腦心通膠囊對血管性癡呆模型大鼠的治療作用

1、腦心通膠囊對血管性癡呆模型大鼠的治療作用         08-05-31 17:03:00     作者：何明大， 黎紅    編輯：studa20【關鍵詞】  腦心通膠囊；,大腦中動脈閉塞；,血管性癡呆；,學習記憶；,海馬摘要：目的觀察腦心通膠囊對血管性癡呆模型大鼠行為學及海馬組織形態(tài)學的作用。方法采用大腦中動脈閉塞法(MCAO)制作血管性癡呆動物模型; 跳臺試驗測定大鼠學習記憶成績; 取腦組織作冰凍切片，HE染色，觀察大

2、鼠海馬形態(tài)學改變。結果跳臺實驗中，與假手術組比較，模型組大鼠存在著明顯的學習記憶障礙；與模型組比較，腦心通膠囊、喜得鎮(zhèn)兩治療組大鼠學習記憶能力得到改善，且兩組相比無顯著性差異。光鏡觀察顯示，假手術組大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞排列緊密整齊，無明顯神經(jīng)元脫失；模型組大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞排列稀疏、紊亂，神經(jīng)元脫失明顯，可見膠質細胞增生，中、西藥治療組可明顯減輕大鼠CA1區(qū)海馬神經(jīng)元脫失現(xiàn)象，使錐體細胞形態(tài)較正常，排列較整齊，接近假手術組。結論腦心通膠囊對血管性癡呆模型大鼠有治療作用。關鍵詞：腦心通膠囊；  大腦中動脈閉塞；  血管性癡呆；  學習記憶；  海

3、馬Therapeutic Effects of Naoxintong Capsule on Rats Model of Vascular DementiaAbstract：ObjectiveTo study the effects of Naoxintong capsule on behavior and hippocampal histomorphology in vascular dementia rats.MethodsThe vascular dementia model was established by occlusion of the middle cerebral arter

4、y in rats. The faculty of learning and memory were evaluated by stepdown avoidance test. The brain tissues were removed to be made frozen sections and stained with HE,and then the hippocampal histomorphology was observed and analyzed by light microcope. ResultsThe results of step-down avoidance test

5、 showed that compared with sham-operated group,model group presented significant learning and memory disorder; compared with model group, Naoxintong capsule group and Hydergine group exhibited improvement of learning and memory disability.Meanwhile,there existed no obvious difference between these t

6、wo therapy groups. Under the light microscope, hippocampal CA1 field of rats in the sham-operated group exhibited closely and neatly spaced pyramidal cells, and insignificant neuron loss;in the hippocampal CA1 field of rats in the model group sparse and disturbed pyramidal cells ,noticeable neuron l

7、oss and neuroglial cell proliferation could be seen. Neuron loss reduced significantly in the hippocampal CA1 pyramidal cell field of the two therapy group and cell morphology presented relative normal.ConclusionNaoxintong capsule has therapeutic effect on rat model of vascular dementia.Key words：Na

8、oxintong capsule;  Middle cerebral artery occlusion;  Vascular dementia;  Learning and memory;  Hippocampus      血管性癡呆(Vascular Dementia, VD)是因腦血管疾病所致的智能及認知能障礙臨床綜合征。隨著社會人口老齡化和腦卒中治療存活率的提高，VD的發(fā)病率愈來愈高。腦心通膠囊臨床治療缺血性腦卒中效果肯定，亦有學者將其擴展應用于VD的治療1，發(fā)現(xiàn)腦心通膠囊對VD的智能及其中醫(yī)主癥均有改善作

9、用。本實驗旨在通過觀察腦心通膠囊對擬血管性癡呆模型大鼠行為學及腦組織形態(tài)學的影響，為其臨床治療VD提供實驗依據(jù)。1  材料與方法1.1  動物 健康清潔級SD大鼠40只，雌雄各半，體重200250 g，由中南大學湘雅二醫(yī)院動物實驗室提供，合格證號：(湘)20040013。1.2  藥物腦心通膠囊(藥粉)為實驗藥物，1 g藥粉相當于1g生藥，由咸陽步長制藥有限公司生產(chǎn)，實驗時用雙蒸水配成濃度為0.05 g/ml的混懸液。喜德鎮(zhèn)為陽性對照藥物，1mg/片，系天津華津制藥廠與北  京諾華制藥有限公司合作產(chǎn)品。將藥片碾碎溶于雙蒸水經(jīng)超聲細胞粉碎機制成濃度為0.0

10、62 5 mg/ml的混懸液。藥物配制后置4水箱保存?zhèn)溆?，用前搖勻。1.3  血管性癡呆大鼠模型的建立參照尹軍祥等2的方法略加改進復制血管性癡呆大鼠模型。線栓采用直徑為0.237 mm的尼龍魚線，頭端覆以指甲油，距頭端2 cm處作標記，以10%水合氯醛(0.35 ml/100 g體重)腹腔注射麻醉大鼠后，將其腹臥位固定于手術板上，以絡合碘消毒頸部皮膚。行頸部右側切口，于胸骨舌骨肌與胸骨甲狀肌間分離出右頸總動脈(CCA)、頸內動脈(ICA)及頸外動脈(ECA)，結扎CCA近心端與ECA，用微動脈夾夾閉ICA遠心端后，于CCA分叉處下端迅速作一切口，從切口處插入線栓。線插入ICA后，于入

11、口處稍稍結扎尼龍線與入口出CCA段，然后松開夾閉ICA的動脈夾，繼續(xù)插入尼龍線至稍有阻力后略回撤，至線插入深度為1820 mm左右，實現(xiàn)大腦中動脈阻塞導致腦缺血。再次結扎入口處，尼龍線外留約3 cm，縫合皮膚。2 h后輕輕提拉所留線頭至有阻力，實現(xiàn)大腦中動脈再灌，則造模完成。假手術組只結扎ECA與ICA。1.4  動物分組及給藥將40只大鼠完全隨機分為4組(隨機數(shù)字表法)：假手術組(10只)、模型組(10只) 、中藥組(10只)和西藥組(10只)。中藥組給予腦心通灌胃0.5 g/（kgd）-1,西藥組給予喜德鎮(zhèn)灌胃0.625 mg/（kgd）-1假手術組和模型組給予等體積蒸餾水1 m

12、l/100 g灌胃。術后第1天即用藥，灌胃1次/d，連續(xù)給藥28 d后，進行行為學測試，然后取腦測定相應指標。1.5  行為學測試 跳臺實驗跳臺裝置參照文獻3自制為一25 cm×20 cm×75 cm大小的被動回避反應箱，箱底鋪直徑為1 mm銅柵，通360 V交流電，箱壁由黑色塑料板圍成，銅柵的一角固定8 cm×8 cm×5 cm大小的塑料泡沫塊作為動物回避電擊反應的安全區(qū)。先將大鼠放入箱中自由活動3 min，熟悉環(huán)境，然后接通銅柵電源，大鼠受到電擊，其正常反應是跳回泡沫塊以躲避傷害性刺激，多數(shù)大鼠可能再次或多次跳至銅柵上，受到電擊(雙足同時接觸銅柵)又跳回安全區(qū)，如此訓練5 min，并記錄每只大鼠首次找到安全區(qū)所需的時間(反應時間)和5 min內受到的電擊次數(shù)(錯誤次數(shù))，作為學習測試成績。24 h后重復上述試驗，記錄每只大鼠第一次跳下安全區(qū)的時間（潛伏期）和錯誤次數(shù)，作為記憶測試成績。1.6  形態(tài)學觀察各組隨機取4只大鼠，麻醉方法同前，腹臥位固定于手術板上。打開胸腔，暴露心臟，將灌注穿刺針自心尖部穿入左心室至升主動脈根部。予生理鹽水沖洗及4%多聚甲醛心臟灌注固定，取右側腦組織置4固定液后固定約68 h。組織經(jīng)蔗糖溶液脫水，于20在LEICA CM