異種輸血——獼猴受輸豬紅細(xì)胞的初步研究

1、異種輸血獼猴受輸豬紅細(xì)胞的初步研究作者：檀英霞，季守平，盧雁平，張成林，李立立，宮鋒，張金國，章?lián)P培【摘要】本研究的目的是改造豬紅細(xì)胞(pRBC表面抗原，使之與靈長(zhǎng)類動(dòng)物相容，以探討異種輸血的可能性。結(jié)合使用a半乳糖甘酶(AGL)酶解和甲氧基聚乙二醇(mPEG修飾改造豬紅細(xì)胞表面異種抗原，并輸注給狷猴，觀察pRBCft狷猴體內(nèi)活存時(shí)間及安全性；使用免疫抑制劑(蛇毒因子CVF和地塞米松)延長(zhǎng)pRBCft彳彌猴體內(nèi)的存活時(shí)間；建立失血性貧血狷猴模型，觀察輸注pRBC臺(tái)療失血性貧血狷猴的可能性。結(jié)果表明：AGL酶解能夠去除豬紅細(xì)胞表面主要異種抗原(a-Gal抗原)，減弱其與狷猴血清的凝集反應(yīng)，酶解技

2、術(shù)與mPE夠飾技術(shù)結(jié)合可以使豬紅細(xì)胞與狷猴血清更為相容。異種輸血試驗(yàn)表明，雙修飾的pRBU0彌猴體內(nèi)存活時(shí)間為12小時(shí)，使用免疫抑制劑后，可延長(zhǎng)至40小時(shí)；pRBCQ彌猴體內(nèi)8小時(shí)的存活率為38%,在輸注pRBC勺8小時(shí)內(nèi)，失血狷猴的血紅蛋白和紅細(xì)胞壓積可維持在失血前的正常水平。結(jié)論：改造后的pRBCM安全地輸注給狷猴，改善失血狷猴的貧血癥狀，提示用豬紅細(xì)胞進(jìn)行異種輸血是可能的?！娟P(guān)鍵詞】豬紅細(xì)胞PreliminaryStudyonXenotransfusionfromPorcineRedBloodCellintoRhesusMonkeyAbstractInordertostudythepos

3、sibilityofxenotransfusionfromporcineredbloodcell(pRBC)toprimate，theantigensonpRBCsurfaceweremodifiedtomakeitmorecompatibletoprimatesera.PorcineRBCsweresubjectedtobothenzymaticremovalofmembranea-Galantigenswithrecombinanta-galactosidase(AGL)andcovalentattachmentofsuccinimidpropionate-linkedmethoxypol

4、yethyleneglycol(mPEG-SPA)tocamouflagenon-aGalantigens.Theeffectsofdoublemodificationsweredeterminatedbyhemagglutinationandclinicalcross-matchtestingwithrhesussera.InvivoclearanceratesandsafetyofmodifiedpRBCsweremeasuredafteritwastransfusedintoRhesusmonkeywithorwithoutimmunosuppressanttreatment.Theva

5、lidityofpRBCwasdetectedinexsanguineRhesusmonkeymodel.TheresultsshowedthatAGLcouldeffectivelyremovea-GalxenoantigensonpRBCmembraneandreducehemagglutination.ThecombinationofmPEGmodificationwithAGLtreatmentcouldsignificantlyincreasedcompatibilitybetweenpRBCsandRhesusmonkeysera.ModifiedpRBCsweredetectab

6、leinRhesusmonkeybloodat12hoursaftertransfusion，andtheirsurvivaltimewas40hoursintheimmunosuppressant-treatedRhesusmonkey.InvivosurvivalratesofpRBCswere38%inexsanguineRhesusmonkeyat8hoursaftertransfusion，andduringthattime，thehemoglobinandhematocritofRhesusmonkeyweremaintainedatthesamelevelasbeforeitlo

7、stblood.ItisconcludedthatthemodifiedpRBCcanbesafelytransfusedintoRhesusmonkeyandrelievetheanemicsymptomexsanguineRhesusmonkey.ItsuggestedthatpRBCcanbehopefullyusedasabloodsubstituteforprimateandhumaninthefuture.Keywordsporcineredbloodcell；Gala1-3Gal；a-galactosidase；methoxypolyethyleneglycol；xenotran

8、sfusionblood血液供應(yīng)的嚴(yán)重短缺是臨床輸血面臨的難題。豬血液生理生化指標(biāo)與人類非常接近，無傳染甲肝、乙肝和艾滋病等疾病的危險(xiǎn)，因而近年來人們開始探討豬紅細(xì)胞作為人類紅細(xì)胞替代品的可能性，以緩解血源緊張的矛盾1-4。豬紅細(xì)胞輸給人體會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)烈的排斥反應(yīng)，這主要是由豬紅細(xì)胞表面的異種抗原引起的。研究證明豬紅細(xì)胞表面存在兩類異種抗原，即a-半乳糖（a-Gal）抗原和非a半乳糖（non-Gal）抗原。a-Gal抗原是主要異種抗原，它表達(dá)于除人和舊大陸猴外的所有哺乳動(dòng)物體內(nèi)，只是種類和個(gè)體間表達(dá)量有所差異5-7。人體內(nèi)存在天然抗-a-Gal抗體，如果將豬細(xì)胞、組織和器官移植給人和靈長(zhǎng)類，人和靈

9、長(zhǎng)類會(huì)出現(xiàn)超急性排斥反應(yīng)（HAR,導(dǎo)致移植物被迅速消除。研究表明，使用a半乳糖甘酶（AGL能有效消除豬細(xì)胞表面Gala1-3Gal抗原（a-Gal抗原）末端的a-Gal殘基，減弱HAR勺程度，延長(zhǎng)移植物的存活時(shí)間2,8,9。甲氧基聚乙二醇（mPEG是無毒性、無免疫原性的高分子化合物，已被用于修飾蛋白和多肽類藥物，延長(zhǎng)藥物的半衰期，提高治療效果。國外和我們前期的研究均表明，mPEGT與人紅細(xì)月刨摸表面的-NH2、-OH共價(jià)結(jié)合，非特異性地遮蔽血型抗原，修飾后的紅細(xì)胞與相應(yīng)抗血清的凝集反應(yīng)減弱或消失10,11。本研究結(jié)合AGLW解技術(shù)和mPE夠飾技術(shù)，改造豬紅細(xì)胞（pRBC,檢測(cè)改造后的pRBCt

10、彳彌猴血清的相容性。在此基礎(chǔ)上，把雙修飾的pRBC俞注到彳彌猴體內(nèi)，觀察雙具在狷猴體內(nèi)的活存時(shí)間，探討異種輸血的可能性。材料和方法血液和試劑豬血液為無特定病原體的豬血，由北京市SPF育種中心提供；抗體：IsolectinB4-Biotin（Sigma）,Streptavidin-FITC（SouthernBiotech,USA；試驗(yàn)彳彌猴及彳彌猴血清由北京市動(dòng)物園提供；基因重組咖啡豆a半乳糖甘酶（rC-AGL簡(jiǎn)稱AGL為本研究室研制；mPEG-SPA20kD）購自美國Nektar。血液標(biāo)本的采集與處理頸靜脈采豬血，肝素抗凝，4c保存?？鼓娜?00Xg離心5分鐘，棄上層血漿，生理鹽水洗滌沉淀

11、紅細(xì)胞。AGLt造豬紅細(xì)胞及a-Gal抗原清除取壓積pRBC用等滲磷酸-檸檬酸-NaCl緩沖液（58mmol/LNa2HPO421mmol/L檸檬酸C6H8O7?H2O77mmol/LNaCl,pH5.6±0.5,PCS洗滌4次，按每毫升PCS1細(xì)胞懸液中添加酶量為0、50、100U,分別加入AGL26c反應(yīng)2小時(shí)，PBS（pH7.4）洗滌。用PBS等酶解前后的pRBCffi釋為0.2懸液，1.5%的多聚甲醛固定，室溫過夜，加入生物素標(biāo)記的IB4凝集素，24c反應(yīng)2小時(shí)，PBSSfc滌后加入FITC-鏈親和素，24c反應(yīng)30分鐘，PBS先滌，用流式細(xì)胞儀（FACSCalibur，Be

12、ctonDickinson）檢測(cè)紅細(xì)胞表面的熒光強(qiáng)度，計(jì)算a-Gal抗原的清除率。酶解后的豬紅細(xì)胞（EpRBC）BmPEG-SPA修飾用PBS（pH8.0）洗滌酶解后的pRBC4次，稀釋成12%田胞懸液，在紅細(xì)胞懸液中加入mPEG-SP為終濃度為1.0,2.0,3.0mmol/L,混勻后25c反應(yīng)1小時(shí)，PBS洗滌紅細(xì)胞。紅細(xì)胞與mPEG吉合的兩相法檢測(cè)文獻(xiàn)報(bào)道12，13，PEG8000（Sigma）和葡聚糖T500（Pharmacia）組成的兩相系統(tǒng)（5%葡聚糖T500、3?5%PEG800、00.15mol/LNaCl、6.84mmol/LNa2HPO43.16mmol/LNaH2P。4p

13、H7.4）可分離mPE夠飾的紅細(xì)胞。用50ml的聚丙烯離心管盛兩相溶液，室溫靜止過夜，分層后，用吸管吸取上相（PEG,試管底部扎孔收集下相（葡聚糖），棄中間層（上下相在3天內(nèi)使用）。取上、下相各500屋于EP管中混合，mPEG-pRBC對(duì)照紅細(xì)胞（108cells/ml）各10屋加到此EP管中，上下顛倒20次，靜止15分鐘，紅細(xì)胞在兩相中分配（設(shè)重復(fù)），計(jì)算上相中的細(xì)胞數(shù)與加入到系統(tǒng)中總細(xì)胞數(shù)的百分比，即為分配率，亦即被修飾的紅細(xì)胞比率。雙修飾的pRBCf狷猴血清的配血實(shí)驗(yàn)2.0%的pRBCt7取20屋，與40l彳彌猴血清混合，250Xg離心30秒，肉眼和顯微鏡下觀察紅細(xì)胞凝集程度。少量輸血實(shí)

14、驗(yàn)5mlAGL和mPE醪飾的壓積pRBCPBS（pH7?2）洗滌，加入異硫氟酸熒光素（FITC，Sigma）37反應(yīng)20分鐘，生理鹽水洗滌，重懸至壓積為50。在輸血前，將受血猴麻醉，分為3組：自身輸血組，受血猴取出10ml猴血，離心去白細(xì)胞，熒光素標(biāo)記后回輸；無免疫抑制劑試驗(yàn)組，將10ml經(jīng)FITC標(biāo)記的雙修飾pRBCS靜脈輸入受試方猴（體重約為6.0kg）;免疫抑制劑試驗(yàn)組，將10ml經(jīng)FITC標(biāo)記的雙修飾pRBCg靜脈輸入受試狷猴，受試猴接受免疫抑制劑處理。具體免疫方法為：在輸血前24小時(shí)，按0.05mg/kg體重的量將蛇毒免疫抑制因子K眼鏡蛇毒因子（cobravenomfactor,CV

15、F）,中國科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所研制靜脈注射給受試猴，并在輸血前半小時(shí)靜脈注射地塞米松（5mg,0.5mg/kg）以及第二次注射CVF（200g,0?02mg/kg）,輸血后1小時(shí)再次靜脈注射地塞米松（5mg）。整個(gè)試驗(yàn)過程中，監(jiān)測(cè)受試猴的心率、血壓；在輸血后的5、10、15、30分鐘及1、2、4、8、12、24、28、32、36、40、44、48小時(shí)取血，流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光細(xì)胞百分率，計(jì)算pRBCft彳彌猴體內(nèi)的活存時(shí)間，并在輸血4小時(shí)后進(jìn)行血常規(guī)、血生化和尿常規(guī)檢測(cè)。失血猴模型輸血實(shí)驗(yàn)從獼猴體內(nèi)放血12（體重10kg，放血100ml），建立失血性貧血獼猴模型。將實(shí)驗(yàn)分為兩組，其中一組輸入相同

16、體積代血漿（羥乙基淀粉-鹽水注射液），另一組使用免疫抑制劑處理受試猴（方法同少量輸血試驗(yàn)），輸入相同體積雙修飾的pRBC（40ml壓積紅細(xì)胞）和代血漿（50ml），靜脈滴注輸血，然后檢測(cè)失血前后及輸血/液后不同時(shí)間點(diǎn)的血紅蛋白（Hb）和紅細(xì)胞壓積（Hct）,并在放血前及輸血/液4小時(shí)后進(jìn)行獼猴的血生化、尿常規(guī)檢測(cè)，記錄獼猴心率、血壓變化。結(jié)果AGLW解改造后的豬紅細(xì)胞表面抗原分析舊4凝集素可特異地與以a-Gal為末端的多糖結(jié)合14,用來檢測(cè)酶解前后pRBCft面a-Gal抗原的變化情況。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明，以未酶解pRBC勺熒光標(biāo)記率為100%,使用>50U/ml的AGLM有效清除p

17、RBC表面主要異種抗原一a-Gal抗原，清除率達(dá)99.42%（圖1）。紅細(xì)胞與mPE鉆合的兩相法檢測(cè)圖2為mPEG-SPA修飾的酶解后的豬紅細(xì)胞在兩相中的分配，從圖中可看出未修飾的紅細(xì)胞分布在界面下相，mPEGI飾的紅細(xì)胞均勻分布在上相，mPEG-SP濃度為2.0mmol/L時(shí)，>80%勺mPEG-RBC布在上相，mPEG-SPA3.0mmol/L時(shí)，紅細(xì)胞的修飾率大于90%。這種技術(shù)對(duì)于規(guī)?；蛛x回收被修飾的紅細(xì)胞和應(yīng)用于輸血是非常重要的。AGLB解和mPEG-SPA蔽雙修飾的pRBCW彳彌猴血清的配血試驗(yàn)AGL基本清除了pRBCft面的a-Gal抗原后，配血試驗(yàn)顯示，EpRBC與猴血

18、清仍然有凝集反應(yīng)，但凝集程度有所減弱（從+降到+），凝集時(shí)間延長(zhǎng)。進(jìn)一步使用mPEG-SP修飾EpRBC鏡檢結(jié)果表明，隨著mPEG-SPA度的升高，修飾的pRBCf彳彌猴血清的鹽水凝集反應(yīng)逐步減弱，當(dāng)mPE磔度為2.0mmol/L時(shí)，鹽水凝集反應(yīng)完全消失（圖3）,這說明AGL和mPEG-SPA修飾能有效清除和遮蔽豬紅細(xì)胞表面主要和非主要異種抗原。百事通少量輸血試驗(yàn)所有受試猴在輸血過程中和輸血后，呼吸、心率、血壓和血氧飽和度均無大幅度的波動(dòng)，無明顯的輸血反應(yīng)癥狀出現(xiàn)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明，輸入的pRBC勺占狷猴體內(nèi)總紅細(xì)胞數(shù)量的4%左右，這與理論值是一致的，以此為100%,計(jì)算輸血后不同時(shí)間點(diǎn)

19、pRBCf活的百分率。檢測(cè)結(jié)果表明：自身回輸組，3天后檢測(cè)紅細(xì)胞存活率在90%以上；無免疫抑制劑試驗(yàn)組，在輸血后12小時(shí)時(shí)仍可檢測(cè)到FITC標(biāo)記的pRBC免疫抑制劑試驗(yàn)組，輸血8小時(shí)時(shí)有38%pRB竊活，而在輸血40小時(shí)后，彳彌猴體內(nèi)仍可檢測(cè)到熒光標(biāo)記的pRBC（圖4）。受試猴的尿常規(guī)和血生化等多項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)表明，各組的血清K、尿素氮，膽紅素和轉(zhuǎn)氨酶等均有一定程度的上升。值得注意的是，無免疫抑制劑試驗(yàn)組總膽酸升高了15倍。尿常規(guī)指標(biāo)中，無免疫抑制劑試驗(yàn)組受試猴在輸豬紅細(xì)胞后，尿液中出現(xiàn)大量的尿膽原，尿蛋白和尿紅細(xì)胞（均為+）；而免疫抑制劑組在輸豬紅細(xì)胞后，尿液中未出現(xiàn)尿膽原和尿蛋白，僅紅細(xì)胞有略

20、微的增加，與自身回輸組相似（表1）。這些結(jié)果說明使用免疫抑制劑可減輕異種輸血的免疫反應(yīng)。Table1.BloodandurinebiochemicalanalysisofautologousbloodtransfusionRhesusmonkeyandtransfusedpRBCRhesusmonkeywithorwithoutimmunosuppressant（CVF）treatment（略）失血性貧血狷猴的pRBC臺(tái)療為了檢測(cè)雙修飾后pRBC是否在獼猴體內(nèi)行使紅細(xì)胞的功能，我們建立了失血性貧血獼猴模型。獼猴失血約12后，輸入代血漿-羥乙基淀粉，恢復(fù)血容量，失血獼猴出現(xiàn)貧血癥狀，表現(xiàn)為面色蒼

21、白，血紅蛋白和紅細(xì)胞壓積降低等（3小時(shí)內(nèi)Hb降低了15%RBCH氐了13%（圖5）。失血后3小時(shí)，彳彌猴血清中乳酸脫氫酶（LDH,乳酸脫氫酶是一種糖酵解酶）的水平升高了約5倍，說明動(dòng)物無氧酵解水平上升，提示動(dòng)物處于缺氧的狀態(tài)；而輸入雙修飾pRBC臺(tái)療的貧血狷猴，面色紅潤(rùn)，輸血3小時(shí)后，LDH僅為放血前的1.5倍，明顯低于未治療貧血猴（表2）；其它生化指標(biāo)變化不大。在輸血后8小時(shí)內(nèi)，受試猴體內(nèi)血紅蛋白和紅細(xì)胞壓積與失血前一致（圖5），維持正常水平，而未治療的獼猴在失血18小時(shí)內(nèi)一直表現(xiàn)典型的貧血癥狀。這說明經(jīng)酶解和mPE（&裹的雙修飾豬紅細(xì)胞輸給獼猴在一定時(shí)間內(nèi)可發(fā)揮正常的攜氧功能，因此

22、失血獼猴未出現(xiàn)失血后的貧血癥狀。這一結(jié)果提示異種輸血的可能性。Table2.BloodandurinebiochemicalanalysisofhemorrhagicRhesusmonkeyandpRBCtreatedhemorrhagicRhesusmonkey（略）討論據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國每年的血液需求量為50億毫升，但目前的供應(yīng)量?jī)H為16億毫升，供需之間存在巨大差距，血液來源問題已經(jīng)成為制約臨床輸血應(yīng)用的瓶頸。在實(shí)行義務(wù)獻(xiàn)血法后供需矛盾更顯突出，很多病人由于不能及時(shí)獲得輸血治療而延誤搶救的最佳時(shí)機(jī)。為解決這一矛盾，人們開始尋找紅細(xì)胞代用品，其中以化學(xué)修飾的牛血紅蛋白和納米氟碳乳劑最為成功，但它們

23、不完全具備有形紅細(xì)胞的功能。豬紅細(xì)胞無論從形態(tài)、結(jié)構(gòu)，還是生理功能、生化特征，都與人紅細(xì)胞極為相近，近年來逐漸成為人紅細(xì)胞代用品研究的對(duì)象。研究表明，將豬的細(xì)胞或器官移植到人體內(nèi)，會(huì)引起強(qiáng)烈的免疫排斥反應(yīng)，主要是超急性排斥反應(yīng)（HAR,人血液中的天然抗體與豬細(xì)胞表面主要異種抗原a-Gal結(jié)合，激活補(bǔ)體系統(tǒng)，導(dǎo)致在數(shù)分鐘內(nèi)被排斥。去除豬細(xì)胞表面的a-Gal抗原、抑制補(bǔ)體系統(tǒng)激活、消除人體內(nèi)的天然抗體是克服HAR勺三條技術(shù)途徑。異種輸血比異種器官移植更有可能實(shí)現(xiàn)，因?yàn)槌墒旒t細(xì)胞無核，缺乏細(xì)胞器，使用AGL可永久去除pRBC的a-Gal抗原。為克服異種輸血的HAR我們首先使用基因重組咖啡豆a-半乳糖

24、甘酶（AGL）處理pRBC結(jié)果表明，AGLM以有效地清除pRBCft面的a-Gal抗原，AGLM度為50U/ml時(shí)，抗原消除率達(dá)到99.4%以上。然而，AGL處理的pRBCW猴血清仍有弱凝集反應(yīng)。這可能是由于pRBCft面還存在nonGal抗原或殘存少量的a-Gal抗原分子，因此必須將異種抗原完全去除或遮蔽。為此，我們進(jìn)一步用SPA端基活化的mPEGH人61處理過的pRBCmPEG-SPA與紅細(xì)胞膜蛋白以酰胺鍵的形式共價(jià)結(jié)合10,其形成的高度水化膜和柔韌的長(zhǎng)鏈阻止抗體等大分子的進(jìn)入，對(duì)抗原起到空間遮蔽作用。隨著mPEG-SPA濃度的升高，pRBCf彳彌猴血清的鹽水凝集反應(yīng)進(jìn)一步減弱，當(dāng)mPEG

25、勺濃度大于2.0mmol/L,凝集反應(yīng)消失，提示雙修飾的pRBCf彳彌猴血清基本兼容。Doucet等3的研究結(jié)果表明，雙修飾對(duì)豬紅細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能和變形性等均無明顯影響，我們前期的工作也得到了相同的結(jié)論。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，Eckermann等2曾用pRBCAGL處理的pRBCAGL#理的pRBCE合使用免疫抑制劑（CVF補(bǔ)體抑制劑）及結(jié)合使用BSA-Gal分別輸給1只猩猩，試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，pRBG目應(yīng)的存活期分別為不到15分鐘、2小時(shí)、24小時(shí)和72小時(shí)。我們將雙修飾的pRBC寸未處理狷猴進(jìn)行少量輸血試驗(yàn)，結(jié)果顯示pRBG目應(yīng)的存活期為12小時(shí)，比Eckermann報(bào)道的存活時(shí)間長(zhǎng)5倍。我們的實(shí)

26、驗(yàn)還表明，使用CVFffi地塞米松處理狷猴進(jìn)行大量輸血試驗(yàn)，輸血8小時(shí)后約有38%的pRBC活，輸血40小時(shí)后仍可檢測(cè)到pRBC結(jié)果說明mPEGT以遮蔽豬紅細(xì)胞表面的non-Gal抗原，使之與獼猴體內(nèi)的天然抗體的反應(yīng)能力減弱，降低遲發(fā)型排斥反應(yīng)的程度；雙修飾的方法明顯優(yōu)于AGL單處理法，能顯著降低異種輸血排斥反應(yīng)的程度。我們首次用雙修飾的pRBCS己合使用免疫抑制劑治療失血性貧血狷猴，輸血后8小時(shí)內(nèi)，受血狷猴的Hb和Hct恢復(fù)到和失血前水平，失血猴未出現(xiàn)面色蒼白等貧血癥狀，說明經(jīng)酶解和mPE而裹雙修飾的豬紅細(xì)胞可在一定時(shí)間內(nèi)在獼猴體內(nèi)發(fā)揮正常的攜氧功能，因此失血彳彌猴未出現(xiàn)貧血癥狀，尤其是在輸

27、入修飾的pRBCt,血清中LDH水平升高幅度較貧血猴低，說明輸入的豬紅細(xì)胞能夠緩解動(dòng)物的缺氧狀態(tài)。在給獼猴輸入雙修飾的pRBC勺異種輸血過程中，彳彌猴的呼吸、心率、血壓和血氧飽和度等指標(biāo)均沒有明顯變化，這提示在異種輸血過程中受血獼猴的生命指標(biāo)是平穩(wěn)的，未出現(xiàn)劇烈的輸血反應(yīng)。無免疫抑制劑試驗(yàn)組獼猴的尿膽原，尿蛋白和尿紅細(xì)胞均出現(xiàn)強(qiáng)陽性，而使用免疫抑制劑試驗(yàn)組和自身回輸對(duì)照組在尿中僅檢測(cè)到少量的紅細(xì)胞。我們推測(cè)，其機(jī)理是使用CVF抑制受試猴體內(nèi)的補(bǔ)體系統(tǒng)，減弱了IgG介導(dǎo)的補(bǔ)體激活途徑，減輕了肝臟和腎臟損傷，因此免疫抑制劑試驗(yàn)組的血生化和尿常規(guī)檢查指標(biāo)均較無免疫抑制劑組正常。試驗(yàn)結(jié)果提示將經(jīng)修飾的

28、pRBC俞注給狷猴，即異種輸血是有可能的。本研究結(jié)果為實(shí)現(xiàn)將pRBC乍為人紅細(xì)胞代用品，以及用pRBCfe救失血的珍稀動(dòng)物，提供了有意義的參考?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1ZhuA.Intruductiontoporcineredbloodcell:implicationsforxenotransplantation.SeminHematol，2000；37:143-1492EckermannJM，BuhlerLH，ZhuA，etal.Initialinvestigationofthepotentialofmodifiedporcineerythrocytesfortransfusioninprimates

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