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文檔簡(jiǎn)介
1、1、請(qǐng)闡明 PCR 的原理和引物設(shè)計(jì)的注意事項(xiàng)原理:PCR 技術(shù)的基本原理 類似于 DNA 的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴于與靶序列兩端互 補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR 由變性-退火-延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:模板DNA 的變性:模板 DNA 經(jīng)加熱至 93C左右一定時(shí)間后,使模板 DNA 雙鏈或經(jīng) PCR 擴(kuò)增形成的雙鏈 DNA 解 離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;模板DNA 與引物的退火(復(fù)性):模板 DNA 經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55C左右,引物與模板 DNA 單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;引物的延伸:DNA 模板-引物結(jié)合物在 TaqDNA 聚合酶的作用下,以 dNTP
2、 為反 應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性 -退火-延伸三過(guò)程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈” ,而 且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需24 分鐘,23 小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍注意事項(xiàng):引物長(zhǎng)度:15-30bp,常用 20bp 左右;引物擴(kuò)增跨度:以 200-500bp 為宜, 特定條件下可擴(kuò)增至 10kb 的片段;引物堿基:G+C 含量為 40-60%為宜,ATGC 最好隨機(jī)分 布,避免 5 個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸成串排列; 避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu), 避免兩條 引物間互補(bǔ), 特別是
3、3端互補(bǔ); 引物 3 端的堿基, 特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基應(yīng)嚴(yán)格 要求配對(duì); 引物中最好有合適的酶切位點(diǎn); 引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其他序列無(wú)明顯 同源性;序列 Tm 為 55-60C,盡可能與上下游引物的 Tm 值一致, 不超過(guò) 2C2、 試述 Southern 技術(shù)的原理,操作和注意事項(xiàng)原理:將待檢測(cè)的 DNA 分子用/不用限制性內(nèi)切酶消化后,通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離, 繼而將其變性并按其在凝膠中的位置轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素薄膜或尼龍膜上,固定后再與同位素或其它標(biāo)記物標(biāo)記的 DNA 或 RNA 探針進(jìn)行反應(yīng)。如果待檢物中含有與探針互補(bǔ)的序列,則二者通過(guò)堿基互補(bǔ)的原理進(jìn)行結(jié)合, 游離探針洗滌后
4、用自顯影或其它合適的技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),從而顯示出待檢的片段及其相對(duì)大小。操作:基因組酶切;用瓊脂糖凝膠電泳隊(duì) DNA 片段按分子量大小分離;將 DNA 片段在 瓊脂糖凝膠電泳變性成單鏈后,再轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)墓枢l(xiāng)支持物上并與之結(jié)合(即轉(zhuǎn)膜);探針與膜上 DNA 雜交;檢測(cè)注意事項(xiàng):將凝膠中和至中性時(shí),要測(cè)定pH,防止凝膠的堿性破壞硝酸纖維膜;要注意趕走凝膠和濾紙及硝酸纖維膜之間的氣泡3、 試述 Northern 技術(shù)的原理操作和注意事項(xiàng)原理:在變性條件下將待檢的RNA 樣品進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,繼而將其變性并按其在凝膠中的位置轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素薄膜或尼龍膜上,固定后再與同位素或其它標(biāo)記物標(biāo)記的DNA 或RN
5、A 探針進(jìn)行反應(yīng)。如果待檢物中含有與探針互補(bǔ)的序列,則二者通過(guò)堿基互補(bǔ)的原理進(jìn)行 結(jié)合,游離探針洗滌后用自顯影或其它合適的技術(shù)進(jìn)行檢測(cè), 從而顯示出待檢的片段及其相 對(duì)大小。操作:RNA 的提??;RNA 變性電泳;RNA 轉(zhuǎn)移和固定(即轉(zhuǎn)膜):探針與膜上的 RNA 雜交;檢測(cè)注意事項(xiàng):用于 RNA 電泳、轉(zhuǎn)膜的所有器材均須預(yù)處理以除去RNAse 以免樣品的降解;2轉(zhuǎn)膜時(shí),注意趕走氣泡4、 試述質(zhì)粒提取的原理和注意事項(xiàng)原理:堿裂解法提取質(zhì)粒利用的是共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA 與線狀的染色體 DNA 片段在拓?fù)鋵W(xué)上的差異來(lái)分離它們。在 pH 值介于 12.0-12.5 這個(gè)狹窄的范圍內(nèi),線狀的DNA
6、雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)變性,在這樣的條件下,共價(jià)閉環(huán)質(zhì)粒 DNA 的氫鍵雖然斷裂,但兩條互補(bǔ)鏈彼此依然相互盤(pán)繞而緊密地結(jié) 合在一起。當(dāng)加入 PH4.8 的醋酸鉀高鹽緩沖液使 pH 降低后,共價(jià)閉合環(huán)狀的質(zhì)粒DNA 的兩條互補(bǔ)鏈迅速而準(zhǔn)確地復(fù)性, 而線狀的染色體 DNA 的兩條互補(bǔ)鏈彼此已完全分開(kāi),不能迅速而準(zhǔn)確地復(fù)性,它們纏繞形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。通過(guò)離心,線狀的染色體 DNA 與不穩(wěn)定的大分子 RNA 蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物等一起沉淀下 來(lái),而閉合環(huán)狀質(zhì)粒 DNA 卻留在上清液中。注意事項(xiàng):(堿裂解法)加入溶液 2 后不要?jiǎng)×艺袷?,只需輕輕顛倒幾次離心管;加入 溶液 2 后,復(fù)性時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),一般是 5 分
7、鐘,否則會(huì)使染色體復(fù)性;在用苯酚、氯仿抽 提時(shí)應(yīng)用 TE 緩沖液將原溶液的體積擴(kuò)大,一般是200300 微升,以減少 DNA 的損失;在加入酚氯仿的步驟中, 最好用未高溫滅菌的離心管, 因?yàn)楦邷剡^(guò)程中可能使管口變形, 使 得振蕩混勻過(guò)程中酚氯仿容易溢出;溶液2 不可冷凍,現(xiàn)用現(xiàn)配;提取過(guò)程應(yīng)盡量在低溫環(huán)境進(jìn)行;反應(yīng)中加入的研濃度要控制好5、試述載體構(gòu)建的流程和注意事項(xiàng)流程:克隆目的基因片段:設(shè)計(jì)引物,進(jìn)行目的基因片段的per,連 T 載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,提質(zhì)粒,通過(guò) per 或酶切鑒定;酶切:用相同的酶酶切插入目的片段的T 載體及表達(dá)載體, 回收目的片段與表達(dá)載體的大片段; 連接: 連接回收的
8、目的片段與表達(dá)載體的大片 段,重組子轉(zhuǎn)化大腸桿菌,提取質(zhì)粒,酶切鑒定注意事項(xiàng):設(shè)計(jì)引物時(shí)酶切位點(diǎn)前加上適當(dāng)?shù)谋Wo(hù)堿基,否則將不能有效酶切;PCR 產(chǎn)物最好純化后再進(jìn)行酶切, 酶切時(shí)注意內(nèi)切酶最后加入, 每次取樣更換槍頭, 用完后立即放 入-20 度冰箱;酶量不超過(guò)反映總體系的10%;多種酶消化時(shí)若緩沖液條件相同,可同時(shí)加入;否則,先做低溫或低鹽的酶消化,再做高溫或高鹽的酶消化連接時(shí)注意 DNA 片段的摩爾數(shù)應(yīng)控制在載體 DNA 摩爾數(shù)的 310 倍;平端的連接效率比粘性末 端要低得多,T4 DNA 連接酶的濃度和外源 DNA 及載體 DNA 濃度要適當(dāng)加大。6、試述細(xì)胞全能性的概念,以及其對(duì)分
9、子育種的意義概念:多細(xì)胞生物中的每個(gè)體細(xì)胞都含有該生物的整套遺傳物質(zhì),在適宜條件下具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛力。意義: 體細(xì)胞克隆變異是指植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)物在培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的變異。體細(xì)胞克隆變異可以應(yīng)用在抗病、抗除草劑育種上。 在耐鹽、 耐低溫、抗重金屬等突變體方面也開(kāi)展了 工作。 單倍體細(xì)胞培養(yǎng)及育種利用: 花粉培養(yǎng)是指把花粉從花藥中分離出來(lái),以單個(gè)花藥粒作為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)的技術(shù)。 優(yōu)點(diǎn): 花粉已是單倍體細(xì)胞, 發(fā)育成的小植株都是單倍 體植株或雙單倍體, 不含有因干擾而形成的體細(xì)胞植株; 缺點(diǎn): 培養(yǎng)難度大幼胚培養(yǎng)與遠(yuǎn) 緣雜交育種:植物胚胎培養(yǎng)是指使胚及具有胚器官 (如子房、 胚珠) 在離
10、體無(wú)菌培養(yǎng)條件下 發(fā)育成幼苗的技術(shù), 是植物遠(yuǎn)緣雜交育種的重要輔助手段, 克服了遠(yuǎn)緣雜交種胚的早期敗育 現(xiàn)象, 提高遠(yuǎn)緣雜交種的成苗率, 使種子無(wú)生活力的植株獲得后代, 使胚發(fā)育不全的植物獲 得后代,克服種子休眠,提早結(jié)實(shí),縮短育種周期,克服柑橘類合子胚不能生長(zhǎng)現(xiàn)象。7、試述瓊脂糖凝膠電泳的原理原理:許多重要的生物分子, 如氨基酸、 多肽、蛋白質(zhì)、 核苷酸、 核酸等都具有可電離基團(tuán), 它們?cè)谀硞€(gè)特定的 pH 值下可以帶正電或負(fù)電,在電場(chǎng)的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其 所帶電荷極性相反的電極方向移動(dòng),即電泳過(guò)程。瓊脂糖主要在電泳中作為一種固體支持基 質(zhì)。瓊脂糖之間以分子內(nèi)和分子間氫鍵形成較為穩(wěn)
11、定的交聯(lián)結(jié)構(gòu),這種交聯(lián)的結(jié)構(gòu)使瓊脂糖凝膠有較好的抗對(duì)流性質(zhì)。 瓊脂糖凝膠的孔徑可以通過(guò)瓊脂糖的最初濃度來(lái)控制,低濃度的瓊脂糖形成較大的孔徑,而高濃度的瓊脂糖形成較小的孔徑。8、石蠟包埋過(guò)程應(yīng)注意的問(wèn)題1包埋前應(yīng)該將鑷子和溶化的石蠟放在恒溫箱中,溫度65-70C為宜;材料應(yīng)盡量放在石蠟底部,使石蠟完全淹沒(méi)材料;材料放好后,輕輕吹一口氣,是石蠟的表面形成一層膜, 再放入冷水中,使石蠟迅速冷卻;控制溫度,溫度過(guò)高石蠟中容易出現(xiàn)氣泡,溫度過(guò)低使石蠟在操作過(guò)程中凝固;石蠟使用前要過(guò)濾,除去雜質(zhì),用濾紙過(guò)濾比紗布效果好9、 投射電鏡主要由哪三大系統(tǒng)組成?其中每個(gè)系統(tǒng)主要包括哪些部分? 電子光學(xué)系統(tǒng):電子槍
12、、 磁電子透鏡、樣品室、觀察記錄儀; 真空系統(tǒng): 真空泵、閥門(mén)、真空管道、檢測(cè)儀;成像系統(tǒng): 物鏡、中間鏡、攝像鏡10、 簡(jiǎn)述投射電鏡的成像原理 電子束在真空條件下經(jīng)高壓加速后形成快速電子束流, 這時(shí)不帶樣品信息的入射電子射線與 樣品發(fā)生作用。 由于樣品的厚度和質(zhì)量有差異, 使信號(hào)產(chǎn)生差異。 電子束信號(hào)經(jīng)過(guò)磁透鏡構(gòu) 成的物鏡, 獲得被檢物的正確放大像。 最后再經(jīng)投影鏡再次放大, 形成觀察和拍攝的最終差 異。11、 簡(jiǎn)述普通超薄切片下樣品制備的基本過(guò)程1取材: 選擇有代表性、新鮮健康的材料,并且要求小而精、保持完整,要求動(dòng)作快,1min內(nèi)進(jìn)入固定相;2殺死、固定和保存: 一般選擇殺死、固定和保存
13、劑兼作的化學(xué)藥品,常用甲醛。殺死過(guò)程 應(yīng)迅速,盡量使材料保持其自然狀態(tài);3漂洗與脫水: 用固定液相應(yīng)的緩沖液清洗。用脫水劑置換出材料中的水分,使材料變硬, 形狀更固定,常用脫水劑有酒精和丙酮。脫水過(guò)程應(yīng)從低濃度開(kāi)始,逐漸更換到高濃度;4透明: 使用一種既能與脫水劑又能與包埋劑相混合的溶劑,常用透明劑有二甲苯和氯仿;5浸透和包埋: 經(jīng)透明后,用石蠟浸透,除去材料中的二甲苯,而代之以石蠟。常用的包埋 劑有環(huán)氧樹(shù)脂、乙二醇甲基丙烯酸酯;6切片: 先用石蠟修剪成六面體,再同切片機(jī)切片;7粘片: 用粘貼劑將石蠟切片粘貼于載玻片上;8染色: 染色前,將石蠟溶去,用二甲苯去蠟,在逐步移入酒精或者水中,染色劑
14、一般用番 紅- 固綠二重燃料;9固封: 固封劑有加拿大樹(shù)膠、甘油膠和糖漿等12、 制備掃描電鏡的樣品有哪些干燥方法?空氣干燥法: 又稱自然干燥法, 將經(jīng)過(guò)脫水的樣品, 讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā) 干燥; 臨界點(diǎn)干燥法:利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時(shí),其表面張力等于零的特性,使樣品的液體 完全汽化,并以氣體方式排掉,來(lái)達(dá)到完全干燥的目的;冷凍干燥法:將經(jīng)過(guò)冷凍的樣品 置于高真空中,通過(guò)升華除去樣品中的水分或脫水劑的過(guò)程。 冷凍干燥法有兩種, 即含水樣 品直接冷凍干燥和樣品脫水后冷凍干燥;13、 制備免疫電鏡的樣品時(shí),為什么要進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)?樣品的制備過(guò)程比較復(fù)雜,會(huì)受到多種因素的影響,如抗原的活性、微
15、環(huán)境的成分、抗體的 特異性、抗體稀釋的比例、各種溶液(固定祥和緩沖液)成分、pH、投射壓、溫度、作用時(shí)間和電子染色的效應(yīng)等。 為了排除干擾因素的影響, 增加實(shí)驗(yàn)的可靠性, 就需要根據(jù)具體情 況進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。14、 簡(jiǎn)述鹽析和透析的基本原理和技術(shù)要點(diǎn)鹽析的基本原理:高濃度鹽的水合作用破壞了蛋白質(zhì)的水化膜,使蛋白質(zhì)分子相互聚集而沉 淀。不同蛋白質(zhì)帶電荷水化程度不同,鹽濃度不同,可將不同蛋白質(zhì)加以分離。鹽析的技術(shù)要點(diǎn): 大多數(shù)蛋白質(zhì)用 55%硫酸銨沉淀, 80%、 85%硫酸銨是最大沉淀,將蛋白質(zhì) 溶液燒杯放入有冰塊的大燒杯中,用磁力攪拌器攪拌,加入硫酸銨至飽和,5-10min 完成。攪拌 10-3
16、0min,lOOOOxg 離心 10min,棄上清,沉淀懸浮于 1-2 倍緩沖液中,透析、超濾、 脫鹽柱除去硫酸銨。透析的基本原理: 利用蛋白質(zhì)分子不透過(guò)半透膜的性質(zhì), 通過(guò)不斷更換透析袋外側(cè)的溶液將蛋白與其他小分子物質(zhì)分離。透析的技術(shù)要點(diǎn):新購(gòu)買(mǎi)的透析袋含甘油等雜質(zhì),先用水煮 10min,后用 70%酉精冰箱保存。將預(yù)處理過(guò)的透析袋一端扎緊, 用移液管或漏斗將待透析液移入透析袋中, 不能裝滿, 留一 半左右空間, 扎緊口,浸入裝有大量純凈溶劑的量筒或玻璃缸中。透析液與純凈溶液在攪拌 時(shí)體積比為 1 :10, 靜態(tài)體積比 1 :20。15、 什么叫電泳?簡(jiǎn)述電泳的基本原理電泳: 在外電場(chǎng)作用下
17、,帶電顆粒向與其電性相反的電極移動(dòng)?;驹恚喝芤褐械牡鞍踪|(zhì)具有許多可接力的酸性基團(tuán)和堿性基團(tuán),在一定pH 值條件下,就會(huì)解離帶電。帶電性質(zhì)和電荷多少?zèng)Q定于蛋白質(zhì)分子的性質(zhì)、溶液pH 及離子強(qiáng)度。帶電的蛋白質(zhì)分子在電場(chǎng)中會(huì)朝著自己所帶電荷相反的電極方向移動(dòng),根據(jù)帶電性質(zhì)不同有不同的遷移率,因此可用于分離不同的蛋白質(zhì)。16、 原子吸收分光光度法與火焰光度法有何異同點(diǎn)?主要應(yīng)用于哪些方面?共同點(diǎn): 都是發(fā)射出特定波長(zhǎng)的光, 通過(guò)單色器分出該元素的特征譜線, 并用光電檢測(cè)器測(cè) 定其發(fā)射強(qiáng)度。不同點(diǎn): 前者測(cè)定范圍廣,靈敏度高,選擇性強(qiáng),操作簡(jiǎn)便、快速,重復(fù)性好。后者只能測(cè) 定無(wú)機(jī)元素,精確性受到很多
18、因素干擾。應(yīng)用:前者用于植物分析、肥料分析、土壤分析、食品飼料分析和生物化學(xué)分析;后者用于 無(wú)機(jī)元素特別是鈣、鎂、錳等,土壤和植物的元素分析,生物大分子、細(xì)胞和組織中金屬元 素的分析。17、 在采用凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子量時(shí),為何向電泳體系中加入SDS?SDS 是一種陰離子表面活性劑,帶有大量負(fù)電荷。當(dāng)與蛋白質(zhì)結(jié)合后,使蛋白質(zhì)失去原有帶 電狀態(tài)而只帶負(fù)電荷, 消除了蛋白質(zhì)間天然的電荷差異; 同時(shí)引起蛋白質(zhì)構(gòu)想的改變, 均形 成長(zhǎng)橢圓棒狀,消除了蛋白質(zhì)間的形態(tài)差異。這樣的蛋白質(zhì) SDS 復(fù)合物在凝膠中的遷移率只與橢圓棒的長(zhǎng)度即蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量的函數(shù)有關(guān),有利于蛋白質(zhì)的分離。18、 相對(duì)離
19、心力為 30000 xg,轉(zhuǎn)頭平均半徑為 10cm,求轉(zhuǎn)速 rRCF=1.118X10-5xRXrpm225rpm2=30000 x105/ (1.118x10)rpm= 16380.9719、 簡(jiǎn)述測(cè)定過(guò)氧化物酶活性的生理意義過(guò)氧化物酶是植物體內(nèi)普遍存在的、 活性較高的一種酶, 它與呼吸作用、 光合作用及生長(zhǎng)素 的氧化等都有密切關(guān)系。在植物生長(zhǎng)發(fā)育股過(guò)程中他的活性不斷發(fā)生變化。因此測(cè)量這種酶 的活性,可以反映特定時(shí)期植物體內(nèi)代謝的變化。20、 免疫印跡雜交技術(shù)( Western Blot )的工作原理?應(yīng)用在哪些方面?工作原理: 與 Southern 或 Northern 雜交方法類似, 但
20、 Western 雜交采用的是聚丙烯酰胺凝 膠電泳,被檢測(cè)物是蛋白質(zhì),探針是抗體,顯色用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過(guò)PAGE 分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素膜)上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能 保持電泳分離的多態(tài)類型及其生物學(xué)活性不變。 以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原, 與 對(duì)應(yīng)的抗體其免疫反應(yīng), 再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng), 經(jīng)過(guò)底物顯色或放射性自 顯影以檢測(cè)電泳分離的特異目的基因表達(dá)的蛋白成分。應(yīng)用: 抗原的純化和濃縮,檢測(cè)靶蛋白的有無(wú),目的基因是否表達(dá)的鑒定,該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。21、 TTC 法快速測(cè)定種子生命力的理論依據(jù)是什么?在實(shí)驗(yàn)操作
21、中應(yīng)注意些什么?理論依據(jù):TTC 的氧化態(tài)是無(wú)色的,可被氫還原成紅色不溶性的TTF?;畹姆N子有呼吸作用,而呼吸作用中脫氫酶的活動(dòng)可使無(wú)色的TTC 還原成紅色的 TTF。應(yīng)用 TTC 的水溶液浸泡活的 種子,可使種胚顯紅色。種子生命力越強(qiáng),代謝活動(dòng)越旺盛,種胚被染成紅色的程度越深; 而種胚生命力衰退或部分喪失生活力則染色較淺或只有部分被染色。因此,可以根據(jù) TTC 快速測(cè)定種子的生命力。注意事項(xiàng):TTC 溶液濃度一般為 0.5%,最好現(xiàn)配現(xiàn)用,貯藏要保存在棕色瓶中,陰涼黑暗處;若溶液變色則不可再用;染色溫度一般為 25-35C;有生活力的種子應(yīng)具有的特征: 種胚完整, 發(fā)育良好,能整個(gè)染成鮮紅色
22、,允許子葉有小部分的壞死,但不能在胚中軸和子 葉連接處,胚根尖也可以有小部分的壞死, 但其它的部位完好; 無(wú)生活力的種子應(yīng)具有的 特征: 種胚全部或大部分不染色, 胚根不染色的部位不僅在根尖, 子葉不染色或喪失機(jī)能的 組織超過(guò) 1/2 ,子葉與胚中軸的連接處或在胚根上有壞死的部分;胚根受傷以及發(fā)育不良、 未成熟的種子;測(cè)定不同作物種子的生活力,要選擇適當(dāng)?shù)娜旧噭⒃噭舛?、染色時(shí) 間等22、層析法按照層析過(guò)程的機(jī)理分哪幾類?各有何特點(diǎn)?1吸附層析:利用吸附劑表面對(duì)不同組分吸附性能的差異達(dá)到分離鑒定目的;2分配層析: 利用不同組分在流動(dòng)相合固定相之間的分配系數(shù) (或溶解度) 不同而使之分離;3離子交換層析: 利用離子交換劑上的可交換離子與周?chē)橘|(zhì)中被分離的各種離子間的親和 力不同,經(jīng)過(guò)交換平衡達(dá)到分離目的;4凝膠層析:某些凝膠對(duì)于分子大小不同的組分,阻滯作用有所差異,從而進(jìn)行分離;5親和層析:利用生物分子的生物學(xué)特性不同來(lái)分離蛋白質(zhì);6疏水相互作用層析:利用不同蛋白疏水區(qū)的不同性質(zhì)分離蛋白;7共價(jià)層析:利用親和支持物和靶分子之間形成的牢固但可
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