人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課件

1、蛇身蛇身馬首馬首鹿角鹿角獸腳獸腳鬣尾鬣尾鷹爪鷹爪魚鱗魚鱗虎須虎須。 受精卵受精卵來自精子來自卵細(xì)胞人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體不同不同DNADNA的兩個(gè)細(xì)胞的兩個(gè)細(xì)胞AB人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過程用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過程細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒病毒顆粒細(xì)胞核細(xì)胞核滅活喪失感染性滅活喪失感染性保留融合活性保留融合活性不同不同DNADNA的兩個(gè)細(xì)胞的兩個(gè)細(xì)胞滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合融合后的細(xì)胞融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂進(jìn)行有絲分裂AB人教

2、版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體3 3、植物體細(xì)胞雜交過程應(yīng)先進(jìn)行原、植物體細(xì)胞雜交過程應(yīng)先進(jìn)行原 生質(zhì)體融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)形成生質(zhì)體融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)形成 完整的個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能完整的個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能 形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎？形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎？4 4、你能歸納出什么叫做動(dòng)物細(xì)胞、你能歸納出什么叫做動(dòng)物細(xì)胞 融合嗎？融合嗎？不能不能思考題思考題 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞（單核的雜交細(xì)胞）的過一個(gè)細(xì)胞（單核的雜交細(xì)胞）的過程。程。4 4、動(dòng)物細(xì)胞融合的應(yīng)用、動(dòng)物細(xì)胞融合的應(yīng)用生物新品種培育

3、生物新品種培育細(xì)胞遺傳細(xì)胞遺傳 細(xì)胞免疫細(xì)胞免疫 腫瘤腫瘤 利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)誘導(dǎo)形成雜利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)誘導(dǎo)形成雜交瘤細(xì)胞，制備單克隆抗體交瘤細(xì)胞，制備單克隆抗體3 3、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義 突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。緣雜交成為可能。 假如你掌握了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，你想用假如你掌握了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，你想用它來解決什么問題？它來解決什么問題？ 植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合在原理、細(xì)胞融合細(xì)胞融合在原理、細(xì)胞融合的方法、誘導(dǎo)方法等方面有的方法、誘導(dǎo)方法等方面有什么差異呢？什么差異呢？小結(jié)：小結(jié)：雜雜種種

4、植植株株融合的融合的原生質(zhì)原生質(zhì)體體ABAB再再生生出出細(xì)細(xì)胞胞壁壁脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化植物細(xì)胞的融合植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞植物細(xì)胞A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A雜種雜種細(xì)胞細(xì)胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導(dǎo)導(dǎo)方法？方法？促進(jìn)融合促進(jìn)融合的方法？的方法？融合融合完成完成的的標(biāo)志標(biāo)志植物細(xì)胞植物細(xì)胞B 復(fù)習(xí):植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用途用途物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、振物理

5、（離心、振動(dòng)、電刺激）動(dòng)、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性原理原理動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？提提問問？2.2.利用已學(xué)知識(shí)，考慮如何利用已學(xué)知識(shí)，考慮如何 得到抗體？得到抗體？ 抗體抗體抗原抗原刺激刺激漿細(xì)胞漿細(xì)胞

6、經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）動(dòng)物體內(nèi)動(dòng)物體內(nèi)人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從從血血清清中中分分離離抗抗體體多多種種漿漿細(xì)細(xì)胞胞動(dòng)動(dòng)物物體體內(nèi)內(nèi)多多種種抗抗體體抗抗原原 抗原抗原 動(dòng)物體內(nèi)動(dòng)物體內(nèi)刺激刺激漿細(xì)胞漿細(xì)胞 抗體抗體抗原不純抗原不純抗體不純抗體不純不能增殖產(chǎn)生大量抗體不能增殖產(chǎn)生大量抗體產(chǎn)量低、純度低，抗體特異性差產(chǎn)量低、純度低，抗體特異性差3.此方法得到的抗體的缺點(diǎn)是什么？此方法得到的抗體的缺點(diǎn)是什么？該法制備抗體的特點(diǎn)：該法制備抗體的特點(diǎn)：1 1、如何保證抗體的純度？、如何保證抗體的純度？如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一

7、、特異性強(qiáng)的高產(chǎn)抗體？如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的高產(chǎn)抗體？設(shè)計(jì)方案：設(shè)計(jì)方案：小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖2 2、如何提高抗體的產(chǎn)量？、如何提高抗體的產(chǎn)量？一個(gè)一個(gè)B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖一個(gè)一個(gè)B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體B B-B B-瘤瘤 瘤瘤-瘤瘤 瘤瘤3 3、細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞？、細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞？4 4、如何從中篩選出雜交瘤細(xì)胞？、如何從中篩選出雜交瘤細(xì)胞？用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：用特定的選擇性

8、培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞細(xì)胞5 5、如何選擇出分泌、如何選擇出分泌所需專一所需專一抗體的雜交瘤細(xì)胞？抗體的雜交瘤細(xì)胞？克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。經(jīng)多次篩選，獲克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。經(jīng)多次篩選，獲得足夠數(shù)量的能分泌所需專一抗體的細(xì)胞。得足夠數(shù)量的能分泌所需專一抗體的細(xì)胞。體外大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，體外大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，可提取大量從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，可提取大量的單克隆抗體。的單克隆抗體。6 6、如何獲得大量單克隆抗體？、如何獲得大量單克隆抗體？總結(jié)總結(jié):單克隆抗體的制備過程單克隆

9、抗體的制備過程人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 分組討論，單抗制備過程分哪幾步？分組討論，單抗制備過程分哪幾步？請用箭頭把以請用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來。順序是？序連接起來。順序是？ （一）、單克隆抗體的制備（一）、單克隆抗體的制備誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn)瘤細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn)注射特定抗原的目的是什么注射特定抗原的目的是什么為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專

10、一抗體檢測，多次篩選一抗體檢測，多次篩選大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單克隆抗體的方法克隆抗體的方法制制備備過過程程人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 由由單個(gè)單個(gè)B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖經(jīng)過無性繁殖（克隆），形成基因型相同的細(xì)胞群，（克隆），形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。稱為單克隆抗體。 最主要的優(yōu)點(diǎn)：最主要的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高并可能大量制備。特異性強(qiáng)、靈敏度高并可能大量制備。人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 在基礎(chǔ)理論研究中具有重要意義在基礎(chǔ)理論研

11、究中具有重要意義 （二）、單克隆抗體的應(yīng)用（二）、單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑診斷試劑最廣泛應(yīng)用最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡易、快速準(zhǔn)確、高效、簡易、快速同位素標(biāo)記的單克隆抗體，同位素標(biāo)記的單克隆抗體，在特定組織中成像，定位在特定組織中成像，定位診斷相關(guān)疾病診斷相關(guān)疾病人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 (“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈” 單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)用于治療疾病和運(yùn)載藥物用于治療疾病和運(yùn)載藥物人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體比較植物體細(xì)胞雜交和單克隆抗體的制備比較植物體細(xì)胞雜交和單克隆抗體的制備比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備原

12、理原理融合前處理融合前處理促融方法促融方法用途用途過過程程第一步第一步第二步第二步第三步第三步第四步第四步細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖增殖酶解法去壁酶解法去壁小鼠免疫處理小鼠免疫處理、細(xì)胞分散、細(xì)胞分散物理法化學(xué)法物理法化學(xué)法物理、化學(xué)、生物法物理、化學(xué)、生物法原生質(zhì)體的制備原生質(zhì)體的制備融合親本細(xì)胞的準(zhǔn)備融合親本細(xì)胞的準(zhǔn)備原生質(zhì)體的融合原生質(zhì)體的融合與篩選與篩選動(dòng)物細(xì)胞融合與動(dòng)物細(xì)胞融合與兩次篩選兩次篩選雜種細(xì)胞的形成與培養(yǎng)雜種細(xì)胞的形成與培養(yǎng)產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)雜種植株的鑒定雜種植株的鑒定單克隆

13、抗體的分離提純單克隆抗體的分離提純單抗有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防單抗有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防獲得具優(yōu)良性狀的雜種植株獲得具優(yōu)良性狀的雜種植株小結(jié)小結(jié)兩個(gè)過程兩個(gè)過程動(dòng)物細(xì)胞融合過程動(dòng)物細(xì)胞融合過程單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程三個(gè)三個(gè)“一一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法滅活一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法滅活病毒病毒一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢單克隆抗體特異性一個(gè)優(yōu)勢單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1 1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的合

14、，得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是A.A.經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 B.B.不經(jīng)過免疫的不經(jīng)過免疫的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞C.C.經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 D.D.不經(jīng)過免疫的不經(jīng)過免疫的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞不要灰心，不要灰心，再來一次！再來一次！不要灰心，不要灰心，再來一次！再來一次！不要灰心，不要灰心，再來一次！再來一次！恭喜你，答恭喜你，答對了！再接對了！再接再厲！再厲！知識(shí)闖關(guān)知識(shí)闖關(guān)人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體2 2、單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和、單克隆抗體制備過程

15、中，骨髓瘤細(xì)胞和B B淋巴淋巴細(xì)胞融合后要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。細(xì)胞融合后要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A.A. B.B. C.C. D. D.不要灰心，不要灰心，再來一次！再來一次！不要灰心，不要灰心，再來一次！再來一次！不要灰心，不要灰心，再來一次！再來一次！恭喜你，答恭喜你，答對了！再接對了！再接再厲！再厲！人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合

16、與單克隆抗體3 3、試管嬰兒、試管苗和克隆羊這三者可、試管嬰兒、試管苗和克隆羊這三者可以說是現(xiàn)代生物科技的杰出成果以說是現(xiàn)代生物科技的杰出成果, ,下列對下列對其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述, ,正確的是正確的是 A.A.都屬于無性生殖都屬于無性生殖 B.B.都利用了細(xì)胞工程的某些技術(shù)都利用了細(xì)胞工程的某些技術(shù) C.C.都不會(huì)發(fā)生基因重組都不會(huì)發(fā)生基因重組 D.D.都體現(xiàn)了已分化的細(xì)胞具有全能性都體現(xiàn)了已分化的細(xì)胞具有全能性B人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體解題思路探究解題思路探究對克隆與組織培養(yǎng)、試管動(dòng)物對克隆與組織培養(yǎng)、試管動(dòng)物( (嬰兒嬰兒) )區(qū)分不清區(qū)分不清克

17、隆克隆組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)試管動(dòng)物試管動(dòng)物( (嬰兒嬰兒) )生殖方式生殖方式無性無性無性無性有性有性遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)來源來源2 2個(gè)親本個(gè)親本1 1個(gè)親本個(gè)親本2 2個(gè)親本個(gè)親本性別決定性別決定提供核親本提供核親本一般沒有一般沒有精子類型精子類型用途用途優(yōu)良種畜快優(yōu)良種畜快速繁育速繁育, ,可可選擇性別選擇性別快速繁殖無快速繁殖無病毒植株病毒植株解決不孕不育解決不孕不育多選題多選題（ A、C ）人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體下課啦下課啦！人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體5、右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷

18、風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。據(jù)圖回答：驗(yàn)方案。據(jù)圖回答：該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？ 原因是原因是圖中圖中為為 過程，可在過程，可在 誘導(dǎo)下完成。誘導(dǎo)下完成。雜交瘤細(xì)胞繁殖進(jìn)行的是雜交瘤細(xì)胞繁殖進(jìn)行的是 分裂，分裂，該細(xì)胞的特點(diǎn)是該細(xì)胞的特點(diǎn)是淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤融合成一個(gè)細(xì)胞，淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤融合成一個(gè)細(xì)胞，兩種細(xì)胞膜也能融合在一起，說明細(xì)兩種細(xì)胞膜也能融合在一起，說明細(xì)胞膜胞膜不能沒有抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生此種抗體的B細(xì)胞細(xì)胞融合有絲滅活的病毒或聚乙二醇又能產(chǎn)生專一的抗體。既能迅速大量繁殖，既能迅速大量繁殖，具有一定的流動(dòng)性具有一定的流動(dòng)性人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與

19、單克隆抗體將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細(xì)胞，放在含將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細(xì)胞，放在含 培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，篩選。培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，篩選。該方案的目的是該方案的目的是 。單克隆抗體的準(zhǔn)確定義為單克隆抗體的準(zhǔn)確定義為 。A.A.一類特殊抗體一類特殊抗體B.B.無性繁殖系無性繁殖系C.C.單一抗體細(xì)胞的無性繁殖系單一抗體細(xì)胞的無性繁殖系D.D.單一抗體細(xì)胞的有性繁殖系單一抗體細(xì)胞的有性繁殖系單克隆抗體與一般的血清抗體相比，具有的優(yōu)點(diǎn)單克隆抗體與一般的血清抗體相比，具有的優(yōu)點(diǎn) 是是 。 特定的選擇性特定的選擇性制備單克隆抗體制備單克隆抗體C特異性強(qiáng)，靈敏度高并可大量制備特異性強(qiáng)，靈敏度高并可大量制備人

20、教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。的具有免疫功能的球蛋白。人教版教學(xué)課件動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 已知細(xì)胞合成已知細(xì)胞合成DNADNA有有DD和和S S兩條途兩條途徑，其中徑，其中DD途徑能被途徑能被氨基嘌呤氨基嘌呤阻斷。人阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩條淋巴細(xì)胞中有這兩條DNADNA合成途徑，但合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有沒有S S途徑，但能不斷分裂增殖。途徑，但能不斷分裂增殖。小資料：小資料：1.1.植

21、物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)有什么不同？合技術(shù)有什么不同？提示：植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物提示：植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)基本相同，不同的是植細(xì)胞融合技術(shù)基本相同，不同的是植物體細(xì)胞融合前需去掉細(xì)胞壁，然后物體細(xì)胞融合前需去掉細(xì)胞壁，然后再融合；動(dòng)物細(xì)胞融合是兩個(gè)體細(xì)胞再融合；動(dòng)物細(xì)胞融合是兩個(gè)體細(xì)胞直接融合。直接融合。 2.2.制備單克隆抗體時(shí)，為什么要選用制備單克隆抗體時(shí)，為什么要選用B B淋巴細(xì)淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？提示：提示：動(dòng)物在免疫反應(yīng)的過程中，每一種動(dòng)物在免疫反應(yīng)的過程中，每一種B B

22、淋巴細(xì)淋巴細(xì)胞能分泌一種特異性抗體，要想獲得大量的特異性抗胞能分泌一種特異性抗體，要想獲得大量的特異性抗體，必須使能分泌該單一抗體的體，必須使能分泌該單一抗體的B B淋巴細(xì)胞大量增殖。淋巴細(xì)胞大量增殖。B B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力，但不能在體外淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力，但不能在體外增殖；骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞，它能在體外培養(yǎng)條增殖；骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞，它能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。因此，把一種件下無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。因此，把一種B B淋淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，它會(huì)兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的

23、特性它會(huì)兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性在體外培養(yǎng)條件下在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。能不斷增殖，同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。4.4.為什么不用兩個(gè)而要用多個(gè)細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞間的為什么不用兩個(gè)而要用多個(gè)細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞間的融合？融合？ 就目前常用的細(xì)胞融合方法來看，不管是用物理的、就目前常用的細(xì)胞融合方法來看，不管是用物理的、化學(xué)的方法，還是生物的方法，其融合率都不可能是化學(xué)的方法，還是生物的方法，其融合率都不可能是100%100%。僅用兩個(gè)細(xì)胞融合，其效率太低，不一定能得。僅用兩個(gè)細(xì)胞融合，其效率太低，不一定能得到融合細(xì)胞。更重要的是，即使兩個(gè)細(xì)胞已發(fā)生融合，到融合細(xì)胞。

24、更重要的是，即使兩個(gè)細(xì)胞已發(fā)生融合，但并不一定是研究者期望得到的細(xì)胞類型。目前動(dòng)物細(xì)但并不一定是研究者期望得到的細(xì)胞類型。目前動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用就是單克隆抗體的制備。我胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用就是單克隆抗體的制備。我們以制備單克隆抗體為例來說明這一問題。我們知道，們以制備單克隆抗體為例來說明這一問題。我們知道，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達(dá)百萬種以上，但是每體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達(dá)百萬種以上，但是每一個(gè)一個(gè)B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，如果僅取一個(gè)淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，如果僅取一個(gè)脾細(xì)胞（含脾細(xì)胞（含B B淋巴細(xì)胞）和一個(gè)瘤細(xì)胞雜交，我們不能淋巴細(xì)胞）和一個(gè)瘤細(xì)

25、胞雜交，我們不能確定該脾細(xì)胞分泌的抗體是否正是我們所需要的；若用確定該脾細(xì)胞分泌的抗體是否正是我們所需要的；若用大量的脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，就可以從融合細(xì)胞中大量的脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，就可以從融合細(xì)胞中篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。5.5.如何進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？如何進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？ 融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞。但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需就是雜交瘤細(xì)胞。但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，通常用抗體的細(xì)胞，通常用“

26、有限稀釋法有限稀釋法”來選擇。將雜交瘤細(xì)來選擇。將雜交瘤細(xì)胞稀釋，用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔細(xì)胞不超過一個(gè)胞稀釋，用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔細(xì)胞不超過一個(gè)，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中細(xì)胞分泌的，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體（常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法），那些上清液可與特定抗體（常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法），那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細(xì)胞還不能保證抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細(xì)胞還不能保證是來自單個(gè)細(xì)胞，挑選陽性孔的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有限稀釋，是來自單個(gè)細(xì)胞，挑選陽性孔的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有限稀釋，一般需進(jìn)行一般需進(jìn)行3 34 4次，直至確

27、信每個(gè)孔中增殖的細(xì)胞為單次，直至確信每個(gè)孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞。該過程即為雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)?？寺〖?xì)胞。該過程即為雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。對位訓(xùn)練對位訓(xùn)練3.3.利用細(xì)胞工程方法，以利用細(xì)胞工程方法，以SARSSARS病毒核衣殼蛋白為抗病毒核衣殼蛋白為抗 原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是（ ） A.A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn) 生的血清抗體為單克隆抗體生的血清抗體為單克隆抗體 B.B.體外培養(yǎng)單個(gè)體外培養(yǎng)單個(gè)B B淋巴細(xì)胞可以獲得大量針對淋巴細(xì)胞可以獲得大量針對SARSSARS 病毒的單克隆抗體病毒的單克隆抗體 C.C.將等量將等量B B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEGPEG誘誘 導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞 D.D.利用該單克隆抗體與利用該單克隆抗體與SARSS