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文檔簡介
1、實驗一實驗一 細菌檢驗基本技術細菌檢驗基本技術( (二二) )目的v掌握平板劃線法、斜面、液體和半固體培養(yǎng)基等各種接種方法。v熟悉接種細菌工具、接種細菌的環(huán)境要求和無菌操作要領。 【器材器材】接種工具接種工具 接種環(huán)與接種針接種環(huán)與接種針【標本標本】瓊脂平板瓊脂平板:腐生葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌、腐生葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌、 銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌 斜面:斜面:大腸埃希菌大腸埃希菌 牛肉膏湯:牛肉膏湯:銅綠假單胞菌,表皮葡萄球菌銅綠假單胞菌,表皮葡萄球菌 半固體:半固體:大腸埃希菌、表皮葡萄球菌大腸埃希菌、表皮葡萄球菌 【操作】【操作】v1.分區(qū)劃線分離法(分區(qū)劃線分離法(用于細菌標本的分離純
2、化。)用于細菌標本的分離純化。) 五段分區(qū)法五段分區(qū)法孵育后情況孵育后情況單菌落(單菌落(clone)菌苔菌苔(lawn)光滑型菌落光滑型菌落粗糙型菌落粗糙型菌落 菌落的描述菌落的描述v細菌的菌落特征細菌的菌落特征:v菌落大小(菌落大?。?mm,小;小;1m3mm,大),大)v形狀(露滴狀、圓形、菜花樣、不規(guī)則等)形狀(露滴狀、圓形、菜花樣、不規(guī)則等)v高度(突起、扁平或凹陷)高度(突起、扁平或凹陷)v邊緣(整齊、波形、鋸齒狀、卷發(fā)狀等)邊緣(整齊、波形、鋸齒狀、卷發(fā)狀等)v表面(光滑、粗糙等)表面(光滑、粗糙等)v濕潤度(干燥、濕潤等)濕潤度(干燥、濕潤等)v透明度(不透明、半透明、透明等)
3、透明度(不透明、半透明、透明等)v顏色(紅色、灰白色、黑色、綠色、黃色或無色等)顏色(紅色、灰白色、黑色、綠色、黃色或無色等)v溶血性(溶血性(溶血、溶血、溶血或溶血或溶血)溶血)v特殊氣味特殊氣味(2)瓊脂斜面接種法)瓊脂斜面接種法 主要用于單個菌落的純培養(yǎng)及保存菌種,也主要用于單個菌落的純培養(yǎng)及保存菌種,也可用于某些生化鑒定試驗的接種??捎糜谀承┥b定試驗的接種。斜面培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基接種后菌落生長示意圖菌苔(lawn)(3)穿刺接種法)穿刺接種法 用于半固體培養(yǎng)基或用于半固體培養(yǎng)基或KIA、明膠等具有高、明膠等具有高層的培養(yǎng)基接種。半固體培養(yǎng)基的穿刺接種層的培養(yǎng)基接種。半固體培養(yǎng)基的穿刺接種可用于觀察細菌的動力??捎糜谟^察細菌的動力。 v動力陽性動力陽性v動力陰性動力陰性(4) 液體接種法液體接種法 用于各種液體培養(yǎng)基如肉湯、蛋白胨水、用于各種液體培養(yǎng)基如肉湯、蛋白胨水、糖發(fā)酵管等的接種。糖發(fā)酵管等的接種?!咀⒁馐马棥俊咀⒁馐马棥縱接種細菌時不要說話,嚴格無菌操作;接種前要灼燒接種環(huán), 灼燒后接
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