醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本采集和處理方法

1、血液標(biāo)本的采集和處理方法血液標(biāo)本的采集和處理方法 安慶伊康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所安慶伊康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所 汪全龍汪全龍 血液血液 是存在于心血管系統(tǒng)內(nèi)的流體組織，由是存在于心血管系統(tǒng)內(nèi)的流體組織，由血漿血漿和和血細(xì)胞血細(xì)胞組成。組成。 血液的生理功能血液的生理功能 1、運(yùn)輸功能、運(yùn)輸功能 2、緩沖功能、緩沖功能 3、參與體溫的維持、參與體溫的維持 4、免疫防御功能、免疫防御功能 5、參與機(jī)體的生理止血、參與機(jī)體的生理止血第一節(jié)第一節(jié) 血液組成及理化特性血液組成及理化特性 一、血液的組成和血量一、血液的組成和血量 血液由血液由血漿血漿和各種和各種血細(xì)胞血細(xì)胞組成，組成， 一個(gè)健康成年人的血量約占體重的一個(gè)健康成年

2、人的血量約占體重的7%8% 血量的相對(duì)穩(wěn)定是機(jī)體維持正常生命活動(dòng)血量的相對(duì)穩(wěn)定是機(jī)體維持正常生命活動(dòng)的重要保證。的重要保證。血液各成分的比容血液各成分的比容血漿的化學(xué)成分血漿的化學(xué)成分蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 血漿蛋白血漿蛋白是血漿中多種蛋白質(zhì)的總稱，總量是血漿中多種蛋白質(zhì)的總稱，總量為為65-85g/L65-85g/L白蛋白白蛋白 404048g/L 48g/L 形成膠體滲透壓形成膠體滲透壓球蛋白球蛋白 151530g/L 30g/L 免疫防御作用免疫防御作用纖維蛋白原纖維蛋白原 2 24g/L 4g/L 參與血液凝固參與血液凝固 血漿蛋白的功能血漿蛋白的功能1、形成血漿滲透壓、形成血漿滲透壓2、運(yùn)輸作

3、用、運(yùn)輸作用3、免疫作用、免疫作用4、參與生理止血和纖維蛋白溶解過程、參與生理止血和纖維蛋白溶解過程血漿滲透壓及其作用血漿滲透壓及其作用血漿滲透壓的大小取決于血漿中溶質(zhì)血漿滲透壓的大小取決于血漿中溶質(zhì)顆粒的數(shù)目。顆粒的數(shù)目。血漿滲透壓血漿滲透壓：300 mmolL ，主要，主要來自溶解在血漿中的晶體物質(zhì)。血漿滲來自溶解在血漿中的晶體物質(zhì)。血漿滲透壓的大小與血漿的溶質(zhì)顆粒數(shù)成正比，透壓的大小與血漿的溶質(zhì)顆粒數(shù)成正比，而與溶質(zhì)顆粒的種類、化學(xué)性質(zhì)和大小而與溶質(zhì)顆粒的種類、化學(xué)性質(zhì)和大小無關(guān)。無關(guān)。二、血漿的理化特性二、血漿的理化特性1、晶體滲透壓晶體滲透壓：血漿中晶體物質(zhì)形成，：血漿中晶體物質(zhì)形成

4、，80%來自來自Na和和Cl。 意義：保持細(xì)胞內(nèi)外的水平衡。意義：保持細(xì)胞內(nèi)外的水平衡。 因?yàn)榫w物質(zhì)可以自由通過毛細(xì)血管，因?yàn)榫w物質(zhì)可以自由通過毛細(xì)血管，使細(xì)胞外液的晶體滲透壓基本相等，但不使細(xì)胞外液的晶體滲透壓基本相等，但不易通過細(xì)胞膜。這對(duì)保持細(xì)胞內(nèi)外水平衡易通過細(xì)胞膜。這對(duì)保持細(xì)胞內(nèi)外水平衡和細(xì)胞的正常體積非常重要。和細(xì)胞的正常體積非常重要。2. 膠體滲透壓膠體滲透壓：3.3 kPa (25 mmHg)，由血，由血漿 蛋 白 形 成 ， 主 要 是漿 蛋 白 形 成 ， 主 要 是 白 蛋 白白 蛋 白 。 意義：保持血管內(nèi)外的水平衡。意義：保持血管內(nèi)外的水平衡。 由于血漿蛋白不易通

5、過毛細(xì)血管壁所以在由于血漿蛋白不易通過毛細(xì)血管壁所以在調(diào)節(jié)血管內(nèi)外水的平衡和維持正常的血漿調(diào)節(jié)血管內(nèi)外水的平衡和維持正常的血漿容量起重要作用。容量起重要作用。水水水水水水0.9% NaCl 2% NaCl 0.7% NaCl等滲溶液等滲溶液 高滲溶液高滲溶液 低滲溶液低滲溶液正常紅細(xì)胞正常紅細(xì)胞NaCl溶液溶液與血漿滲透壓相比與血漿滲透壓相比血漿滲透壓：血漿滲透壓： 等滲溶液等滲溶液 血漿滲透壓：血漿滲透壓： 高滲溶液高滲溶液 血漿滲透壓：血漿滲透壓： 低滲溶液低滲溶液34第二節(jié)第二節(jié) 血細(xì)胞的形態(tài)和功能血細(xì)胞的形態(tài)和功能血細(xì)胞生成部位血細(xì)胞生成部位成人的各種血細(xì)胞均發(fā)源于成人的各種血細(xì)胞均發(fā)

6、源于骨髓骨髓，在胚胎早，在胚胎早期從是卵黃囊造血，從第二個(gè)月起由肝脾期從是卵黃囊造血，從第二個(gè)月起由肝脾造血，第五個(gè)月起變?yōu)樵煅?，第五個(gè)月起變?yōu)榧t骨髓造血紅骨髓造血，出生，出生時(shí)幾乎完全依靠時(shí)幾乎完全依靠骨髓造血骨髓造血，隨著骨髓腔的，隨著骨髓腔的增長脂肪細(xì)胞進(jìn)入骨髓，逐步填充多余的增長脂肪細(xì)胞進(jìn)入骨髓，逐步填充多余的骨髓腔，骨髓腔，18歲以后主要是在歲以后主要是在脊椎骨、肋骨、脊椎骨、肋骨、髂骨和長骨骨骺髂骨和長骨骨骺處處才有造血骨髓。所有的才有造血骨髓。所有的血細(xì)胞均起源于血細(xì)胞均起源于造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞。一、紅細(xì)胞一、紅細(xì)胞 是血液中數(shù)量最多的血細(xì)胞是血液中數(shù)量最多的血細(xì)胞 1、形態(tài)：

7、、形態(tài)： 無核，呈中央雙凹圓盤狀無核，呈中央雙凹圓盤狀 12 正常值正常值 男性（男性（4.05.5）10L 12 女性（女性（3.55.0）10L 紅細(xì)胞生成的主要原料紅細(xì)胞生成的主要原料 、合成血紅蛋白的基本原料：、合成血紅蛋白的基本原料：鐵鐵和和蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)。成人體內(nèi)共有鐵成人體內(nèi)共有鐵34 g，其中約，其中約70存于血紅存于血紅蛋白中。蛋白中。 、促使紅細(xì)胞發(fā)育成熟的因子：促使紅細(xì)胞發(fā)育成熟的因子：葉酸葉酸和和維維生素生素B12 ，加快細(xì)胞的分裂和增殖，促進(jìn)紅細(xì)，加快細(xì)胞的分裂和增殖，促進(jìn)紅細(xì)胞的發(fā)育成熟。胞的發(fā)育成熟。 紅細(xì)胞平均壽命紅細(xì)胞平均壽命120 天。天。 衰老衰老RBC變形

8、能力弱，脆性增加。變形能力弱，脆性增加。 血流湍急處收機(jī)械沖擊而破損血流湍急處收機(jī)械沖擊而破損血管血管內(nèi)破壞。內(nèi)破壞。 滯留在肝、脾、骨髓的血管或血竇的狹滯留在肝、脾、骨髓的血管或血竇的狹窄處，被巨噬細(xì)胞吞噬窄處，被巨噬細(xì)胞吞噬血管外破壞。血管外破壞。 紅細(xì)胞的生理特性紅細(xì)胞的生理特性 1、紅細(xì)胞的可塑變形性、紅細(xì)胞的可塑變形性 2、紅細(xì)胞的滲透脆性、紅細(xì)胞的滲透脆性 3、紅細(xì)胞的懸浮穩(wěn)定性、紅細(xì)胞的懸浮穩(wěn)定性 紅細(xì)胞的生理功能紅細(xì)胞的生理功能 主要功能：運(yùn)主要功能：運(yùn)輸輸O2和和CO2 主要由主要由血紅蛋白血紅蛋白完成完成 紅細(xì)胞中含有豐富的紅細(xì)胞中含有豐富的血紅蛋白血紅蛋白。 正常成年男性

9、約為正常成年男性約為120g120gL L160g160gL L 女性約為女性約為110g110gL L150g150gL二、白細(xì)胞二、白細(xì)胞 1、白細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量和分類白細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量和分類 是有核的細(xì)胞，在血液中呈球形，是有核的細(xì)胞，在血液中呈球形，正常成正常成人白細(xì)胞總數(shù)為人白細(xì)胞總數(shù)為(4.0(4.010.0) 10.0) 10109 9L L，飯，飯后、運(yùn)動(dòng)、妊娠分娩及月經(jīng)期等均可使白后、運(yùn)動(dòng)、妊娠分娩及月經(jīng)期等均可使白細(xì)胞增多。細(xì)胞增多。白細(xì)胞白細(xì)胞有粒白細(xì)胞有粒白細(xì)胞中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞無粒白細(xì)胞無粒白細(xì)胞淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞單

10、核細(xì)胞 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)及主要生理功能白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)及主要生理功能分類分類 百分比百分比( () ) 主要生理功能主要生理功能中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞 505070 70 吞噬細(xì)菌，尤其是入侵的化吞噬細(xì)菌，尤其是入侵的化 膿性細(xì)菌膿性細(xì)菌嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞 0 01 1 與組織中的肥大細(xì)胞共同參與組織中的肥大細(xì)胞共同參 與過敏反應(yīng)與過敏反應(yīng)嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞 1 14 4 限制過敏反應(yīng)，參與蠕蟲免疫限制過敏反應(yīng)，參與蠕蟲免疫淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 202040 40 參與特異性免疫參與特異性免疫單核細(xì)胞單核細(xì)胞 2 28 8 吞噬病原微生物及衰老細(xì)胞；吞噬病原微生物及衰老細(xì)胞； 識(shí)別殺傷腫瘤細(xì)

11、胞識(shí)別殺傷腫瘤細(xì)胞 白細(xì)胞的生理功能白細(xì)胞的生理功能 1、白細(xì)胞滲出白細(xì)胞滲出 2、趨化性趨化性50%50%70% 70% 形態(tài)：球形，核桿狀或分葉狀，功能：吞噬、殺滅細(xì)菌。 0-1% 形態(tài)：球形，核形態(tài)：球形，核S形或分葉，胞質(zhì)內(nèi)含大小不形或分葉，胞質(zhì)內(nèi)含大小不一一,分布不均的嗜堿性顆粒分布不均的嗜堿性顆粒,染成蘭紫色。染成蘭紫色。 功能：參與過敏反應(yīng)。功能：參與過敏反應(yīng)。 0.5-3% 形態(tài)：球形，核兩葉，胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大均勻嗜形態(tài)：球形，核兩葉，胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大均勻嗜酸性顆粒，紅染。酸性顆粒，紅染。 功能：抗過敏，抗寄生蟲。功能：抗過敏，抗寄生蟲。 3-8% 形態(tài)：圓或橢圓形態(tài)：圓或橢圓,

12、核腎形或卵圓形。核腎形或卵圓形。 功能：是巨噬細(xì)胞的前身。具有吞噬及免疫功功能：是巨噬細(xì)胞的前身。具有吞噬及免疫功能。能。 20-30%形態(tài)：圓或橢圓，核圓，一側(cè)有凹陷，胞質(zhì)少形態(tài)：圓或橢圓，核圓，一側(cè)有凹陷，胞質(zhì)少。功能功能:免疫作用免疫作用,包括包括T細(xì)胞：細(xì)胞：主要參與細(xì)胞免疫。主要參與細(xì)胞免疫。 B細(xì)胞：細(xì)胞：主要參與體液免疫。主要參與體液免疫。 三、血小板三、血小板 1 1、血小板的形態(tài)和數(shù)量、血小板的形態(tài)和數(shù)量 血小板是骨髓中成熟的巨核細(xì)胞脫落下來的血小板是骨髓中成熟的巨核細(xì)胞脫落下來的細(xì)胞質(zhì)碎片，體積小，無細(xì)胞核。細(xì)胞質(zhì)碎片，體積小，無細(xì)胞核。 正常成人血小板數(shù)為正常成人血小板數(shù)

13、為（100100300300）10109 9/L/L。劇烈運(yùn)動(dòng)、妊娠、較大損傷后可使血小板增劇烈運(yùn)動(dòng)、妊娠、較大損傷后可使血小板增多。多。 當(dāng)血小板少于當(dāng)血小板少于505010109 9/L/L時(shí)，稱血小板過少，時(shí)，稱血小板過少，人體可出現(xiàn)異常出血傾向。人體可出現(xiàn)異常出血傾向。 當(dāng)血小板多于當(dāng)血小板多于1000100010109 9/L/L時(shí)，稱血小板過時(shí)，稱血小板過多，則易發(fā)生血栓。多，則易發(fā)生血栓。 血小板平均壽命血小板平均壽命 714 天。天。血小板的生理功能血小板的生理功能（1 1）. .維持血管內(nèi)皮完整性維持血管內(nèi)皮完整性 （2 2）. .參與生理性止血和血液凝固過程參與生理性止血和

14、血液凝固過程 第三節(jié)第三節(jié) 生理止血和血液凝固生理止血和血液凝固 一、生理止血生理止血 小血管破損后血液將從血管流出，數(shù)分鐘后小血管破損后血液將從血管流出，數(shù)分鐘后即可自行停止，稱為即可自行停止，稱為生理性止血生理性止血。生理性止血大致分為三個(gè)基本步驟生理性止血大致分為三個(gè)基本步驟1、血管收縮血管收縮 表現(xiàn)為受損血管局部和附近的小血管受縮，表現(xiàn)為受損血管局部和附近的小血管受縮，使局部血流減少。使局部血流減少。2、血小板止血栓的形成血小板止血栓的形成 血管受損后，血小板首先黏附聚集于受損血管受損后，血小板首先黏附聚集于受損血管內(nèi)皮下，血流中的血小板不斷的的聚血管內(nèi)皮下，血流中的血小板不斷的的聚集

15、、黏附固定于血管內(nèi)皮上，形成血小板集、黏附固定于血管內(nèi)皮上，形成血小板血栓，從而將傷口堵塞，達(dá)到初步止血的血栓，從而將傷口堵塞，達(dá)到初步止血的作用。作用。 3、血液凝固血液凝固 血管受損可以啟動(dòng)凝血系統(tǒng)，在局部迅血管受損可以啟動(dòng)凝血系統(tǒng)，在局部迅速發(fā)生血液凝固，使血漿中的速發(fā)生血液凝固，使血漿中的可溶性纖維可溶性纖維蛋白原蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白不溶性的纖維蛋白，并交織，并交織成網(wǎng)，以加固止血栓。成網(wǎng)，以加固止血栓。 生理性止血過程的三個(gè)環(huán)節(jié)彼此相互促進(jìn)，生理性止血過程的三個(gè)環(huán)節(jié)彼此相互促進(jìn)，使生理性止血能及時(shí)而快速地進(jìn)行，是機(jī)使生理性止血能及時(shí)而快速地進(jìn)行，是機(jī)體重要的保護(hù)機(jī)制之一

16、。體重要的保護(hù)機(jī)制之一。 血液凝固后血液凝固后l2 h，血凝塊發(fā)生回縮，釋，血凝塊發(fā)生回縮，釋出淡黃色的液體，稱為出淡黃色的液體，稱為血清血清。血清與血漿的主要區(qū)別在于血清中不血清與血漿的主要區(qū)別在于血清中不含含纖維蛋白原纖維蛋白原。抗凝、離心抗凝、離心不抗凝、靜置不抗凝、靜置血漿血漿白細(xì)胞和血小板白細(xì)胞和血小板紅細(xì)胞紅細(xì)胞血清血清血塊血塊（血清（血清+ +纖維蛋白原）纖維蛋白原）（血細(xì)胞（血細(xì)胞+ +纖維蛋白）纖維蛋白） 二、二、血液凝固血液凝固 血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)變?yōu)椴荒芰鲃?dòng)的凝血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)變?yōu)椴荒芰鲃?dòng)的凝膠狀態(tài)的過程稱為膠狀態(tài)的過程稱為血液凝固血液凝固，簡稱凝血。，簡稱凝血。

17、血液凝固的本質(zhì)血液凝固的本質(zhì)是在凝血因子的作用下發(fā)生一是在凝血因子的作用下發(fā)生一系列酶促生化反應(yīng)，使血漿中的系列酶促生化反應(yīng)，使血漿中的可溶性可溶性纖維蛋纖維蛋白原白原轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄圆蝗苄岳w維蛋白纖維蛋白的過程。纖維蛋白的過程。纖維蛋白交織成網(wǎng)，將很多血細(xì)胞網(wǎng)羅在內(nèi)，形成血凝交織成網(wǎng)，將很多血細(xì)胞網(wǎng)羅在內(nèi)，形成血凝塊。血液凝固需要多種凝血因子的參與。塊。血液凝固需要多種凝血因子的參與。 （一）、凝血因子（一）、凝血因子 血漿與組織中直接參與血液凝固的物質(zhì)統(tǒng)稱為凝血因血漿與組織中直接參與血液凝固的物質(zhì)統(tǒng)稱為凝血因子，共有子，共有1212種。種。 編號(hào)編號(hào) 中文名稱中文名稱 編號(hào)編號(hào) 中文名稱

18、中文名稱 因子因子 纖維蛋白原纖維蛋白原 因子因子 抗血友病因子抗血友病因子 因子因子 凝血酶原凝血酶原 因子因子 血漿凝血激酶血漿凝血激酶 因子因子 組織因子組織因子 因子因子 斯圖亞特因子斯圖亞特因子 因子因子 Ca Ca2+2+ 因子因子 血漿凝血激酶前質(zhì)血漿凝血激酶前質(zhì) 因子因子 前加速素前加速素 因子因子 接觸因子接觸因子 因子因子 前轉(zhuǎn)變素前轉(zhuǎn)變素 因子因子 纖維蛋白穩(wěn)定因子纖維蛋白穩(wěn)定因子 （二）、（二）、血液凝血過程血液凝血過程 血液凝固是血液凝固是凝血因子凝血因子按一定順序相繼激活而生成的按一定順序相繼激活而生成的凝凝血酶血酶，最終使，最終使纖維蛋白原纖維蛋白原變?yōu)樽優(yōu)槔w維蛋

19、白纖維蛋白。分為三個(gè)步驟：分為三個(gè)步驟：A、凝血酶原復(fù)合物的形成凝血酶原復(fù)合物的形成 可通過內(nèi)源性凝血途徑和外源性凝血途徑生成，可通過內(nèi)源性凝血途徑和外源性凝血途徑生成， 進(jìn)而激活凝血酶原。進(jìn)而激活凝血酶原。B、凝血酶原的激活凝血酶原的激活 凝血酶原在凝血酶原復(fù)合物的作用下激活成為凝血凝血酶原在凝血酶原復(fù)合物的作用下激活成為凝血 酶。酶。C、纖維蛋白的生成纖維蛋白的生成 在凝血酶的作用下，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成不溶的纖在凝血酶的作用下，使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成不溶的纖維蛋白。維蛋白。相繼激活、逐級(jí)放大相繼激活、逐級(jí)放大”（3）凝血的三個(gè)基本步驟：）凝血的三個(gè)基本步驟： 1、凝血酶原酶復(fù)合物的形成（凝血酶

20、原酶復(fù)合物的形成（因子因子酶復(fù)合物）酶復(fù)合物） 根據(jù)根據(jù)凝血因子凝血因子X的激活途徑和參與的凝血因子的的激活途徑和參與的凝血因子的不同分為不同分為 內(nèi)源性凝血途徑內(nèi)源性凝血途徑 外源性凝血因子外源性凝血因子 （1）、內(nèi)源性凝血途徑內(nèi)源性凝血途徑指參與凝血的因子全部來自血液指參與凝血的因子全部來自血液 通常因血液與帶負(fù)電荷的物質(zhì)如玻璃、血通常因血液與帶負(fù)電荷的物質(zhì)如玻璃、血管內(nèi)皮等接觸而啟動(dòng)。管內(nèi)皮等接觸而啟動(dòng)。 血液與異物接觸血液與異物接觸 因子因子結(jié)合到異物表面，結(jié)合到異物表面， 激活激活 激活激活 因子因子a 成為成為a Ca2+ 因子因子激活成為激活成為a， a+a結(jié)合成復(fù)結(jié)合成復(fù) 激活

21、激活合物，即合物，即因子因子酶復(fù)合物酶復(fù)合物 生成生成a （2）、）、外源性凝血途徑外源性凝血途徑 由血管外組織產(chǎn)生的由血管外組織產(chǎn)生的組織因子組織因子（）與血液接）與血液接觸而啟動(dòng)的凝血過程，又稱組織因子途徑。觸而啟動(dòng)的凝血過程，又稱組織因子途徑。 凝血過程凝血過程 當(dāng)血管損傷時(shí)，暴露出當(dāng)血管損傷時(shí)，暴露出組織因子組織因子， a 磷脂、磷脂、Ca2+ a-組織因子復(fù)合物組織因子復(fù)合物 激活生成激活生成a 通過通過a-組織因子復(fù)合物組織因子復(fù)合物的形成，使內(nèi)源的形成，使內(nèi)源性凝血途徑和外源性凝血途徑相互聯(lián)系，性凝血途徑和外源性凝血途徑相互聯(lián)系，相互促進(jìn)，共同完成凝血過程。相互促進(jìn)，共同完成凝血

22、過程。 生成的生成的a在在Ca2+存在的情況下與存在的情況下與a在磷在磷脂膜表面形成脂膜表面形成a-a- Ca2+-磷脂復(fù)合物磷脂復(fù)合物即即凝血酶原酶復(fù)合物凝血酶原酶復(fù)合物。 凝血酶原酶復(fù)合物凝血酶原酶復(fù)合物 凝血酶原凝血酶原 凝血酶凝血酶相繼激活、逐級(jí)放大相繼激活、逐級(jí)放大”（3）凝血的三個(gè)基本步驟：）凝血的三個(gè)基本步驟： 凝血酶的作用凝血酶的作用使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白單體使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白單體激活因子激活因子生成因子生成因子 a,使纖維蛋白使纖維蛋白單體相互聚合，形成不溶于水的纖維蛋白單體相互聚合，形成不溶于水的纖維蛋白多聚體凝塊。多聚體凝塊。激活因子激活因子、等，對(duì)凝血過程起

23、正等，對(duì)凝血過程起正反饋促進(jìn)作用。反饋促進(jìn)作用。使血小板活化，為凝血酶原酶復(fù)合物的形使血小板活化，為凝血酶原酶復(fù)合物的形成提供有效的磷脂表面。成提供有效的磷脂表面。 （三）（三）血液凝固過程的調(diào)控血液凝固過程的調(diào)控 1、血管內(nèi)皮的抗凝作用、血管內(nèi)皮的抗凝作用 2、纖維蛋白的吸附、血液的稀釋及單核巨、纖維蛋白的吸附、血液的稀釋及單核巨 噬細(xì)胞的吞噬作用。噬細(xì)胞的吞噬作用。 3、生理性抗凝物質(zhì)。、生理性抗凝物質(zhì)。 A、絲氨酸蛋白酶抑制物、絲氨酸蛋白酶抑制物:抗凝血酶抗凝血酶 B、肝素、肝素 C、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)C系統(tǒng)系統(tǒng) D、組織因子途徑抑制物、組織因子途徑抑制物 正常情況下，血管內(nèi)皮完整，血液不會(huì)

24、發(fā)生凝血，正常情況下，血管內(nèi)皮完整，血液不會(huì)發(fā)生凝血，即使有損傷發(fā)生時(shí)，血液凝固也僅限于受損血管即使有損傷發(fā)生時(shí)，血液凝固也僅限于受損血管的局部，并不延及未損部位，全身血液循環(huán)不會(huì)的局部，并不延及未損部位，全身血液循環(huán)不會(huì)受到影響，原因在于血液中存在抗凝物質(zhì)。受到影響，原因在于血液中存在抗凝物質(zhì)。 血液中的抗凝物質(zhì)主要有血液中的抗凝物質(zhì)主要有抗凝血酶抗凝血酶和和肝素肝素。 三、纖維蛋白溶解系統(tǒng)三、纖維蛋白溶解系統(tǒng) 纖維蛋白纖維蛋白被分解液化的過程稱為被分解液化的過程稱為纖維蛋白溶解纖維蛋白溶解。 纖維蛋白溶解纖維蛋白溶解 血凝過程中形成的血凝過程中形成的不溶性纖維蛋白不溶性纖維蛋白可在纖溶酶可

25、在纖溶酶的作用下，變成可的作用下，變成可溶性的纖維蛋白降解產(chǎn)物溶性的纖維蛋白降解產(chǎn)物。纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解激活物激活物+抑制物抑制物- 纖溶的意義纖溶的意義 使纖維蛋白凝塊溶解，防止血栓形成，保證使纖維蛋白凝塊溶解，防止血栓形成，保證血流通暢，有利于收縮組織的再生和修復(fù)。血流通暢，有利于收縮組織的再生和修復(fù)。 凝血和凝血和纖溶纖溶是機(jī)體的一種保護(hù)性生理過是機(jī)體的一種保護(hù)性生理過程，程，血液凝固系統(tǒng)血液凝固系統(tǒng)和和纖維蛋白溶解系統(tǒng)纖維蛋白溶解系統(tǒng)是兩個(gè)是兩個(gè)對(duì)立統(tǒng)一的功能系統(tǒng)，它們之間維持著動(dòng)態(tài)平對(duì)立統(tǒng)一的功能系統(tǒng)，它們之間維持著動(dòng)態(tài)平衡，既保證血液暢通，又可防止血管內(nèi)血栓的衡，既保證血

26、液暢通，又可防止血管內(nèi)血栓的形成。形成。 紅細(xì)胞凝集紅細(xì)胞凝集 將含不同凝集原的血混合，將會(huì)發(fā)生紅細(xì)胞將含不同凝集原的血混合，將會(huì)發(fā)生紅細(xì)胞聚集成簇，這一現(xiàn)象稱為聚集成簇，這一現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞凝集紅細(xì)胞凝集；同時(shí)；同時(shí)伴有引起凝集的紅細(xì)胞破例，發(fā)生溶血。因伴有引起凝集的紅細(xì)胞破例，發(fā)生溶血。因此當(dāng)給人體輸入血型不相容的血液時(shí)，在血此當(dāng)給人體輸入血型不相容的血液時(shí)，在血管內(nèi)可發(fā)生管內(nèi)可發(fā)生紅細(xì)胞凝集紅細(xì)胞凝集和和溶血反應(yīng)溶血反應(yīng)?；瘜W(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本采集和處理方法化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本采集和處理方法 臨床檢驗(yàn)的目的是為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)診斷依據(jù)。為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制

27、（total quality control，TQC.）和全過程質(zhì)量控制。全過程質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)前（分析前）、實(shí)驗(yàn)中（分析中）和實(shí)驗(yàn)后（分析后）三個(gè)階段的質(zhì)量控制。在實(shí)驗(yàn)誤差中實(shí)驗(yàn)前誤差占70%，因而實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證對(duì)減少實(shí)驗(yàn)誤差顯得尤其重要。實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證包括病人準(zhǔn)備、 標(biāo)本收集、處理、貯存和運(yùn)輸?shù)龋?因而能否正確地、規(guī)范化地采集和處理標(biāo)本，是能否做到實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證的重要內(nèi)容。在臨床化學(xué)檢驗(yàn)中，血液標(biāo)本是應(yīng)用最多的生物體液，血液標(biāo)本因素是影響臨床化學(xué)分析準(zhǔn)確性和可靠性的最重要、最直接的因素。我國從我們的國情出發(fā)，參考了美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）的有關(guān)規(guī)定，對(duì)臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的

28、有關(guān)問題也提出了相應(yīng)的要求。 我國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)委員會(huì)臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì)（CCCLS）已對(duì)“臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理”提出了“中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”，旨在通過標(biāo)本方面的質(zhì)量控制達(dá)到臨床化學(xué)分析的質(zhì)量保證。目前該“標(biāo)準(zhǔn)”文件正在待批中。化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本采集和處理方法化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本采集和處理方法一、一、臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的定義臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的定義二、血液標(biāo)本的采取二、血液標(biāo)本的采取三、全血處理為血清或血漿三、全血處理為血清或血漿四、四、血清或血漿分離物質(zhì)血清或血漿分離物質(zhì)五、標(biāo)本污染和生物安全五、標(biāo)本污染和生物安全 一、臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的定義一、臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的

29、定義 臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本是指為完成某項(xiàng)或多項(xiàng)臨床化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目而采集的一定量的血液，包括抗凝及非抗凝血。二、血液標(biāo)本的采取二、血液標(biāo)本的采取 u采取部位 1.靜脈采血：應(yīng)用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈，小兒和新生兒有時(shí)用頸靜脈和前囟靜脈。2.動(dòng)脈采血：主要用于血?dú)夥治鰰r(shí)。常用的動(dòng)脈為股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈、橈動(dòng)脈和臍動(dòng)脈。3.毛細(xì)血管采血：適用于僅需微量血液的試驗(yàn)或嬰幼兒。 常用部位為耳垂、指端，小兒有時(shí)為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應(yīng)為2mm （2.5mm）， 采血局部應(yīng)無炎癥、水腫等。u標(biāo)本類型臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用， 除前者不含纖維

30、蛋白原外，其余多數(shù)化學(xué)成分無差異；全血只有在紅細(xì)胞內(nèi)成分與血漿成分相似時(shí)才用； 血?dú)夥治?、血紅蛋白電泳等時(shí)用全血， 一般臨床化學(xué)分析多不用全血。三、全血處理為血清或血漿三、全血處理為血清或血漿 血液標(biāo)本采取后應(yīng)盡可能早地自然地使血清（漿）從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來。一般應(yīng)于采血后2h內(nèi)分離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心后三個(gè)階段，對(duì)各不同階段均有具體要求。三、全血處理為血清或血漿三、全血處理為血清或血漿 （一）離心前階段（一）離心前階段 即指標(biāo)本采集到離心處理前的一段時(shí)間。1.血清：標(biāo)本離心前一般應(yīng)令其自行凝集，不可用木棍竹簽等剝離凝血塊。通常于室溫（2225）

31、放置3060 min 血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集；冷藏標(biāo)本凝集緩慢；加促凝劑時(shí)凝集加快（標(biāo)本采集后應(yīng)輕輕顛倒混合510次，以確保促凝劑作用）。2.血漿：需用血漿標(biāo)本時(shí)，必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，而且采血后必須立即輕輕顛倒采血管混合510次（以確?？鼓齽┌l(fā)揮作用），510 min 后即可分離出血漿。3.冷藏標(biāo)本：標(biāo)本冷藏可抑制細(xì)胞代謝，穩(wěn)定某些溫度依賴性成分、但全血標(biāo)本一般不能冷藏；血鉀測(cè)定標(biāo)本冷藏不得超過2h. 標(biāo)本需要冷藏（28）時(shí)，標(biāo)本采取后應(yīng)立即將標(biāo)本置于2-8冰箱中。三、全血處理為血清或血漿三、全血處理為血清或血漿 （一）離心前階段（一）離心前階段 4.代謝抑制劑和防腐劑：某些添加劑

32、加入血液標(biāo)本中能抑制細(xì)胞代謝，可以防止血液標(biāo)本貯存時(shí)分析物濃度的變化。血液葡萄糖測(cè)定時(shí)，如在血液中加入氟化鈉，在血細(xì)胞未分離的情況下，葡萄糖在2225時(shí)可穩(wěn)定24h，28 時(shí)可以穩(wěn)定48h；但在新生兒和兒童標(biāo)本，由于紅細(xì)胞壓積高，用氟化鈉難以控制細(xì)胞的糖酵解作用；甲醛草酸鉀抗凝保存劑不適合血糖測(cè)定；氟化鈉麝香草酚混合劑因能抑制酶活性，不適用于酶學(xué)測(cè)定。三、全血處理為血清或血漿三、全血處理為血清或血漿 （一）離心前階段（一）離心前階段 5.標(biāo)本采集現(xiàn)場(chǎng)：（1）標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送往實(shí)驗(yàn)室，尤其當(dāng)收集區(qū)溫度超過22時(shí)此點(diǎn)更為重要；（2）血液標(biāo)本采集后血管必須加塞、管口向上、垂直放置，以減少管中內(nèi)容物

33、振動(dòng)，促進(jìn)凝血完全，防止標(biāo)本蒸發(fā)、污染和外濺等；（3）已收集的血液標(biāo)本應(yīng)溫和地處理，要防止標(biāo)本管振蕩所造成的紅細(xì)泡破壞(溶血)；溶血可引起細(xì)胞內(nèi)外液濃度改變，影響測(cè)定結(jié)果。有嚴(yán)重影響（使結(jié)果升高）的項(xiàng)目有：神經(jīng)元特異性烯醇化酶、乳酸脫氫酶、血清門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清鉀和血紅蛋白；引起值得注意的影響的項(xiàng)目有：血清鐵（）、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（）和血清甲狀腺素（）；輕度受影響（增加）的有： 總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶；溶血可影響呈色反應(yīng)終點(diǎn)為紅色的實(shí)驗(yàn)，如：酶法測(cè)定血糖、膽固醇、甘油三酯、膽紅素的重氮反應(yīng)、尿素的二乙酰污法。 （4）應(yīng)避免對(duì)光線敏感的分析物暴露在人造光或太

34、陽光（紫外線）照射下。如 VA 、VB6 、 胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測(cè)定時(shí)，標(biāo)本管應(yīng)該用鋁箔或類似物質(zhì)包裹保護(hù)起來。三、全血處理為血清或血漿三、全血處理為血清或血漿 （一）離心前階段（一）離心前階段 6.標(biāo)本運(yùn)送：全血標(biāo)本應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場(chǎng)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，如果運(yùn)送距離較遠(yuǎn)，特別是因分析物穩(wěn)定性有影響，必要時(shí)可于采血現(xiàn)場(chǎng)分離出血清或血漿后，再送往實(shí)驗(yàn)室；標(biāo)本運(yùn)送過程中要注意標(biāo)本的包裝、溫度要求、處理方法等，要確保分析成分的穩(wěn)定性；標(biāo)本管在運(yùn)送過程中要保持管口封閉、向上垂直放置。三、全血處理為血清或血漿三、全血處理為血清或血漿 （一）離心前階段（一）離心前階段 7. 實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本及離心標(biāo)本準(zhǔn)備：

35、（1）要有標(biāo)本收取記錄（應(yīng)認(rèn)真核對(duì)檢驗(yàn)中清單，對(duì)有關(guān)情況要認(rèn)真記錄，標(biāo)本接收及處理應(yīng)簽字登記）； （2）對(duì)接受的標(biāo)本要予以分類準(zhǔn)備離心； （3）實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本后應(yīng)仍保持標(biāo)本管于密閉封口、管口向上，垂直位放置。管塞移去后血中CO2丟失，會(huì)造成pH增加，離子鈣和酸性磷酸酶減少，尤其pH變化會(huì)影響某些檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性； （4）標(biāo)本凝集時(shí)間要充分 ；加抗凝劑的血液標(biāo)本可以立即離心；加促凝劑的標(biāo)本可于采血后515 min 盡早離心；抗凝的全血標(biāo)本（鋅、鋰、原卟啉等測(cè)定時(shí)）可以不離心； （5）冷藏（28）標(biāo)本應(yīng)保持這個(gè)溫度直到準(zhǔn)備離心。推薦用溫度控制離心機(jī)； （6）離心標(biāo)本前不主張用小木棒或類似器材去剝離附著于試管壁和管塞上的凝塊，人為剝離會(huì)誘導(dǎo)溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時(shí)，一定要十分注意，動(dòng)作一定要輕柔。三、全血處理為血清或血漿三、全血處理為