2012屆高三生物一輪復(fù)習(xí) 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)精品學(xué)案 新人教版選修1

1、專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)【高考目標(biāo)導(dǎo)航】1、蛋白質(zhì)的提取和分離2、PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用【基礎(chǔ)知識(shí)梳理】一、DNA的粗提取與鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理：DNA與雜質(zhì)的溶解度不同，DNA與雜質(zhì)對(duì)酶、高溫、洗滌劑的耐受性不同2、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)材料的選?。悍彩呛蠨NA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大，如雞血、菜花、洋蔥等。破碎細(xì)胞：動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，用紗布過濾后收集濾液即可。去除濾液中的雜質(zhì)：利用DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)。 DNA的析出：

2、將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置23min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。DNA的鑒定：取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜诜兴屑訜?min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)。二、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段1、PCR原理：DNA的熱變性2、PCR反應(yīng)過程（1）變性：當(dāng)溫度上升到90以上時(shí)，

3、雙鏈DNA解聚為單鏈（2）復(fù)性：溫度下降到50左右時(shí)，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合（3）延伸：溫度上升到72左右時(shí)，溶液中的4種脫氧核苷酸（A,T,C,G）在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。三、血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)1、方法及原理方法原理凝膠色譜法根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)電泳法各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同來分離蛋白質(zhì)2、操作程序：（1）樣品處理：紅細(xì)胞的洗滌血紅蛋白的釋放分離血紅蛋白溶液（2）粗分離透析：除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。（3）純化：一般采用凝膠色譜法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分離和純化。（4）純度鑒定：一般用SD

4、S-聚丙烯酰胺凝膠電泳法來測定蛋白質(zhì)的分子量，即對(duì)血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。3、細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的比較細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不同點(diǎn)解旋在解旋酶作用下邊解旋邊復(fù)制80100高溫解旋，雙鏈分開酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA或RNA溫度體內(nèi)溫和條件高溫相同點(diǎn)（1）需提供DNA復(fù)制的模板（2）四中脫氧核苷酸作原料（3）子鏈延伸的方向都是從5端到3端（4）都需要酶的催化【要點(diǎn)名師透析】一、DNA和蛋白質(zhì)的技術(shù)1、比較細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與DNA擴(kuò)增（PCR）2.血紅蛋白的提取和分離方法(1)凝膠色譜法含義：根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的方法。原理a.相對(duì)分子質(zhì)量較

5、小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動(dòng)速度較慢。b.相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快。(2)電泳法含義：帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。原理：利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異和分子本身大小、形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。(3)緩沖溶液組成：12種緩沖劑溶解于水中配制而成。作用：在一定范圍內(nèi)抵制外界的酸和堿對(duì)溶液pH的影響，維持pH基本不變，確保實(shí)驗(yàn)室條件下能準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的代謝過程?！靖形蚋呖颊骖}】1、（2011·江蘇高考）在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的

6、實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)敘述正確的是()A.用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L，濾去析出物B.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)C.將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色D.用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同【解析】A項(xiàng)，用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 molL,使DNA析出。B項(xiàng)，NaCl溶液為2molL，過濾除去不溶的雜質(zhì)，木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。C項(xiàng)，在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。D項(xiàng)，如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜。【答案】B2、（2010·廣東高考）新技術(shù)的建立和

7、應(yīng)用對(duì)生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是 A. PCR技術(shù)擴(kuò)增蛋白質(zhì) B.雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體 C.光學(xué)顯微鏡觀察葉綠體的基粒 D.花粉離體培養(yǎng)培育單倍體植物【解析】本題主要考查學(xué)生的理解能力。PCR技術(shù)只能用來擴(kuò)增核酸，不能用來擴(kuò)增蛋白質(zhì)；利用光學(xué)顯微鏡無法觀察到葉綠體。【答案】BD3、（2010·江蘇高考）某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份每份l0 g。剪碎后分成兩組，一組置于20、另一組置于一20條件下保存24 h。DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放人研缽中，各加入l5 mL研磨液

8、，充分研磨。用兩層紗布過濾取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注人10mL濾液，再加人20 mL體積分?jǐn)?shù)為95的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的2 molL NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑。混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。分析上述實(shí)驗(yàn)過程，回答下列問題：(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是 。(2)第二步中”緩緩地”攪拌，這是為了減少 。(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。 結(jié)論1：與20相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在-20條件下保存，DNA

9、的提取量較多。 結(jié)論2： 。 針對(duì)結(jié)論I請?zhí)岢龊侠淼慕忉專?。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是： 。然后用體積分?jǐn)?shù)為95的冷酒精溶液使DNA析出?！窘馕觥勘绢}考查了DNA粗提取技術(shù)的原理、操作過程及同學(xué)分析、判斷能力，從題目實(shí)驗(yàn)看出，該實(shí)驗(yàn)的課題是探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響。在試用第二步中，為了防止DNA斷裂，要緩緩的攪拌，從表中結(jié)果看出，由于低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解慢，使得相同材料在低溫保存下，DNA提取量大，在相同條件先，蒜黃

10、藍(lán)色最深，說明相同條件下從蒜黃中提取的DNA量最大，由于氯仿密度比水大，可使蛋白質(zhì)變性后沉淀，而與水、DNA不相溶，這樣可將第三步獲得的溶液與等量的氯仿混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液即可得到較純凈的DNA?！敬鸢浮浚?）探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響（2）DNA斷裂（3）等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的DNA量最多低溫抑制了向光酶的活性，DNA降解速度慢（4）將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液4、（2009·江蘇高考）下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有 A提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)

11、胞 B用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)C蛋白質(zhì)提取和分離過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNAD蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化 【解析】A選項(xiàng)，在提取DNA時(shí)，如果是用動(dòng)物的細(xì)胞需要用蒸餾水漲破，如果用植物細(xì)胞則不需要，而是用洗滌劑溶解細(xì)胞膜；用2 molL的NaCl溶液溶解DNA，然后過濾出蛋白質(zhì)，再降低NaCl溶液的濃度，析出DNA。DNA和蛋白質(zhì)樣品都是帶負(fù)電荷的，從負(fù)極向正極移動(dòng)，移動(dòng)的距離都和樣品的分子量有關(guān)。C中透析用以出去小分子物質(zhì)，DNA是大分子物質(zhì)，D是常規(guī)方法比如用十二烷基磺酸鈉，可以根據(jù)其分子大小及所帶電荷性質(zhì)進(jìn)行分離純化【答案】BD【考點(diǎn)

12、模擬演練】一、選擇題1、下列是有關(guān)血紅蛋白提取和分離的相關(guān)操作，其中正確的是()A可采集豬血作為實(shí)驗(yàn)材料B用蒸餾水重復(fù)洗滌紅細(xì)胞C血紅蛋白釋放后應(yīng)低速短時(shí)間離心D洗脫液接近色譜柱底端時(shí)開始收集流出液【解析】為防止細(xì)胞吸水漲破，洗滌時(shí)要用生理鹽水；釋放出血紅蛋白后，以2 000 r/min 的高速離心；在分離時(shí)，要等到紅色蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)開始收集流出液?！敬鸢浮緼2、對(duì)“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()A利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液，可將DNA與蛋白質(zhì)分離B利用高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對(duì)DNA沒有影響的特性，可將DNA與蛋白質(zhì)分離C在溶有DNA的2 mol/

13、L氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，輕輕攪拌后過濾，取濾液進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn)D在DNA濾液中加入嫩肉粉，通過木瓜蛋白酶的作用，可將DNA 與蛋白質(zhì)分離【解析】利用DNA不溶于酒精溶液，蛋白質(zhì)溶于酒精溶液的特點(diǎn)，可將DNA與蛋白質(zhì)分離；高溫能使蛋白質(zhì)、DNA變性，蛋白質(zhì)在6080可變性，而DNA在80以上也會(huì)變性，所以高溫對(duì)DNA有影響；在溶有DNA的2 mol/L氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，輕輕攪拌后過濾，得到DNA黏稠物，用DNA黏稠物進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn)；在DNA濾液中加入嫩肉粉，通過木瓜蛋白酶的專一性作用，可將DNA與蛋白質(zhì)分離。【答案】D3、(2011·鎮(zhèn)江模擬)下列對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確

14、的是()A血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)中使用的交聯(lián)葡聚糖凝膠G­75，其中“75”表示每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5克B在色素的提取和分離的實(shí)驗(yàn)中，葉綠素b在層析液中的溶解度最低，擴(kuò)散速度最慢C用洋蔥作實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí)，加入一定的食鹽的目的是有利于溶解DNAD制取細(xì)胞膜、血紅蛋白的提取和分離均以雞血細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料【解析】血紅蛋白的提取和分離以雞血細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料；制取細(xì)胞膜不能用雞血細(xì)胞，雞血細(xì)胞有核膜及其他細(xì)胞器膜?！敬鸢浮緿4、有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)敘述中，不正確的是()A可通過SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度B將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析，其目的是去

15、除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)C血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑，其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑D整個(gè)過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)【解析】可通過SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度。將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑，其目的是溶解細(xì)胞膜。整個(gè)過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)?！敬鸢浮緾5、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增，其簡要過程如下圖所示。下列關(guān)于PCR技術(shù)敘述不正確的是()APCR

16、技術(shù)是在實(shí)驗(yàn)室中以少量DNA制備大量DNA的技術(shù)B反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板CPCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴(kuò)增D應(yīng)用PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變【解析】PCR技術(shù)是人工合成DNA的方法，原料是脫氧核苷酸而不是核糖核苷酸?！敬鸢浮緾6、蛋白質(zhì)的提取和分離分為哪幾步()A樣品處理、凝膠色譜操作、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳B樣品處理、凝膠色譜操作、純化C樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定D樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定【解析】蛋白質(zhì)的提取和分離分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步。A中凝膠色譜操作及SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳為實(shí)驗(yàn)操作過程的技術(shù)?！敬鸢浮?/p>

17、C7、下列關(guān)于DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)和血紅蛋白的提取實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是()A前者選擇雞血細(xì)胞作為材料較好，后者選擇哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料較好B樣品預(yù)處理時(shí)，前者靜置1天處理除去上清液；后者需要加入清水，反復(fù)低速短時(shí)間離心洗滌，至上清液無黃色C在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，往2 mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時(shí)，應(yīng)該緩慢加入，直到出現(xiàn)黏稠物即止D洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽等【解析】雞血細(xì)胞有細(xì)胞核，適于提取DNA；哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，適用于提取血紅蛋白。提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)中，洗滌紅細(xì)胞時(shí)，不能加清水，應(yīng)該加入生理鹽水，否則細(xì)胞提早釋放出血紅蛋白與雜

18、質(zhì)混合，加大提取難度。DNA初次析出時(shí)，加蒸餾水至黏稠物不再增加為止。洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜質(zhì)蛋白，以利于血紅蛋白的分離和純化。【答案】A8、(2011·廣州模擬)蛋白質(zhì)的分離與純化技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述不正確的是()A根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜的特性，可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離B根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等，可通過電泳分離蛋白質(zhì)C根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，可通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)D根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì)【解析】蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜，而溶液中的小分子物質(zhì)則可以透過半透膜，因此可以將蛋白質(zhì)和溶液中的小分

19、子物質(zhì)分離。【答案】A9、以下關(guān)于血紅蛋白提取和分離的過程及原理敘述正確的是()A紅細(xì)胞洗滌過程中要加入5倍體積的蒸餾水，重復(fù)洗滌3次B將血紅蛋白溶液放在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液中透析12小時(shí)C凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在D蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的移動(dòng)速度慢【解析】紅細(xì)胞洗滌過程中要加入5倍體積的生理鹽水，重復(fù)洗滌3次目的是除去雜蛋白。透析時(shí)使用物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液，而不是用0.9%的NaCl溶液。蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的在凝膠外部移動(dòng)，移動(dòng)速度快。在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在，氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效

20、果?！敬鸢浮緾10、(2011·南通一模)下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)敘述中，正確的是()A用蒸餾水進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌，其目的是去除細(xì)胞表面雜蛋白B將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)C血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑，其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑D整個(gè)過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)【解析】紅細(xì)胞的洗滌用的是生理鹽水，其目的是去除血漿蛋白等雜質(zhì)，有利于后續(xù)步驟的分離純化，而不是去除細(xì)胞表面雜蛋白；而本實(shí)驗(yàn)中蒸餾水的作用是漲破紅細(xì)胞使血紅蛋白釋放。將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑，其目的是

21、溶解細(xì)胞膜。整個(gè)過程不斷用磷酸緩沖液處理，是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)?！敬鸢浮緿11、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()試劑操作作用A檸檬酸鈉溶液與雞血混合防止血液凝固B蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀C蒸餾水加入到溶解有DNA的NaCl溶液中析出蛋白質(zhì)D冷卻的酒精加入到過濾后含DNA的NaCl溶液中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)【解析】檸檬酸鈉溶液有抗凝血的作用。第一次加入蒸餾水是為了讓細(xì)胞吸水漲破。在濃NaCl溶液(2 mol/L)中，DNA核蛋白的溶解度很大，而RNA核蛋白的溶解度很小，在稀NaCl溶液(0.14 mol/L)中DNA的溶解度最低，蛋白質(zhì)的溶解度很高，而出現(xiàn)鹽溶現(xiàn)象。用

22、乙醇沉淀法可使其他物質(zhì)溶于酒精而進(jìn)一步純化DNA，但不會(huì)出現(xiàn)顏色反應(yīng)?！敬鸢浮緼12、PCR一般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，從第二輪循環(huán)開始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)，由引物延伸而成的DNA單鏈做模板時(shí)將( )A仍與引物結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸B無需與引物結(jié)合，在酶的作用下從頭合成子鏈C同時(shí)與引物和引物結(jié)合進(jìn)行子鏈延伸D與引物結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸【解析】PCR擴(kuò)增中，從第二輪循環(huán)開始由引物延伸而成的DNA單鏈做模板時(shí)將與引物結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸；由引物延伸而成的DNA單鏈做模板時(shí)將與引物結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸?！敬鸢浮緿13、PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的D

23、NA片段的核酸合成技術(shù)，如圖表示合成過程。下列說法錯(cuò)誤的是( )A.A過程高溫使DNA變性解旋，該過程不需要解旋酶的作用B.C過程要用到的酶在高溫下失活，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)需要再添加C.如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“945572”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占25%D.PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于基因突變【解析】高溫所起的作用類似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂?。C過程為PCR技術(shù)的延伸階段，當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72左右時(shí)，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。Taq DNA聚合酶是耐熱的，高溫下不變性

24、，所以一次性加入即可。PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過三次循環(huán)，共產(chǎn)生23個(gè)DNA分子，其中有2個(gè)DNA分子含有15N標(biāo)記?；蛑械膲A基對(duì)改變屬于基因突變。【答案】B14、(2011·寧夏模擬)在采用雞血為材料對(duì)DNA進(jìn)行粗提取的實(shí)驗(yàn)中，如果需要進(jìn)一步提取雜質(zhì)較少的DNA，可以依據(jù)的原理是( )A.在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的氯化鈉溶液中DNA的溶解度最小B.DNA遇二苯胺在沸水浴的條件下會(huì)變成藍(lán)色C.DNA不溶于酒精而細(xì)胞中的一些物質(zhì)易溶于酒精D.質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用【解析】由于DNA不溶于酒精，而混雜在DNA中的某些細(xì)胞中的物質(zhì)易溶

25、于酒精，所以向含有雜質(zhì)的DNA中加入95%的冷酒精，可以進(jìn)一步提純DNA。【答案】C15、下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置。下列相關(guān)敘述正確的是()A血紅蛋白在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有調(diào)節(jié)功能B甲裝置中A是蒸餾水，乙裝置中C溶液的作用是洗脫血紅蛋白C甲裝置的目的是去除樣品中分子量較大的雜質(zhì)D乙裝置分離時(shí)，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液【解析】血紅蛋白在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有運(yùn)輸功能；甲裝置中A應(yīng)是磷酸緩沖液；甲裝置的目的是去除樣品中分子量較小雜質(zhì)?！敬鸢浮緿二、非選擇題16、紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜

26、帶O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白。請回答下列有關(guān)問題：(1)血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：_、_、_和_。(2)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_。在樣品處理中包括紅細(xì)胞的洗滌、_、分離血紅蛋白溶液、透析。洗滌紅細(xì)胞的目的是_，你如何知道紅細(xì)胞已洗滌干凈？_分離紅細(xì)胞時(shí)對(duì)離心速度和離心時(shí)間的要求是_。若離心速度過高和時(shí)間過長結(jié)果會(huì)怎樣？_。(3)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中透析，這就是樣品的粗分離。透析的目的是_。透析的原理是_。(4)然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是_。血