唾液腺染色體觀察_圖文

1、果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、練習(xí)果蠅幼蟲唾腺的分離技術(shù)；2、學(xué)習(xí)制作唾腺染色體標(biāo)本的方法；3、觀察、識(shí)別果蠅唾腺染色體的特征。二、實(shí)驗(yàn)原理果蠅幼蟲唾腺的細(xì)胞核非常大，唾腺染色體比其他細(xì)胞染色體大200多倍。由于重復(fù)復(fù)制后的眾多染色線沒有分開，一條染色體內(nèi)含有染色體線多達(dá)千條以上，是通過核內(nèi)有絲分裂形成的多線染色體。一般來說，多線染色體是處于永久性前期中的一種體細(xì)胞染色體配對(duì)形式，普遍存在于雙翅目昆蟲某些物種的幼蟲唾腺細(xì)胞內(nèi)。唾腺染色體的特征：巨大；體細(xì)胞配對(duì)，染色體只有半數(shù)（n）；各染色體著絲粒部分互相靠攏形成染色中心；有深淺不同、疏密各別的橫紋。唾腺染色體經(jīng)染色后出現(xiàn)的橫紋

2、的數(shù)目和位置常常恒定，標(biāo)志著物種的特征。當(dāng)染色體上有結(jié)構(gòu)變異，如缺失、重復(fù)、倒位、易位等，很容易在唾腺染色體上鑒別。例如：果蠅號(hào)染色體上16A區(qū)中有六條橫紋的是正常復(fù)眼，有12條橫紋的是棒狀眼，有18條橫紋的是加倍棒狀復(fù)眼。三、實(shí)驗(yàn)材料果蠅三齡幼蟲；解剖鏡，顯微鏡，鑷子，解剖針，載玻片，蓋玻片，吸水紙，生理鹽水，醋酸洋紅四、實(shí)驗(yàn)步驟1、幼蟲培養(yǎng)置于16-18下飼養(yǎng)，當(dāng)幼蟲爬上瓶壁準(zhǔn)備化蛹前，即為三齡幼蟲，此時(shí)蟲體肥大，便于解剖，是制備唾腺染色體的最理想時(shí)期。2、幼蟲的解剖將載玻片置于解剖鏡下，滴一滴生理鹽水，將幼蟲置于其中，左手持解剖針按住幼蟲前端1/3處，固定幼蟲。右手持針按住幼蟲頭部正中，

3、快速用力向右拉，把頭部從身體拉開，腺體即隨之而出。唾腺為半透明小囊狀，其上附有脂肪帶，食道兩側(cè)各一個(gè)。找到唾腺后盡可能把腺體上的脂肪剔除。3、染色前處理清除殘?bào)w，使載片上只留下唾腺。4、酸解：把腺體放入1N HCl中浸泡2-3分鐘，dH2O洗3次。5、染色滴上幾滴醋酸洋紅于唾腺上，染色30分鐘，染色時(shí)用鑷子將唾腺稍搗碎。6、壓片在載片上加蓋玻片，蓋片上覆蓋一吸水紙，然后以拇指適當(dāng)用力壓片，將唾腺細(xì)胞核壓破，以染色體伸展而不破碎為好。7、顯微鏡下觀察五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果從圖中能明顯觀察到：唾腺染色體上巨大，具有深淺不一和疏密相間的橫紋及條帶，也大致能將各對(duì)染色體分開（但無(wú)法具體辨別是哪一條對(duì)染色體）。六

4、、分析與討論1、本次實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵操作有以下幾步：1）從果蠅幼蟲中拉出唾液腺。解剖針的位置一定要找準(zhǔn)，然后迅速將幼蟲頭部與身體分離，這樣才能完整清晰的分離出人字形的唾液腺，而且這樣分離出的唾液腺上不帶或很少帶脂肪袋。若不幸將唾液腺與腸道、頭部其他組織混在一起，掌握以下技巧也能成功將唾液腺找出來：唾液腺與腸道的顏色不同，腸道更偏黃，而唾液腺是白色并更加透明。唾液腺上帶的脂肪袋也是很好的判斷依據(jù)。2）解離、染色。解離及染色的過程中一定要注意滴加液體時(shí)小心唾液腺被洗跑或者被吸水紙吸走。染色時(shí)間要視染色劑的質(zhì)量來定，若染色劑顏色淺，應(yīng)染30min以上。注意染色劑中是否有殘?jiān)?，若殘?jiān)鄳?yīng)用吸水紙吸去。3）壓片。這是最容易出錯(cuò)的一步。壓片時(shí)應(yīng)滴加一小滴水，將蓋玻片輕輕放在載玻片上，其上蓋一張吸水紙。用手固定住蓋玻片邊緣使其不會(huì)移動(dòng)，找準(zhǔn)唾液腺所在位置后果斷用力地用解剖針針柄向下壓或者敲擊，才能壓出云霧狀的效果。4）觀察。由于這次染色不是很深，在顯微鏡下難以將沒有染太深的染色體與背景中大量破碎的細(xì)胞（爆漿）區(qū)分開，如果不仔細(xì)觀察尋找，很容易錯(cuò)誤地以為視野里沒有壓好的染色體。2、總結(jié)本次