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文檔簡介
1、實驗室有毒試劑免疫組化 :甲醛(致癌)二甲苯(致癌)Triton X-100 (有毒)DAB (二氨基聯(lián)苯胺,致癌)RT-PCRDEPC (焦碳酸二乙酯,易揮發(fā),致癌)氯仿(有揮發(fā)性,致癌)苯酚( trizol 中含,易揮發(fā),有毒)DMSO (二甲椏楓,易揮發(fā),血管毒性和肝腎毒性)EB (溴化乙錠,致癌)Goldview (致癌有爭議)紫外燈(致癌)Western-blotPMSF (苯甲基磺酰氟,高強(qiáng)度毒性膽堿酯酶抑制劑)SDS (十二烷基硫酸鈉,粉末、質(zhì)量小、易飛揚,對皮膚、呼吸道粘膜有刺激)TEMED (N,N,N',N'-四甲基乙二胺,強(qiáng)神經(jīng)毒性)丙烯酰胺(中等神經(jīng)毒性
2、)過硫酸銨(有毒)疊氮鈉(NaN3,有毒)DTT(二硫蘇糖醇,很強(qiáng)的還原劑)放射線(可能用到,致突變)細(xì)胞:逆轉(zhuǎn)錄病毒(這個不用說了,想想 HIV)Giemsa (吉姆薩染料,有毒)其余可能接觸有毒物質(zhì):三氯乙酸、冰醋酸、苯、四氯甲烷、氰及氰化物、氟化氫、硫化氫、高氯酸、有機(jī)過氧化物實驗室最危險的 17種物質(zhì)。慢性毒性,最易忽視 各位兄弟姐妹們務(wù)必小心1. DMSO:DMSO是二甲基亞砜, 用途廣泛。用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。 是一種即溶于水又溶于有機(jī)溶 劑的極為重要的非質(zhì)子極性溶劑。 對皮膚有極強(qiáng)的滲透性, 有助于藥 物向人體滲透。 也可作為農(nóng)藥的添加劑。
3、 也是一種十分重要的化學(xué)試 劑。DMSO也是一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點,減少冰晶的形成, 減輕自由基對細(xì)胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、 毒物和代謝產(chǎn) 物的通透性。但是研究表明,DMSO存在嚴(yán)重的毒性作用,與蛋白質(zhì)疏水集團(tuán)發(fā)生 作用,導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性 ,具有血管毒性和肝腎毒性。DMSO是毒性比較強(qiáng)的東西,用的時候要避免其揮發(fā), 要準(zhǔn)備1%-5% 的氨水備用,皮膚沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗滌 . 最為常見的為惡心、 嘔吐、皮疹及在皮膚、和呼出的氣體中發(fā)出大蒜、 洋蔥、牡蠣味。吸入:高揮發(fā)濃度可能導(dǎo)致頭痛,暈眩和鎮(zhèn)靜。 皮膚:能夠灼傷皮膚并使皮膚有刺痛感, 如同所見的皮疹及水泡一樣
4、。 若二甲基亞砜與含水的皮膚接觸會產(chǎn)生熱反應(yīng)。 要避免接觸含有毒性 原料或物質(zhì)的二甲基亞砜溶液, 因其毒性不為人所知, 而二甲基亞砜 卻可能會滲入肌膚,在一定條件下會將有毒物質(zhì)代入肌膚。 吸收:吸收危險性很低。2. EB:EB(Ethidium bromide ,溴化乙錠) 溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑, 用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰 胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標(biāo)準(zhǔn)302nm紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號,觀察瓊脂糖凝膠中 DNA 最常用的方法是利用熒光染料 溴化乙錠進(jìn)行染色,溴化乙錠含有一個可以嵌入DNA 堆積堿基之間的一個三環(huán)平面基團(tuán)。它與 DNA 的結(jié)合幾乎沒有堿基序列特異性。
5、在高離子強(qiáng)度的飽和溶液中,大約每 2.5個堿基插入一個溴化乙錠分 子。當(dāng)染料分子插入后, 其平面基團(tuán)與螺旋的軸線垂直并通過范德華 力與上下堿基相互作用。這個基團(tuán)的固定位置及其與堿基的密切接 近,導(dǎo)致與 DNA 結(jié)合的染料呈現(xiàn)熒光,其熒光產(chǎn)率比游離溶液中染 料有所增加。DNA吸收254nm處的紫外輻射并傳遞給染料,而被結(jié)合 的染料本身吸收302nm和366nm的光輻射。這兩種情況下,被吸收的 能量在可見光譜紅橙區(qū)的590nm處重新發(fā)射出來。由于溴化乙錠-DNA復(fù)合物的熒光產(chǎn)率比沒有結(jié)合DNA的染料高出20-30倍,所以當(dāng) 凝膠中含有游離的溴化乙錠(0.5ug/ml)時,可以檢測到少至10ng的
6、NDA條帶。溴化乙錠可以嵌入堿基分子中,導(dǎo)致錯配。溴化乙錠是 強(qiáng)誘變劑,具有高致癌性! 會在6070度是蒸發(fā)(所以最好不要在膠 太熱的時候加,或者應(yīng)該加到液體里,0.5ug/ml,染色半小時)(當(dāng) EB加得過多時,也可以在室溫用水將已染色的凝膠浸泡 20min以降低 未結(jié)合的EB引起的背景熒光)。溴化乙錠溶液的凈化處理: 由于溴化乙錠具有一定的毒性, 實驗結(jié)束 后,應(yīng)對含EB的溶液進(jìn)行凈化處理再行棄置,以避免污染環(huán)境和危 害人體健康。(1) 對于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下處理: 將EB溶液用水稀釋至濃度低于0.5mg/ml ; 加入一倍體積的 0.5mol/L KMnO4 ,混
7、勻,再加入等量的 25mol/LHCI,混勻,置室溫數(shù)小時; 加入一倍體積的 2.5mol/L NaOH ,混勻并廢棄。(2) EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下處理: 按1mg/ml的量加入活性炭,不時輕搖混勻,室溫放置 1小時; 用濾紙過濾并將活性碳與濾紙密封后丟棄。3. DEPC:DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可滅活各種蛋白質(zhì),是RNA酶的強(qiáng)抑制劑。DEPC是 一種潛在的致癌物質(zhì),在操作中應(yīng)盡 量在通風(fēng)的條件下進(jìn)行,并避免接觸皮膚。DEPC毒性并不是很強(qiáng), 但吸入的毒性是最強(qiáng)的, 使用時戴口罩。 不小心占到手上注意立即沖 洗,RNaseAway
8、TM試劑可以替代DEPC,操作簡單,價格低,且無毒 性。只需將RNaseAwayTM直接倒在玻璃器皿和塑料器皿的表面,浸 泡后用水沖洗去除,即可以快速去除器皿表面的 RNase,并且不會殘 留而干擾后繼實驗。4. 丙烯酰胺:屬中等毒性物質(zhì)。 可通過皮膚吸收及呼吸道進(jìn)入人體, 因此,在搬運 和使用中必須穿戴好防護(hù)用具,如防毒服,防毒口罩及防毒手套等。 丙烯酰胺的危害主要是引起神經(jīng)毒性,同時還有生殖、 發(fā)育毒性。 神 經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學(xué)習(xí)、 記憶和其他 認(rèn)知功能部位的退行性變化,試驗還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌 物,職業(yè)接觸人群的流行病學(xué)觀察表明, 長期低劑量接觸丙烯酰
9、胺會 出現(xiàn)嗜睡、情緒和記憶改變、幻覺和震顫等癥狀,伴隨末梢神經(jīng)病如 手套樣感覺、出汗和肌肉無力。累積毒性,不容易排毒。 具備以下任何一項者,可列為慢性丙烯酰胺中毒觀察對象:a. 接觸丙烯酰胺的局部皮膚出現(xiàn)多汗、濕冷、脫皮、紅斑;b. 出現(xiàn)肢端麻木、刺痛、下肢乏力、嗜睡等癥狀;c. 神經(jīng)-肌電圖顯示有可疑神經(jīng)源性損害。治療原則:可用B族維生素、能量合劑,并輔以體療、理療及對癥治療。重度中毒者應(yīng)同時加強(qiáng)支持療法。5. NN-亞甲雙丙烯酰胺,有毒,影響中樞神經(jīng)系統(tǒng),切勿吸入粉末。6. DTT 二硫蘇糖醇,很強(qiáng)的還原劑,散發(fā)難聞的氣味??梢蛭?、 咽下或皮膚吸收而危害健康。 當(dāng)使用固體或高濃度儲存液時
10、, 戴手套 和護(hù)目鏡,在通風(fēng)櫥中操作。7. TEMED 強(qiáng)神經(jīng)毒性,防止誤吸,操作時快速,存放時密封。8. PMSF:苯甲基磺酰氟(PMSF) , C7H7FO2S或C6H5CH2SO2F 是一種高強(qiáng)度毒性的膽堿酯酶抑制劑。 它對呼吸道黏膜、 眼睛和皮膚 有非常大的破壞性。可因吸入、咽下或皮膚吸收而致命。 戴合適的手 套和安全眼鏡,始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里使用。在接觸到的情況下, 要立 即用大量的水沖洗眼睛或皮膚,已污染的工作服丟棄掉。9. 氯仿(CHC13)對皮膚、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用。它是一 種致癌劑,可損害肝和腎。它也易揮發(fā),避免吸入揮發(fā)的氣體。操作 時戴合適的手套和安全眼鏡并始終在化
11、學(xué)通風(fēng)櫥里進(jìn)行。10. 甲醛(HCOH)有很大的毒性并易揮發(fā),也是一種致癌劑。很容 易通過皮膚吸收, 對眼睛、 黏膜和上呼吸道有刺激和損傷作用。 避免 吸入其揮發(fā)的汽霧。 要戴合適的手套和安全眼鏡。 始終在化學(xué)通風(fēng)櫥 內(nèi)進(jìn)行操作。遠(yuǎn)離熱、火花及明火。11. 吉姆薩(Giemsa)染料咽下可致命或引起眼睛失明,通過吸入和 皮膚吸收是有毒的。 其可能的危險是不可逆的效應(yīng)。 戴合適的手套和 安全護(hù)目鏡。在化學(xué)通風(fēng)櫥里操作,不要吸入其粉末。12.疊氮鈉(NaN3)毒性非常大。它阻斷細(xì)胞色素電子運送系統(tǒng)。含 有疊氮鈉的溶液要標(biāo)記清楚。 可因吸入、咽下或皮膚吸收而損害健康。 戴合適的手套和安全護(hù)目鏡,操作
12、時要格外小心。13. 十二烷基硫酸鈉(SDS)有毒,是一種刺激物,并造成對眼睛的 嚴(yán)重?fù)p傷的危險。 可因吸入、咽下或皮膚吸收而損害健康。戴合適的 手套和安全護(hù)目鏡。不要吸入其粉末。14. 三氯乙酸(TCA)有很強(qiáng)的腐蝕性。戴合適的手套和安全防目鏡。15. Triton X- 1 00引起嚴(yán)重的眼睛刺激和灼傷??梢蛭?、咽下或皮膚 吸收而受害。戴合適的手套和護(hù)目鏡。16. 過硫酸銨(NH4)2S2O8對黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有 極大危害性。 吸入可致命。 操作時戴合適的手套、 安全眼鏡和防護(hù)服。 始終在通風(fēng)櫥里操作,操作完后徹底洗手。17. Trizol 含有毒物質(zhì)苯酚,如皮膚接觸 Trizol 。請立即用大量去垢劑 和水沖洗,如仍有不
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