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1、7.7作物生長環(huán)境/教學單元6作物生長的營養(yǎng)環(huán)境/技能訓練土壤速效磷含量的測定/實訓任務單(書)實訓項目名稱技能訓練 土壤速效磷含量的測定(0.5mol/L NaHCO3浸提鉬銻抗比色法)編號技能訓練6-5學習目標了解土壤速效磷含量測定的基本原理,熟悉土壤速效磷測定的操作,并能計算出土壤速效磷含量, 為合理分配和施用磷肥提供科學依據(jù)。工作任務1.學習土壤速效磷含量測定的基本原理2.熟悉土壤速效磷測定的操作3.分小組進行土壤速效磷的測定,計算出土壤速效磷含量。閱讀資料作物生長環(huán)境課程教學資源,主要包括教學單元6學習手冊文本、學習性任務單、實訓任務單文本、學習評價表。教學單元6技術(shù)資料的文本、多媒

2、體課件、視頻、圖片等。實訓任務實施(工作步驟、注意事項及工作記錄)一、方法原理 用pH 8.5的0.5 mol/L NaHCO3作浸提劑處理土壤,由于碳酸根的存在抑制了土壤中碳酸鈣的溶解,降低了溶液中Ca2+濃度,相應地提高了磷酸鈣的溶解度。由于浸提劑的pH較高,抑制了Fe3+和AI3+的活性,有利于磷酸鐵和磷酸鋁的提取。此外,溶液中存在著OH-、HCO3-、CO32-等陰離子,也有利于吸附態(tài)磷的置換。用NaHCO3作浸提劑提取的有效磷與植物吸收磷有良好的相關(guān)性,其適應范圍也較廣。浸出液中的磷,在一定的酸度下,用硫酸鉬銻抗還原顯色成磷鉬藍,藍色的深淺在一定濃度范圍與磷的含量成正比,因此,可用比

3、色法測定其含量。二、儀器、試劑 1儀器用品 振蕩機、分光光度計、天平(0.01g)、無磷濾紙、漏斗、量筒(100mL)、帶塞三角瓶(250mL)、三角瓶(100mL)、吸量管(5mL、10mL)、容量瓶(50mL)。2試劑配制(1)0.5 mol/L NaHCO3溶液 稱取化學純NaHCO3 42.0g溶于800mL蒸鎦水中,以0.5 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至8.5(用酸度計測定),然后稀釋至1000mL。若貯存期超過一個月,使用前應重新調(diào)整pH。(2)無磷活性碳 化學純,粉末狀,不含磷。若含磷,先將活性炭用1:1(V/V)的鹽酸浸泡過夜,然后在布氏漏斗上抽氣過濾,用蒸餾水沖洗多次至

4、無CI-為止。再用0.5mol/L NaHCO3溶液浸泡過夜,在布氏漏斗上抽濾,用蒸餾水洗盡NaHCO3,檢查至無磷為止,烘干備用。(3)7.5 mol/L硫酸鉬銻抗貯存液 在1000mL燒杯加入約400mL蒸餾水,將燒杯浸在冷水中,然后緩慢注入208.3mL濃H2SO4(分析純),并不斷攪拌,冷卻至室溫。另稱取分析純鉬酸銨20.0g溶于約60的150mL蒸餾水中,冷卻。再將硫酸溶液慢慢倒入鉬酸銨溶液中,不斷攪拌,最后加入100mL 0.5%酒石酸銻鉀溶液,用蒸餾水稀釋至1000mL,搖勻,貯于棕色試劑瓶中避光保存。(4)硫酸鉬銻抗混合顯色劑 稱取1.50g抗壞血酸(左旋,分析純)溶于100m

5、L硫酸鉬銻抗貯存液中,混勻。此試劑有效期在室溫下為24h,在28的冰箱中可貯存7d。(5)磷標準溶液 準確稱取在105烘箱中烘干2h的分析純KH2PO4 0.2195g,溶于約400mL蒸餾水中。加濃硫酸5mL,然后轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中,用蒸餾水定容,此溶液為50mg/L磷標準溶液。吸取上述磷標準溶液25mL,稀釋至250mL,即為5mg/L磷標準溶液。此溶液不宜久貯。三、操作規(guī)程1磷標準曲線的繪制 分別吸取5mg/L磷標準溶液0 mL、1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5mL于50mL容量瓶中,再各加入0.5 mol/L NaHCO3溶液至10 mL,硫酸鉬銻抗顯色劑5.00mL,

6、充分搖動,趕凈氣泡,定容,搖勻,即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L的磷系列標準液。30min后與待測液同時進行比色,讀取吸光度值。在方格坐標紙上以吸光度值為縱坐標,磷溶液濃度為橫坐標,繪制成工作曲線。2土壤浸提 稱取通過1mm篩孔的風干土樣5.00g置于250mL三角瓶中,加入一小勺無磷活性碳和100mL 0.5 mol/L NaHCO3浸提劑,塞緊瓶塞,于振蕩機上在2025條件下振蕩30min,取出后立即用干燥漏斗和無磷濾紙過濾,濾液承接于干燥三角瓶中。同時作空白實驗。3待測液中磷含量的測定 吸取濾液10.00mL(含磷量高時,可吸取5mL或2mL,同時用0.5 mol/

7、L NaHCO3浸提劑補足至10mL)于50mL容量瓶中,加硫酸鉬銻抗混合顯色劑5.00mL,充分搖動,趕凈氣泡,定容。30min后,在分光光度計上用660nm波長比色,以空白測定調(diào)零,讀取待測液的吸光度值,在工作曲線上查出顯色液的磷濃度值(mg/L)。四、結(jié)果計算土壤速效磷(P,mg/kg)=式中:待測液磷含量為從工作曲線上查得的待測液磷濃度(mg/L);待測液體積本實驗為50mL;分取倍數(shù)為浸提液總體積(mL)/ 吸取濾液體積(mL);烘干土質(zhì)量單位為g。五、注意事項1.如果土壤速效磷含量較高,應減少浸提液的吸樣量,并加浸提劑補足至10.00mL后顯色,以保持顯色時溶液的酸度,計算時按所取

8、浸提液的分取倍數(shù)計算。2.土樣風干和貯存后,測定的速效磷含量可能稍有改變,但一般無大影響。3.對于酸性土壤,一般采用Bray法(鹽酸-氟化銨提取鉬銻抗比色法)。4. 在結(jié)果計算時,也可以用烘干土樣的質(zhì)量:烘干土質(zhì)量風干土樣質(zhì)量×5此法溫度影響很大,一般測定應在2025的溫度下進行。如室溫低于20,可將容量瓶放入3040熱水中保溫20min,取出冷卻后比色。6加入混合顯色劑后,即產(chǎn)生大量的CO2氣體,由于容量瓶口小,CO2氣體不易逸出,在混勻過程中易造成試液外溢,造成測定誤差,因此必須小心慢慢加入,同時充分搖動排出CO2,以避免CO2的存在影響比色結(jié)果。7土壤速效磷含量等級參考標準見表實8-1。表實 8-1 耕層土壤速效磷含量等級(0.5mol/L NaHCO3浸提鉬銻抗比色法)土壤速效磷(mg/kg)<101020>20土壤供磷

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