加味桃核承氣湯對糖尿病大鼠冠狀動脈結扎致心肌缺血預防作用的研究

1、加味桃核承氣湯對糖尿病大鼠冠狀動脈結扎致心肌缺血預防作用的研究日期：2005-9-5 14:44:31     編輯：頁面功能 【字體：大 中 小】【打印】 【關閉】加味桃核承氣湯對糖尿病大鼠冠狀動脈結扎致心肌缺血預防作用的研究中醫(yī)雜志 2000年第8期第41卷 方藥研究作者：李賽美熊曼琪林安鐘許慶文鄭海霞胡永珍何敏單位：廣州中醫(yī)藥大學,廣州市機場路12號(510407)關鍵詞： 糖尿病；病理生理學；心肌缺血；預防和控制；桃核承氣湯/治療應用摘要采用STZ大鼠冠狀動脈結扎致心肌缺血模型，觀察了加味桃核承氣湯抗心肌缺血作用。結果發(fā)現(xiàn)，該方對心電圖

2、(ECG)T波異常有顯著改善，并能提高存活率(P0.05)，在該方基礎上加用水蛭則減少心肌缺血面積，降低ECG異律率效果更佳。既往研究表明,加味桃核承氣湯對糖尿病患者及動物模型具有肯定療效1。為進一步探討該方對糖尿病心臟病的影響，我們于1998年911月，觀察了該方對鏈脲佐菌素(STZ)大鼠冠狀動脈結扎致心肌缺血的預防作用，現(xiàn)報告如下。1材料和方法1.1實驗動物與飼料加工：采用清潔級SD雄性大鼠，體重200280g，由上海西普爾-必凱實驗動物有限公司提供。隨機分為正常組(8只)與造模組(40只)。STZ造模40天后，分為模型組、模型加中藥組。后者依中藥組方不同進一步分為綜合組(即加味桃核承氣湯

3、組)、綜合加水蛭組。1.2藥物及試劑：綜合組予加味桃核承氣湯：黃芪30g，大黃6g，桃仁10g，桂枝6g，芒硝3g，麥冬12g，生地黃15g，玄參12g，甘草3g。綜合加水蛭組予上方加水蛭10g。中藥經(jīng)煎煮-合并-加熱-濃縮-酒精沉淀-抽濾-消毒-分裝，制為含生藥2g/ml腹腔注射液(由廣州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院臨床藥理研究室制備)。造模試劑STZ為SIGMA公司產品。硝基四氧唑藍(N-BT)購自上海前進試劑廠，用0.2mmol Tris液配制成0.125%溶液。1.3實驗儀器：小動物呼吸機由江西特力麻醉呼吸設備公司生產，型號TKR-2000A。電生理儀由日本光電株氏會社生產，型號RM-600

4、。1.4動物模型及實驗方法：糖尿病動物模型復制， 所有大鼠禁食12小時， 造模組按60mg/kg體重的劑量腹腔內注射STZ(溶于0.1mmol/L檸檬酸緩沖液，pH4.4)； 正常組腹腔內注射等量的檸檬酸緩沖液。 1周后復查空腹血糖11.1mmol/L, 確認為糖尿病模型。糖尿病心肌缺血模型復制，參考藥理實驗方法學結扎冠狀動脈引起心肌梗塞法2，糖尿病動物模型成功后，各組均普通飼料喂養(yǎng)4周，大白鼠予1.5%戊巴比妥麻醉(2ml/kg)，在人工呼吸條件下開胸(呼吸器頻率為54次/分，呼吸量為2ml/100g)，剪斷左側胸廓第35肋，剪開心包膜暴露心臟，用小圓針和0號線在左心耳下緣穿越左冠狀動脈，于

5、肺動脈圓錐旁出針。中藥組于冠脈結扎前30分鐘注射(5g生藥/kg)，模型及空白組注射等量蒸餾水。分別于冠脈結扎前、術后10分、20分、30分、60分、90分、120分鐘測錄心電圖(ECG)，觀察心率(HR)、T波、異律率，并計算動物2小時存活率。NB-T染色：沿冠狀溝切除心房，留下心室，冰凍5分鐘后，順房室溝從心尖到心基部平行將心室切成0.1cm厚心肌片，生理鹽水沖洗干凈后，將其放入0.125%的NB-T溶液中，37溫孵15分鐘，染色后立即用水沖洗去多余染料。梗塞區(qū)不著色，非梗塞區(qū)被NB-T染為藍色。心肌缺血區(qū)測算：將未染色的缺血心肌重量除以全心肌重量，乘以%。1.5數(shù)據(jù)處理：計數(shù)資料用2檢驗

6、，計量資料用配對t檢驗。2結果2.1正常組與模型組血糖、體重、心臟重量/體重的比較：結果顯示，造模后模型組體重明顯下降，血糖升高，且心臟重量增高，與正常組比較有非常顯著性差異(P0.01)，正常組40天后血糖也有所提高。見表1。表1正常組與模型組BS、W、心臟重量/體重的比較(±s)分組造模前造模后(40天)鼠數(shù)體重(g)血糖(mmol/L)鼠數(shù)體重(g)血糖(mmol/L)心臟重量/體重()正常組8293.25±42.742.73±0.388331.25±122.183.38±0.833.11±0.20模型組40295.95

7、7;22.962.79±0.3835207.49±35.19*22.45±6.99*3.62±0.39*與正常組比較*P0.01；與造模前比較,P0.05，P0.01 2.2各組大鼠心肌缺血面積、ECG異律率及2小時存活率比較：結果表明，模型組(模型加結扎)心肌缺血面積較正常組(正常加結扎)及綜合加水蛭組(模型加結扎、綜合、水蛭)顯著增大(P0.01)，2小時存活率降低(P0.05)；綜合加水蛭組缺血面積低于綜合組(P0.05)，而與正常組無顯著性差異(P0.05)。其異律率也呈現(xiàn)模型綜合綜合加水蛭正常，依次下降趨勢，但其差異無顯著性意義。見表2。表2各

8、組心肌缺血面積、ECG異律率及存活率比較分組鼠數(shù)缺血面積(±s,)異律率()存活率()正常811.76±7.52*37.5100*模型組1131.18±15.4872.763.64綜合組1122.96±8.8763.64100*綜合加水蛭組1315.18±10.93*38.5100*與模型組比較,*P0.05，*P0.01；與綜合組比較,P0.05 2.3不同治法對冠脈結扎后T波改變的影響：模型組在冠脈結扎術前，T波已有顯著性升高(P0.01)，表明在糖尿病成模1月后，心肌缺血已經(jīng)存在。在施行冠脈結扎術后，分別于5分、10分、20分、30分、6

9、0分、90分鐘，T波仍居高不下(P0.01)，在120分鐘時差異略有縮小，但仍顯著高于正常組(P0.05)。治療組中，綜合加水蛭組于結扎術后30分鐘，心肌缺血有所改善，T波回落，與模型組比較有顯著性差異(P0.05)。綜合組分別于60分、90分鐘，T波回落，與模型組比較差異有顯著性(P0.05)，并接近正常水平(P0.05)，且與自身術前比較，分別于20分、60分、90分、120分鐘心肌缺血得到明顯改善(P0.05或P0.01)。見表3。表3不同治法對冠脈結扎后T波(mV)改變的影響(±s)分組術前術后5分10分20分30分60分90分120分正常組0.09±0.03(8)

10、0.07±0.03(7)0.10±0.08(6)0.07±0.07(7)0.07±0.08(8)0.09±0.09(7)0.13±0.07(6)0.15±0.09(4)模型組033.±0.08(11)*0.30±0.15(9)*0.33±0.11(7)*0.28±0.20(9)*0.34±0.14(9)*0.41±0.17(7)*0.4±0.13(5)*0.32±0.08(5)*綜合組0.38±0.10(11)*0.32±0.

11、13(10)*0.33±0.14(9)*0.27±0.15(10)*0.30±0.17(10)*0.24±0.15(9)*0.22±0.16(8)0.20±0.14(9)綜合加水蛭組0.30±0.08(13)*0.26±0.10(13)*0.25±0.10(13)*0.27±0.12(13)*0.25±0.10(13)*0.29±0.16(10)*0.29±0.12(8)*0.28±0.12(8)*括號內為鼠數(shù)。與正常組比較,*P0.05，*P0.01；與

12、模型組比較,P0.05；與術前比較,P0.05；P0.013討論糖尿病心臟病是指糖尿病并發(fā)或伴發(fā)的心臟病，包括冠心病、心肌病、心臟植物神經(jīng)病變。由于與心血管病高度相關，且具有發(fā)病率高、發(fā)病早、病變重、癥狀不典型、進展快、易發(fā)生心肌梗塞等特點3，已成為近年研究的熱點。該病屬中醫(yī)“胸痹”、“真心痛”、“心悸”等范疇，其病機主要為消渴日久，或失于調治或遷延發(fā)展，陰虛燥熱日甚，不斷耗傷氣陰，使氣陰兩虛，心脈失養(yǎng)，氣不運血，血瘀心脈所致4。桃核承氣湯出自傷寒論，方由調胃承氣湯加桃仁、桂枝組成，為蓄血輕證而設。其蓄血者乃瘀熱互結所致，若見于下焦，少腹急結或硬滿疼痛，為太陽蓄血證；或停于中焦，屎雖硬，大便反

13、易，其色必黑，為陽明蓄血證。熊氏根據(jù)臨床型糖尿病患者多見疲倦、口渴、便秘、肢麻等癥狀，認為氣陰不足、燥熱內結、血脈瘀阻為其基本病機，尊仲景瀉熱通瘀法，溶益氣養(yǎng)陰之品為加味桃核承氣湯，用以治療糖尿病及其并發(fā)癥取得顯著成績1。林氏提出糖尿病及其并發(fā)癥以益氣養(yǎng)陰、活血化瘀為優(yōu)5。王氏報道用調胃承氣湯救治急性心肌梗塞療效顯著，認為心胃經(jīng)脈相通，肺與大腸相表里，用調胃承氣湯瀉熱和胃，陰液得存，氣血流暢，則心痛得已6。均為加味桃核承氣湯用于糖尿病心臟病治療提供了佐證。本實驗改中藥口服為腹腔注射，觀察糖尿病急性心肌缺血時加味桃核承氣湯的預防作用，初步結果顯示，該方對糖尿病大鼠冠狀動脈結扎致T波異常有顯著的改

14、善，并能提高生存率。在此基礎上加用水蛭能進一步減少心肌缺血面積，降低異律率。從治療角度言盡快有效地恢復心肌的血液灌注是防治心肌缺血根本措施，而消除加重心肌缺血損傷因素，如酸中毒、鈣超載、能量匱乏、自由基損傷等，保護缺血心肌是治療的重點7。業(yè)已證實水蛭中的水蛭素具有抗凝，抗血小板聚集，抑制血栓形成，改善微循環(huán)，尤其能增加心肌營養(yǎng)血流量等綜合作用8，因而加用水蛭組顯示出更佳效果。急性心肌缺血引起的不可逆性損傷多發(fā)生于缺血2030分鐘后，加用水蛭組術后30分鐘T波即顯示改善，較綜合組60分鐘后出現(xiàn)改善更具意義。結扎30分鐘后T波改善與心肌缺血面積不呈平行關系，其機理有待進一步探討。既往研究證實，ST

15、Z糖尿病大鼠飼養(yǎng)4周，即可出現(xiàn)心肌損害9，同時伴有體重下降、血糖增高、心臟增大，在此基礎上再施行冠狀動脈結扎，與糖尿病冠心病特征相吻合，而正常組施行冠狀動脈結扎術，則與冠心病特征相似。實驗結果顯示：糖尿病冠心病較之冠心病，具有心肌缺血面積廣泛、程度重、異律率高、存活率低等特點，與臨床報道相符，我們認為STZ大鼠冠脈結扎可作為糖尿病冠心病實驗研究的較好載體?；痦椖?國家中醫(yī)藥管理局青年基金課題(A95-11)參考文獻1，熊曼琪，梁柳文，林安鐘,等.加味桃核承氣湯治療型糖尿病的臨床與實驗研究.中西醫(yī)結合雜志，1992，12(2)：74.2，徐叔云，卞如濂，陳修主編.藥理實驗方法學.第2版，北京：人民衛(wèi)生出版社，1994:938，921.3，吳可光.糖尿病心血管病變的臨床處理.實用內科雜志，1991，11(12)：631.4，錢秋海.實用糖尿病治療保健學.濟南：山東大學出版社，1993:293.5，蘇愛鋒，盧景芬，何麗莉，等.降糖通脈寧對糖尿病大鼠血清及組