【圖文】實(shí)驗(yàn)三:分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)含量_第1頁(yè)
【圖文】實(shí)驗(yàn)三:分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)含量_第2頁(yè)
【圖文】實(shí)驗(yàn)三:分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)含量_第3頁(yè)
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2.樣品提取液中蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定 吸取樣品提取液1.0 mL( why? ,放入 試管 中 ,加入5Ml考馬斯亮藍(lán)G250溶液,充分混 合,放置2Min后在595nM下比色,記錄吸光值, 并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查得蛋白質(zhì)含量。 注意事項(xiàng): 1)如果測(cè)定要求很?chē)?yán)格,可以在試劑加 入后的5-20 min內(nèi)測(cè)定光吸收,因?yàn)檫@ 段時(shí)間內(nèi)顏色最穩(wěn)定。 2)測(cè)定中,蛋白-染料復(fù)合物會(huì)有少部 分吸附于比色杯壁上,但此復(fù)合物的吸 附量可以忽略。測(cè)定完后可用乙醇將藍(lán) 色的比色杯洗干凈。 思考題 (1)試比較該法與其他幾種常用蛋白質(zhì) 定量測(cè)定方法的優(yōu)缺點(diǎn)。

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