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文檔簡介
1、二、免疫抑制藥物應用免疫抑制劑可明顯延長移植物在受者體內的存活時間。長時間接受 免疫抑制劑的受者發(fā)生感染和惡性腫瘤的可能性明顯增大。環(huán)抱素A、他克莫司 (FK506)通過抑制IL-2基因的轉錄而抑制T細胞活化。糖皮質激素誘導活化的T 細胞凋亡,下調MHC分子的表達。硫醴嚓吟可抑制次黃嚓吟核昔酸代謝,干擾DM 合成,從而抑制T淋巴細胞增生??谷薈D3抗體可抑制T細胞的免疫應答。三、誘導耐受誘導對移植物的免疫耐受應是控制排斥反應的最理想方法,但該類方法迄今 多處于實驗研究階段。第十九單元免疫學檢測技術【考試大綱】十九、免疫學檢測 技術1.抗體的檢測及應用抗體進行的 檢測(1)概念(2)血凝抑制(3
2、)凝集反應和血型的鑒定(4)免疫熒光(5)放射免疫(6)酶免疫(ELISA和免疫組化)(7)免疫電鏡(8)免疫沉淀(9)免疫印跡2.免疫細胞的分離常用方法3.免疫細胞的特異性、數量和功(1)流式細胞術能檢測(2)增殖試驗(3)細胞毒試驗(4)細胞凋亡檢測(5)芯片技術(6)細胞因子的生物活性檢 測抗體的檢測及應用抗體進行的檢測一、概念免疫學檢測的基本原理是抗原-抗體的特異性結合,山于抗體長存在于血清 中,因此常將體外進行的抗原抗體結合反應稱為血清學反應。常見的反應類型有凝 集反應、沉淀反應、中和反應等,相關的技術稱為血清學技術。二、血凝抑制有血凝素(HA)的病毒能凝集人或動物紅細胞,稱為血凝現
3、象,通常用于病 毒的檢測。血凝現象被相應抗體抑制稱為血凝抑制試驗,原理是相應抗體與病毒結 合后,阻止病毒表面HA與紅細胞結合,通常用于病毒抗體的快速檢測。常用于正 粘病毒、副粘病毒及黃病毒等的輔助診斷、流行病調查,也可用于鑒定病毒型與亞 型。不同的病毒抗體也會相同。三、凝集反應和血型的鑒定紅細胞、細菌等顆粒性抗原與相應抗體特異性結合后,形成肉眼可見的凝集 塊,這一類反應稱為凝集反應。 直接凝集:顆粒性抗原與相應抗體結合產生的凝集反應??设b定細菌和血 型。如玻片法為定性試驗,常用于菌種鑒定或人類ABO血型的鑒定等。試管法是半 定量試驗,常用于檢測抗體的滴度或效價。 間接凝集:將可溶性抗原或抗體包
4、被在紅細胞或乳膠顆粒載體表面后,與 相應抗體或抗原作用出現的凝集。顆粒載體有紅細胞、聚苯乙烯乳膠顆粒等,而相 應的凝集現象分別稱為間接血球凝集、間接乳膠凝集,如將人IgG吸附在乳膠顆粒 上的類風濕因子的檢測等。將已知抗體吸附在載體上的凝集稱為反向間接凝集。如 Rh血型不符檢測中隊患者抗紅細胞Rh抗原IgG的檢測。四、免疫熒光免疫熒光是用熒光素與抗體連接成熒光抗體(或抗原),再與待檢標本中的 抗原(或抗體)反應,置熒光顯微鏡下觀察,抗原抗體復合物散發(fā)出熒光,借此對 標本中的抗原作鑒定和定位。免疫熒光法在病原體的診斷、細胞表面標志的鑒定等 方面用途廣泛。五、放射免疫放射免疫技術為一種將放射性同位素
5、測量的高度靈敏性、精確性和抗原抗體 反應的特異性相結合的體外測定超微量物質的新技術。廣義來說,凡是應用放射性 同位素標記的抗原或抗體,通過免疫反應測定的技術,都可稱為放射免疫技術,經 典的放射免疫技術是標記抗原與未標抗原競爭有限量的抗體,然后通過測定標記抗 原抗體復合物中放射性強度的改變,測定出未標記抗原量。它可以分為兩類:競爭 性RIA和非競爭性RIA,也稱為免疫放射分析。六、酶免疫(ELISA和免疫組化)酶免疫分析用酶標記的抗體進行的抗原抗體反應。酶標記抗原抗體后形成的酶標記物,既保留抗原或抗體的免疫活性,乂保留 酶的催化活性。當酶標記物與待測樣品中相應的抗原或抗體相互作用時,可形成酶 標
6、記抗原抗體復合物。利用復合物上標記的酶催化底物顯色,其顏色深淺與待測樣 品中抗原或抗體的量相關。該方法靈敬度可達到陰pg/ml水平。常用的標記物有 辣根過氧化物酶HRP和堿性磷酸酶AP等。七、免疫電鏡免疫電鏡是將免疫化學技術與電鏡技術相結合在超微結構水平觀察抗原、抗 體結合定位的方法。八、免疫沉淀免疫沉淀是將抗原和抗體特異性結合用于研究蛋口質相互作用的經典方法, 可確定兩種蛋口質在細胞內生理性相互作用。九、免疫印跡免疫印跡試驗乂稱Western印跡法。該法能測定待檢蛋口質的分子量和特異 性。應用該法檢測血清中的人免疫缺陷病毒(HIV)抗體是確認HIV感染的方法。免疫細胞的分離常用方法體外測定免
7、疫細胞首先要從外周血或淋巴組織中分離所需的細胞。其主要方 法是根據細胞的表面標記、理化性狀及功能等方面的差別進行設計。常用的方法有 密度梯度離心法輔以花環(huán)沉降或親合板粘附法等。U前最先進的方法是用熒光激活 細胞分離儀(FACS)可自動、快速和大量地分出各類純度高、活性強的細胞。免疫細胞的特異性、數量和功能檢測一、流式細胞術根據表面表達CD分子的種類、水平和多種CD表達格局,流式細胞術可以二 維熒光方圖和比例統(tǒng)計顯示待測細胞群體中某群CD+細胞的比例和數量等。二、增殖試驗增殖試驗也叫淋巴細胞轉化試驗??煞譃門細胞增殖試驗、遲發(fā)型超敏反應 皮試、B細胞抗體形成細胞測定。三、細胞毒試驗細胞毒試驗是檢
8、測CTL、NK等細胞殺傷靶細胞活性的最為經典可靠的細胞學 技術。四、細胞凋亡檢測細胞凋亡檢測有瓊脂糖凝膠電泳法、FACS法和TUNEL法。五、芯片技術芯片技術基本原理是將各種蛋口質有序地固定于芯片,再用熒光標記抗體與 芯片上對應的蛋白質結合,測定芯片上各點的熒光強度可指示對應的蛋白質的含 量。六、細胞因子的生物活性檢測細胞因子的檢測技術:生物活性測定法;ELISA檢測;DNA聚合酶鏈反 應。第二十單元免疫學防治【考試大綱】二十、免疫學防治1.免疫治療(1)概念(2)分類(3)應用2.免疫預防(1)人工免疫的概念(2)人工免疫的分類(3)疫苗的種類及應用免疫治療一、概念針對機體低下或亢進的免疫狀態(tài),人為地增強或抑制機體的免疫功能以達到 治療疾病目的的治療方法稱為免疫治療。二分類分類名稱用途或特點免疫增強療法感染、腫瘤、免疫缺陷病的治療免疫抑制療法移植排斥、自身免疫病、超敬反應病、炎癥的治療主動免疫治療人為提供具有免疫原性的制劑,使機體主動產生特異性免疫力被動免疫治療人為提供免疫應答的效應物質,直接發(fā)回免疫效應特異性免疫治療調整機體免疫功能所用制劑的作用具有抗原特異性非特異性免疫治療調整機體免疫功能所用
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