(xiàng)目的線性斜率和截距輸入儀器,現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)時(shí)不用再做標(biāo)準(zhǔn)曲線,直接得出樣品結(jié)果。有單一項(xiàng)目檢測(cè)儀,也有多項(xiàng)目檢測(cè)儀等;5)特定目標(biāo)物檢測(cè)法:如砷斑法、砷管法
5、、氰化物發(fā)生器法等等。5、快速檢測(cè)結(jié)果的表述形式有哪些?答:1)定性檢測(cè):即快速地得出被檢樣品中是否含有有毒有害物質(zhì),或其本身就是有毒有害物質(zhì)。通常以陰性或陽(yáng)性表述。陰性表示用本方法未檢出要檢測(cè)的物質(zhì)。陽(yáng)性表示檢出了有毒有害物質(zhì)。2)限量檢測(cè):即快速地得出被檢樣品中有毒有害物質(zhì)是否超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值或有效物質(zhì)是否達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值。通常以合格或不合格表述。3)半定量檢測(cè):能夠快速地得出所測(cè)物質(zhì)的大概含量,通常以合格或不合格表述,也可標(biāo)示出具體數(shù)值。4)定量檢測(cè):如溫度、濕度、消毒間紫外線輔照強(qiáng)度、純凈水電導(dǎo)率等物理指標(biāo)的檢測(cè)。通常以具體數(shù)值表述。6、簡(jiǎn)述快速檢測(cè)的注意事項(xiàng)及采樣的注意事項(xiàng)?答:檢測(cè)注意
6、事項(xiàng):1)對(duì)于陽(yáng)性結(jié)果以及不合格結(jié)果的樣品:應(yīng)重復(fù)測(cè)試,排除偶然誤差。重要樣品,如含急性中毒物質(zhì)或可能會(huì)對(duì)后期處理帶來(lái)較大社會(huì)影響或較大經(jīng)濟(jì)損失的樣品,應(yīng)注意留樣,并將樣品送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步確證。2)對(duì)于陰性與陽(yáng)性、合格與不合格之間不易判定的樣品:應(yīng)重復(fù)測(cè)試,以多次重復(fù)相同的結(jié)果報(bào)告之。采樣注意事項(xiàng):1)為了監(jiān)測(cè)總體樣品的安全衛(wèi)生狀況,應(yīng)注意采樣的代表性原則。均衡地,不加選擇地從全部批次的各部分隨機(jī)性采樣。2)為了檢驗(yàn)樣品摻假、投毒或懷疑中毒的食物等,應(yīng)注意采樣的典型性原則。根據(jù)已掌握的情況有針對(duì)性地采樣。如懷疑某種食物可能是食物中毒的原因食品,或者感官上已初步判定出該食品存在衛(wèi)生質(zhì)量問(wèn)題,而進(jìn)行
7、有針對(duì)性的選擇采樣。3)當(dāng)檢出陽(yáng)性樣品或不合格樣品時(shí),應(yīng)考慮采樣方法是否正確。必要時(shí)應(yīng)送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步檢測(cè)。7、簡(jiǎn)述利用農(nóng)藥速測(cè)卡快速檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥的基本原理,并簡(jiǎn)要敘述基于農(nóng)藥速測(cè)卡采用表面測(cè)定法快速檢測(cè)蔬菜樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥的過(guò)程?(注:可以不用寫明具體的取樣量和加樣量,只敘述過(guò)程)答:利用農(nóng)藥速測(cè)卡快速檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥的基本原理:膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍(lán)色),有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過(guò)程發(fā)生改變,由此判斷樣品中是否含有過(guò)量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留?;谵r(nóng)藥速測(cè)卡采用表面測(cè)定法快速檢測(cè)蔬菜樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥的過(guò)程:擦去蔬菜表面泥土,滴2
8、3滴浸提液(pH7.5磷酸鹽溶液)在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。取一片速測(cè)卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng),將速測(cè)卡對(duì)折(紅色藥片與白色藥片疊合)后,用手捏3min時(shí),打開與空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)卡比較,白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同為陰性結(jié)果。8、簡(jiǎn)述利用農(nóng)藥速測(cè)卡快速檢測(cè)氨基甲酸脂類農(nóng)藥的基本原理,并簡(jiǎn)要敘述基于農(nóng)藥速測(cè)卡采用整體測(cè)定法快速檢測(cè)蔬菜樣品中氨基甲酸脂類農(nóng)藥的過(guò)程?(注:可以不用寫明具體的取樣量和加樣量,只敘述過(guò)程)答:利用農(nóng)藥速測(cè)卡快速檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥的基本原理:膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯(紅色)水解為乙酸
9、與靛酚(藍(lán)色),氨基甲酸脂類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過(guò)程發(fā)生改變,由此判斷樣品中是否含有過(guò)量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留?;谵r(nóng)藥速測(cè)卡采用整體測(cè)定法快速檢測(cè)蔬菜樣品中氨基甲酸脂類農(nóng)藥的過(guò)程:選取有代表性的蔬菜樣品,擦去表面泥土,剪成1cm左右見(jiàn)方碎片,取5g放入帶蓋瓶中,加入10mL浸提液(樣品與浸提液的比例為1+2),震搖50次(有條件時(shí),可將提取瓶放入超聲波提取器中震蕩30秒),靜置2min以上。取一片速測(cè)卡,在白色藥片上滴上23滴提取液,放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng),將速測(cè)卡對(duì)折(紅色藥片與白色藥片疊合)后,用手捏3min時(shí),打開與空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)卡比較,白色藥片不變色
10、或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同為陰性結(jié)果。9、簡(jiǎn)述試劑盒法快速檢測(cè)毒鼠強(qiáng)的基本原理,針對(duì)有色液體、固體或半固體樣品采用此法的具體檢測(cè)過(guò)程?(注:可以不用寫明具體的取樣量和加樣量,只敘述過(guò)程)答:檢測(cè)原理:毒鼠強(qiáng)可與二羥基萘二磺酸發(fā)生反應(yīng)變?yōu)榈霞t色,本方法檢出限為1µg,最低檢出濃度2µg/mL。濃度高時(shí)變?yōu)樯钭霞t色。針對(duì)有色液體、固體或半固體樣品采用此法的具體檢測(cè)過(guò)程:取2mL(g)樣品放入比色管中,加入5mL乙酸乙酯,充分振搖,靜置,取上清液2mL于試管中或表面皿上,在85左右水浴中加熱,待乙酸乙酯剩余1mL以下時(shí),提高水浴溫度揮干余液,
11、放至室溫后,加入1mL的純凈水充分溶解殘?jiān)?,加?滴毒鼠強(qiáng)顯色劑,輕輕搖勻,加入5mL(約115滴)毒鼠強(qiáng)試液,輕輕搖動(dòng)后,將試管放入90以上水浴中,加熱5min后取出,觀察顏色變化。溶液顏色變?yōu)榈霞t色為毒鼠強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),隨著毒鼠強(qiáng)濃度的增加,紫色加深。同時(shí)用純凈水做陰性空白對(duì)照試驗(yàn)。有條件時(shí)可用毒鼠強(qiáng)對(duì)照液做陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)。10、簡(jiǎn)述異羥肟酸鐵顯色試劑盒法快速檢測(cè)鼠藥氟乙酰胺的基本原理,簡(jiǎn)要敘述利用此法檢測(cè)固體樣品中氟乙酰胺的過(guò)程?(注:可以不用寫明具體的取樣量和加樣量,只敘述過(guò)程)答:檢測(cè)原理:氟乙酰胺與羥胺在堿性條件下,生成異羥肟酸,與三價(jià)鐵離子作用生成紫色異羥肟酸絡(luò)合物。針對(duì)有色液體、固
12、體或半固體樣品采用此法的具體檢測(cè)過(guò)程:固體樣品研碎后取25克加3倍于樣品重的蒸餾水或純凈水,半流體樣品取25克加等量于樣品重的蒸餾水或純凈水,振搖提取,過(guò)濾,將濾液煮沸濃縮至1ml左右測(cè)定。取待檢液1ml左右于試管中(同時(shí)取一份同等量的蒸餾水或純凈水于另一試管中做陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)),各加鹽酸羥胺溶液5滴,加氫氧化鈉溶液10滴,置沸水中水浴10分鐘以上(使其充分水解釋放出氨),取出放冷后,加鹽酸溶液調(diào)整溶液pH值到34之間,加三氯化鐵溶液34滴,觀察溶液顏色變化情況,陽(yáng)性結(jié)果為粉紅或紫紅色。11、砷是糧食重金屬超標(biāo)的主要污染物之一,砷及其化合物對(duì)人體的毒害作用主要是破壞物質(zhì)代謝,損害肝臟、心臟及神經(jīng)
13、系統(tǒng)。目前,針對(duì)重金屬砷的快速檢測(cè)方法有哪些?請(qǐng)舉出一種并說(shuō)明其檢測(cè)原理和簡(jiǎn)要的檢測(cè)判定過(guò)程?(注:可以不用寫明具體的取樣量和加樣量,只敘述過(guò)程)答:目前,針對(duì)重金屬砷的快速檢測(cè)方法可采用銅片加熱的方法,其檢測(cè)原理為:在酸性條件下,重金屬砷及其化合物可與金屬銅作用使銅片變?yōu)楹谏蚧疑纱送茰y(cè)可能存在的砷及其有害化合物。檢測(cè)過(guò)程:取樣品5g于三角燒瓶中,加入約25mL蒸餾水或純凈水,加入5mL鹽酸,加入約0.5g氯化亞錫混合試劑,將三角燒瓶放在加熱裝置上,使樣液微沸約10min(目的是驅(qū)除可能存在的硫化物或亞硫化物),加入2片銅片, 保持樣液微沸約20min。如果液體蒸發(fā)較快,注意補(bǔ)加一些熱的
14、蒸餾水或純凈水。若加熱30min后銅片表面變?yōu)楹谏蚧疑?,可懷疑樣品中含有砷及其化合物?2、1953-1956年,日本熊本縣水俁灣發(fā)生了“水俁病”事件,即氮肥股份公司排放含甲基汞的廢水,污染水俁灣和不知火海的水體及水中的魚貝類,使附近長(zhǎng)期大量食用這種魚貝類的居民中毒受害。目前,汞及其化合物已成為糧食重金屬超標(biāo)的主要污染物之一。當(dāng)前,針對(duì)重金屬汞的快速檢測(cè)方法有哪些?請(qǐng)舉出一種并說(shuō)明其檢測(cè)原理和簡(jiǎn)要的檢測(cè)判定過(guò)程?(注:可以不用寫明具體的取樣量和加樣量,只敘述過(guò)程)答:目前,針對(duì)重金屬汞的快速檢測(cè)方法可采用銅片加熱的方法,其檢測(cè)原理為:在酸性條件下,重金屬汞及其化合物可與金屬銅作用使銅片變?yōu)殂y
15、白色,由此推測(cè)可能存在的汞及其有害化合物。檢測(cè)過(guò)程:取樣品5g于三角燒瓶中,加入約25mL蒸餾水或純凈水,加入5mL鹽酸,加入約0.5g氯化亞錫混合試劑,將三角燒瓶放在加熱裝置上,使樣液微沸約10min(目的是驅(qū)除可能存在的硫化物或亞硫化物),加入2片銅片, 保持樣液微沸約20min。如果液體蒸發(fā)較快,注意補(bǔ)加一些熱的蒸餾水或純凈水。若加熱30min后銅片表面變?yōu)殂y白色,可懷疑樣品中含有汞及其化合物。13、腐爛變質(zhì)蔬菜含有較大量的亞硝酸鹽,亞硝酸鹽進(jìn)入血液后與血紅蛋白結(jié)合,變?yōu)楦哞F血紅蛋白,失去攜氧能力,導(dǎo)致組織缺氧,不僅會(huì)使人中毒,它還有致癌作用。目前,針對(duì)食品中亞硝酸鹽的快速檢測(cè)方法是什么
16、?簡(jiǎn)述其基本原理和針對(duì)固體或半固體樣品的檢測(cè)過(guò)程?(注:可以不用寫明具體的取樣量和加樣量,只敘述過(guò)程)答:目前,針對(duì)食品中亞硝酸鹽的快速檢測(cè)方法是速測(cè)管測(cè)定法,其基本檢測(cè)原理為:亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸在偏酸性條件下發(fā)生重氮化形成重氮鹽,重氮鹽與鹽酸萘乙二胺發(fā)生偶合反應(yīng)而呈現(xiàn)酒紅色。 固體或半固體樣品中亞硝酸鹽的檢測(cè)過(guò)程:取粉碎均勻的樣品1.0g或1.0ml至10ml比色管中,加蒸餾水或去離子水(純凈水)至刻度,充分震搖后放置,取上清液(或過(guò)濾或離心得到的上清液)1.0ml加入到檢測(cè)管中,蓋上蓋,將試劑搖溶,10分鐘后與標(biāo)準(zhǔn)色板對(duì)比,該色板上的數(shù)值乘上10即為樣品中亞硝酸鹽的含量mg/ kg,L
17、(以NaNO2計(jì))。如果測(cè)試結(jié)果超出色板上的最高值,可定量稀釋后測(cè)定,并在計(jì)算結(jié)果時(shí)乘上稀釋倍數(shù)(如從10ml比色管中取出1.0mL轉(zhuǎn)入另一支10ml比色管中,加水至刻度,從中取1.0mL加入到檢測(cè)管中測(cè)定,測(cè)試結(jié)果乘上100(稀釋倍數(shù))即為樣品中亞硝酸鹽的含量。14、甲醇和乙醇在色澤與味覺(jué)上沒(méi)有差異,酒中微量甲醇可引起人體慢性損害,高劑量時(shí)可引起人體急性中毒。簡(jiǎn)述速測(cè)盒測(cè)定法測(cè)定液體樣品中甲醇的基本原理?答:首先向樣品中加入酸性高錳酸鉀溶液,甲醇很容易氧化成甲醛,而其他醇類則不易氧化成相應(yīng)之醛類。再與亞硫酸氫鈉反應(yīng),將未反應(yīng)的紫色高錳酸鉀轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)色,再加人0.01 g的變色酸二鈉鹽和1mL的
18、濃硫酸,此指示劑只和甲醇氧化后的甲醛起反應(yīng),變色酸二鈉鹽與甲醇的氧化產(chǎn)物甲醛反應(yīng)的最終產(chǎn)物顯紫色,與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)照顯示樣品中甲醇含量。15、簡(jiǎn)述膠體金標(biāo)記的全定量免疫層析技術(shù)的基本原理?并簡(jiǎn)要敘述結(jié)果判讀的方法,以及舉例說(shuō)明其在食品安全快速檢測(cè)方面的應(yīng)用?答:膠體金標(biāo)記的全定量免疫層析技術(shù)的基本原理:樣品加入樣品吸收墊,樣品中的液體首先溶解膠體金墊中含有的膠體金標(biāo)記的鼠源性單克隆抗體。其次樣品中待測(cè)抗原與膠體金顆粒標(biāo)記的鼠源性單克隆抗體結(jié)合,形成抗原-抗體-膠體金復(fù)合物,并靠毛細(xì)作用向檢測(cè)線移動(dòng)。在硝酸纖維薄膜的檢測(cè)線上固定有另一鼠源性單克隆二抗。當(dāng)樣品層析至檢測(cè)線時(shí),可以進(jìn)一步形成抗體-抗原
19、-抗體-膠體金雙抗體夾心復(fù)合物,并在檢測(cè)線上聚積顯現(xiàn)出一條可見(jiàn)的顯色反應(yīng)。無(wú)顯色反應(yīng)則表示樣品中無(wú)抗原存在。而膠體金的量反應(yīng)了待測(cè)抗原的量。從加樣墊中泳動(dòng)過(guò)來(lái)的過(guò)量膠體金標(biāo)記的單克隆抗體是鼠源性的,無(wú)論攜帶抗原與否,均可被固定于標(biāo)準(zhǔn)的羊抗鼠抗體所捕獲,形成顯色反應(yīng),這種顯色反應(yīng),既代表了整個(gè)反應(yīng)體系是正確的,同時(shí)C區(qū)的顯色反應(yīng)的深淺,與檢測(cè)區(qū)中被測(cè)抗原的量呈對(duì)應(yīng)關(guān)系。膠體金顆粒在特定波長(zhǎng)下,對(duì)光的吸收和散射與膠體金顆粒的量相關(guān),通過(guò)光電感應(yīng)器檢測(cè)膠體金顆粒對(duì)光的吸收和散射,從而獲得待測(cè)抗原的量。結(jié)果判讀:如果檢測(cè)線T區(qū)、質(zhì)控線C區(qū)上出現(xiàn)紅色條帶,說(shuō)明樣品呈陽(yáng)性;如果質(zhì)控線C區(qū)上出現(xiàn)紅色條帶,檢
20、測(cè)線T區(qū)上沒(méi)出現(xiàn)紅色條帶,說(shuō)明樣品呈陰性;如果質(zhì)控線C區(qū)無(wú)紅色條帶,說(shuō)明試紙條無(wú)效。目前,利用膠體金標(biāo)記的全定量免疫層析技術(shù)在食品安全快速檢測(cè)方面的應(yīng)用如肉制品中瘦肉精的快速檢測(cè)、奶制品中三聚氰胺的快速檢測(cè)。16、目前針對(duì)真菌毒素的快速檢測(cè)主要以應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)檢測(cè)方法,請(qǐng)簡(jiǎn)述其基本檢測(cè)原理,以及ELISA檢測(cè)方法的主要優(yōu)點(diǎn)?答:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用
21、洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。 ELISA檢測(cè)方法的主要優(yōu)點(diǎn):1)由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而,具有很高的特異性;2)另一方面由于酶標(biāo)記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的敏感性;3)ELISA法還具有簡(jiǎn)單、快速、
22、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn),且適用于大批量標(biāo)本的檢測(cè)。17、完整的黃曲霉毒素B1(AFB1)酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)試劑盒主要包括哪些組分?請(qǐng)采用圖示的方式簡(jiǎn)述雙抗體夾心法測(cè)抗原的具體過(guò)程?答:完整的黃曲霉毒素B1(AFB1)酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)試劑盒包括以下組分:已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)、酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)、酶的底物、陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品、結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液、洗滌液、酶反應(yīng)終止液。雙抗體夾心法測(cè)抗原的具體過(guò)程:1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2) 加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相
23、抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3) 加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過(guò)比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。18、針對(duì)蘇丹紅(1、2、3、4號(hào))等油溶性非食用色素的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法是什么?請(qǐng)簡(jiǎn)述其基本檢測(cè)原理、及其檢測(cè)過(guò)程?答:目前,針對(duì)蘇丹紅(1、2、3、4號(hào))等油溶性非食用色素的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法是層析法,其基本原理是:利用混合物中各組分物理化學(xué)性質(zhì)的差異(如吸附力、分子形狀及大小、分子親和力、分配系數(shù)等),使各組分在兩相(一相為固定的,稱
24、為固定相;另一相流過(guò)固定相,稱為流動(dòng)相)中的分布程度不同,從而使各組分以不同的速度移動(dòng)而達(dá)到分離鑒定的目的。檢測(cè)過(guò)程如下:1)樣品處理:取約1克樣品于容器中,加入24 ml乙酸乙酯,充分混勻,提取1分鐘,靜置3分鐘以上。2)樣品點(diǎn)樣: 在層析紙端底向上約1cm處、平行相隔約1cm,分別用毛細(xì)管沾取樣品點(diǎn)出5個(gè)直徑在0.5cm左右的圓點(diǎn),用毛細(xì)管分別沾取蘇丹紅1、2、3、4號(hào)對(duì)照液少許點(diǎn)在1、2、3、4號(hào)樣品點(diǎn)上。3)樣品展開:取一個(gè)250ml以上的燒杯,加入約5ml展開劑,將層析紙(樣品端朝下)插入展開劑中靠在杯壁上,待展開劑延層析紙向上平行展開至層析紙頂端約1厘米處時(shí)取出層析紙,觀察結(jié)果。4
25、)結(jié)果判斷:如果樣品在展開軌跡中出現(xiàn)斑點(diǎn),其斑點(diǎn)展開(向上跑)的距離與某一對(duì)照液展開后的斑點(diǎn)距離相等、顏色相同或顏色雖淺卻相近時(shí),即可判斷樣品中含有這一色素。19、由于甲醛可以改變一些食品的色感并有防腐作用,在無(wú)知或金錢利益的驅(qū)使下,一些不法分子在食品中加入了甲醛。目前,針對(duì)水發(fā)水產(chǎn)品中甲醛的快速檢測(cè)方法有哪些,其基本原理是什么?答:方法一、間苯三酚顯色法:在堿性條件下,甲醛與間苯三酚反應(yīng)后使溶液出現(xiàn)橙紅色。由于此方法的靈敏度較低,水產(chǎn)品本底存在的甲醛很難參與反應(yīng)。當(dāng)人為加入甲醛時(shí),本方法可迅速檢測(cè)出來(lái)。 方法二、AHMT試劑顯色法:甲醛與AHMT(4-氨基-3-聯(lián)氨-5-疏基-1,2,4-三
26、氮雜茂)在堿性條件下縮合,經(jīng)高碘酸鉀氧化成紫紅色化合物,然后與比色板比對(duì)得出甲醛含量。此方法的靈敏度較高,檢出限可達(dá)0.25mg/kg。20、簡(jiǎn)述平板培養(yǎng)法檢測(cè)微生物總數(shù)的具體流程,以及ATP熒光檢測(cè)法快速檢測(cè)餐飲具與食物加工器具表面潔凈度的基本原理?答:平板培養(yǎng)法檢測(cè)微生物總數(shù)過(guò)程:目前測(cè)定細(xì)菌總數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)方法是將待測(cè)樣品在無(wú)菌的情況下,稀釋成23種適宜的稀釋度,取每個(gè)稀釋度待測(cè)樣品1 mL放入有15 mL培養(yǎng)基的滅菌平皿中在36±1 溫箱中培養(yǎng)48±2 h,取出計(jì)算平皿中菌落數(shù),再乘以稀釋倍數(shù),即得每克或每毫升樣品中所含的細(xì)菌總數(shù)。實(shí)驗(yàn)中還要做平行樣品,同時(shí)作空白對(duì)照。A
27、TP熒光檢測(cè)法快速檢測(cè)餐飲具與食物加工器具表面潔凈度的基本原理:ATP是三磷酸腺苷的英文縮寫,是生物能量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物, 存在于所有活的細(xì)胞體中。當(dāng)ATP接觸到熒光素酶后,就會(huì)發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生出光,物體表面殘留的食物和微生物越多,ATP也就越多,發(fā)出的熒光也就越強(qiáng),采用熒光光度計(jì),可將這種光的強(qiáng)度加以記錄。21、丙烯酰胺是淀粉類食品(如方便面、油條等)在高溫烹調(diào)下容易產(chǎn)生的主要危害因子。聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織聯(lián)合食品添加劑專家委員會(huì)對(duì)食品中的丙烯酰胺進(jìn)行了系統(tǒng)的危險(xiǎn)性評(píng)估,其神經(jīng)毒性、生殖發(fā)育毒性和遺傳毒性均得到證實(shí),并被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)列為2類致癌物(即人類可能致癌物)。許多國(guó)家規(guī)定在飲用水中丙
28、烯酰胺單體的濃度不應(yīng)超過(guò)0.25 g/L。由此食品中丙烯酰胺的污染問(wèn)題引起了國(guó)際社會(huì)的高度關(guān)注?;谠搯?wèn)題的普遍性相迫切性,世界衛(wèi)生組織和聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織在聯(lián)合舉辦的食品中丙烯酰胺問(wèn)題專家咨詢會(huì)上建議將建立對(duì)食物中丙烯酰胺較為簡(jiǎn)便、成本低廉的檢測(cè)方法作為各國(guó)今后的一個(gè)重要研究方向,為食品質(zhì)量控制提供方便、可靠的檢測(cè)手段。目前檢測(cè)丙烯酰胺的常用方法主要集中為色譜、質(zhì)譜的分析方法,該類方法樣品預(yù)處理要求高、步驟繁瑣,依賴大型、昂貴的儀器設(shè)備,并且不能同時(shí)測(cè)定多個(gè)樣品,不適合大規(guī)模的樣品檢測(cè)。欲現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)油炸淀粉類食品中丙烯酰胺,請(qǐng):(1)設(shè)計(jì)出最佳的分析方法,并簡(jiǎn)要說(shuō)明所提方法的基本原理;(2)寫出具體檢測(cè)過(guò)程包括樣品處理過(guò)程。(20分)附注:丙烯酰胺是一種不飽和酰胺,別名AM,結(jié)構(gòu)式: CH2=CHCONH2,分子量:71.08,其單體為無(wú)色透明片狀結(jié)晶,沸點(diǎn)125(3325Pa),熔點(diǎn)8485,密度1.122g/cm3。能溶于水、乙醇
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