固本得康對(duì)放射條件下小鼠免疫調(diào)變及抗輻射作用的實(shí)驗(yàn)研究

1、    固本得康對(duì)放射條件下小鼠免疫調(diào) 變及抗輻射作用的實(shí)驗(yàn)研究        摘要：目的在放射條件下進(jìn)行固本得康 對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)及抗輻射作用實(shí)驗(yàn)研究。方法給藥后60C0照射對(duì) 小鼠進(jìn)行抗輻射損傷、外周血、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能、骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)；給藥 后 行移植瘤試驗(yàn)。結(jié)果固本得康具有抗輻射損傷、延長(zhǎng)壽命提高存活率；抑 制和/或延緩腫瘤生長(zhǎng)；保護(hù)和提高巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)；降低微核出現(xiàn)率的顯著作 用。結(jié)論固本得康可能主要是通過(guò)神經(jīng)遞質(zhì)重建并實(shí)現(xiàn)神經(jīng)內(nèi)分泌

2、免 疫系統(tǒng)的平衡，間接影響免疫應(yīng)?；參與 和促進(jìn)骨髓細(xì)胞及NA、DNA和蛋白質(zhì)的合成；抗輻射引起的細(xì)胞膜表面糖蛋白脫落和膜脂質(zhì) 流動(dòng)性的改變。關(guān)鍵詞：免疫調(diào)變；抗輻射損傷；微核出現(xiàn)率中分類號(hào)：R73-33文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1000-8578(2000)03-0194-03 Expetimental Leseach in Immunozagulation and Anti-LadiaT ionof Gubendekang in Mice unolez ZadiationHUANG Huan-yuan,FU You-gao,GUO Gong-lian（HuBci Cancer Intitut

3、e,Wuhan 430079,China）Abstract:Objective The purpose of this experment is to study the effect of Guben-dekang in mice under adiation on immun-regulation and ant i-radiation.Methods mice(C57BL、NiH) were fed Gubendekang befose transplanted tumor.The peripheral blood white cells and the function of macr

4、ophage of abdomina cavity and microuncleus of The bone marrow were assayed undez ladiation of the 60C0.Results Gubendekang not onl y had sign-ifiant effect on anttinadiation injur,but also increase survival rat e.Gubendekang could enhance the phagocytic power of macrophage and effect of imm unoregul

5、ation of phagocylic index.Conclusion Gubendekang possibly la kes effect by Nelso which improves the functional reconstitution of stom cells of the bone marrow and realizes intesaction of the newso.Key words:Immunregulation;Anti-radiation injwry;Microuncleus rate of appearance免疫調(diào)變理論認(rèn)為，正常情況下，腫瘤與機(jī)體防御之間

6、處于動(dòng)態(tài)平衡。癌變 的發(fā)生，增殖與擴(kuò)散，完全是這種動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)所致。在腫瘤放療中，射線殺傷腫瘤細(xì)胞的 同時(shí)，對(duì)機(jī)體也造成較大的輻射損傷，出現(xiàn)機(jī)體衰弱，消化功能障礙，骨髓抑制，免疫功能 下降等毒副反應(yīng)。探索扶正，滋陰補(bǔ)腎，生津潤(rùn)燥，涼補(bǔ)氣血中藥與放射治療聯(lián)合應(yīng)用，降 低毒副反應(yīng)，提高放射治療效果和生存質(zhì)量，為腫瘤病因?qū)W預(yù)防開(kāi)拓新的途徑，是本課題研 究的目的。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)用藥由六味地黃湯16味中藥組成；放射源系加拿大產(chǎn)6000居里60C0治療機(jī)；實(shí) 驗(yàn)動(dòng)物C5760C0180細(xì)胞懸液(含5×106/m l)于實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組小鼠前腿右下側(cè)皮下分別注射Lewis肺癌、S18

7、02檢 測(cè)差異顯著性。2結(jié)果及分析2.1抗輻射損傷的實(shí)驗(yàn)結(jié)果60C010GY半數(shù)致死量照射后24天對(duì)照小鼠5/10只死亡，用藥組10只存活。 27.30，P0.01，兩組差異有極顯著意義。60C012GY超半數(shù)致死量照射后第9天，對(duì)照組小鼠5/10只死亡，用藥組10/10只 健存。24.4924.493.840.05兩組差異有顯著意 義與半數(shù)致死存活時(shí)間均值分別為228小時(shí)和144小時(shí)，藥物組存活時(shí)間比對(duì)照組長(zhǎng)84小時(shí)， 為對(duì)照組半數(shù)致死存活時(shí)間的1.63倍。2.2灌胃固本得康后，60C05.2GY、6.8GY、12GY照射對(duì)小鼠周?chē)笥绊?的檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表1。表1固本得康灌胃3天后60C0

8、5.2、6.8、12 GY照射小鼠周?chē)笥绊憴z測(cè)結(jié)果照射量(GY)用藥組WBC/ml對(duì)照組WBC/mlT值P值5.27050±9804230±5664.3670.0016.85040±4323050±1494.3440.001123400±1942200±1459.390.0012.3固本得康灌胃C57BL小鼠7天后對(duì)S180，Lewis肺癌移植瘤抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見(jiàn)表2。 表2固本得康灌胃C57小鼠7天后對(duì)S18 0Lewis肺癌移植瘤抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別瘤重(g、±s)瘤重比值(實(shí)驗(yàn)：對(duì)照)t值P值S180+固本得康0.98&

9、#177;0.17S180對(duì)照2.48±0.2612.535.29670 .001Lewis+固本得康0.644±0.14Lewis對(duì)照1.77±0.3112.613.49940.012.4固本得康對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。 表3固本得康灌胃3天后60C0照射對(duì)NiH 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別鼠數(shù)未吞吞噬吞噬率(%)吞噬指數(shù)1234陽(yáng)性對(duì)照7800425118451242.86±18.70.6029瘤株接種組710803145013527.28±16.830. 33646GY71190180192014.36

10、±13.250.16006GY+固本得康7960300391030.72±17.440 .33428GY7125514320010.39±11.530.10508GY+固本得康71025354183025.36±16.440.26676GY+固本得康、8GY+固本得康分別與對(duì)照組比較，吞噬率和吞噬指數(shù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 t值分別為14.4、4.89和17.19、17.74，差異有極顯著意義。2.5固本得康對(duì)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核出現(xiàn)率影響檢測(cè)結(jié)果() 表4固本得康灌胃3天后60C0照射對(duì)NiH小鼠微核出現(xiàn)率影響檢測(cè)結(jié)果編號(hào)陽(yáng)性組()s陰性組()6GY()6G

11、Y+固本得康()8GY()8GY+固本得康()1161251536172182292131383150NO1730194183391526165220282233236181211851157112NO23211081602184925920131192619101102519351716.501.0±1.028.6±6.317.7±3.933.8±6.719.90±4.46GY、8GY+固本得康和對(duì)照組照射結(jié)果見(jiàn)表(4)。t值分別為4.56和3.58，P 0.001和0.01，兩組差異有極顯著意義。表明固本得康在不同劑量水平60C 0照射下，

12、均有顯著降低微核出現(xiàn)率作用。3討論中醫(yī)理論認(rèn)為“氣為血帥、血為氣母、氣虛血不能自生，氣旺可以生血”“脾胃乃血液生成 之源，營(yíng)氣入心脈有化生血液作用”；“腎藏精，精生髓，髓生血”。射線對(duì)機(jī)體的損傷， 中醫(yī)癥候?qū)W認(rèn)為是熱毒傷陰，腎精虧損，腎氣虛衰，抗病免疫機(jī)能下降。針對(duì)腫瘤放射治療 中出現(xiàn)的毒副反應(yīng)，本課題立論原則是健脾和胃、生津潤(rùn)燥、涼補(bǔ)氣血，滋陰補(bǔ)腎，祛清源 。達(dá)到抗輻射損傷，免疫調(diào)變，激活抑制腫瘤機(jī)制的作用。固本得康具有極顯著提升白細(xì)胞，保護(hù)血象和恢復(fù)骨髓造血功能的效果；應(yīng)用固本得康進(jìn) 行S180、Lewis肺癌C57BL小鼠荷瘤試驗(yàn)，結(jié)果是用藥組瘤重顯著低于對(duì)照組； 固本得康具有顯著提高腹

13、腔巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)的作用。有報(bào)道2 、3滋陰補(bǔ)腎中藥有顯著促脾細(xì)胞增殖，增強(qiáng)細(xì)胞因子特別是IL-1，IL-2的產(chǎn)生和組織 分布的改變?；罨疶細(xì)胞，激活脾，胸腺T淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生變化，增強(qiáng)NK細(xì)胞及IL-2依賴的 LAK細(xì)胞活性4。GM-CSF，IL-1，IL-6對(duì)骨髓造血干細(xì)胞損傷有不同程度的保護(hù)作 用1。早在1924年，SI，Metal?nikov論證了巴甫洛夫條件反射可改變免疫應(yīng)答。V、Ghanta4論述了NK細(xì)胞活性的條件性免疫促進(jìn)作用中傳 出支和傳入支神經(jīng)化學(xué)方面的變化。童強(qiáng)等5報(bào)道神經(jīng)肽中的速激肽SK和SP在亞 適量的CanA或Lps共同作用下，能促進(jìn)脾臟細(xì)胞的體外增殖和抗體

14、生成。SK能使ConA激活的 脾臟和胸腺T淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生變化4。宮斌等3報(bào)道補(bǔ)腎中藥對(duì)正常 大鼠腦和脾臟神經(jīng)遞質(zhì)有明顯的促進(jìn)作用，對(duì)被SRBC(羊紅血球)免疫后，使降低了的神經(jīng)遞 質(zhì)含量恢復(fù)正常。固本得康免疫調(diào)變作用，可能主要是神經(jīng)免疫學(xué)上的調(diào)節(jié)。促進(jìn)條件 性免疫中的傳入和傳出支神經(jīng)化學(xué)方面的變化，糾正免疫紊亂，激活機(jī)體抗腫瘤免疫機(jī)制， 增強(qiáng)抗腫瘤的細(xì)胞毒效應(yīng)。固本得康的極顯著的抗輻射損傷效果，目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。在半數(shù)致死， 超半數(shù)致死量照射下、具有顯著延長(zhǎng)用藥組小鼠生存期，提高生存率的效果；對(duì)放射后小鼠 骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核出現(xiàn)率，用藥組顯著低于單放組。輻射介異的主要損傷在胞核、胞質(zhì)

15、導(dǎo)致細(xì)胞溶解死亡或核染色體斷裂，形成微核6。微核是染色體畸變的一種形 式，其生物學(xué)意義被認(rèn)為可能是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的決定因素。固本得康抗微核、抗輻射損傷的 本質(zhì)，可能是最大限度保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的正常和完整，抗輻射引起的細(xì)胞膜表面糖 蛋白脫落和膜脂質(zhì)流動(dòng)性的改變6，在腫瘤臨床治療和高危人群病因?qū)W預(yù)防方面 具有極重要的應(yīng)用價(jià)值。 作者單位：黃環(huán)元（430079武漢，湖北省腫瘤研究所）付由高（430079武漢，湖北省腫瘤研究所）郭貢年（湖北省腫瘤醫(yī)院）參考文獻(xiàn)：1王景華，段金珠，白小薇，等.91合劑加速輻射損傷小鼠免疫功能的恢復(fù) J.中國(guó)免疫學(xué)雜志，1993，9(3)：92.2李求是，楊貴貞，周?chē)?yán)恒，等.生物反應(yīng)調(diào)變劑Gwe抗腫瘤效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究J.中 國(guó)免疫學(xué)雜志，1991，7(1)：75.3宮斌，莫啟忠，莫志紅，等.補(bǔ)腎中藥對(duì)SRBC免疫大