遺傳病的診斷和咨詢ppt課件

1、課前提問課前提問1.1.什么叫做什么叫做血紅蛋白病血紅蛋白?。垦t蛋白病的類型有哪？血紅蛋白病的類型有哪些，請簡單描述？些，請簡單描述？2.2.試述試述鐮形細(xì)胞貧血癥鐮形細(xì)胞貧血癥的發(fā)病機(jī)制。的發(fā)病機(jī)制。3.3.地中海貧血地中海貧血包括哪些類型，其基因型及臨床包括哪些類型，其基因型及臨床表現(xiàn)如何？表現(xiàn)如何？4.4.苯丙酮尿癥苯丙酮尿癥有哪些主要的臨床癥狀？試述其分有哪些主要的臨床癥狀？試述其分子機(jī)制。子機(jī)制。1遺傳病的診斷遺傳病的診斷第十七章第十七章2.n掌握掌握系譜分析、產(chǎn)前診斷、基因診斷的概念；系譜分析、產(chǎn)前診斷、基因診斷的概念；遺傳病診斷的主要方法，尤其是實驗室檢查的遺傳病診斷的主要方法

2、，尤其是實驗室檢查的主要方法及染色體檢查的適應(yīng)證。主要方法及染色體檢查的適應(yīng)證。 n熟悉熟悉孟德爾式遺傳病的系譜分析法，非孟德爾孟德爾式遺傳病的系譜分析法，非孟德爾式遺傳病和特殊遺傳方式的疾病；產(chǎn)前診斷常式遺傳病和特殊遺傳方式的疾病；產(chǎn)前診斷常用方法及最佳診斷時間；產(chǎn)前診斷的適應(yīng)證。用方法及最佳診斷時間；產(chǎn)前診斷的適應(yīng)證。 n了解了解生物化學(xué)檢查的適用范圍。生物化學(xué)檢查的適用范圍。 3遺傳病的診斷包括：遺傳病的診斷包括：n一般診斷一般診斷（病史、癥狀、體征、實驗室檢查）（病史、癥狀、體征、實驗室檢查）n特殊診斷特殊診斷（系譜分析、染色體檢查、特殊生（系譜分析、染色體檢查、特殊生化檢測、基因診斷

3、）化檢測、基因診斷）目前目前，臨床對遺傳病的診斷包括：，臨床對遺傳病的診斷包括：n臨癥診斷、癥狀前診斷、產(chǎn)前診斷和植入前臨癥診斷、癥狀前診斷、產(chǎn)前診斷和植入前診斷診斷4 第一節(jié)第一節(jié) 臨癥診斷和癥狀前診斷臨癥診斷和癥狀前診斷n臨癥診斷（臨癥診斷（symptomatic diagnosis）是）是根據(jù)患者的根據(jù)患者的各種臨床表現(xiàn)各種臨床表現(xiàn)進(jìn)行檢查、確診和判斷遺傳方式，是進(jìn)行檢查、確診和判斷遺傳方式，是遺傳病診斷的主要內(nèi)容。遺傳病診斷的主要內(nèi)容。n癥狀前診斷（癥狀前診斷（presymptomatic diagnosis）則是）則是對遺對遺傳上異常的個體（傳上異常的個體（針對一些發(fā)病較遲的常染色體

4、顯針對一些發(fā)病較遲的常染色體顯性遺傳病患者性遺傳病患者）采用各種措施，使他們在采用各種措施，使他們在出現(xiàn)癥狀出現(xiàn)癥狀前前從遺傳上予以確認(rèn)。從遺傳上予以確認(rèn)。5 1 1、病史：家族史、婚姻史、生育史、病史：家族史、婚姻史、生育史 2 2、癥狀和體征：、癥狀和體征：PKUPKU、半乳糖血癥、性染、半乳糖血癥、性染色體病色體病一、病史、癥狀和體征一、病史、癥狀和體征6二、家系分析二、家系分析n從先證者入手，調(diào)查其親屬的健康從先證者入手，調(diào)查其親屬的健康及生育狀況，將調(diào)查材料繪制成及生育狀況，將調(diào)查材料繪制成系系譜圖進(jìn)行系譜分析，譜圖進(jìn)行系譜分析，大大有助于大大有助于區(qū)區(qū)分單基因病和多基因病分單基因病

5、和多基因病，以及遺傳，以及遺傳方式。方式。n由于各種單基因遺傳病常表現(xiàn)出特由于各種單基因遺傳病常表現(xiàn)出特定的孟德爾式遺傳，所以，定的孟德爾式遺傳，所以，系譜分系譜分析常有助于單基因病的診斷析常有助于單基因病的診斷。7三、細(xì)胞遺傳學(xué)檢查三、細(xì)胞遺傳學(xué)檢查n即即染色體檢查與核型分析染色體檢查與核型分析，是較早，是較早應(yīng)用于遺傳病診斷的輔助手段，能應(yīng)用于遺傳病診斷的輔助手段，能較準(zhǔn)確地判斷和發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目和較準(zhǔn)確地判斷和發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常綜合征，因而該方法是結(jié)構(gòu)異常綜合征，因而該方法是確確診染色體病的主要方法診染色體病的主要方法。 81染色體檢查染色體檢查 亦稱核型分析（亦稱核型分析（kary

6、otype analysis）n是確診染色體病的主要方法是確診染色體病的主要方法。隨著顯帶技。隨著顯帶技術(shù)的應(yīng)用以及高分辯率染色體顯帶技術(shù)的術(shù)的應(yīng)用以及高分辯率染色體顯帶技術(shù)的出現(xiàn)和改進(jìn)，能更準(zhǔn)確地判斷和發(fā)現(xiàn)更多出現(xiàn)和改進(jìn)，能更準(zhǔn)確地判斷和發(fā)現(xiàn)更多的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常綜合征，還可以的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常綜合征，還可以發(fā)現(xiàn)新的微畸變綜合征。發(fā)現(xiàn)新的微畸變綜合征。92性染色質(zhì)檢查性染色質(zhì)檢查n 優(yōu)點是方法簡單，主要優(yōu)點是方法簡單，主要用于疑為兩性畸用于疑為兩性畸形或性染色體數(shù)目異常的疾病形或性染色體數(shù)目異常的疾病診斷或產(chǎn)診斷或產(chǎn)前診斷，有一定價值，但確認(rèn)仍需依靠前診斷，有一定價值，但確認(rèn)仍需依靠

7、染色體檢查。染色體檢查。103、染色體原位雜交：、染色體原位雜交：n應(yīng)用標(biāo)記的應(yīng)用標(biāo)記的DNA片段與玻片上的細(xì)胞、片段與玻片上的細(xì)胞、染色體或間期核的染色體或間期核的DNA雜交，在樣品雜交，在樣品核酸不改變其結(jié)構(gòu)和分布格局的情況核酸不改變其結(jié)構(gòu)和分布格局的情況下，研究下，研究核酸片段的位置、相互關(guān)系核酸片段的位置、相互關(guān)系。114 4、熒光原位雜交（、熒光原位雜交（FISHFISH）：）：n應(yīng)用應(yīng)用熒光素標(biāo)記的熒光素標(biāo)記的DNA探針探針與標(biāo)本進(jìn)行原位雜交后，使與標(biāo)本進(jìn)行原位雜交后，使雜交區(qū)域發(fā)出熒光雜交區(qū)域發(fā)出熒光。 優(yōu)點：快速、安全優(yōu)點：快速、安全 靈敏度高靈敏度高 特異性強(qiáng)特異性強(qiáng)圖示為圖

8、示為18三體綜合征患者的三體綜合征患者的FISH檢測檢測12染色體檢查的指征：染色體檢查的指征：有明顯的智力發(fā)育不全、生長遲緩或伴有其他先天畸形者；夫婦之一有染色體異常，如平衡易位、嵌合體等；已生育有染色體或先天畸形患兒的夫婦；多發(fā)性流產(chǎn)婦女及其丈夫；原發(fā)性閉經(jīng)和女性不育癥；無精子癥男子和男性不育癥；兩性畸形者；疑為先天愚型的患兒及其父母；原因不明的智力低下伴有大耳、大睪丸和（或）多動癥者；35歲以上的高齡孕婦（產(chǎn)前診斷）。13四、生化檢查四、生化檢查n生化檢查主要用于生化檢查主要用于生化遺傳病生化遺傳病的檢測的檢測（對由于（對由于基因突變所引起的酶和蛋白質(zhì)定量和定性分基因突變所引起的酶和蛋白

9、質(zhì)定量和定性分析）析）。n主要針對三方面：主要針對三方面： 1 1）蛋白、酶活性；）蛋白、酶活性； 2 2）反應(yīng)底物、代謝中間產(chǎn)物或終產(chǎn)物的濃度；）反應(yīng)底物、代謝中間產(chǎn)物或終產(chǎn)物的濃度； 3 3）受體的結(jié)合能力。）受體的結(jié)合能力。n例如例如疑為苯丙酮尿癥患者疑為苯丙酮尿癥患者，可檢測，可檢測血清苯丙氨血清苯丙氨酸或尿中苯丙酮酸的濃度酸或尿中苯丙酮酸的濃度。14五、基因診斷五、基因診斷（第三節(jié)）（第三節(jié)）n采用分子生物學(xué)方法在采用分子生物學(xué)方法在DNA水平或水平或RNA水平對某一基因進(jìn)行分析水平對某一基因進(jìn)行分析，從而對特定，從而對特定的疾病進(jìn)行診斷（的疾病進(jìn)行診斷（gene diagnosis

10、）。）。n基因診斷是癥狀前診斷的主要手段。基因診斷是癥狀前診斷的主要手段。15 19781978年，華裔美國學(xué)者簡悅威（年，華裔美國學(xué)者簡悅威（Yuet-Wai KanYuet-Wai Kan）首次采用首次采用DNADNA重組技術(shù)對血紅蛋白病進(jìn)行產(chǎn)前診斷，重組技術(shù)對血紅蛋白病進(jìn)行產(chǎn)前診斷，開創(chuàng)基因診斷的先河開創(chuàng)基因診斷的先河。目前，基因診斷早已進(jìn)入歐。目前，基因診斷早已進(jìn)入歐美各國的臨床應(yīng)用，不僅針對遺傳性疾病，而且用美各國的臨床應(yīng)用，不僅針對遺傳性疾病，而且用于對一些感染性疾病和腫瘤的診斷。于對一些感染性疾病和腫瘤的診斷。 16基因診斷的特點基因診斷的特點（優(yōu)點）（優(yōu)點） ：1.1.以特定基

11、因為目標(biāo)，檢測基因的突變和表達(dá)信息，以特定基因為目標(biāo)，檢測基因的突變和表達(dá)信息，特異性強(qiáng)特異性強(qiáng)；2.2.采用分子雜交技術(shù)和采用分子雜交技術(shù)和PCRPCR技術(shù)具有信號放大作用，微技術(shù)具有信號放大作用，微量樣品即可進(jìn)行診斷，量樣品即可進(jìn)行診斷，靈敏度高靈敏度高；3.3.可用于尚無出現(xiàn)臨床表現(xiàn)前，胎兒的出生前診斷，可用于尚無出現(xiàn)臨床表現(xiàn)前，胎兒的出生前診斷，群體篩查等，群體篩查等，應(yīng)用廣泛應(yīng)用廣泛；4.4.檢測樣品獲得便利檢測樣品獲得便利，不受個體發(fā)育階段性和基因表不受個體發(fā)育階段性和基因表達(dá)組織特異性的限制達(dá)組織特異性的限制。 17基因診斷的樣本：基因診斷的樣本： 可以是可以是任何有核細(xì)胞任何有

12、核細(xì)胞，包括：，包括：1、外周血白細(xì)胞、口腔粘膜細(xì)胞、外周血白細(xì)胞、口腔粘膜細(xì)胞2、活檢標(biāo)本、石臘包埋的組織塊、活檢標(biāo)本、石臘包埋的組織塊3、沉淀細(xì)胞（唾液、痰液、尿液）、沉淀細(xì)胞（唾液、痰液、尿液）4、羊水細(xì)胞、絨毛細(xì)胞、進(jìn)入母體循環(huán)的胎、羊水細(xì)胞、絨毛細(xì)胞、進(jìn)入母體循環(huán)的胎兒細(xì)胞兒細(xì)胞應(yīng)用應(yīng)用PCR，樣本可微量化到一個細(xì)胞，樣本可微量化到一個細(xì)胞18基因診斷的基本技術(shù)：基因診斷的基本技術(shù)：n核酸分子雜交核酸分子雜交n聚合酶鏈反應(yīng)（聚合酶鏈反應(yīng)（PCRPCR）nDNADNA測序技術(shù)測序技術(shù)19Southern blotSouthern blot印跡雜交印跡雜交n通過用已知基因的通過用已知基因

13、的DNA片段制備探針與待測基因片段制備探針與待測基因組組DNA的限制性酶切片段進(jìn)行雜交，分析帶譜。的限制性酶切片段進(jìn)行雜交，分析帶譜。n可直接確定致病基因的缺陷。是最經(jīng)典、應(yīng)用最廣可直接確定致病基因的缺陷。是最經(jīng)典、應(yīng)用最廣泛的分子遺傳學(xué)技術(shù)。泛的分子遺傳學(xué)技術(shù)。n常用于基因缺失。常用于基因缺失。2021aa/aa aa/- aa/a- a-/- -/-14kb10kb10kb 4kbBamH IBamH I左側(cè)：左側(cè)：16號染色體上攜有數(shù)目不同的基因號染色體上攜有數(shù)目不同的基因右側(cè)：右側(cè)：a基因探針雜交的結(jié)果基因探針雜交的結(jié)果 -地貧基因缺失的診斷地貧基因缺失的診斷正常正常貧血貧血癥狀癥狀攜

14、帶攜帶者者HbH22 鐮狀細(xì)胞貧血的基因診斷鐮狀細(xì)胞貧血的基因診斷限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶Mst切割的序列是切割的序列是CCTNAGG （其中（其中N是任何一種核苷酸），是任何一種核苷酸），切割正常切割正常DNA產(chǎn)生產(chǎn)生1.1kb 珠蛋白的珠蛋白的DNA片段；若切割患者片段；若切割患者DNA時，時，由于由于AT破壞了破壞了Mst的位點，便形成的位點，便形成1.3kb 珠蛋白的珠蛋白的DNA片段。片段。酶解正常人酶解正常人DNADNA和患者和患者DNADNA，用標(biāo)記的，用標(biāo)記的 珠蛋白基因為探針作珠蛋白基因為探針作SouthernSouthern雜交雜交23Polymerase Chain Re

15、action (PCR)A method to amplify specific genetic sequences.24Template (DNA or RNA)Two primersdNTPsPCR bufferKCl, Tris, MgCl2Thermostable DNA Polymerase (Taq)PCR Reagent Components反應(yīng)體系：反應(yīng)體系：25PCR Cycle：26Geometric Amplification：27基于基于PCRPCR技術(shù)的技術(shù)的DNADNA診斷診斷: :nPCRPCR直接擴(kuò)增（大片段缺失）直接擴(kuò)增（大片段缺失）nPCR/ASOPCR/A

16、SO、PCR/SSCPPCR/SSCP、PCR/DGGEPCR/DGGE聯(lián)合應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用（點突變的檢測用（點突變的檢測) )nPCR/Southern blot PCR/Southern blot 聯(lián)合應(yīng)用聯(lián)合應(yīng)用（三核苷酸重復(fù)相關(guān)遺傳病）（三核苷酸重復(fù)相關(guān)遺傳?。?8多重多重PCR：在同一：在同一PCR體系中加入數(shù)對體系中加入數(shù)對PCR引物，可引物，可同時擴(kuò)增多個同時擴(kuò)增多個DNA片段。常用來檢測同一基因的多個片段。常用來檢測同一基因的多個外顯子的缺失。外顯子的缺失。29DNADNA測序法：測序法： DNADNA測序（測序（DNA Sequencing)DNA Sequencing)是檢測未是

17、檢測未知突變和已知突變基因的最基本和最重知突變和已知突變基因的最基本和最重要的實驗手段。要的實驗手段。30基因芯片基因芯片n又稱又稱DNA芯片，（芯片，（DNA array）.n指把成千上萬個寡核苷酸或指把成千上萬個寡核苷酸或cDNA探針密集、探針密集、規(guī)律地排列在規(guī)律地排列在1cm2大小的硅片或玻璃芯片上，大小的硅片或玻璃芯片上，容量可達(dá)容量可達(dá)2040萬個基因探針。將熒光標(biāo)記萬個基因探針。將熒光標(biāo)記的的DNA或或cDNA樣品送到在芯片上與探針雜交，樣品送到在芯片上與探針雜交，經(jīng)激光共聚焦顯微鏡掃描，以計算機(jī)系統(tǒng)對熒經(jīng)激光共聚焦顯微鏡掃描，以計算機(jī)系統(tǒng)對熒光信號做出比較和檢測，可迅速得出所需

18、的信光信號做出比較和檢測，可迅速得出所需的信息，比常規(guī)方法快幾十到幾千倍。息，比常規(guī)方法快幾十到幾千倍。 31DNA microarrays on glass slides32應(yīng)用實例應(yīng)用實例nAffymetrix公司，把公司，把P53基因全長序列和已基因全長序列和已知突變的探針集成在芯片上，制成知突變的探針集成在芯片上，制成P53基因芯基因芯片，將在片，將在癌癥早期診斷癌癥早期診斷中發(fā)揮作用。中發(fā)揮作用。nHeller等構(gòu)建了等構(gòu)建了96個基因的個基因的CDNA微陣，用微陣，用于檢測分析風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎于檢測分析風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)相關(guān)的基因，相關(guān)的基因，以探討以探討DNA芯片在芯片在感染性疾病

19、診斷感染性疾病診斷方面的應(yīng)方面的應(yīng)用。用。n現(xiàn)在，現(xiàn)在，肝炎病毒檢測診斷芯片、結(jié)核桿菌耐藥肝炎病毒檢測診斷芯片、結(jié)核桿菌耐藥性檢測芯片、多種惡性腫瘤相關(guān)病毒基因芯片性檢測芯片、多種惡性腫瘤相關(guān)病毒基因芯片等一系列診斷芯片逐步開始進(jìn)入市場。等一系列診斷芯片逐步開始進(jìn)入市場。33G6PD缺乏癥檢測芯片缺乏癥檢測芯片n由由G6PDG6PD基因的突變、插入和缺失引起?；虻耐蛔儭⒉迦牒腿笔б?。n根據(jù)已知的基因突變型可設(shè)計突變基因根據(jù)已知的基因突變型可設(shè)計突變基因探針，制成芯片探針，制成芯片n可同時檢測中國人種的可同時檢測中國人種的8 8種突變類型，覆種突變類型，覆蓋率達(dá)蓋率達(dá)90%90%以上，并能精

20、確確定突變類型以上，并能精確確定突變類型及純、雜合狀況。及純、雜合狀況。n操作時間短（操作時間短（4 4小時以內(nèi)），適于大批量小時以內(nèi)），適于大批量檢定。檢定。34第二節(jié)第二節(jié) 產(chǎn)前診斷和植入前診斷產(chǎn)前診斷和植入前診斷 n產(chǎn)前診斷（產(chǎn)前診斷（prenatal diagnosis）是以羊膜）是以羊膜穿刺術(shù)和絨毛取樣等技術(shù)，對羊水、羊水穿刺術(shù)和絨毛取樣等技術(shù)，對羊水、羊水細(xì)胞和絨毛進(jìn)行遺傳學(xué)和生化檢查分析，細(xì)胞和絨毛進(jìn)行遺傳學(xué)和生化檢查分析，對胚胎或胎兒的染色體和基因進(jìn)行分析診對胚胎或胎兒的染色體和基因進(jìn)行分析診斷斷，是，是預(yù)防遺傳病患兒出生預(yù)防遺傳病患兒出生的有效手段。的有效手段。35母嬰保健法

21、規(guī)定：母嬰保健法規(guī)定：n第二十條第二十條 孕婦有下列情形之一的，醫(yī)師應(yīng)當(dāng)對其進(jìn)孕婦有下列情形之一的，醫(yī)師應(yīng)當(dāng)對其進(jìn)行產(chǎn)前診斷：行產(chǎn)前診斷： （一）羊水過多或者過少的；（一）羊水過多或者過少的； （二）胎兒發(fā)育異常或者胎兒有可疑畸形的；（二）胎兒發(fā)育異常或者胎兒有可疑畸形的； （三）孕早期接觸過可能導(dǎo)致胎兒先天缺陷的物（三）孕早期接觸過可能導(dǎo)致胎兒先天缺陷的物質(zhì)的；質(zhì)的； （四）有遺傳病家族史或者曾經(jīng)分娩過先天性嚴(yán)（四）有遺傳病家族史或者曾經(jīng)分娩過先天性嚴(yán)重缺陷嬰兒的；重缺陷嬰兒的； （五）初產(chǎn)婦年齡超過（五）初產(chǎn)婦年齡超過35周歲的。周歲的。 36 一、產(chǎn)前診斷的對象一、產(chǎn)前診斷的對象：夫婦之

22、一有染色體畸變，特別是平衡易位攜帶者，或生育過染色體病患兒的夫婦；35歲以上的孕婦；夫婦之一有開放性神經(jīng)管畸形，或生育過這種畸形患兒的孕婦；夫婦之一有先天性代謝缺陷，或生育過這種患兒的孕婦；X連鎖遺傳病致病基因攜帶者孕婦；有習(xí)慣性流產(chǎn)史的孕婦；羊水過多的孕婦；夫婦之一有致畸因素接觸史的孕婦；有遺傳病家族史，又系近親結(jié)婚的孕婦。37二、產(chǎn)前診斷的方法二、產(chǎn)前診斷的方法1、無創(chuàng)傷性方法無創(chuàng)傷性方法: : 母親血清、尿液的生化檢查、母親血清、尿液的生化檢查、 B B超、超、CTCT、X X線、線、 MRIMRI2、有創(chuàng)傷性方法有創(chuàng)傷性方法： 根據(jù)妊娠時間及檢測目的有針對性地選用不根據(jù)妊娠時間及檢測目

23、的有針對性地選用不同的穿刺取樣技術(shù)，然后將樣品進(jìn)行同的穿刺取樣技術(shù)，然后將樣品進(jìn)行實驗室實驗室檢查（細(xì)胞遺傳學(xué)、生化檢查、基因診斷）檢查（細(xì)胞遺傳學(xué)、生化檢查、基因診斷）。 羊膜穿刺術(shù)、絨毛吸取術(shù)羊膜穿刺術(shù)、絨毛吸取術(shù) 、 臍帶穿刺術(shù)臍帶穿刺術(shù)38n B B 超超是一種是一種相對安全無創(chuàng)的檢測方法相對安全無創(chuàng)的檢測方法，是，是首選首選的診斷方法，能夠的診斷方法，能夠詳細(xì)檢查胎兒的外部形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)，可對多種遺傳性疾病詳細(xì)檢查胎兒的外部形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)，可對多種遺傳性疾病進(jìn)行早期診斷，這些疾病包括，神經(jīng)管缺陷、腦積水、無腦進(jìn)行早期診斷，這些疾病包括，神經(jīng)管缺陷、腦積水、無腦畸形；唇、腭裂，頸部淋巴

24、管瘤；先天性心臟病；支氣管、畸形；唇、腭裂，頸部淋巴管瘤；先天性心臟?。恢夤?、肺部發(fā)育異常，胸腔積液；肢體缺陷；先天性單側(cè)腎缺如、肺部發(fā)育異常，胸腔積液；肢體缺陷；先天性單側(cè)腎缺如、多囊腎；先天性幽門狹窄、先天性巨結(jié)腸等。多囊腎；先天性幽門狹窄、先天性巨結(jié)腸等。39 取樣方法取樣方法 取樣時間取樣時間 待測樣品待測樣品 羊膜穿刺術(shù)羊膜穿刺術(shù) 孕孕15-17周周 脫落細(xì)胞脫落細(xì)胞絨毛吸取術(shù)絨毛吸取術(shù) 孕孕10-11周周 絨毛膜細(xì)胞絨毛膜細(xì)胞臍帶穿刺術(shù)臍帶穿刺術(shù) 孕孕18周周 臍帶血細(xì)胞臍帶血細(xì)胞40.羊膜穿刺術(shù)：羊膜穿刺術(shù)：孕孕15-17周周 41羊膜穿刺術(shù)指征：羊膜穿刺術(shù)指征：n高齡孕婦高齡

25、孕婦n異常的母體血清三倍體標(biāo)記篩查結(jié)果異常的母體血清三倍體標(biāo)記篩查結(jié)果n染色體異常家族史染色體異常家族史n神經(jīng)管缺損神經(jīng)管缺損/異常母體血清甲胎蛋白異常母體血清甲胎蛋白n生化檢查或生化檢查或DNA分析檢測的孟德爾遺傳病分析檢測的孟德爾遺傳病 42優(yōu)點：優(yōu)點：發(fā)生感染、流產(chǎn)及其他婦科合并癥發(fā)生感染、流產(chǎn)及其他婦科合并癥的風(fēng)險相對較小（約的風(fēng)險相對較?。s1%1%）缺點：缺點：檢查時間較晚檢查時間較晚羊膜穿刺術(shù)的優(yōu)缺點：羊膜穿刺術(shù)的優(yōu)缺點：43絨毛吸取術(shù)絨毛吸取術(shù)（絨毛取樣法）（絨毛取樣法）n絨毛樣本可用于診斷染色體病，代謝病，胎兒性絨毛樣本可用于診斷染色體病，代謝病，胎兒性別鑒定，生化檢測和別鑒

26、定，生化檢測和DNADNA分析。分析。 孕孕10-11周周 44n優(yōu)點：優(yōu)點：檢查時間早，根據(jù)檢測結(jié)果認(rèn)為檢查時間早，根據(jù)檢測結(jié)果認(rèn)為有必要進(jìn)行選擇性流產(chǎn)時，給孕婦帶來有必要進(jìn)行選擇性流產(chǎn)時，給孕婦帶來的損傷和痛苦相對較小。的損傷和痛苦相對較小。n缺點：缺點：取樣標(biāo)本容易被污染，胎兒和母取樣標(biāo)本容易被污染，胎兒和母體易感染和操作不便等，引起流產(chǎn)的風(fēng)體易感染和操作不便等，引起流產(chǎn)的風(fēng)險是羊膜穿刺法的險是羊膜穿刺法的2 2倍。倍。絨毛取樣的優(yōu)缺點：絨毛取樣的優(yōu)缺點：45 臍穿刺臍穿刺 是在是在B B超的監(jiān)護(hù)下，用細(xì)針經(jīng)腹壁、子宮壁進(jìn)入超的監(jiān)護(hù)下，用細(xì)針經(jīng)腹壁、子宮壁進(jìn)入胎兒臍帶，并抽取胎兒血液樣本

27、進(jìn)行診斷。本方胎兒臍帶，并抽取胎兒血液樣本進(jìn)行診斷。本方法適宜妊娠法適宜妊娠1818周周進(jìn)行，進(jìn)行，常作為因錯過絨毛或羊膜常作為因錯過絨毛或羊膜穿刺取樣最佳時機(jī)穿刺取樣最佳時機(jī)，或羊水檢查失敗的補(bǔ)救措施，或羊水檢查失敗的補(bǔ)救措施，還可檢測胎兒血液系統(tǒng)疾病，先天性免疫缺陷等。還可檢測胎兒血液系統(tǒng)疾病，先天性免疫缺陷等。46 胎兒鏡檢查胎兒鏡檢查 又稱羊膜腔鏡或?qū)m腔鏡檢查。宮腔鏡進(jìn)入羊膜腔后，又稱羊膜腔鏡或?qū)m腔鏡檢查。宮腔鏡進(jìn)入羊膜腔后，直接直接觀察觀察胎兒是否有畸形、性別和發(fā)育狀況如何，可以同時胎兒是否有畸形、性別和發(fā)育狀況如何，可以同時抽抽取羊水或胎兒血樣進(jìn)行檢查取羊水或胎兒血樣進(jìn)行檢查，還可

28、進(jìn)行，還可進(jìn)行宮內(nèi)治療宮內(nèi)治療。因此，。因此，理論上這是一種最為理想的方法理論上這是一種最為理想的方法。但由于操作困難和易引。但由于操作困難和易引起多種并發(fā)癥，目前還不能被廣泛接受。起多種并發(fā)癥，目前還不能被廣泛接受。 胎兒鏡檢查的最佳時間是妊娠胎兒鏡檢查的最佳時間是妊娠18182020周周。 47 分析孕婦外周血中的胎兒細(xì)胞以及游離的胎兒分析孕婦外周血中的胎兒細(xì)胞以及游離的胎兒DNADNA或或RNARNA 利用妊娠期少量胎兒細(xì)胞可以通過胎盤進(jìn)入母體血液中利用妊娠期少量胎兒細(xì)胞可以通過胎盤進(jìn)入母體血液中這一現(xiàn)象這一現(xiàn)象，采用流式細(xì)胞儀分離、磁激活細(xì)胞分選、免疫，采用流式細(xì)胞儀分離、磁激活細(xì)胞分

29、選、免疫磁珠法、顯微操作分選法以及分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)等，分磁珠法、顯微操作分選法以及分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)等，分離和分析胎兒有核細(xì)胞以及血清中游離的胎兒離和分析胎兒有核細(xì)胞以及血清中游離的胎兒DNADNA或或RNARNA，從而進(jìn)行無創(chuàng)性基因診斷。從而進(jìn)行無創(chuàng)性基因診斷。48新進(jìn)展：著床前診斷新進(jìn)展：著床前診斷n在在受精受精6天胚胎天胚胎著床前著床前進(jìn)行。進(jìn)行。n優(yōu)點：既可避免優(yōu)點：既可避免分娩患兒，又不分娩患兒，又不必行流產(chǎn)術(shù)必行流產(chǎn)術(shù)49 三、植入前診斷三、植入前診斷 PGDPGD （preimplantation genetic diagnosis）技術(shù)是指技術(shù)是指在體外受精的胚胎，發(fā)育到在體

30、外受精的胚胎，發(fā)育到4 48 8細(xì)胞期細(xì)胞期，通過顯微操作技術(shù)取出單個卵裂球細(xì)胞，應(yīng)用通過顯微操作技術(shù)取出單個卵裂球細(xì)胞，應(yīng)用PCRPCR、FISHFISH等技術(shù)進(jìn)行快速的遺傳學(xué)分析，包括染色體等技術(shù)進(jìn)行快速的遺傳學(xué)分析，包括染色體檢查、特定基因檢測，性別鑒定，檢查、特定基因檢測，性別鑒定，正常的胚胎植正常的胚胎植入母體子宮入母體子宮。 50PGD的應(yīng)用：的應(yīng)用：n該技術(shù)由英國該技術(shù)由英國HandysideHandyside醫(yī)生小組首創(chuàng)，于醫(yī)生小組首創(chuàng)，于19901990年年第第1 1例妊娠成功。例妊娠成功。n目前目前PGDPGD已成功應(yīng)用于以下疾?。阂殉晒?yīng)用于以下疾?。虹犘渭t細(xì)胞鐮形紅細(xì)胞

31、貧血、血友病、囊性纖維增生癥、地中海貧貧血、血友病、囊性纖維增生癥、地中海貧血和自毀容貌綜合征血和自毀容貌綜合征等。等。51課堂小結(jié)課堂小結(jié) 遺傳病的常規(guī)診斷方法和手段：遺傳病的常規(guī)診斷方法和手段：n 癥狀的了解、病史采集和臨床癥狀、體征的檢查。癥狀的了解、病史采集和臨床癥狀、體征的檢查。n 系譜分析的作用及應(yīng)注意的事項。系譜分析的作用及應(yīng)注意的事項。n 染色體檢查的適應(yīng)癥。染色體檢查的適應(yīng)癥。n 性染色質(zhì)檢查。性染色質(zhì)檢查。n 生化檢查。生化檢查。 產(chǎn)前診斷：產(chǎn)前診斷：n 產(chǎn)前診斷的概念。產(chǎn)前診斷的概念。n 產(chǎn)前診斷的常用方法：產(chǎn)前診斷的常用方法：B B超、超、X X線檢查、通過羊膜穿刺術(shù)線

32、檢查、通過羊膜穿刺術(shù)、絨毛吸取術(shù)提供羊水絨毛進(jìn)行的羊水的生化分析、胎兒脫、絨毛吸取術(shù)提供羊水絨毛進(jìn)行的羊水的生化分析、胎兒脫落細(xì)胞的細(xì)胞遺傳學(xué)檢查、分子遺傳學(xué)檢查。落細(xì)胞的細(xì)胞遺傳學(xué)檢查、分子遺傳學(xué)檢查。n 產(chǎn)前診斷的適應(yīng)癥。產(chǎn)前診斷的適應(yīng)癥。52思考題思考題n1.1.遺傳病實驗室檢查的主要方法有哪些遺傳病實驗室檢查的主要方法有哪些? ?n2.2.什么是產(chǎn)前診斷什么是產(chǎn)前診斷? ?其主要技術(shù)有哪些其主要技術(shù)有哪些? ?n3.3.產(chǎn)前診斷的指征有哪些產(chǎn)前診斷的指征有哪些? ?n4.4.試述遺傳病主要診斷方法試述遺傳病主要診斷方法? ?n5.5.何謂家系分析法及臨床應(yīng)用注意事項何謂家系分析法及臨床

33、應(yīng)用注意事項? ?n6.Southern6.Southern印跡雜交技術(shù)的基本原理和步驟印跡雜交技術(shù)的基本原理和步驟? ?n7.7.目前產(chǎn)前診斷技術(shù)有哪些，各有何特點目前產(chǎn)前診斷技術(shù)有哪些，各有何特點? ?n8.8.基因診斷的基本原理，有何優(yōu)點？基因診斷的基本原理，有何優(yōu)點？5354. 遺傳咨詢（genetic counselling）也為“遺傳商談”，它應(yīng)用遺傳學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的基本原理和技術(shù)，與遺傳病患者及其親屬以及有關(guān)社會服務(wù)人員討論遺傳病的發(fā)病原因、遺傳方式、診斷、治療和預(yù)后等問題，解答來訪者所提出的有關(guān)遺傳學(xué)方面的問題，并在權(quán)衡對個人、家庭、社會的利弊的基礎(chǔ)上，給予婚姻、生育、防治、預(yù)防

34、等方面的醫(yī)學(xué)指導(dǎo)。 概述概述55第一節(jié)第一節(jié) 遺傳咨詢的臨床基礎(chǔ)遺傳咨詢的臨床基礎(chǔ)一、一些常見的遺傳咨詢問題一、一些常見的遺傳咨詢問題 （一）（一）遺傳咨詢的種類：遺傳咨詢的種類： 婚前咨詢婚前咨詢 產(chǎn)前咨詢產(chǎn)前咨詢 一般咨詢一般咨詢 56婚前咨詢婚前咨詢本人或?qū)Ψ郊覍僦械哪撤N遺傳病對婚姻的影響及后代健康估測；男、女雙方有一定的親屬關(guān)系，能否結(jié)婚，如果結(jié)婚對后代的影響有多大；雙方中有一方患某種疾病，能否結(jié)婚，若結(jié)婚后是否傳給后代。57 產(chǎn)前咨詢產(chǎn)前咨詢雙方中一方或家屬為遺傳病患者，生育子女是否會雙方中一方或家屬為遺傳病患者，生育子女是否會得病，得病機(jī)會大小；得病，得病機(jī)會大小；曾生育過遺傳病患

35、兒，再妊娠是否會生育同樣患兒；曾生育過遺傳病患兒，再妊娠是否會生育同樣患兒；雙方之一有致畸因素接觸史，會不會影響胎兒健康。雙方之一有致畸因素接觸史，會不會影響胎兒健康。 58 一般咨詢一般咨詢本人有遺傳病家族史，這種病是否會累及本人或子女；本人有遺傳病家族史，這種病是否會累及本人或子女；習(xí)慣性流產(chǎn)是否有遺傳方面原因，多年不孕的原因及生育習(xí)慣性流產(chǎn)是否有遺傳方面原因，多年不孕的原因及生育 指導(dǎo)；指導(dǎo)；有致畸因素接觸史，是否會影響后代；有致畸因素接觸史，是否會影響后代；某些畸形是否與遺傳有關(guān)；某些畸形是否與遺傳有關(guān)；已診斷的遺傳病能否治療等等。已診斷的遺傳病能否治療等等。 59 （二）遺傳咨詢門診

36、和咨詢醫(yī)師：（二）遺傳咨詢門診和咨詢醫(yī)師：對遺傳學(xué)的基本理論、原理、基本知識有全面的認(rèn)識與理解；掌握診斷各種遺傳病的基本技術(shù)；能熟悉地運用遺傳學(xué)理論對各種遺傳病進(jìn)行病因分析，確定遺傳方式，并能區(qū)分出是上代遺傳而來還是新產(chǎn)生的突變；需要掌握某些遺傳病的群體資料，包括群體發(fā)病率，基因頻率、攜帶者頻率和突變率，才能正確估計復(fù)發(fā)風(fēng)險；對遺傳病患者及其家屬在咨詢商談的過程中熱情、耐心，具有同情心，進(jìn)行詳細(xì)的檢查，正確的診斷，盡可能給予必要的診療。60 （三）有一定條件的實驗室和輔助檢查手段：（三）有一定條件的實驗室和輔助檢查手段： 實驗室除一般醫(yī)院常規(guī)化驗外，還應(yīng)有細(xì)胞遺傳學(xué)、生化遺傳學(xué)及分子遺傳學(xué)等方

37、面的檢測。輔助性檢查手段包括X線、超聲診斷、心電圖、腦電圖、肌電圖、各種內(nèi)窺鏡、造影技術(shù)、斷層掃描等。61 （四）有各種輔助性工作基礎(chǔ)：（四）有各種輔助性工作基礎(chǔ)： 有各種輔助性工作基礎(chǔ)，例如病案的登記，特別是婚姻史、生育史、家族史（包括繪制系譜圖）的記錄和管理；產(chǎn)前診斷必需的絨毛、羊水，胎血采集技術(shù)的配合；以及處理階段所需的避孕、流產(chǎn)、絕育、人工受精等手段。62 二、遺傳咨詢的主要步驟二、遺傳咨詢的主要步驟（一）準(zhǔn)確診斷（一）準(zhǔn)確診斷（二）確定遺傳方式（二）確定遺傳方式（三）對再發(fā)風(fēng)險的估計（三）對再發(fā)風(fēng)險的估計（四）提出對策和措施（四）提出對策和措施（五）隨訪和擴(kuò)大咨詢（五）隨訪和擴(kuò)大咨詢

38、63（一）準(zhǔn)確診斷（一）準(zhǔn)確診斷準(zhǔn)確診斷疾病是遺傳咨詢的準(zhǔn)確診斷疾病是遺傳咨詢的第一步第一步，也是，也是最基本最基本和和很重要很重要的一步。的一步。遺傳病的診斷主要是通過病史、家族史的咨詢和調(diào)遺傳病的診斷主要是通過病史、家族史的咨詢和調(diào)查來繪制系譜圖，再通過臨床診斷、染色體核型分查來繪制系譜圖，再通過臨床診斷、染色體核型分析、生化與基因診斷、雜合子篩查、皮紋檢查及輔析、生化與基因診斷、雜合子篩查、皮紋檢查及輔助性器械檢查等方法，盡力做出明確的診斷。助性器械檢查等方法，盡力做出明確的診斷。64 （二）確定遺傳方式（二）確定遺傳方式 大多數(shù)遺傳病的遺傳方式是已知的大多數(shù)遺傳病的遺傳方式是已知的，故

39、確定診斷，故確定診斷后，隨之也就能了解該病的遺傳方式。后，隨之也就能了解該病的遺傳方式。 但但對于有表型模擬和遺傳異質(zhì)性的疾病對于有表型模擬和遺傳異質(zhì)性的疾病，通過家，通過家系調(diào)查，分析遺傳方式，是遺傳咨詢中極為重要的不系調(diào)查，分析遺傳方式，是遺傳咨詢中極為重要的不可缺少的步驟。可缺少的步驟。 65 （三）對再發(fā)風(fēng)險的估計（三）對再發(fā)風(fēng)險的估計 不同種類的遺傳病，其子代的再發(fā)風(fēng)險率均有不同種類的遺傳病，其子代的再發(fā)風(fēng)險率均有其各自獨特的規(guī)律，在明確診斷，其各自獨特的規(guī)律，在明確診斷，確定遺傳方式以確定遺傳方式以后，就可分別計算再發(fā)風(fēng)險率后，就可分別計算再發(fā)風(fēng)險率。 66 （四）提出對策和措施（

40、四）提出對策和措施產(chǎn)前診斷產(chǎn)前診斷冒險再次生育冒險再次生育不再生育不再生育過繼或認(rèn)領(lǐng)過繼或認(rèn)領(lǐng)人工受精人工受精借卵懷胎借卵懷胎67 （五）隨訪和擴(kuò)大咨詢（五）隨訪和擴(kuò)大咨詢 為了確證咨詢者提供信息的可靠性，觀察遺傳為了確證咨詢者提供信息的可靠性，觀察遺傳咨詢的效果和總結(jié)經(jīng)驗教訓(xùn)，有時需要咨詢的效果和總結(jié)經(jīng)驗教訓(xùn)，有時需要對咨詢者進(jìn)對咨詢者進(jìn)行回訪行回訪，以便改進(jìn)工作。，以便改進(jìn)工作。 在擴(kuò)大的家庭遺傳咨詢（在擴(kuò)大的家庭遺傳咨詢（expanded familial expanded familial genetic counselinggenetic counseling）中，）中，確認(rèn)攜帶者是

41、一個關(guān)確認(rèn)攜帶者是一個關(guān)鍵的問題鍵的問題，對對XRXR病、染色體易位疾病的預(yù)防病、染色體易位疾病的預(yù)防，更有，更有決定性的作用。決定性的作用。 68第二節(jié)第二節(jié) 遺傳病的再發(fā)風(fēng)險率的估計遺傳病的再發(fā)風(fēng)險率的估計 一、遺傳病再發(fā)風(fēng)險率的一般估計一、遺傳病再發(fā)風(fēng)險率的一般估計 （一）染色體?。ㄒ唬┤旧w病 染色體病一般均為染色體病一般均為散發(fā)性散發(fā)性，因此再發(fā)風(fēng)，因此再發(fā)風(fēng)險率實際上就是險率實際上就是群體發(fā)生率群體發(fā)生率。 雙親之一為平衡易位攜帶者或嵌合體，雙親之一為平衡易位攜帶者或嵌合體，子代就有較高的再發(fā)風(fēng)險率子代就有較高的再發(fā)風(fēng)險率。 69 （二）常染色體顯性遺傳（二）常染色體顯性遺傳 AD

42、 AD患者多為雜合子，AD遺傳子女的再發(fā)風(fēng)險率為50。 但再發(fā)風(fēng)險率估計時注意： 外顯率 新的突變 70n （三）（三）常染色體隱性遺傳常染色體隱性遺傳 AR 只有當(dāng)父母雙方均為攜帶者時，子女才有只有當(dāng)父母雙方均為攜帶者時，子女才有2525的的概率患病，如已生育一個或幾個患兒，再發(fā)風(fēng)險仍概率患病，如已生育一個或幾個患兒，再發(fā)風(fēng)險仍為為2525。一般在小家系中，呈散發(fā)性，大家系中可。一般在小家系中，呈散發(fā)性，大家系中可見到同時患病的同胞，患者的子女一般不發(fā)病，在見到同時患病的同胞，患者的子女一般不發(fā)病，在少數(shù)情況下可能發(fā)病，取決于患者的配偶。少數(shù)情況下可能發(fā)病，取決于患者的配偶。 71 （四）（四） X X連鎖隱性遺傳連鎖隱性遺傳 XRXR 女性雜合子是患者致病基因的主要來源女性雜合子是患者致病基因的主要來源，因此檢，因此檢出雜合子，對于預(yù)